ABI-2720型基因扩增仪SOP(LT-SOP-2-1-5)word版本
abi quantstudio5标准操作规程 -回复
abi quantstudio5标准操作规程-回复Abi QuantStudio 5标准操作规程1. 引言Abi QuantStudio 5是一款先进的实时聚合酶链反应(Real-Time PCR)设备,被广泛应用于基因表达分析、突变检测、拷贝数变异分析等领域。
本文将详细介绍Abi QuantStudio 5的使用步骤和操作规范,帮助用户合理高效地进行实验。
2. 前期准备在进行实验之前,需要购买适当的试剂盒和耗材,并准备好所需的样本和试剂。
确保实验室台面整洁,工作区域干净,并根据实验所需调整设备的温度和湿度。
3. PCR实验操作步骤3.1. 设备开机准备先将Abi QuantStudio 5连接电源,并待待设备启动完成后进入“PCR”模式。
稍等片刻,直到设备温度稳定在所需温度。
3.2. 样本和试剂准备根据实验需求,将待测样本和质控样品取出,并使用合适的方法提取目标核酸。
同时,根据实验需求准备好各种试剂,包括PCR探针和引物,酶切酶等。
3.3. 样品货架设置将样品盘放在Abi QuantStudio 5的样品货架上,并按照实验需求设置样品位置。
确保每个孔位都放入正确的样品,防止交叉污染的发生。
将样品盘放置好后,轻轻轻按下样品盖,保证与孔位的完全吻合。
3.4. PCR体系配置根据试剂盒说明书,准确计量待配置的PCR体系,包括PCR反应缓冲液、模板DNA、MGCL2、引物、探针等。
使用专用的移液器和消毒的吸头进行配置,避免交叉污染。
3.5. PCR程序设置在QuantStudio软件中选择适当的PCR模式,并根据试剂盒说明书输入反应体系和实验方案参数。
确保PCR程序模板的准确性和完整性,避免因设置错误导致结果不准确。
3.6. PCR实验运行将配置好的PCR体系添加到样品盘对应的孔位中,注意不要发生溢液现象。
关闭样品盖,检查无异常后,将样品盘放入设备,并点击软件上的“Run”按钮开始PCR实验。
实验过程中,根据实验需求进行必要的参数调整。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法第一章设备概述ABI 2720 PCR 扩增仪是一台高性能的PCR(聚合酶链反应)仪器,用于在分子生物学实验中进行DNA扩增。
本文档旨在介绍ABI 2720 PCR 扩增仪的基本操作方法和注意事项。
第二章设备安装与连接1.安装ABI 2720 PCR 扩增仪:________将扩增仪放置在水平且稳定的台面上,确保设备周围有足够的通风空间。
2.连接电源:________将电源线插入扩增仪的电源插座,并插入电源插座。
3.连接计算机:________使用USB线将计算机与扩增仪连接。
第三章扩增方案设计1.确定扩增反应的目标基因或序列。
2.设计引物:________根据目标序列设计适当的引物。
建议使用专业软件进行引物设计,以确保引物的特异性和扩增效果。
第四章扩增反应操作1.准备反应组分:________按照扩增方案中确定的反应体系配制扩增反应液。
注意使用无菌操作和避免污染。
3.密封试管或板:________将PCR管或96孔板使用相应的封闭盖密封。
4.放置样品:________将PCR反应容器放置在ABI 2720 PCR 扩增仪的样品块中。
5.设置PCR程序:________使用计算机控制软件设置PCR 程序,包括温度和时间的设定。
6.开始扩增:________确认PCR程序设置正确后,启动扩增程序。
第五章扩增结果分析1.扩增结束后,取出PCR反应容器。
使用凝胶电泳等方法对扩增产物进行分析。
2.根据实验的需要,可以进行进一步的数据分析和结果解读。
第六章注意事项1.操作前请务必阅读设备使用手册,了解设备的安全注意事项和操作规程。
2.注意无菌操作,避免污染样品和反应体系。
3.注意实验室安全,正确处理和处置反应液和废弃物。
4.在设置PCR程序时,请确保温度和时间的设定符合实验需求。
本文档涉及附件:________附件1:________ABI 2720 PCR 扩增仪使用手册本文所涉及的法律名词及注释:________扩增:________聚合酶链反应(Polymerase Chn Reaction),一种用于扩增DNA片段的技术。
基因扩增实验室常用仪器设备的正确操作
移液器
4.2 注意事项
在使用移液器前:应进行安全检查,确 保其处于正常状态 在吸取和推出液体时:要保持慢速和稳 定,避免产生气泡或溅出液体 在操作结束后:应及时清洗移液器,并 归置到指定位置 在更换吸头时:应确保吸头与移液器紧 密连接,避免漏液或交叉污染
移液器
总之,正确操作基因扩增实验室中的仪 器设备是获得准确、可靠实验结果的关 键
在设置离心机参数时:应根据实验要求 进行设置 在加入样品时:要确保离心管放置平衡 ,避免偏心旋转
4
第4部分
移液器
移液器
移液器是一种用于精确转移 液体的仪器,在基因扩增实 验室中广泛应用于样品的添 加和转移
正确使用移液器可以确保实 验的准确性和重复性
移液器
4.1 操作步骤
