2[1].2.2动物细胞融合与单克隆抗体课件(人教版选修3)
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人教版高中生物选修三专题二第2节 2 .2动物细胞融合与单体克隆抗体 课件(共23张PPT)
第一次筛选 选择培养基
只筛有选杂出种杂细 胞交才瘤能细活胞
（多种）杂交瘤细胞
问题6：如何筛选出能够产生所需的单一抗体的杂 交瘤细胞？ 思路：稀释、培养、检测
多孔培养板
细胞克隆化培养 单克隆有单个杂交瘤细胞克隆的含义
抗体检测（抗原—抗体杂交）
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）杂交瘤细胞
第二 次筛选：
。
分泌抗体
注射到 小鼠腹腔
吞噬 细胞
①产生抗体细胞：浆细胞
②化学本质：蛋白质
T细胞
淋巴 因子
B细胞
浆细胞
抗体
记忆B细胞
返回
杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，
通常用“有限稀释法”来选择能分泌所需抗体
的杂交瘤细胞。
Hale Waihona Puke 返回将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，
使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。
然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。
阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，
挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需
进行3～4次，直至每个孔中增殖的细胞为单克
隆细胞。该过程为杂交瘤细胞的克隆化培养。
获得产生相应 目的 抗体的已免疫 的B淋巴细胞
动物细胞培养
（多种）
（已免疫的）
脾脏
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（已免疫的）
动物细胞 融合技术
B 、BB 、杂交瘤 、 瘤瘤 、瘤
问题4：如果仅考虑2个细胞之间发生融合，有多少类
情况？哪类是需要的？
5
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）
已免疫的
问题5：如何筛 选杂交瘤细胞？
只筛有选杂出种杂细 胞交才瘤能细活胞
（多种）杂交瘤细胞
问题6：如何筛选出能够产生所需的单一抗体的杂 交瘤细胞？ 思路：稀释、培养、检测
多孔培养板
细胞克隆化培养 单克隆有单个杂交瘤细胞克隆的含义
抗体检测（抗原—抗体杂交）
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）杂交瘤细胞
第二 次筛选：
。
分泌抗体
注射到 小鼠腹腔
吞噬 细胞
①产生抗体细胞：浆细胞
②化学本质：蛋白质
T细胞
淋巴 因子
B细胞
浆细胞
抗体
记忆B细胞
返回
杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，
通常用“有限稀释法”来选择能分泌所需抗体
的杂交瘤细胞。
Hale Waihona Puke 返回将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，
使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。
然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。
阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，
挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需
进行3～4次，直至每个孔中增殖的细胞为单克
隆细胞。该过程为杂交瘤细胞的克隆化培养。
获得产生相应 目的 抗体的已免疫 的B淋巴细胞
动物细胞培养
（多种）
（已免疫的）
脾脏
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（已免疫的）
动物细胞 融合技术
B 、BB 、杂交瘤 、 瘤瘤 、瘤
问题4：如果仅考虑2个细胞之间发生融合，有多少类
情况？哪类是需要的？
5
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）
已免疫的
问题5：如何筛 选杂交瘤细胞？
人教版选修3课件 第1部分 专题2 2.2 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
(1)概念：是指_两__个__或__多__个__动物细胞结合形成_一__个__细__胞___ 的过程，也称_细__胞__杂__交 ___。
(2)原理：_细__胞__膜__的__流__动__性__。 (3)结果：形成_杂__交__细胞。 (4)诱导因素：①_聚__乙__二 ___醇_ (PEG)、②_灭__活__的__病__毒__、③电 激等。
[精讲精析] 本题考查动物细胞工程中的制备单克隆抗体。 ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞(浆细胞)，A项错 误；胰蛋白酶可使组织分散为单个细胞，B项错误；③为杂交细 胞，只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞，才同时具有 (效应)B淋巴细胞(可产生抗体)和骨髓瘤细胞(可无限增殖)的特 性，C项错误；④是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交 瘤细胞，D项正确。
2．下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是 ( ) A．制备过程中不需要动物细胞培养技术 B．杂交瘤细胞具有B淋巴细胞与癌细胞的所有特点 C．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆 抗体的生产 D．单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 解析：单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与已免疫的B淋 巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，经过选择培养基的筛选并 经单一抗体检测后获得所需杂交瘤细胞，培养能产生特定 抗体的杂交瘤细胞即可得到单克隆抗体；杂交瘤细胞能无 限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。 答案：D
(3)若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花 粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性 纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生 长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细 胞，较为简便的筛选方法是______________________________ ____________________________________________________。
