一、还原糖含量的测定
还原糖含量的测定
05
结果分析与解读
数据处理与图表绘制
数据处理
对实验数据进行整理、筛选和计算， 确保数据的准确性和可靠性。
图表绘制
根据处理后的数据，绘制图表以直观 地展示实验结果，如柱状图、折线图 等。
结果解读与误差分析
结果解读
根据实验结果，分析还原糖含量的变化趋势和规律，判断实 验是否符合预期。
误差分析
对实验结果进行误差分析，找出误差来源，如操作误差、仪 器误差等，以提高实验的准确性和可靠性。
部分多糖
多糖是由多个单糖通过脱 水缩合形成的，部分多糖 也具有还原性，如淀粉、 纤维素等。
还原糖与非还原糖的区别
还原性
还原糖具有还原性，能够还原斐林试 剂或班氏试剂；非还原糖则没有还原 性，不能还原斐林试剂或班氏试剂。
结构
性质
还原糖通常具有较高的反应活性，而 非还原糖则较低。
还原糖通常含有醛基或酮基，而非还 原糖则没有这些基团。
02
还原糖基础知识
定义与性质
定义
还原糖是指具有还原性的糖类，能够 还原斐林试剂或班氏试剂的糖。
性质
还原糖具有醛基或酮基，因此具有还 原性，可与斐林试剂或班氏试剂发生 氧化还原反应。
还原糖的种类
01
02
03
单糖
单糖是最简单的糖类，也 是最具还原性的糖，如葡 萄糖、果糖等。
双糖
双糖是由两个单糖通过脱 水缩合形成的，如麦芽糖、 乳糖等。
色谱法
总结词
色谱法是一种分离和测定复杂混合物中各组 分含量的方法。在测定还原糖含量时，通常 使用高效液相色谱法，将样品中的还原糖与 其他组分分离，通过检测器检测各组分的含 量，从而计算出还原糖的含量。
详细描述
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告还原糖的测定实验报告引言：还原糖是一类具有还原性质的糖类物质，它们能够将其他物质还原为较低的氧化态。
测定还原糖的含量对于食品、医药等领域具有重要意义。
本实验旨在通过一系列的化学反应和分析方法，测定某种食品中还原糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备首先，我们需要准备样品。
选取一种食品，如苹果汁，将其过滤并稀释至适当浓度。
确保样品中没有其他干扰物质的存在。
2. 还原糖的测定将准备好的样品分别取10ml放入两个试管中。
标记为A和B。
3. 试剂的添加在试管A中加入5ml硫酸铜溶液，并加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
4. 还原糖的反应在试管B中加入5ml硫酸铜溶液，并加入适量的还原糖试剂。
搅拌均匀后，加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
5. 比色测定待试管A和B冷却后，使用分光光度计分别测定它们的吸光度。
根据吸光度的差异，计算出还原糖的含量。
结果与讨论：通过实验，我们得到了样品中还原糖的含量。
根据试管A的吸光度，我们可以推测样品中还原糖的含量较低。
而试管B的吸光度明显高于试管A，表明样品中含有较高浓度的还原糖。
这一结果与我们的预期相符。
苹果汁中含有大量的果糖和葡萄糖等还原糖，因此我们可以得出结论，该苹果汁样品中还原糖的含量较高。
然而，我们也要注意到实验中存在的一些限制因素。
首先，我们只测定了还原糖的总含量，并没有对具体的还原糖种类进行分析。
其次，实验中的试剂和操作条件也可能对结果产生影响。
因此，在实际应用中，我们需要综合考虑多种因素，进行更为准确的分析。
结论：通过本实验的测定，我们成功地测定了某种食品中还原糖的含量。
这一实验方法简便易行，可以在食品、医药等领域中得到广泛应用。
然而，在实际应用中，我们需要注意实验条件的控制和结果的解读，以确保测定结果的准确性和可靠性。
实验一斐林试剂置换法测定还原糖的含量
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四、结果计算
还原糖含量(以G计) （ g/ml) =（Vo-V) *0.002 *1/10 * n
式中Vo-------- 斐林试剂标定值，ml V--------- 样品糖液测定值，ml 0.002----- 标准GS液浓度，g/ml 10-------- 样品糖液体积，ml n--------- 样品稀释倍数
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2、定糖预备试验
同1法取斐林试剂，加10ml样品液， 摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分 钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%G滴定至 蓝色消失。记录耗用的G量为V1
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3、样品中还原糖测定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预 先稀释)，补加（V0—V1）ml水，并从滴定管 中预先加入（V1-1）ml 0.2%G，摇匀至电炉 上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次 甲基蓝，继续用G滴定至蓝色消失。记录消 耗的标准G体积为V毫升。
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2
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化 剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示 剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。 根据斐林试剂完全还原所需的还原糖 量，计算出样品还原糖量。
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二、试剂与材料
1、斐林试剂