确认移液器处于安全状态:检查有无漏液现象 按照实验要求:将正确的吸头安装在移液器上 调整移液器的量程:使其与需要转移的液体体积相 匹配 将移液器竖直:确保吸头完全浸入液体中,缓慢吸 取液体 将移液器水平:缓慢推出液体,将液体转移到目标 容器中 在操作结束后:及时清洗移液器并归置
正确使用电泳仪可以获得清晰、 准确的实验结果
2.1 操作步骤
将电泳缓冲液加入电泳槽中 将样品加入电泳凝胶孔中 连接电源:启动电泳程序 观察电泳结果:记录数据
电泳仪
2.2 注意事项
电泳仪
在使用电泳凝胶时:应根据 实验要求选择合适的浓度和 配方 在加入样品时:要确保样品 在凝胶中分布均匀,避免出 现气泡 在观察电泳结果时:应及时 记录数据,包括迁移率和分 子量等
开始PCR程序:观察实验进程 并记录数据
PCR仪
PCR仪
1.2 注意事项
在设置PCR仪参数时:应参考实验指南或 根据研究人员的要求进行设置
ABI-2720型基因扩增仪SOP(LT-SOP-2-1-5)word版本
编制审核批准日期日期日期目的:规范ABI 2720型基因扩增仪的使用,减少差错。
范围:ABI 2720型基因扩增仪的使用过程。
职责:ABI 2720型基因扩增仪操作人员。
1 主菜单1.1 打开仪器电源几秒钟后,仪器即显示主菜单界面。
1.2 此时可利用功能键进入各个功能菜单:1.2.1 F1-RUN:运行一个PCR方法1.2.2 F2-Creat:建立一个方法文件1.2.3 F3-Edit:编辑一个方法文件1.2.4 F4-Util:机器内置功能菜单1.2.5 F5-User:用户名菜单2 新增用户名2.1 用户可以在2720里面建立用户名,用来保存自己建立的方法文件。
2.2 在主菜单上按F5-User,进入界面。
2.3 按F2-Creat,进入新建用户名的页面。
2.4 使用导航键和Enter键从界面右上角的字符中选择你所需的字符,组成用户的名字,输入完成按F1-Accept完成用户名的建立工作。
2.5 如果需要用密码保护,按F3-PIN#就可以键入你的密码。
2.6 输入四位数的密码后,按F1-Accept,系统会提示你再输入一次,进行确认。
2.7 再次输入密码后,按F1-Accept,系统提示你是否需要锁定你所编辑的方法。
2.8 如果需要锁定,按F4-Lock按钮,再按一次F1-Accept,新建立的用户名就出现在User界面了。
3 建立新方法文件3.1 在主菜单下,按F2-Creat,进入页面。
3.1.1 页面默认的方法由三个部分组成,第一部分1Hld是预保温,94.0,5:00指的是在94℃保持5分钟,即横线上方的数值表示温度,下方的数值表示时间3.1.2 第二部分3Tmp 25Cycles指此部分是由三个不同温度组成的循环,循环数为25个,具体的温度为94℃保持三十秒,55℃保持三十秒,72℃保持三十秒。
3.1.3 然后进入第三部分2Holds,由两个保温温度组成,分别为72℃7分钟,4℃一直保温。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法!ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法,带有相关英文指示步骤的操作2、PCR技术发展史 PCR原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
聚合酶链式反应第一代:手动/⌝自从1993年到现在很快经历了四代产品:机械手式水浴基因扩增如上图所示,用三个恒温水浴箱,分别将三个水浴温度恒定在三个温度:PCR的高温变性温度(如94℃)低温复性温度(如58℃),适温延伸温度(如72℃)。
再用一个装有PCR标本试管的提篮,用手工在不同温度的水浴箱中依次水浴,标本在每个水浴箱中恒温的时间用秒表计时。
这样PCR标本就能完成下述形式的热循环:94℃ 30S 58℃ 45S 72℃ 60S 40次循环这种方法的特点是:实验人员劳动强度大,容易因疲劳引起差错;而优点是:设备简单,投资少,与自动化基因扩增仪相比,它无须升降温过程,实验时间短,试验更接近理想PCR反应条件,事实表明实验效果还是不错的,但由于标本试管从一个水浴箱往另一个水浴箱移动中要较短暂暴露于空气中,因此如移动速度不够快时也会对标本形成温度干扰,影响结果。
本方法的另外一些缺点包括只能局限三个温阶(某些PCR反应需要多于三个温阶)、液体污染以及在低气压地区水温难以烧到94℃变性温度等。
为改进提高本方法的自动化水平,有人设计了机械手装置,替代上述手工移动标本过程,形成了机械手水浴式基因扩增仪,该改进解决了实验人员的高强度劳动问题,但又带来了一个机械手部件大行程频繁相对运动而引起的高故障。
这种类型的基因扩增仪在九十年代中期我国北京、上海有定型的产品销售,应用也较广,曾为我国的分子生物学⌝的发展做出过积极贡献,而后便逐步被自动化程度更高的扩增仪替代,现在很少有单位使用。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法简版范文
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法简介ABI 2720 PCR 扩增仪是一种常用的实验室设备,用于在分子生物学和遗传学研究中进行聚合酶链式反应 (Polymerase Chn Reaction, PCR) 扩增。
