第四章 猪的常见寄生虫病

1. 伊氏锥虫 试验动物可用小鼠、大鼠、
豚鼠、兔或犬。其中尤以小 鼠最适用。接种材料用可疑 病畜的抗凝血液，血液采取 后应在2-4小时内接种完毕。 接种量0.5-1.0毫升，可接种 于腹腔或皮下。
接种后的动物应隔离并 经常检查。当病料中含 虫较多时，小鼠在接种 后1-3日即可在其外周血 液中查到锥虫，当病料 内含虫量少时，发病时 间可能延长，
将此皿置25℃温箱中，注意 保持皿内湿度（应使底部的 垫纸保持潮湿状态）。经7 天后，多数虫卵即可发育成 第三期幼虫，并集中于皿盖 上的水滴中。将幼虫吸出置 载玻片上，放显微镜下检查
7. 测微技术 ➢各种虫卵和幼虫，常有
恒定的大小，测量虫卵 或幼虫的大小，可作为 确定某一虫卵或幼虫的 依据。虫卵和幼虫的测 量需用测微器
如有媾疫锥虫存在，经1-2 周后，即可见家兔的阴囊、 阴茎、睾丸以及耳、唇周 围的皮肤发生水肿，并可 在水肿液内检出虫体
3.胎儿毛滴虫 取病牛阴道分泌物或包
皮冲洗液为病料，接种于 妊娠豚鼠的腹腔内，在接 种后1-20天可以使妊娠豚 鼠发生流产，在其流产胎 儿的消化道和胎盘里可查 出大量的毛滴虫
4.弓形虫 弓形虫是多宿主病原原虫，
使用时将管的“短臂”插 入受检畜的阴道，另端接 一橡皮管并抽吸，少量阴 道粘液即可吸入管内。取 出玻管，两端塞以棉球， 带回实验室检查
➢收集公牛包皮冲洗液，应 先准备100—150毫升加温 到30—35℃的生理盐水， 用针筒注入包皮腔。用手 指将包皮口捏紧，用另一 手按摩包皮后部，而后放 松手指，将液体收集于广 口瓶中待查
➢以上所采的病料，均可加 适当量的生理盐水，置载 玻片上，覆以盖玻片，制 成压滴标本检查；也可制 成抹片，用姬氏液染色后 检查
➢也可用灭菌纱布，以生理 盐水浸湿，用敷料钳夹持， 插入公马尿道或母马阴道， 擦洗后，取出纱布，洗入 无菌生理盐水中，将盐水 离心沉淀，取沉淀物检查， 方法同上
四、血液和组织内虫体 检查法
生殖器官 切开并刮下粘膜，压片
检查。怀疑为马媾疫和牛 胎儿毛滴虫病时，应涂片 染色后油镜检查
脑 先肉眼检查有无多头蚴，
再切成薄片，压片检查 眼
结膜和结膜腔以括搔法 处理检查。剖开眼球，将 前房水收集于皿中，在放 大镜下检查
心和主要血管 剖开将内容物洗于生理
盐水中，反复用沉淀法检 查（对血管内分体吸虫的 收集见后） 膈脚
➢镜检法为取隔肌肉样0.5~ 1g剪成3×10mm的小块， 用厚玻片压紧，放显微 镜下检查或投放到屏幕 上观察
➢消化法为取100g肉样，搅碎 或剪碎，放入3L的烧瓶内。 加入10g胃蛋白酶，溶于2L 自来水。加入16ml盐酸 （25%），放入一磁力搅拌 棒。置于可加热的磁力搅拌 器上，设温于44~46℃。
1. 鲜血压滴标本检查 2. 涂片染色标本检查 3. 虫体浓集法
➢涂片法虽然可以查到血液 中的原虫，但血液中的虫 体较少时，则不易查出虫 体。为此，常先进行集虫， 再制片检查。其操作过程 是采病畜抗凝血6-7毫升， 以每分钟500转的速度，离 心5分钟，使其中大部分红 细胞沉降；
而后将含有少量红细胞，白 细胞和虫体的上层血浆移入 另一离心管中，补加一些生 理盐水，以每分钟2500转的 速度离心10分钟。取沉淀物 制成抹片，按上述染色法染 色检查。此法适用于伊氏锥 虫病和梨形虫病。