甲 69.3g CuSO4.5H2O
1000ml 50ml/组
乙 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组
1、斐林试剂标定
A 取甲液5ml+乙液5ml，（注意：甲液与乙液混 合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液， 使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶）置于250ml 三角瓶中，加入10ml水，并从滴定管中加入 0.2%的标准G若干毫升（约23ml） 。（量控 制在后滴定时消耗G在0.5－1.0ml)
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质，通常用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖等在食品和生物样品中的含量。
测定还原糖的方法有很多种，其中包括费林试剂法、硫酸铜比色法、硼酸硫酸铜比色法等。
本文将介绍硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法两种测定还原糖的方法。
硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。
2. 配制硫酸铜溶液，取一定容量的硫酸铜溶液，通常浓度为0.1mol/L。
3. 反应，将样品溶液与硫酸铜溶液混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成红色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。
5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。
硼酸硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。
2. 配制硼酸硫酸铜试剂，将一定量的硼酸溶液与硫酸铜溶液混合制备硼酸硫酸铜试剂。
3. 反应，将样品溶液与硼酸硫酸铜试剂混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成蓝色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。
5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。
以上两种方法均是通过还原糖与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在具体操作时，需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制以及仪器的使用等细节，以确保测定结果的准确性和可靠性。
总结，硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法是常用的测定还原糖的方法，通过与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在实际操作中，需要严格按照方法步骤进行操作，以获得准确可靠的测定结果。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法
还原糖是一种重要的碳水化合物，广泛存在于植物和动物体内。
它在食品加工中起着重要作用，也是一种重要的营养物质。
因此，
准确测定还原糖的含量对于食品加工和营养评估具有重要意义。
下
面将介绍几种常用的还原糖测定方法。
首先，最常用的还原糖测定方法是费林试剂法。
该方法利用费
林试剂与还原糖发生化学反应，生成可见的蓝色产物，通过比色法
测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
费林试剂法操作简便，结
果准确，广泛应用于食品工业和科研领域。
其次，还原糖的测定方法还包括硫酸铜法。
该方法利用硫酸铜
与还原糖在碱性条件下发生化学反应，产生沉淀物，通过沉淀物的
重量来计算还原糖的含量。
硫酸铜法操作简单，结果准确，适用于
各种类型的食品样品。
此外，还原糖的测定方法还包括酚酞法。
该方法利用酚酞与还
原糖在碱性条件下发生化学反应，产生可见的红色产物，通过比色
法测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
酚酞法操作简便，结果
准确，适用于各种类型的食品样品。
最后，还原糖的测定方法还包括高效液相色谱法。
该方法利用高效液相色谱仪对食品样品中的还原糖进行分离和测定，具有分离效果好、分析速度快、准确度高的优点，适用于各种类型的食品样品。
综上所述，还原糖的测定方法多种多样，各有其特点和适用范围。
在实际应用中，可以根据样品的特点和实验条件选择合适的测定方法，以获得准确的测定结果。
希望本文介绍的内容对您有所帮助。
实验 食品中还原糖含量的测定
实验食品中还原糖含量的测定一、实验目的1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点；2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
反应方程式如下：CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa ︱∣CHOH CHO╲∣ +Cu(OH)2= ∣ Cu +2H2OCHOH CHO╱∣ ∣COOK COOKCOONa COONa∣ CHO ∣ CHOH CHO╲∣ CHOH ∣2∣ Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣ + (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣ CHOH ∣∣ CH2HO ∣ CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) （无色）三、实验试剂1、盐酸(1+1)：量取50mL盐酸，加水稀释至100mL。