本文档将介绍 ABI 2720 PCR 扩增仪的使用方法,包括设备的启动与关闭、程序设定、样品制备和实验操作等。
设备启动与关闭1. 将 ABI 2720 PCR 扩增仪接入电源,并打开电源开关。
2. 按下设备面板上的启动按钮,等待设备启动完成。
3. 在实验结束后,按下设备面板上的关闭按钮,等待设备自动关闭。
程序设定1. 打开设备面板上的软件界面,或通过连接电脑上的软件进行操作。
2. 在软件界面中选择新建实验,并设置程序参数,包括温度、时间和循环次数等。
3. 确认程序参数无误后,保存程序设定。
样品制备1. 根据实验需要,准备好待扩增的 DNA 样本和其他试剂。
确保样品准备过程在无菌条件下进行。
2. 将待扩增的 DNA 样本加入扩增试剂管中,并轻轻摇匀,确保样品完全溶解。
3. 用离心机将样品离心,移除上清液。
4. 将样品置于保护罩内,避免受到外界温度变化的影响。
实验操作1. 打开设备面板上的保护罩,将样品放置在 ABI 2720 PCR 扩增仪的样品槽中。
2. 确保样品完全密封,并关闭保护罩。
3. 在软件界面中选择之前保存的程序设定,并开始运行。
4. 设备将自动按照设定的程序参数进行 PCR 扩增。
在此过程中,可以通过软件界面查看实时温度曲线和剩余时间等信息。
5. 扩增完成后,设备会自动停止运行。
打开保护罩,取出样品。
6. 根据实验需要,对样品进行后续处理,如凝胶电泳分析或测序。
注意事项操作过程中应佩戴手套,避免污染样品。
使用前应检查设备面板的温度设置是否正确。
扩增试剂管中的试剂应密封保存,避免受到湿气和光线的影响。
扩增结束后,及时清理设备并关闭电源。
基因扩增仪操作手册1
HeMa系列基 因 扩 增 仪操 作 手 册1介绍 2 开箱 2 安装 3 面板功能键说明 3操作详解 4 开机4编程基础 4 主菜单 5 编程8存储8 调用9 运行9 暂停10 中止11断电处理11 关机11 系统设置11热盖12 实例13维护18故障排除18系统指标20 仪器示图20 附录一:英文注解20附录二: KP-210KJ基因扩增仪简易操作规程 22 2●本系统提供了一个用户选择编程的变温样品台。
它既可恒定在某个温度设定点上,也可按一定模式在多个温度设定点之间快速升降温。
样品台上精心加工有24个、48个或80个排列的样品井,使用0.2ml或0.5ml标准反应管,从而提供充足的样品批量。
●软件设计上,20×2字符式液晶显示器可以提供完整的实时信息提示。
全数字键操作键盘,使编程快捷方便。
●本系统具有运行状态断电处理和低温样品长期保存的功能,可让操作者无需顾忌仪器的运行过程和担忧扩增程序何时结束的问题。
●国际上首家提供温度循环过程中保温时间可递减功能,尤其适合长链核酸(模板)扩增实验。
●用户若另选配原位PCR附件,可分别进行普通及原位PCR实验。
开 箱●确信包装箱体未倒置后,小心拆箱,按照装箱单清点主机与附件。
●保存好包装材料,以备下次运输之用。
●仔细审视仪器与附件外部,如有运输致损情况,立即通知厂商和运输商。
●请填写仪器保修卡回执,并尽快寄回我公司,以便我们更好地为您服务。
安 装场地请选择较为坚实的、不怕湿的台面安置仪器,台面高度适中,轻松操作。
仪器四周留取一定空间,间隔20cm以上,用于通风和散热。
供电线路需承受10A电流。
提供良好接地将进一步提高电气安全性和系统可靠性。
环境仪器正常工作的环境条件是:环境温度:5℃~40℃;相对湿度:不大于80%;环境清洁少尘,避免阳光直射。
远离热源,水源,强烈的电磁干扰源。
通电将仪器电源线连接上电源,按下电源开关。
3提示:通电开机前,须肯定电源接地良好。
扩增区工作制度标准操作程序文件
扩增区工作制度标准操作程序文件1.目的:规范基因扩增、分析区的配置、功能、内务管理等。
2.适用范围:PCR实验室。
3.负责人:操作人:4.细则:4.1 配置:美国伯乐PTC-200型核酸扩增仪一台,ABI7300荧光定量检测仪一台,电脑一台、可移动紫外灯一台?、空调一台、其它耗品、办公用品若干。
4.2 功能:进行扩增反应并对产物进行分析。
4.3 内务管理:a.着装和标识:本区工作服、专用设备均以红色为标识。
b.实验人员进入该区须穿本区专用红色工作服。
实验中须戴一次性手套(手套需常更换)、鞋套或本区专用拖鞋。
c.从传递窗中取出已加样并离心好的反应管上机扩增。
d.按荧光扩增仪的标准操作文件对各种标本进行检测。
扩增结束后对检验结果进行分析。
e.记录温湿度计读数。
(本区每天在工作前利用本区的温控设备使温度控制在15-25℃之间)f.作好扩增仪的维护、实验数据的记录、质控记录。
g.关闭扩增仪,记录运行状态。
h.实验结束后将已经扩增的反应管放入塑料套袋中密闭后带出,脱下手套、鞋套置于专用污物桶中,由卫生员清除。