六、动物剖检法
1.全身剖检法 ➢在动物死亡（或捕杀）后，
首先制作血片，染色检查， 观察血液中有无寄生虫， 而后仔细检查体表，观察 有无体表寄生虫
➢而后剥皮，观察皮下组织 中有无虫体寄生
➢将各内部脏器依次取出， 先收集胸水，腹水，沉 淀后观察其中有无寄生 虫。而后取出全部消化 器官及其所附的肝、胰 等腺体。取出呼吸系统、 泌尿系统和生殖系统、 心脏和大的动脉和静脉 血管，分别进行检查
也可用1.0%~1.2%食盐水冲 洗粪便,以防止毛蚴过早孵 出，但孵化时应用清水
6. 粪便培养与幼虫分离法 ➢圆线虫目所属线虫种类很
多，其虫卵在形态上非常 相似，很难区别。有时为 了区别这些线虫的种类， 常将含有虫卵的粪便加以 培养，待其中虫卵发育成 为幼虫时，再检查幼虫， 根据幼虫形态上的差异， 加以鉴别
因此接种后至少观察一个月 也可于接种的第3天 采接种小鼠的血液0.5~1.0 毫升，接种于另一只小鼠， 如此盲传3代，即可在接种 小鼠外周血内发现虫体
2.马媾疫 马媾疫锥虫不能接种于
多数实验动物，但可将病 畜的阴道或尿道刮取物与 无菌生理盐水混合，接种 于公家兔的睾丸实质中， 每个睾丸的接种量为0.2 毫升。
多种家畜和实验动物均具有 易感性，但小鼠对之特别敏感 常常仅数十个虫体即可 使小鼠感染发病。
一般取急性死亡的可疑动物 的肺、淋巴结、脾、肝或脑 组织，以1∶5的比例加入生 理盐水，制成乳剂，并加少 量青霉素和链霉素以控制杂 菌感染。
吸取乳剂0.2毫升接种于小鼠 腹腔，一般急性者在4-5天后 发病，病鼠被毛粗乱，食欲 消失，腹部膨大，有大量腹 水，病程4-5天，最后死亡。 抽取病鼠或病死鼠的腹水作 涂片，染色检查，可见大量 游离的滋养体
第七章 寄生虫病诊断
பைடு நூலகம்一节 病原学诊断方法
一、粪便虫卵检查法
1.直接涂片法
direct smear method 2.漂浮集卵法
flotation method 3.沉淀集卵法
sedimentation method 4.麦氏计数法
MacMaster method
5.毛蚴孵化法 ➢是诊断日本血吸虫及
特别是猪，应用镜检法 和消化法进行检查
2.个别器官和个别寄生虫 剖检法
➢有些寄生虫（如网尾科线 虫），其虫卵在新排出的 粪便中已变为幼虫；类圆 属线虫的卵随粪便排出后， 在外界温度较高时，经512小时后，即孵出幼虫。 为了提高检出率，常将幼 虫从粪便中分离出来进行 检查
➢常用的方法为漏斗幼虫 分离法 亦称贝尔曼法
(Baermann's technique)
➢最常用的方法是在培养 皿底部加草纸或滤纸一 张，而后将欲培养的粪 便加水调成硬糊状，塑 成半球形，放于皿内的 纸上，并使半球形粪球 的顶部略高出平皿边沿， 使加盖时与皿盖相接触。
冲洗液应采用以玻璃蒸馏 装置制备的蒸馏水配制生 理盐水，以保证冲洗液中 不含金属离子，减少金属 离子对虫体的影响。病料 采集后应尽快地进行检查
➢由母畜采集病料，是取阴 道分泌的透明粘液，以直 接自阴道内采取为良好， 建议用一根长45厘米，直 径1.0厘米的玻璃管，在 距一端的12厘米处，弯成 150°角，而后消毒备用。