2、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜 ( CuSO4•5H2O) 及0.05g次甲基蓝，溶入水中并稀释至1000mL。
3、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
4、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
5、亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
6、葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。
此溶液每mL相当于1.0mg葡萄糖。
四、实验仪器1、分析天平；2、可调电炉；3、50mL小烧杯；4、250mL容量瓶；5、100mL量筒，1个/2组；6、250mL锥形瓶3只；7、25mL酸式滴定管1支/组； 8、5mL移液管4支/2组；9、10mL移液管1支/2组； 10、干燥滤纸3张，漏斗1个/组；11、小玻璃棒1根/组； 12、玻璃珠：9颗/组；五、操作步骤（一）试样处理称取约2.50g~5.00g试样，置于250mL容量瓶中，加50mL水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液，混匀放置片刻，加入5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀、静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
实验一 还原糖和总糖含量的测定
实验一还原糖和总糖含量的测定一、实验目的1、了解还原糖和总糖含量的测定原理，熟悉实验步骤。
2、掌握还原糖和总糖含量的测定方法。
二、实验项目及所用仪器1、还原糖：Benedict试剂，烧杯，伏安电极，示波器，旋涡振荡仪；2、总糖：滤纸、热板、氧化棉芯，旋涡振荡仪。
三、实验原理1、还原糖：Benedict试剂由碳酸锰盐溶液、碳酸铵溶液、氯化钠溶液和抗上皮染料橙Ⅲ组成。
当还原糖作用于Benedict试剂时，会与其中的锰离子发生反应，生成蓝色配体，从而使抗上皮染料橙Ⅲ发生变色；2、总糖：将样品与氧化棉芯一起置于热板中，加热到900℃时，碳水化合物在此温度条件下完全分解为糖和水，糖与热板表面发生热反应而分解，引起氧化棉芯之上有显著黑色浓缩形成，即糖皿现象，根据糖皿质量来推算样品中碳水化合物的质量。
四、实验步骤1、还原糖测定：（1）将1ml Benedict溶液放至烧杯中；（2）向烧杯中加入1ml样品液体，根据不同液体不同加入2-3滴 (液体较稠时) 或1-2滴 (液体较洁时) 酸碱度调节液；（3）将伏安电极组件放入烧杯中，并选取示波器连接；（4）加热26℃下水浴加热，取示波器时加热过程中的电势；（5）检测峰面上的电势，来比较是否有变色；（6）如果有变色，就用旋涡振荡仪对发生变色的液体测定样品含有的还原糖含量。
（1）将样品5ml液体流入滤纸中，滤取液体；（2）将滤取的液体均匀的淋洒在氧化棉芯之上，并将其置于热板之上；（3）将热板加热，观察过程中糖皿现象的变化，双环现象表示反应完成；五、结果计算还原糖：检测变色后用旋涡振荡仪测定吸光度值，用标准曲线求出浓度；总糖：使用朱诺重量比法称取峰面上的焦灰，根据标准曲线求出浓度，以重量比计算样品中碳水合物的含量。
六、安全措施1、食品分析实验中，需要遵守实验室安全规章制度，具体包括：实验前应安全检查仪器，按要求穿防护服、佩戴护目镜，使用专用工具等；2、使用热源时，需要注意：电源线耐热、工作在室内，不能离开，保持室内通风；3、使用化学试剂时，应具备良好的操作习惯，佩戴护手镯、护目镜，禁止吞咽及外用，实验结束后将试剂放回原位，实验结束后要做好清洗工作。
苯酚硫酸法测定还原糖
苯酚硫酸法测定还原糖引言：还原糖是一类具有还原性质的糖类物质，其含量的测定对于食品、饮料等行业具有重要意义。
苯酚硫酸法是一种常用的测定还原糖含量的方法，本文将对该方法的原理、步骤以及注意事项进行介绍。
一、实验原理苯酚硫酸法是一种间接法，通过将还原糖与苯酚在硫酸存在下发生反应，生成有色化合物，利用比色法测定其吸光度来确定还原糖的含量。
该方法的原理基于还原糖具有还原性，能够还原苯酚为呈紫色的有色化合物。
二、实验步骤1. 准备样品：将待测样品称重，加入适量的蒸馏水溶解并稀释至一定体积，得到待测溶液。
2. 试剂准备：将苯酚溶液与硫酸溶液按照一定比例混合，得到苯酚硫酸试剂。
3. 反应：取适量待测溶液加入苯酚硫酸试剂，充分混合后静置一段时间，使反应充分进行。
4. 比色：将反应后的溶液转移到比色皿中，使用比色计在特定波长下测定其吸光度。
5. 标准曲线：使用已知浓度的还原糖溶液制备一系列标准溶液，按照相同的方法进行反应和比色，得到各标准溶液的吸光度。
6. 计算：根据标准曲线，将待测溶液的吸光度与标准溶液的吸光度进行比较，确定其对应的还原糖含量。
三、注意事项1. 实验中所有使用的仪器、试剂和容器应保持干净和无污染，避免对实验结果产生影响。
2. 在加入苯酚硫酸试剂后，应充分混合均匀，并静置一段时间，以确保反应充分进行。
3. 比色时，应选择适当的波长，并进行零点校正，使测定结果更加准确。
4. 制备标准曲线时，应使用不同浓度的标准溶液，以覆盖待测样品的浓度范围。
5. 实验操作中应注意安全，避免接触苯酚和浓硫酸，以免对人体造成伤害。
结论：苯酚硫酸法是一种常用的测定还原糖含量的方法，通过将还原糖与苯酚在硫酸存在下发生反应，并利用比色法测定其吸光度来确定还原糖的含量。
在实验操作中，我们需要注意保持仪器、试剂和容器的干净和无污染，并在比色时选择适当的波长进行测定。
通过制备标准曲线，我们可以根据待测溶液的吸光度确定其对应的还原糖含量。
实验一 直接滴定法测定食品中还原糖含量讲义