i.实验完毕打开紫外灯消毒60分钟4.4核酸扩增操作规程本实验室使用美国伯乐PTC-200型核酸扩增仪和ABI7300荧光定量检测仪,在此对其操作规范?进行描述a. 伯乐PTC-200型核酸扩增仪操作①开机,打开电源开关,仪器进行自检(约一分钟结束);②运行,显示主菜单,运行一个程序:从主菜单中选择RUN,按《Proceed》,显示<MAIN>菜单(和自己创建的文件夹)?用Select键选择要运行的程序,按《Proceed》;③设置样品管子类型及反应体积在“Vessel Type”项中选择,要使用的(管子、微型板和玻片),按《Proceed》;在“Volume”项中输入样品体积(微升)按《Proceed》;④在“Use heated lid”中选择程序运行过程中是否热盖,按《Proceed》;程序开始运行。
ABI 2720 PCR 仪操作规程
ABI 2720 PCR 仪操作规程1.准备工作1.1 操作人员:实验室检测人员。
1.2 使用前将电源线插紧,确保使用过程中电源的连接。
2.运行程序2.1 接通电源,打开电源开关。
2.2 功能键(F1-F5):用这些键选择显示屏上对应位置的功能。
比如在上图这个界面中 F1 键是运行、F2 键是创建。
在不同显示界面中,功能键发挥不同的功能。
在多数显示界面中都可以利用光标去选择区域,2.3 选择区域:用上【↑】、下【↓】、左【←】、右【→】键移动显示屏上光标至相应的位置。
2.4 键入数字:利用数字键(0~9)输入温度、时间等参数,再按【ENTER】键确认,如要取消键入,则按【DELETE】键清除,按【STOP】键,终止一个正在运行的程序。
2.5 开机后进入主菜单,可利用相应位置的功能键进入各个功能菜单:F1-RUN:选择并运行一个保存在仪器中的 PCR 程序;暂停运行;查看条件参数;PCR 运行至最后阶段,查看历史记录。
F2/F3-Create/Edit:在默认 PCR 程序的基础上创建或更改已经保存的 PCR 程序;更改温度、时间和循环数;添加一个循环或一个恒定温度(Hold);定义和添加程序性暂停;删除一个时间/温度段;在每个循环增加或降低时间或温度参数;命名和储存 PCR 程序。
F4-Util:配置仪器参数,如时间、日期、暂停时长等;利用 Tm 计算器;删除一个PCR 程序;查看上一次运行的 PCR 程序;运行硬件诊断程序;运行系统状态测试(升降温速度和循环次数);运行温度验证和温度均一性测试;升级系统。
F5-User:添加用户名;指定一个PIN 数字给某个使用者;锁定或解锁某个使用者名下的所有 PCR 程序;编辑或删除一个使用者。
2.6 建立 PCR 程序2.6.1 在主菜单下,按【F2-Create】键,显示系统默认2.6.2 根据自己的需要,对温度、时间、循环数和恒温状态(Hold)进行修改。
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法
ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法ABI 2720 PCR 扩增仪使用方法操作前注意事项:1.请按照实验要求和室温(25°C)将试剂和样品放置于实验台上,充分平衡温度。
2.使用前请确保仪器和周围环境的干净和整洁,以免影响实验结果。
3.请仔细阅读并遵守操作手册,确保正确操作和安全使用。
1.仪器初始化1.1 打开电源开关,确保仪器通电。
1.2 选择相应的语言,并按照仪器界面上的指示进行初始化设置。
2.仪器校准2.1 进入仪器菜单界面,选择校准选项。
2.2 按照校准提示,依次进行温度校准、周期时间校准等操作。
2.3 完成校准后,仪器会自动保存校准参数。
3.扩增实验准备3.1 准备PCR反应体系所需的试剂和样品。
3.2 打开仪器上的盖板,将试剂和样品放置到扩增孔中。
3.3 注意避免交叉污染,按照实验要求并根据样品编号依次分别加入反应组分。
3.4 请确保每个孔中的样品和试剂体积均匀分布,避免浓度偏差。
4.扩增程序设置4.1 进入仪器菜单界面,选择扩增程序选项。
4.2 按照实验要求设置扩增程序的参数,包括温度、时间等。
4.3 确认设置无误后保存程序。
5.开始扩增实验5.1 关闭盖板,确保完全密封。
5.2 按下启动按钮,启动扩增程序。
5.3 实时监测仪器显示屏上的温度和时间,确保扩增过程顺利进行。
6.扩增完成及结果分析6.1 扩增完成后,仪器会发出声音提示。
6.2 将反应管从仪器中取出,进行结果分析。
6.3 基于实验要求和分析方法,对扩增结果进行解读和记录。
附件:本文档未涉及附件。
法律名词及注释:1.PCR(Polymerase Chn Reaction)●聚合酶链反应,一种体外扩增 DNA 片段的方法。
2.ABI 2720●一种常用的 PCR 扩增仪型号,由 Applied Biosystems(美国生物技术公司)生产。
pcr对比
9700型PCR扩增仪AB
样品容量: 该款PCR仪的样品基座可以方便的更
换,样品基座配置包括单个0.2ml、96孔,单个0.5ml 、60孔,以及双0.02ml、384孔。
温度范围:
4.0-99.9℃
温度显示: 显示经计算机计算的实际样品温度,精确到0.1℃。
升降温速率:样品实际平均温度变化速度1℃/秒,95-55℃温度范围内样品基座的平均升降温速度3.5℃/秒4
静态样品基座 温度均匀性:±0.5℃,
35-100℃30秒
温度准确性:±0.25℃,35-100℃范围。
温度校正: 符合美国国家标准技术局标准。
热盖:维持105℃温度,满足无油操作PCR 扩增。