30min后, 将消化液用180μm 的滤筛滤入一2L的分离漏斗, 静置30min, 放出40ml液体于 一50ml的量筒内, 静置10min, 吸去30ml上清夜。
加入30ml水，摇匀。10min 后，再吸去30ml上清液。 剩下的液体到入一带有格 线的平皿内，用20-50X显 微镜观察
五、动物接种法
➢采取病料时，浮肿液和皮 肤丘疹液用消毒的注射器 抽取，为了防止吸入血液 发生凝固，可于注射器内 先吸入适量的 2% 柠檬酸 钠生理盐水。
马阴道粘膜刮取物的采取， 先用阴道扩张器扩张阴道， 再用长柄锐匙在其粘膜有 炎症的部位刮取，刮时应 稍用力，使刮取物微带血液 则其中容易检到锥虫。
采取公马尿道刮取物时， 应先将马保定，左手伸入 包皮内，以食指插入龟头 窝中，徐徐用力以牵出阴 茎，用消毒的长柄锐匙插 入尿道内，刮取病料
其原理是锥虫和感染有梨 形虫的红细胞较正常红细 胞的比重为轻，所以在第 一次沉淀时，正常红细胞 下降，而锥虫和感染有梨 形虫的红细胞尚悬浮在血 浆中。第二次离心沉淀时， 则将其浓集于管底。
对于血液中的微丝蚴，也 可用虫体浓集法。方法是 采血于离心管中。加入5% 醋酸溶液以溶血。待溶血 完成后，离心并吸取沉淀 检查
局部剪毛，消毒，以10毫 升注射器和较粗的针头刺 入淋巴结，抽取淋巴组织； 拔出针头，将针头内容物 推挤到载玻片上，涂成抹片 固定，染色，镜检， 可以找到柯赫氏蓝体
➢家畜患弓浆虫病时，除死 后可在一些组织中找到包 囊和速殖子外，生前诊断 可取腹水，检查其中滋养 体的存在。收集腹水，猪 只可采取侧卧保定，穿刺 部在白线下侧脐的后方 （公畜）或前方（母畜） 1-2厘米处。
波动膜的发现，常作为本 虫与其它一些非致病性鞭 毛虫和纤毛虫在形态上相 区别的依据。也可将标本 固定，用姬氏染液或苏木 素染色后检查
➢马媾疫锥虫在末梢血液中 很少出现，因此血液学检 查在马媾疫诊断上的用处 不大。检查材料主要应采 取浮肿部皮肤或丘疹的抽 出液，尿道及阴道的粘膜 刮取物，特别在粘膜刮取 物中最易发现虫体
4. 组织内虫体检查法 ➢有些原虫可以在动物身体的
不同组织内寄生。一般在死 后剖检时，取一小块组织， 以其切面在载玻片上做成抹 片、触片，或将小块组织固 定后制成组织切片，染色检 查。抹片或触片可用瑞氏染 色法或姬氏染液染色
➢泰勒虫的病畜，常呈现局 部体表淋巴结肿大，取淋 巴结穿刺物，进行显微镜 检查以寻找病原体，对本 病的早期诊断很有帮助。 其方法是，首先将病畜保 定，用右手将肿大的淋巴 结稍向上方推移，并用左 手固定淋巴结；
➢流产胎儿，可取其第四 胃内容物，胸水或腹水 检查
➢检查时应将收集到的病料， 立即放于载玻片上，并防 止材料干燥。对浓稠的阴 道粘液，检查前最好以生 理盐水稀释2-3倍，羊水或 包皮洗涤物最好先以每分 钟2000转的速度离心沉淀 5分钟，而后以沉淀物制片 检查。
未染色的标本主要检查活 动的虫体，在显微镜下可 见其长度略大于一般的白 细胞，能清楚地见到波动 膜，有时尚可见到鞭毛， 在虫体内部可见含有一个 圆形或椭圆形的有强折光 性的核。
穿刺时先局部消毒，将皮 肤推向一侧，针头以略倾 斜的方向向下刺入，深度 约2-4厘米，针头刺入腹腔 后会感到阻力骤减，而后 有腹水流出。取得的腹水 可在载玻片上抹片，以瑞 氏液或姬氏液染色后检查