实验一直接滴定法测定食品中还原糖含量一、目的与要求1、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术2、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素二、实验原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色时为滴定终点。
根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。
三、仪器与试剂1、仪器酸式滴定管（25mL），锥形瓶，电炉，石棉网，容量瓶250ml，移液管，洗耳球，水浴锅，玻璃珠，烧杯，玻璃棒2、试剂碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到1000 ml。
碱性酒石酸铜乙液:取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，在加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，再用水稀到1000 ml，储存于橡胶塞玻璃瓶内。
葡萄糖标准液：准确称取1.000g干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5 ml盐酸，并以水稀释至1000 ml。
雪碧四、实验步骤1、样品处理汽水等含二氧化碳的样品，吸取100 ml试样在水浴上除去二氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用蒸馏水洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。
2、标定碱性酒石酸铜溶液吸取5.0 mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于锥形瓶中，加水20 mL, 加玻璃珠2粒，从滴定管中加约9 mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液，摇匀，置于电炉上加热至沸，然后保持沸腾时以每2s 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，显示淡黄色为为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
还原糖含量的测定(Somogyi～Nelson法)
还原糖含量的测定（ Somogyi-Nelson 比色法）一.目的在植物营养及代谢研究中，常需测定还原糖的含量，本实验要求掌握Somogyi-Nelson 比色法的测定原理。
二、原理还原糖是具有羰基（＞ C ＝ O ）的糖，能将其他物质还原而其本身被氧化。
(1) 还原糖在碱性条件下加热，在酒石酸钾钠存在的情况下，可以定量地将二价铜离子还原为一价铜离子，即产生砖红色的氧化亚铜沉淀，其本身被氧化。
具体反应如下：生成的 Cu 复合物与糖反应， Cu 生成氧化亚铜（ Cu 2 O ）。
(2) 氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原，还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合物即砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与还原糖含量（即被还原的 Cu 2 O 量）成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后用做标准，就可测得样品中还原糖含量。
三、仪器、试剂和材料1 .仪器（ 1) 分光光度计（ 2 ）水浴锅（ 3 ）具塞刻度试管： 15ml X 10（ 4 ）吸管： 1ml X 1 ， 2m1X4 ， 5ml X 3（ 5 ）容量瓶： 100m1 X 2（ 6 ）漏斗（ 7 ）研钵（ 8 ）电子顶载天平2 .试剂（ 1) 铜试剂A. 4 ％ CuS04 · 5H20B. 称取 24g 无水碳酸钠，用 850m1 水溶于大烧杯中，加120g含 4 分子结晶水的酒石酸钾钠，待全溶（可适当加热）后加入碳酸氢钠16g, 再加入120g 无水硫酸钠，全溶及冷却后加水至 900m1 ，沉淀 1~2 天，取上清液（要求严格时过滤）即可备用。
使用前将 A 与 B 按 1 ： 9 混匀即可。
(2 ）砷钼酸试剂:25g钼酸铵溶于 450ml 蒸馏水中（加热溶解，但温度接近 150 ℃时易分解），待冷却后再加入21 ml 浓 H2SO4 混匀。
另将3g砷酸氢二钠（ Na2HAs04 . 7H20) 溶解于 25ml 蒸馏水中，然后加到钼酸铵溶液中，室温下放置于棕色瓶中可长期备用。
一、还原糖含量的测定
三、实验材料、仪器和试剂：
1、实验材料：苹果（约0.5 g）
2、仪器：水浴锅；可见分光光度计等。 3、试剂：
（1）0.5 mg/mL葡萄糖标准液
（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂(碱性)
四、实验步骤：
1、葡萄糖标准曲线的绘制 2、还原糖的提取
3、样品含糖量的测定:
生物化学实验
实
验
四
植物组织中还原糖的测定
—3,5-二硝基水杨酸比色法
学时：3
一、实验目的：
1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。
2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。
二、实验原理:
1、还原糖：指含有游离的半缩醛(酮)基糖。 单糖都是还原糖；某些二糖是还原糖（如麦芽糖、
乳糖等）；多糖为非还原糖。
2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。 利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、
3、样品含糖量的测定: 取提取液0.5ml，按上表操作。
五、计算：
还原糖含量(μg/ g )=
还原g)
六、思考题：
1、何谓还原糖？测定还原糖的方法还 有哪几种? 2、本实验的注意事项?