升降温重现性:任意温度达到时间误差小于5秒。
大小(宽×长×高):高:26cm ;宽:
29cm;深:41c 。
重量:主机重:7.3kg ; 96孔样品基座重:3.2kg 30
37
术 路技术
18
本德)。
ABI2720型PCR仪操作说明
ABI2720型PCR仪操作说明1.准备工作:a.将PCR仪放置在平稳的台面上,确保周围无振动和温度变化。
b.检查PCR仪是否连接电源,并确保电源线连接稳固。
c.打开PCR仪的电源开关,待PCR仪启动并显示正常后即可进行下一步。
2.设定温度程序:a. 按下PCR仪的"Program"按钮,进入温度程序设定界面。
b.根据实验需要,选择合适的温度程序模板或自定义温度程序。
c.使用仪器上的方向键和数字键,调整温度和时间参数。
d. 确认设置后,按下"Enter"按钮保存设定。
3.样品装载与密封:a.准备PCR反应管,将样品和PCR试剂按照实验方案加入反应管中。
b.确保反应管盖子紧密关闭,以防止样品的污染和蒸发。
c.将反应管放置在PCR仪的样品托盘上,确保每个孔位都有反应管。
4.启动PCR反应:a. 按下PCR仪的"Run"按钮,启动PCR反应。
b.监控实验过程中PCR仪的温度变化和反应时间。
c.实验结束后,PCR仪会自动停止并显示反应结果。
5.结果分析:a.将PCR反应产物进行凝胶电泳或其他分析方法,以确认目标DNA的放大效果。
b.根据实验需要,对PCR反应结果进行进一步分析和解释。
6.清洁与维护:a.实验结束后,及时关闭PCR仪的电源开关,并切断电源。
b.使用干净的纸巾或软布擦拭PCR仪的表面,以除去沾染的试剂和污渍。
c.定期检查PCR仪的过滤器和灯管,如有需要,及时更换和清洁。
d.注意PCR仪的内部不可随意拆卸和清洁,以避免损坏仪器。
基因扩增实验室常用仪器的使用
P2和P10 ≤1mm
P20和P100 2-3mm
P200和P1000 2-4mm
P5000
3-6mm
P10ML
5-7mm
设定容量值
设定容量
容量计读数由三位拨号数字组成(显示所转移液体容量),从上(最 大有效数字)到下(最小有效数字)读取。利用底部刻度可将容量调节 到更精确的分度。根据型号不同,数字可能是黑色或红色的。
P2
1 2 5 1.25μl
P10
0 7 5 7.5μl
P20
1 2 5 12.5μl
P100
0 7 5 75μl
P200
1 2 5 125μl
P型移液器的应用范围
P2,P10 : 超微量计量及移液, 应用于DNA定序及酶分析等。 P20,P100,P200和P1000 应用于一般 水溶液、酸、硷的计量和移液。 P5000和P10ML 大体积移液和计量。
Eppendorf梯度PCR仪
最大样本数:是唯一可同时防置0.2ml和0.5ml 反应管的扩增仪,可同时扩增96个0.2ml PCR 反应管和77个0.5ml反应管。 温度范围:4-99℃ 加热速度:3℃/秒。冷却速度: 2℃/秒。 温度准确性: 0.2℃ 。 特点:循环时可对变性、退火和延伸同时设温 度梯度。
维护和保养
转头应定期清洗和消毒。擦拭离心机腔时动作要轻, 以免损坏机腔内温度感应器。
使用消毒液处理时,温度不可超过25℃,时间不可超 过规定时间。
可以用高压消毒的转头,应在清洗后,121 ℃消毒20 分钟,转头务必平放,并不受挤压,以免变形。
每次操作完毕;应作好使用情况记录,并定期对机器 各项性能进行检修。
挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离 心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成 事故。
ABI 2720中文说明书
目录一. 运行环境及电源要求-------------------------------------------------------------- 3二. 电源插座及开关----------------------------------------------------------------- 3三. 控制面板-------------------------------------------------------------------------- 3四. 主菜单---------------------------------------------------------------------------- 4五. 添加用户名----------------------------------------------------------------------- 5六. 建立PCR程序-------------------------------------------------------------------- 6七. 编辑存储的程序-------------------------------------------------------------------8八. 运行 PCR程序 ---------------------------------------------------------------------9九. 其他功能---------------------------------------------------------------------------11一. 运行环境和电源要求1.请勿在冰室或冰箱中运行。