(2)原理：_细__胞__膜__的__流__动__性__。 (3)结果：形成_杂__交__细胞。 (4)诱导因素：①_聚__乙__二 ___醇_ (PEG)、②_灭__活__的__病__毒__、③电 激等。
[精讲精析] 本题考查动物细胞工程中的制备单克隆抗体。 ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞(浆细胞)，A项错 误；胰蛋白酶可使组织分散为单个细胞，B项错误；③为杂交细 胞，只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞，才同时具有 (效应)B淋巴细胞(可产生抗体)和骨髓瘤细胞(可无限增殖)的特 性，C项错误；④是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交 瘤细胞，D项正确。
2．下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是 ( ) A．制备过程中不需要动物细胞培养技术 B．杂交瘤细胞具有B淋巴细胞与癌细胞的所有特点 C．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆 抗体的生产 D．单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 解析：单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与已免疫的B淋 巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，经过选择培养基的筛选并 经单一抗体检测后获得所需杂交瘤细胞，培养能产生特定 抗体的杂交瘤细胞即可得到单克隆抗体；杂交瘤细胞能无 限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。 答案：D
(3)若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花 粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性 纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生 长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细 胞，较为简便的筛选方法是______________________________ ____________________________________________________。
人教版生物选修三 2.2 《动物细胞融合与单克隆抗体》课件(共29张PPT)
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4、All that you do, do with your might; things done by halves are never done right. ----R.H. Stoddard, American poet做一切事都应尽力而为，半途而废永远不行6.17.20216.17.202110:5110:5110:51:1910:51:19
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9、要学生做的事，教职员躬亲共做； 要学生 学的知 识，教 职员躬 亲共学 ；要学 生守的 规则， 教职员 躬亲共 守。21 .8.1121 .8.11W ednesday, August 11, 2021
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10、阅读一切好书如同和过去最杰出 的人谈 话。03: 23:0003 :23:000 3:238/ 11/2021 3:23:00 AM
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17、儿童是中心，教育的措施便围绕 他们而 组织起 来。上 午3时23 分0秒 上午3时 23分03 :23:002 1.8.11
• 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of opportunity. (Richard Nixon, American President )命运给予我们的不是失望之酒，而是机会之杯。二〇二一年六月十七日2021年6月17日星期四
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5、You have to believe in yourself. That's the secret of success. ----Charles Chaplin人必须相信自己，这是成功的秘诀。-Thursday, June 17, 2021June 21Thursday, June 17, 20216/17/2021
生物人教版(2019)选择性必修3 2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体(共41张ppt)
1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 1984年，诺贝尔生理学或医学奖
阅读课本P48-49，了解 单克隆抗体的制备过程
二、单克隆抗体及其应用
3. 制 备 过 程
面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相
凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发
生融合。 仙台 紫外线 丧失感染活性(不感染细胞) 病毒 灭活 保留融合活性(诱导细胞融合)
【P49页旁栏思考】19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹 等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?
1975年
Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能 分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。
20世纪80年代 发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)
随堂练习
1．关于动物细胞融合的说法，不正确的是( C )