测定还原糖其它方法
(1)蒽酮比色法：
强酸可使糖类脱水生成糠醛，糠醛与蒽
葡萄糖含 量（μg） 0 50 100 150 200
0.5
4 混匀
250
χ1
2、还原糖的提取
① 取0.5g样品于研钵中，加水2ml，充分研磨。
② 用2ml蒸馏水分三次冲洗研钵(总体积小于10 ml)，转入10ml离心管中。 ③ 在50℃水浴中恒温20分钟，冷却后于 4000r/min, 离心5分钟。 ① 取上清转入50ml容量瓶中，用蒸馏水定容， 待测。
还原糖的含量测定
还原糖的含量测定一、背景介绍糖是人们日常饮食中常见的一种营养物质，但过量摄入糖会导致肥胖、糖尿病等健康问题。
因此，了解食品中糖的含量对于人们合理膳食非常重要。
还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖，如葡萄糖、果糖等，其测定方法较为简便。
二、实验原理还原糖含量测定采用间接法，即先将样品中的多余物质去除，然后将还原糖转化为葡萄糖，并利用酶法或化学法测定葡萄糖含量。
其中，去除多余物质的方法有酸水解法、酶解法和乙醇沉淀法等；将还原糖转化为葡萄糖的方法有硫酸水解法和硝酸钠氧化法等；测定葡萄糖含量的方法有显色滴定法和比色法等。
三、实验步骤1. 样品制备：取适量待测样品，如果汁、奶制品等。
2. 样品预处理：根据样品的特点选择合适的去除多余物质的方法，如果汁可用酸水解法，奶制品可用乙醇沉淀法。
3. 还原糖转化：将经过预处理的样品加入硫酸或硝酸钠溶液中，在加热条件下将还原糖转化为葡萄糖。
4. 葡萄糖含量测定：根据实验需要选择合适的测定方法，如显色滴定法或比色法等。
四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免接触有毒有害物质。
2. 样品预处理和还原糖转化过程要严格控制温度和时间，避免对样品产生影响。
3. 测定葡萄糖含量时要准确称量试剂和标准物质，并按照操作规程进行操作。
4. 实验前应对仪器进行检查和校准，保证实验结果的准确性。
五、实验结果分析通过测定样品中葡萄糖含量可以得到还原糖的含量。
不同食品中还原糖含量不同，其中果汁、甜点等含糖量较高的食品中还原糖含量也相对较高，而蔬菜、豆类等含糖量较低的食品中还原糖含量也相对较低。
通过对不同食品中还原糖含量的测定可以为人们制定合理膳食提供科学依据。
六、实验应用1. 食品生产：测定不同食品中还原糖含量，可以为生产厂家提供产品质量控制和改进方案。
2. 膳食指导：了解不同食品中的还原糖含量，可以帮助人们制定合理的膳食计划，避免过度摄入糖分。
3. 学术研究：测定不同食品中的还原糖含量，可以为相关学科领域提供数据支持。
实验一斐林试剂置换法测定还原糖的含量
• 斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化 剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示 剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色 。根据斐林试剂完全还原所需的还原 糖量，计算出样品还原糖量。
2021/4/24
二、试剂与材料
1、斐林试剂
甲 69.3g CuSO4.5H2O
1000ml 50ml/组
乙 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组
2021/4/24
五、注意事项
• 本方法测定的是一类具有还原性质的糖，包 括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结 果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示，所以 不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如 果已知样品中只含有某一种糖，如乳制品中 的乳糖，则可以认为还原糖=某糖。
2021/4/24
• 分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制 标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所消 耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原 糖，在物化性质上仍有所差别，所以还原糖的结 果只是反映样品整体情况，并不完全等于各还原 糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖， 则应以该还原糖做标准品，结果为该还原糖的含 量。如果样品中还原糖的成分未知，或为多种还 原糖的混合物，则以某种还原糖做标准品，结果 以该还原糖计，但不代表该糖的真实含量。
