天然药物提取、分离鉴定折方法与技术 大学课件

（二）逆流连续萃取法 1.操作 相对密度小的用流动相，密度大者作为固 定相置萃取管内，管内填充不锈钢圈。P23 2.适用范围 适用于各种密度溶剂萃取分离 3.特点 操作简便，萃取完全 4.提示 简单萃取乳化现象严重时可采用此法。
（三）逆流分溶法CCD法（Countercurrent distribution，反流分布法，逆流分溶法）

操作：用极性从低到高组成溶剂系统依次对分 离提取液中的各种成分，使各溶解度有差异的 成分得到分离

适用范围：有效成分不明确天然药物提取液的 分离 特点：操作繁琐、有效成分可能分散
注意：研究天然药物不明成分最常用的方法

二、两相溶剂萃取法
1.概念 向提取溶液中加入一种与提取溶剂互不 相溶的溶剂（萃取剂）组成溶剂系统。 2.原理 利用样品中各种成分在两相溶剂中的分 配系数（分配比）不同进行分离。 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进 行分离 （1）液-液萃取法 ①液-液萃取与分配系数k值

溶剂提取方法的特点及适用范围： （1）浸渍法适用于成分遇热不稳定的或含大 量淀粉、树胶、果胶、粘液质中药。 （2）渗漉法消耗溶剂量大、费时长、操作比 较麻烦。 （3）回流提取法是用易挥发的有机溶剂加热 提取中药成分的方法，对热不稳定的成分不宜用 此法，且溶剂消耗量大，操作繁杂。 （4）连续回流提取法弥补了回流提取法中溶 剂消耗量大，操作繁杂的不足，实验室常用索氏 提取器来完成本法操作。
注意：1.可更换新溶剂后继续 提取；2.慎选乙醚溶剂
萃取溶剂

六、超声萃取法

原理：利用超声波空化作用破坏药材细胞，加强药
材细胞内成分的释放、扩散和溶解

操作：溶剂浸没药材粗粉，密闭，置超声提取器内
提取10分钟左右 适用范围：成分广范，溶剂不限 优点：提取时间短、效率高 缺点：对容器质地有特殊要求

一、溶剂提取法概念
1.概念
根据天然药物中各化学成分的溶解性 能，选择对有效成分溶解度大，而对其他成 分溶解度小的溶剂。
2.原理 根据相似相溶原理。药材细胞内外成分 浓度不同，溶剂在通过渗透、扩散作用。
理想溶剂： （1）有效成分溶解性大，无效成分溶解性小； （2）安全、成本低； （3）便于回收； 3.提取前的预处理 粉碎（含糖多时切成小段），脱脂、苷类提 取注意灭活。 4.影响因素 溶剂、提取方式、粉碎度、温度、时间、浓 度差。
注意：关三通管→关热源→关水
（二）升华法 固体物质受热不经过熔融，直接变成蒸汽， 遇冷后又凝固为固体化合物，称为升华。适 用于中药中一些具有升华性质的成分 。 中草药中有一些成分具有升华的性质， 可以利用升华法直接自中草药中提取出来。 如樟木中樟脑、茶叶中的咖啡因的提取、有 机酸等。 用途狭窄，自学。
【学习要点】 3.掌握薄层色谱和纸色谱在有效成分鉴别 中的应用。 4.熟悉透析法、盐析法、膜过滤法和分馏 法在天然药物化学成分分离中的应用。 5.了解有效成分结构研究中UV、IR、MS、 NMR等波谱方法的含义、原理及应用。
提取方法：共4种

什么叫天然药物溶剂提取法？
如何选择溶剂？——相似相溶原理 2.渗漉法
6.11
26.0 31.2 81.0
溶剂极性的衡量标准：介电常数ε ，ε越大溶剂极性越强
提取前期准备：

文献查阅综述 药材生药鉴定 粉碎成粗粉 溶剂的选择 提取方式的选择 温度和时间
溶剂提取法种类：



按工艺流程分：6种 浸渍法 渗漉法 煎煮法 回流法 连续回流法 超声提取法
注意：可重提2~3次，合并提取液，加入甲苯、甲醛 防腐
（二）渗漉法

操作：粉碎→浸润→装筒（2/3）→排气→浸渍（溶 剂刚好湮没药材为宜）→渗漉→收集渗漉液等7步 （渗漉液总量约为药材的8~10倍） 溶剂：水、酸水、碱水、不同浓度的乙醇 适用范围：有效成分遇热不稳定的成分


特点：①不加热(适用于对热不稳定的成分)；②提取 效率高于浸渍法；③溶剂消耗量大；④费时长。
根据物质溶解度差别进行分离：
（ 1 ）改变温度：结晶与重结晶，即利用溶剂对有效 成分与杂质在冷热情况下溶解度显著差异以获得结晶 的方法。 （2）改变混合溶剂极性： 水/醇法：水提液+醇（数倍）：可沉淀多糖、蛋白 质等水溶性物质（杂质）。 醇/水法：醇提液+水（数倍）：可除去叶绿素、 油脂等脂溶性杂质。
优点：效率高 缺点：提取时间长、溶剂耗量大

（三）煎煮法

操作：溶剂刚好浸没药材即可，微沸30分钟，提取 2~3次，合并提取液
适用范围：有效成分溶于水、遇热稳定且不水解 特点：①可以明火加热(适用于对热稳定的成分)；② 提取溶剂只能用水；③含挥发性成分或有效成分遇热 易分解、含淀粉多的中药不宜用。 优点：操作简单、效率高于冷浸法 缺点：溶剂不能选有机溶剂 注意：提取容器不能是铁器；不能提取挥发油；不适 宜含糖多的药材提取；提取溶剂只选择水。