A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个 细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的具有两个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂 交细胞 C．常用的诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活的病毒诱导、电激 、紫外线照射等 D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能
又能产生大
量 无限增殖。
特定抗体
2. 单克隆抗体的概念
：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞产生的具有特异性的抗体。
一个 B淋巴细胞
克隆
细胞群
抗体
单 克隆 抗体
二、单克隆抗体及其应用
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
动物细胞融合 杂交瘤 动物细 单克隆 细胞 胞培养 抗体
人教版高中生物选修三专题二第2节 2 .2动物细胞融合与单体克隆抗体 课件(共21张PPT)
DNA合成
氨基喋呤
磷酸核糖转பைடு நூலகம்酶）和TK
DNA合成（胸苷激酶）
DNA合成
主要途径 阻断
辅助途径
骨髓瘤细胞无TK或HGPRT B细胞有HGPRT和TK，但在体外通常培养条件下，
尤其是在单个细胞环境下难于长期存活和增殖传代
第二次筛选： 通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用 多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培 养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。 那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。
多孔培养板专一抗体阳性检测
（二选）选出能 产生所需专一抗 体的杂交瘤细胞 并克隆。
体外培养
小鼠腹腔内培养
获得产生相应抗体 的B细胞
√
BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）
（一选）选择 性培养基：只 有杂交瘤细胞 才能存活
杂交瘤细胞特 点：既能产生 特异性抗体， 又能大量增殖。
3、单克隆抗体的应用
单克隆抗体最主要的优点：
一、动物细胞融合
1.动物细胞融合的概念
A细胞 人工诱导
B细胞
动物细胞融合（也称细胞杂 交）：是指两个或多个细胞融 合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
2、动物细胞融合过程 1、如何将动物组织分散成
单个的细胞？
2、动物细胞融合和植物 原生质体融合的基本原理 是否相同？
3、动物细胞融合的具体 过程是否与植物原生质体 融合的过程一样？
问题3：杂交瘤细胞 是如何筛选出来的？ 有何特点？
问题4：是否所有的 杂交瘤细胞都能产生 专一性抗体？
问题5：如何大规模 进行培养得到大量的 单克隆抗体？
第一次筛选：特定选择培养基（HAT培养基：含有
高三生物2.2.2《动物细胞融合与单克隆抗体》课件(新人教版选修3)课件.ppt
。2020年11月19日星期四2020/11/192020/11/192020/11/19
❖ 15、会当凌绝顶，一览众山小。2020年11月2020/11/192020/11/192020/11/1911/19/2020
❖ 16、如果一个人不知道他要驶向哪头，那么任何风都不是顺风。2020/11/192020/11/19November 19, 2020
化学性质单一、特异性强的抗体。 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
杂种细胞
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞
怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点
为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选
大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
动物细胞与植物细胞的差别：
•无细胞壁 •全能性受限制，不能发育成杂种动物
动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同： •不需去除细胞壁 •不能发育成新的动物个体
一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞
的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性
物理法：离心、振动、电激 4、诱导方式 化学法：聚乙二醇（PEG)
• 14、Thank you very much for taking me with you on that splendid outing to London. It was the first time that I had seen the Tower or any of the other famous sights. If I'd gone alone, I couldn't have seen nearly as much, because I wouldn't have known my way about.
动物细胞融合与单克隆抗体 课件人教版高中生物选修三ppt
一 动物细胞融合技术
杂交细胞：具有原来两个 或多个细胞的遗传信息
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
细胞膜的流动性
动物细胞融合特有
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （化学法 物理法 生物法 ）
灭活的病毒诱导动物细胞融合的原理
1.什么是病毒的灭活？
灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
三 单克隆抗体的应用
1.单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，可以大量制备。 单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性 结合，并且可以大量制备。
2.单克隆抗体的应用 （1）广泛用作诊断试剂
（2）运载药物：如ADC（抗体 - 接头 - 药物）
（3）用于治疗疾病。
2(2020全国卷)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了 以下实验流程。
2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体
本节聚焦： 1.什么是动物细胞融合技术？ 2.单克隆抗体是如何制备的？
在临床上有哪些应用？
知识回顾：植物体细胞杂交的过程
植物细胞融合
植物组织培养
运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同植物之间的生殖隔离的屏障
那么，有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞 的优势于一身的动物细胞呢？