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• 五、分析讨论 • 六、思考题：
1、查阅资料还原糖测定检测方 法有哪些？其原理是什么？
2、总结本实验方法检测还原糖 应注意哪些事项？
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2、定糖预备试验
同1法取斐林试剂，加10ml样品液 ，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2 分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%G滴定 至蓝色消失。记录耗用的G量为V1
二硝基水杨酸法测定还原糖
还原糖含量测定（3,5-二硝基水杨酸比色法）一、实验原理还原糖的测定是各种糖类化合物定量测定的基本方法。
在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸（DNS)共热后3,5-二硝基水杨酸(DNS)被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)，还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。
在一定范围内，还原糖的浓度与3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)颜色深浅的程度呈正比，利用可见分光光度计，在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值，查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。
二、实验试剂3, 5-二硝基水杨酸试剂( DNS)：将6.3g DNS和262mL 2mol/L的NaOH溶液加到500mL含有182g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g重蒸酚和5g亚硫酸氢钠，搅拌溶解，冷却后定容至1000ml。
溶液为黄色，贮于棕色瓶中。
1mg/mL 葡萄糖标准溶液：准确称取80℃烘至恒重的分析纯无水葡萄糖1g，置于烧杯中，加少量水溶解后再加5mL浓盐酸(防止微生物生长)，以蒸馏水定容至1000ml,混匀，4℃冰箱中保存备用。
碘-碘化钾溶液：称取5g碘和10g碘化钾，溶于100mL蒸馏水中。
酚酞指示剂：称取1g酚酞，溶于250mL70%乙醇中。
6mol/L HCI溶液：取250mL浓HCI,用蒸馏水稀释到500mL。
6mol/L NaOH溶液：称取240g NaOH, 溶于1000mL蒸馏水中。
三、实验方法1．制作葡萄糖标准曲线取6支试管编号，按照表3-1分别加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂。
将各管混匀，用0号管调零点，在540nm波长处测1-5管吸光度。
以葡萄糖毫克数为横坐标，A540为纵坐标，绘制标准曲线。
2．样品中还原糖的测定（食用面粉为例）准确称取2.00g食用面粉，放入100mL烧杯中，先用少量蒸馏水调成糊状，然后加入50-60mL蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，使还原糖浸出。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告引言：还原糖是一类含有还原性基团的糖类物质，包括蔗糖、果糖、葡萄糖等，它们具有还原剂性质，能够还原某些化学试剂。
还原糖的测定对于食品工业、生物化学以及医学领域具有重要意义。
本实验旨在通过间接法，利用还原糖对氧化剂的还原能力来测定糖的含量。
实验设备：1. 分光光度计2. 烧杯3. 试管4. 10ml 称量瓶5. 称量盘6. 称重仪7. 20ml 锥形瓶8. 恒温水浴器9. 塑料注射器实验原理与步骤：原理：还原糖具有还原能力，能够将某些氧化剂还原为相应的还原剂。
本实验中，我们采用间接法来测定还原糖的含量。
首先，还原糖被氧化剂氧化生成相应的酸。
然后，我们利用已知浓度的氧化剂标定所需的还原糖的质量。
步骤：1. 取适量的还原糖样品，精确称量并记录其质量。
2. 将样品溶解在足够量的蒸馏水中，使得质量浓度为1克/10ml。
3. 取0.5ml还原糖溶液到一个20ml 锥形瓶中。
4. 加入50ml的磷酸盐缓冲溶液，并用塑料注射器将氧化剂硫酸亚铁溶液滴定到显红的终点，记录所需的滴定体积。
5. 用蒸馏水对照实验进行空白试验，并记录滴定体积。
6. 计算样品的还原糖含量。
实验结果与分析：1. 标定曲线：根据实验所得数据，绘制出硫酸亚铁滴定体积与还原糖质量之间的标定曲线。
2. 样品测定：根据实验步骤中测定的滴定体积数据，结合标定曲线，计算并记录样品中还原糖的含量。