2720可在5℃~40℃的环境下安全使用,最适环境温度为15℃~30℃,最适环境湿度为20~80%。
2.2720 的通风口位于机身正面和背面,为保持通风口的通畅,请勿在仪器的周围堆放杂物,并且必须将仪器的左、右及背面离开墙壁10~15cm。
ABI2720型PCR仪操作说明
ABI2720型PCR仪操作说明步骤1:仪器准备1.将PCR仪器放置在水平平稳的工作台上,并将电源插头插入电源插座。
2.按下仪器背面的电源开关,启动PCR仪。
3.等待仪器预热,一般需要5-10分钟,预热完成后仪器将显示主界面。
步骤2:设置PCR参数1.在主界面上,按下"MENU"按钮进入菜单设置界面。
2. 使用向上和向下按键选择"Parameters"或"PCR Parameters"选项,并按下"ENTER"按钮确认选择。
3. 在"PCR Parameters"界面上,使用向上和向下按键选择所需的PCR参数(如温度、时间等),并使用"ENTER"按钮进行确认。
4.根据实验需求,设置PCR反应的循环次数、片段长度和目标温度等参数,并按下"ENTER"按钮进行保存。
步骤3:加载PCR反应混合液1.打开PCR仪器上方的盖子,将PCR反应试管架放入仪器中。
2.打开PCR反应试管架,按需加载PCR反应混合液。
确保试管中的液体不超过标记线并避免发生交叉污染。
3.关闭PCR反应试管架,再次关闭PCR仪器的盖子。
步骤4:启动PCR反应1.在主界面上,按下"START"按钮启动PCR反应。
2.PCR仪开始进行温度循环,显示当前温度和剩余循环次数等相关信息。
3.完成PCR反应后,PCR仪会发出声音提示。
步骤5:结束PCR反应1.在PCR反应完成后,按下"STOP"按钮停止PCR反应。
2.打开PCR仪器盖子,将PCR反应试管架取出。
3.检查PCR反应结果,可以通过凝胶电泳等方法进行分析。
步骤6:关闭仪器1.按下仪器背面的电源开关,关闭PCR仪。
2.拔出电源插头,结束操作。
总结:ABI2720型PCR仪是一种操作简单、功能强大的PCR仪器。
临床基因扩增PCR实验室SOP标准操作程序文件(32项)
临床基因扩增实验室标准操作程序编写人:审核人:批准人:启用日期:年月日XXX医院前言为使基因扩增检验技术有效地应用于临床,更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务,保证检验质量,严格按照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》要求,制定本实验室管理文件,本实验室任何实验均需遵循本管理文件中规定执行。
临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的,以扩增检测DNA或RNA 为方法的检测技术,快速、可靠、准确、安全、收费合理方式下,以规范的操作对临床标本进行分析。
本室采用经国家药品监督管理局批准的试剂盒。
开展的检测项目:1、乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测2、人巨细胞病毒(HCMV)核酸定量检测标准操作程序文件1.目的:为了分子实验室的规范管理,特制订本程序。
2.范围:分子实验室。
3.职责:3.1临床PCR检验实验室工作人员共同遵守、相互督促。
3.2因科研活动需要,进入实验区域(试剂准备区、样本准备区、PCR扩增区)的非本室人员需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行。
4.实验室设置:4.1实验室设计为:专用走廊、试剂准备区、样本制备区、PCR扩增区组成。
三个区域各有一个缓冲间。
(见设置图)4.2三个工作区各配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服,并有明显的区分标识。
试剂准备区—白色、样品处理区—兰色、基因扩增区—红色。
4.3工作区的配置、功能、内务管理制度见各工作区文件。
4.4 实验室须严格遵守试剂区→样本区→扩增区的流向制度,严禁误入和逆进入各工作区。
4.5实验室流程:1)PCR室工作人员上班后,由过道走廊→试剂区→样本区→扩增区流向,打开排风、光源、温控装置。
2)标本接收区接收标本、验收登记后离心(不开盖),由内走廊入口将标本送入标本制备区缓冲间(标本制备区内门关闭)。
3)PCR工作人员按从试剂区→样本区→扩增区更衣开始流水操作。
ABI 2720型PCR仪操作说明