单克隆抗体制备的过程：
能产生所需抗体的杂交瘤细胞
注射到小鼠腹腔内 从小鼠腹水中提取
体外培养 从细胞培养液中提取
单克隆抗体
两次筛选的比较
第一次筛选
第二次筛选
原因
诱导融合后得到的细胞中，除 杂交瘤细胞之外，还有未融合 的亲本细胞，也有融合的具有 同种核的细胞
高中生物人教版选修3课件：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
的特点,又具备淋巴细胞的
的特点,经过选择性培养的
杂交瘤细胞,还需进行
和
,经
多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂
交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或在小鼠腹腔内增殖,从
或
中,就可以提取出大量的单克隆抗体了。
(5)淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来的。
-9-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 题型一 题型二
-7-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 题型一 题型二
目标导航
Z D 重难聚焦 HONGNANJUJIAO
典例透析
IANLITOUXI
题型二 单克隆抗体的制备 【例2】 下图是单克隆抗体制备流程示意图。结合图示完成下 列问题。
-8-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
目标导航
Z D 重难聚焦 HONGNANJUJIAO
如何利用规律实现更好记忆呢？
-31-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
超级记忆法-记忆规律
第四个记忆周期是 1天 第五个记忆周期是 2天 第六个记忆周期是 4天 第七个记忆周期是 7天 第八个记忆周期是15天 这五个记忆周期属于长期记忆的范畴。 所以我们可以选择这样的时间进行记忆的巩固，可以记得更扎实。
如何利用规律实现更好记忆呢？
-32-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
超级记忆法--场景法
人教版七年级上册Unit4 Where‘s my backpack？
-33-
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
超级记忆法-记忆方法
TIP1：在使用场景记忆法时，我们可以多使用自己熟悉的场景（如日常自己的 卧室、平时上课的教室等等），这样记忆起来更加轻松； TIP2：在场景中记忆时，可以适当采用一些顺序，比如上面例子中从上到下、 从左到右、从远到近等顺序记忆会比杂乱无序乱记效果更好。
高中人教版选修3 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 课件(50张)
灭活病毒 形成杂种细胞
栏目 导引
专题2 细胞工程
3.生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源 (1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两 个亲本。 (2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。 (4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲 本细胞。 (5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的 遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。
栏目 导引
专题2 细胞工程
1．病毒在生物技术中的应用 (1)灭活的病毒能作为诱导剂，不灭活的病毒不能作为诱导剂。 (2)病毒在不同过程或操作中的“身份不同”。在免疫调节中病 毒属于抗原，在基因工程中可作为载体，在细胞工程中可作为 诱导剂。
栏目 导引
专题2 细胞工程
2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞膜的流动性和植物细 原理
胞的全能性
细胞膜的流动性
酶解法去掉细胞壁后，诱导
原生质体融合
导细胞融合
形成杂种植株
栏目 导引
专题2 细胞工程
项目 诱导方
法 结果
植物体细胞杂交 物理方法、化学方法
形成杂种植株
动物细胞融合 物理方法、化学方法、
栏目 导引
专题2 细胞工程
2．(2018·江苏高考改编)右图为细胞融合的示意图， 下列叙述正确的是( ) A．若 a 细胞和 b 细胞是植物细胞，需先去分化 再诱导融合 B．a 细胞和 b 细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C．c 细胞的形成与 a、b 细胞膜的流动性无关 D．c 细胞将同时表达 a 细胞和 b 细胞中的所有基因
栏目 导引
专题2 细胞工程
3.生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源 (1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两 个亲本。 (2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。 (4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲 本细胞。 (5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的 遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。
栏目 导引
专题2 细胞工程
1．病毒在生物技术中的应用 (1)灭活的病毒能作为诱导剂，不灭活的病毒不能作为诱导剂。 (2)病毒在不同过程或操作中的“身份不同”。在免疫调节中病 毒属于抗原，在基因工程中可作为载体，在细胞工程中可作为 诱导剂。
栏目 导引
专题2 细胞工程
2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞膜的流动性和植物细 原理
胞的全能性
细胞膜的流动性
酶解法去掉细胞壁后，诱导
原生质体融合
导细胞融合
形成杂种植株
栏目 导引
专题2 细胞工程
项目 诱导方
法 结果
植物体细胞杂交 物理方法、化学方法
形成杂种植株
动物细胞融合 物理方法、化学方法、
栏目 导引
专题2 细胞工程
2．(2018·江苏高考改编)右图为细胞融合的示意图， 下列叙述正确的是( ) A．若 a 细胞和 b 细胞是植物细胞，需先去分化 再诱导融合 B．a 细胞和 b 细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C．c 细胞的形成与 a、b 细胞膜的流动性无关 D．c 细胞将同时表达 a 细胞和 b 细胞中的所有基因
相关主题
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老师都说好! 老师都说好!