缺点：操作复杂、不适宜热稳定性差的有 效成分提取，有机溶剂易挥发
五、连续回流法
特点：①用有机溶剂加热(适用于对热稳定的成分)； ②提取效率最高；③节省溶剂；④提取时间较长。

适用范围：量小药材脂溶性成 分提取 优点：效率较高、溶剂耗量少
蒸气管
冷凝管 抽提器 虹吸管

缺点：不适宜热稳定性差的有 效成分提取，


四、回流法

溶剂：有机溶剂

适用范围：脂溶 性强的成分（甾 体、萜类、蒽醌 等
提 提 即 溶 取 取 可 剂 ， 刚 液 微 好 次 沸 浸 ， 没 合 分 药 并 钟 材 ，
2~3 30
回 流 提 取 操 作 ：
四、回流法

特点：①用有机溶剂加热(适用于对热稳定 的成分)；②提取效率高；③溶剂消耗量大。 ④操作麻烦 优点：效率较高、溶剂耗量大
系统溶剂分离法 两相溶剂萃取法 沉淀法 结晶与重结晶法 透析法 分馏法 盐析法（不讲） 色谱法（层析法）
第2节
天然药物有效成分的分离原理
提取液的浓缩：
1.蒸发: 常压蒸发、薄膜蒸发 2.蒸馏:常压蒸馏、减压蒸馏（旋转蒸发仪） 3.其他: 反渗透法、超滤法
分离原理：
1、根据物质溶解度差别进行分离 a.温度不同，溶解度不同 b.改变溶液的极性去杂质 c.酸碱法 d.沉淀法 2、根据化合物在两相溶剂间分配比差别进行 分离 3、根据物质吸附力差别固-液吸附进行分离 4、根据分子量大小差别进行分子筛原理分离 5、根据物质解离程度不同进行分离
两相溶剂萃取法分为5种：
a.简单液-液萃取法



B.逆流连续萃取法
c.逆流分溶法CCD(反流分布、逆流分配、逆 流分布) d.液滴逆流分配法DCCC（液滴逆流色谱法） E.高速逆流层析法

（一）简单萃取法
1.操作：分液漏斗、量筒 2.适用范围：分配系数较大的成分分离 3.特点：操作简便，设备简单、实验室常用 4.提示 ①水提取液的相对密度最好在1.1~1.2之间 ②萃取剂第1次用量为水提液的1/3~1/2，萃取3次 ③若选三氯甲烷为萃取剂，小心乳化现象。采用旋转 混合或三氯甲烷—乙醚混合萃取剂。 ④可用较大的下口瓶进行萃取。工业生产中在密闭的 缸内进行。
C.正丁醇：中等极性的皂苷、蒽醌苷
D.丙酮、乙醇或甲醇：极性很大的苷类、 生物碱盐、鞣质等极性物质 E.水：强亲水性成分，如蛋白质、氨基酸、 糖类、无机盐等 1.操作：由低极性到高极性分步进行提取， 分成若干部位。 2.适用范围：有效成分不明确
3.特点：操作烦琐，相同成分不易浓集
系统溶剂分离法小结：
第二章 天然药物化学成分提取分离和鉴定 的方法与技术
第1 节 提取方法与技术
【学习要点】 1.掌握有效成分常用提取方法及特点：溶剂提 取法（包括浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提 取法、连续回流提取法等）、水蒸气蒸馏法、 升华、超临界流体萃取提取法等共4种。 2.掌握有效成分常用分离纯化方法及特点：系 统溶剂分离法、结晶法、两相溶剂萃取法、沉 淀法、透析法、分馏法、盐析法、色谱法（包 括硅胶、氧化铝、聚酰胺谱、凝胶柱色谱和大 孔树脂吸附色谱等）共8种。
二、其他提取方法
（一）水蒸气蒸馏法
适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸馏而不被破坏、难溶或
不溶于水的成分的提取，如挥发油、小分子的香豆素类、小分 子的醌类成分。 原理：道尔顿分压定律：P大=∑Pi 操作：蒸馏装置，溶剂浸没药材粗粉，体积约为蒸馏瓶的1/3 适用范围：不溶于水，且不水解的挥发性成分 优点：工艺简单操作方便、实作性强 缺点：溶解度偏大的挥发油需要进行二次蒸馏
5.溶剂的极性与分类：
(1) 水
(2) 亲水性有机溶剂：如甲醇、乙醇、丙酮等
(3) 亲脂性有机溶剂：如石油醚、氯仿、乙醚、饱和烷烃等
水>甲醇> 乙醇> 丙酮> 正丁醇>乙酸乙酯 >氯仿 乙醚>苯 >已烷>石油醚
溶剂： 己烷
苯 无水乙醚
CHCl3
AcOEt
乙醇
甲醇
水
ε
1.88 2.29
4.47
5.20
（3）改变pH值：
碱提酸沉（碱/酸法）：如提取黄酮、蒽醌类
酚酸性成分
酸提碱沉（酸/碱法）：如生物碱类在用酸性
水从药材中提出后，加碱调至碱性即可从水中沉淀
析出。
一、系统溶剂分离法（5部分）

将药材按极性递增的方式，用不同的溶剂逐 步提取：
A.石油醚或汽油：油脂、蜡、叶绿素、挥发油、 游离甾体及三萜类化合物 B.氯仿或乙醚：游离生物碱、有机酸、黄酮、 香豆素苷元等中等极性的物质 C.乙酸乙酯：中等极性的黄酮苷等
4.回流法 6.超声波提取法
一、溶剂提取法（最为常用和重要）