ABI 2720 简易操作手册Applied Biosystems 2720 Thermal Cycler 中文说明书ABI 2720 简易操作手册目录一. 运行环境及电源要求 -------------------------------------------------------------二. 电源插座及开关 -----------------------------------------------------------------3 3三. 控制面板 -------------------------------------------------------------------------- 3 四. 主菜单 ---------------------------------------------------------------------------五. 添加用户名 ----------------------------------------------------------------------4 5六. 建立 PCR 程序 -------------------------------------------------------------------- 6 七. 编辑存储的程序 ------------------------------------------------------------------8八. 运行 PCR 程序 --------------------------------------------------------------------- 9 九. 其他功能 --------------------------------------------------------------------------- 11ABI 2720 简易操作手册 易一. 运行环境和电源要求 运行环境和电源要求 可 5℃~40℃的环境下安全使用,最适环境温度为 为 15℃~30℃, 1.请勿在冰室或冰箱中运行。
ABI 型使用维护操作规程
ABI 7500型荧光定量核酸扩增仪作业指导书1.目的:使ABI 7500型核酸扩增荧光定量检测仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2.范围:ABI 7500型核酸扩增荧光检测仪。
3.性能参数:详见说明书4.程序:4.1.依次打开电脑显示器及电脑主机电源,进入windows XP 界面4.2.打开PCR主机电源4.3.点击桌面7500 software V2.0.6 图标,打开软件4.4.主界面点击SET UP 菜单下ADVANCED SETUP4.4.1.在试验属性界面:选择正确的机器型号,试验类型及试剂类型(探针法/染料法)4.4.2.在plate setup 界面,首先设定试验使用的探针,及样品名称,然后按照事先加样的位置顺序设定样品名称、类型,包括待检样本、阴性对照、阳性对照、阳性标准品、阳性室内质控样本。
4.4.3.在run method界面,编辑与试剂盒提供的温度程序相同的温度程序,包括温度与时间,及循环数4.5.将预先加好的0.2ML样品管按照设定顺序放置到仪器里面,进入到RUN界面,点击绿色START 按钮,弹出保存试验对话框,设定保存后,试验立即开始运行。
界面显示运行倒计时。
运行过程中在amplification plot界面可以查看实时的扩增曲线,在temperature plot界面可以查看实时的温度变化情况。
温度循环结束后试验自动结束。
5.结果分析5.1.在analysis setup里面修改各个探针的baseline与threshold数值,点击绿色analyze图标,软件及完成自动分析。
5.2.在amplification plot界面查看所有样品的扩增曲线。
6.整体曲线的观察,将所有曲线选中进行整体观察。
6.1.观察是否存在污染情况(包括标本污染和试剂污染),特别应注意大量曲线在同一 Ct值出现上涨的情况。
6.2.观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。
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编制审核批准
日期日期日期
目的:规范ABI 2720型基因扩增仪的使用,减少差错。
范围:ABI 2720型基因扩增仪的使用过程。
职责:ABI 2720型基因扩增仪操作人员。
1 主菜单
1.1 打开仪器电源几秒钟后,仪器即显示主菜单界面。
1.2 此时可利用功能键进入各个功能菜单:
1.2.1 F1-RUN:运行一个PCR方法
1.2.2 F2-Creat:建立一个方法文件
1.2.3 F3-Edit:编辑一个方法文件
1.2.4 F4-Util:机器内置功能菜单
1.2.5 F5-User:用户名菜单
2 新增用户名
2.1 用户可以在2720里面建立用户名,用来保存自己建立的方法文件。
2.2 在主菜单上按F5-User,进入界面。
2.3 按F2-Creat,进入新建用户名的页面。
2.4 使用导航键和Enter键从界面右上角的字符中选择你所需的字符,组成用户的名字,输入完成
按F1-Accept完成用户名的建立工作。
2.5 如果需要用密码保护,按F3-PIN#就可以键入你的密码。
2.6 输入四位数的密码后,按F1-Accept,系统会提示你再输入一次,进行确认。
2.7 再次输入密码后,按F1-Accept,系统提示你是否需要锁定你所编辑的方法。