讨论与结论：1. 实验误差：分析实验过程中可能存在的误差来源，如称量误差、滴定体积读取误差等。
提出改进实验方法的建议。
2. 结果分析：根据实验数据的分析与计算，得出样品中还原糖的含量。
3. 结论：通过实验，我们成功测定了还原糖的含量，并得出结论。
实验的意义与应用：1. 食品工业：测定食品中还原糖的含量，为食品质量评价提供重要依据。
2. 生物化学：研究生物体内糖代谢、酶的活性等方面的重要手段。
3. 医学领域：对于糖尿病患者管理血糖以及诊断疾病具有重要意义。
《还原糖的测定方法_国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖是利用还原性固体物质与硫酸酸作用而形成的糖类物质，是各种天然糖和蔗糖等碳水化合物的主要成分。
还原糖的测定方法主要包括酚酞法和锁紫法两种。
一、酚酞法1.原理还原糖在酸性溶液中能够与酚酞形成红色络合物，按照这个特性可以利用测定还原糖的含量。
酚酞法是将酚酞加入葡萄糖溶液，并加入硫酸，使葡萄糖反应生成邻磺酸基苯甲醛，酚酞与邻磺酸基苯甲醛产生红色络合物，根据颜色变化来测定还原糖的含量。
2.步骤（1）样品处理：将样品取适量加入标准瓶中，加入适量蒸馏水稀释。
（2）试剂溶液制备①酚酞指示剂：0.1%酚酞水溶液，加入适量氢氧化钠溶液调节其pH值到8左右；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
（3）测定操作①在滴定管中加入5ml淀粉指示液；②将50ml试剂用热水浴加热至60℃，在加热的过程中不断振荡，直到试剂完全溶解；③加入3ml样品，再加入1.5ml的硫酸；④加入恰好的量的还原剂，至混合溶液变成淡绿色，继续振荡至反应彻底；⑤从头部滴入酚酞指示液，直至溶液变为粉色，记录滴定管体积。
（4）计算还原糖的质量浓度二、锁紫法1.原理锁紫法是一种定量测定还原糖的方法，其原理是利用还原性糖在酸性条件下氧化生成醛酸物质，再与锁紫剂作用形成深紫色络合物，根据反应色深与被测样品中还原糖含量成正比关系的特点，来定量测定还原糖的含量。
2.步骤（1）样品前处理：将样品取适量加入到锥形瓶中加入适量蒸馏水稀释，搅拌溶解。
（2）试剂溶液制备①锁紫试剂：将0.2g锁紫用少量水样吸湿后加入10mL浓氢氧化钠（4mol/L），用水稀释到100ml，在加入5ml浓硫酸搅拌，备用；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
（3）操作流程①在锥形瓶中加入1ml锁紫试剂和30ml蒸馏水；②加入3ml样品后加入2ml还原剂，充分搅拌均匀；③经过10分钟左右，样品溶液颜色变为紫色，放置待沉淀，用滤纸滤掉沉淀；④将过滤后的溶液转移到光度计试样池，用蒸馏水稀释至标线；⑤根据光度计读数计算样品中还原糖的质量浓度。
还原糖含量测定方法
还原糖含量测定方法嘿，你问还原糖含量测定方法啊？那咱就来唠唠。
要说测定还原糖含量呢，有几种常见的办法。
一种是斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个小侦探，能把还原糖给找出来。
先把要测的东西弄成溶液，然后把斐林试剂加进去。
接着放在热水里煮一煮，这时候要是有还原糖，就会和斐林试剂发生反应，产生红色的沉淀。
根据沉淀的多少，就能大概知道还原糖的含量啦。
还有一种方法是班氏试剂法。
这个和斐林试剂法有点像。
也是把溶液和班氏试剂混合，然后加热。
如果有还原糖，就会出现颜色变化，从蓝色变成砖红色啥的。
通过观察颜色的变化程度，就能判断还原糖有多少。
另外呢，还有一种比较简单的方法，就是用血糖仪。
不过这个一般是用来测血糖的，但也能测一些含有还原糖的溶液。
把溶液滴在血糖仪的试纸上，就能读出一个数值。
不过这个方法不是很准确，只能大概知道个范围。
我给你讲个事儿吧。
有一次我在实验室里做实验，就是测定一种水果里的还原糖含量。
我们先用斐林试剂法试了试，把水果榨成汁，然后加入斐林试剂，放在热水里煮。
哇，果然出现了红色的沉淀。
我们根据沉淀的多少，估算出了还原糖的含量。
然后我们又用班氏试剂法做了一遍，结果差不多。
最后我们还用血糖仪测了一下，虽然数值不太准确，但是也能给我们一个参考。
通过这次实验，我们对还原糖含量的测定方法有了更深刻的理解。
总之呢，测定还原糖含量的方法有斐林试剂法、班氏试剂法和血糖仪法等。
不同的方法有不同的优缺点，可以根据实际情况选择合适的方法。
只要你认真去做，就能准确地测出还原糖的含量。
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三、实验材料、仪器和试剂：
1、实验材料：苹果（约0.5 g） 2、仪器：水浴锅；可见分光光度计等。 3、试剂：
（1）0.5 mg/mL葡萄糖标准液 （2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂(碱性)