2.8 如果需要锁定,按F4-Lock按钮,再按一次F1-Accept,新建立的用户名就出现在User界面了。
3 建立新方法文件
3.1 在主菜单下,按F2-Creat,进入页面。
3.1.1 页面默认的方法由三个部分组成,第一部分1Hld是预保温,9
4.0,5:00指的是在94℃保持5
分钟,即横线上方的数值表示温度,下方的数值表示时间
3.1.2 第二部分3Tmp 25Cycles指此部分是由三个不同温度组成的循环,循环数为25个,具体的温
度为94℃保持三十秒,55℃保持三十秒,72℃保持三十秒。
3.1.3 然后进入第三部分2Holds,由两个保温温度组成,分别为72℃7分钟,4℃一直保温。
3.2 根据自己的需要,对所显示的循环参数进行修改,生成自己的方法。
3.2.1 修改各个部分的温度种类:将光标移至图中“1”或“4”或“12”位置,用数字键输入相应的
数字即可,对于Hold过程,输入0表示取消该部分,对于Cycle过程,允许的不同温度的阶
段数范围为2-6,输入数字后再按Enter键确认;
3.2.2 修改温度值:将光标移至需要修改的温度处(图中“2”“6”“8”“10”“13”“15”处),用数
字键输入相应的温度数值,按Enter确认,输入温度范围必须在4-99.9℃之间;
3.2.3 修改保持的时间值:将光标移至需要修改的时间上(图中“3”“7”“9”“11”“14”“16”处),
用数字键输入相应的时间数值,按Enter确认,输入时间范围必须在00:00-98:59之间;当设定保温时间参数时,如果想设定无限长,再次位置输入99或更大数字即可;
3.2.4 修改循环次数:将光标移至需要修改的循环数上(图中“5”处),用数字键输入相应的时间数
值,按Enter确认,输入循环数范围必须在2-99之间;
3.2.5 增加一个保温或循环:将光标移至处于你想插入保温或循环阶段的右边的温度或时间参数处
(图中“2”“3”“6”“7”“8”“10”“11”“13”“14”“15”“16”处),按F4-More键进入界面,选择Insert增加保温或循环,然后按Hold或Cycle键插入保温或循环;
3.2.6 删除一个保温或循环:将光标移至处于你想插入保温或循环阶段的右边的温度或时间参数处
(图中“2”“3”“6”“7”“8”“10”“11”“13”“14”“15”“16”处),按F4-More键进入界面,选择Delete即可删除选中部分。
3.2.7 自动增加循环中的温度或时间参数:将光标移至循环阶段温度或时间参数处(图中“6”“7”“8”
“9”“10”“11”处),按F4-More进入见面,然后按F1-Modify,再按F1-AutoX,在屏幕上改变时间或温度增减参数,设置完成后,按F1-Accept-More回到程序页面,此时,在做过修改
的阶段上会有一个“*”表示区别。
3.3 储存编号的方法文件
3.3.1 方法编辑好以后,按F2-Store按钮,按F2-User选择你想要把程序存在哪个用户名里面,按
F1-Accept,再按F3-Method为你的程序命名。
3.3.2 用箭头和数字输入你的方法的名字,按F-Accept,名字最多不能超过16个字符。
3.3.3 再按一次F1-Accept,方法便已保存完毕。
4 编辑方法文件
4.1 在主菜单下按F3-Edit键,出现显示屏。
4.2 用箭头键移动光标选择你想修改的方法文件的名字,再按一次F1-Edit。
4.3 用箭头键移动光标至你想修改的参数上,用数字键输入新的参数。
4.4 所有需要修改的参数都修改完成以后,可以选择开始运行(F1-Strat)或者把修改过的程序保
存下来(F2-Store)。
5 运行方法文件
5.1 在主菜单下,按F1-Run,进入运行功能子菜单。
5.2 用箭头键移动光标选择你所要运行的文件。
5.3 如果你对所选的文件的参数没把握,可以按F2-Viwe查看所选文件参数。
5.4 如果参数正确,按F1-Strat,输入样品的体积。
5.5 再按一次F1-Strat开始运行该文件,程序需要在仪器的热盖达到之后才能开始,如果开始运
行时热盖温度还没有达到指定温度,会出现等待界面,当热盖温度到了103℃后,才会进入运行界面。
5.6 运行过程中可以按F1-Pause暂停程序的运行,直到你按F1-Resume继续运行,系统默认的暂
停时间为10分钟,超过时间会自动运行程序,也可以按Stop退出程序。
5.7 程序运行结束后,屏幕会出现结束页面,按F5-Exit按钮退出时,软件会提示你是否需要保存
程序,需要按F2-Store,否则按F5-Exit。
6 注意事项
6.1 2720可在5℃-40℃环境下使用,最适环境温度为15℃-30℃,严禁在低于5℃环境下开机。
环
境湿度为20-80%。
6.2 拆卸样品基座时应将仪器关闭,并将电源插头拔下,拆卸要小心,以免不正确的操作损坏样品
基座。
6.3 2720的左边、右边和底部有通风口,为保持通风口的流畅,左、右以及三面必须离开墙壁
10-15cm,不要再仪器周围堆放杂物。
7 相关记录
(LT-JL-2-1-5)《ABI 2720型基因扩增仪运行记录》
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