四、实验步骤：
1、葡萄糖标准曲线的绘制 2、还原糖的提取 3、样品含糖量的测定:
1、葡萄糖标准曲线的绘制:
祝您成功！
酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿 色，其颜色的深浅与糖含量成正比关系， 在620nm波长下可测定其光密度值。
• (2)砷钼酸比色法
• 还原糖在碱性条件下加热，可以定量地 还原二价铜离子为一价铜离子，即产生砖 红色地氧化亚铜沉淀，其本身被氧化。氧 化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原， 还原型地钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用， 生成一种蓝色复合物即砷钼蓝，其颜色深 浅在一定范围内与还原糖地含量（即被还 原的Cu2O）成正比，用标准葡萄糖与砷钼 酸作用，比色后做标准，就可测得样品还 原糖含量。
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、 双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和 多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进 行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量 （还原糖以葡萄糖含量计）。
2、还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂反应：
在碱性条件下，还原糖与DNS试剂反应，还原糖被 氧化成糖酸及其它产物， DNS被还原为棕红色的3-氨 基-5-硝基水杨酸。
(3)费林试剂滴定法
费林试剂由甲乙两种溶液混合而成， 甲液（硫酸铜）与乙液（氢氧化钠）生成 天蓝色沉淀，在碱性溶液中，乙液（酒石 酸钾钠）使氢氧化铜溶解生成一种络合物， 还原糖在碱性加热条件下，可以定量还原 费林试剂中Cu2+为Cu1+ ,使费林试剂脱色， 其脱色的程度与还原糖含量成正比关系。
知识回顾 Knowledge Review
待测。
3、样品含糖量的测定: 取提取液0.5ml，按上表操作。
五、计算：
还原糖含量(μg/ g )=
还原糖含量χ1(μg) ×样液总体积 测定用样品液体积×样品鲜重(g)
六、思考题：
1、何谓还原糖？测定还原糖的方法还 有哪几种? 2、本实验的注意事项?
测定还原糖其它方法
(1)蒽酮比色法： 强酸可使糖类脱水生成糠醛，糠醛与蒽
取7支试管，按下表操作，以标准葡萄糖含量为横坐标， 对应的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
管 号
葡萄糖 标准液
mL
蒸馏水 mL
DNS mL
沸水 蒸馏水 光密度值 浴 mL O比溶液)
0
0.5
0
1
0.1
0.4
50
2
0.2
0.3
100
3 4
0.3 0.4
0.2 0.1
3,5-二硝基水杨酸 (DNS)
3-氨基-5-硝基水杨酸 (棕红色,A540)
3、在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质(3氨基-5-硝基水杨酸)颜色的深浅成正比关系，利用 分光光度计，在540nm波长下测定光密度值， 查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖 的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分 子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
生物化学实验
实验 四
植物组织中还原糖的测定
—3,5-二硝基水杨酸比色法
学时：3
一、实验目的：
1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。 2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。
二、实验原理:
1、还原糖：指含有游离的半缩醛(酮)基糖。 单糖都是还原糖；某些二糖是还原糖（如麦芽糖、
乳糖等）；多糖为非还原糖。 2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。
0.5
5min 冷却
4 混匀
150 200
5
0.5
0
250
还原糖提取液
0.5
χ1
2、还原糖的提取
① 取0.5g样品于研钵中，加水2ml，充分研磨。 ② 用2ml蒸馏水分三次冲洗研钵(总体积小于10
ml)，转入10ml离心管中。 ③ 在50℃水浴中恒温20分钟，冷却后于
4000r/min, 离心5分钟。 ① 取上清转入50ml容量瓶中，用蒸馏水定容，