【提示】 提示】
①三种；②细胞核融合成一个核。 三种； 细胞核融合成一个核。 (1)常用的病毒诱导剂有仙台病毒、 常用的病毒诱导剂有仙台病毒、 常用的病毒诱导剂有仙台病毒
【易误警示】 易误警示】
新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等 其中仙台病毒最常用 其中仙台病毒最常用。 新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。 (2)用做诱导剂的病毒必须事先灭活，使病毒的感染 用做诱导剂的病毒必须事先灭活， 用做诱导剂的病毒必须事先灭活 活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。 活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。
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情景导航 20世纪 年代初，英国科学家成功 世纪90年代初 世纪 年代初， 地利用“生物导弹” 地利用“生物导弹”单克隆抗体瞄 准并杀死了癌细胞， 准并杀死了癌细胞，使患血癌的一 名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失 岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失 了。被称为“生物导弹”的单克隆抗体，能够跟踪 被称为“生物导弹”的单克隆抗体， 和杀死细菌、病毒或癌细胞。 和杀死细菌、病毒或癌细胞。
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单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 ． (1)关键思路 关键思路 ①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。 克隆单一的 淋巴细胞，形成细胞群。 淋巴细胞 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合， ②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因 用 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
DNA 的两个细胞灭活的病毒______ 3．过程 ：不同 ．过程：不同______的两个细胞 ― → 杂交 ― PEG
细胞。 细胞。
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4．意义：克服了______杂交的不亲合性，成为研 ．意义：克服了 远缘 杂交的不亲合性 杂交的不亲合性， 究细胞_____、 细胞免疫 、肿瘤和生物_______培 究细胞 遗传 、_________、肿瘤和生物 新品种 培 育的重要手段。 育的重要手段。 二、单克隆抗体 1．传统抗体的获得 ． (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____，使动 方法： 向动物体内反复注射某种 抗原 ， 方法 物产生_____； 从动物_____中分离所需抗体 中分离所需抗体。 物产生 抗体 ；②从动物 血清 中分离所需抗体。 (2)特点：_______、纯度低、_______差。 特点： 特点 产量低 、纯度低、 特异性 差
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2.2.2 动物 细胞 融合 与单 克隆 抗体
基础自主梳理
核心要点突破
知能过关演练
4
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基础自主梳理
一 、动物细胞融合 1．概念 ：指 ___________动物细胞结合形成一个 ．概念： 两个或多个 动物细胞结合形成一个 细胞的过程，也称细胞杂交。 胞杂交。 细胞的过程 ，也称细 胞杂交 2．结果 ：形成 杂交 细胞。 细胞。 ．结果：形成_____细胞
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4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法 ．优点： 的局限性，使远缘杂交成为可能。 的局限性，使远缘杂交成为可能。 特别提醒 灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感 染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
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思考感悟 什么是单克隆抗体？ 什么是单克隆抗体？鼠的单克隆抗体能否用于人体 疾病的治疗？为什么？ 疾病的治疗？为什么？ 【提示】 提示】 单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞增殖产 不能。因为鼠的 淋巴细 不能。因为鼠的B淋巴细
返回 13
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A.1 C．3 ． 【尝试解答】 尝试解答】 【解析】 解析】 B
B．2 ． D．4 ． 选B。植物细胞工程常采用的技术手段 。
有植物组织培养和植物体细胞杂交。 有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程 常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、 常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单 克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。 克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、 植物细胞工程中都需要对所取材料进行特殊处理， 植物细胞工程中都需要对所取材料进行特殊处理， 植物细胞工程要利用酶解法去除细胞壁， 植物细胞工程要利用酶解法去除细胞壁，得到有生
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(2)第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个 第二次筛选需先在多孔培养皿上培养， 第二次筛选需先在多孔培养皿上培养 孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养， 孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后 再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细 胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的， 胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的 抗体一定是化学性质单一、 抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗 体。 特别提醒 上述B淋巴细胞为经过免疫的 淋巴细胞 上述 淋巴细胞为经过免疫的B淋巴细胞。 淋巴细胞为经过免疫的 淋巴细胞。
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2．单克隆抗体的制备 ．
脾 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 淋巴细胞 增殖 克隆化 抗体 杂交瘤细胞 产生抗体
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体外培养 细胞培养液
小鼠腹腔 腹水
3．单克隆抗体的应用 ． (1)优点：_________、_________、产量大。 优点： 优点 特异性强 、 灵敏度高 、产量大。 (2)应用 应用 ①作为诊断试剂，具有准确、_____、简易、_____ 作为诊断试剂，具有准确、 高效 、简易、 快速 的优点。 的优点。 用于_________和 运载药物 。 ②用于 治疗疾病 和_________。
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例1 (2010年安庆高二检测 某同学在学习“细胞工 年安庆高二检测)某同学在学习 年安庆高二检测 某同学在学习“
程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容， 列表比较了动植物细胞工程的有关内容， 你认为有几处是不正确的( 你认为有几处是不正确的
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淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体； ①每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不 每一个 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同。 同种类的 淋巴细胞分泌的抗体不同。 淋巴细胞分泌的抗体不同 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖； ②B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖；骨髓瘤 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖 细胞能够无限增殖。 细胞能够无限增殖。 2．单克隆抗体的制备过资源网
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跟踪训练
(2011年滦县高二检测 能使动物细胞融 年滦县高二检测)能使动物细胞融 年滦县高二检测 )
合的特有的诱导因素是( 合的特有的诱导因素是 A．离心 ． C．电激 ． 答案： 答案：B
B．灭活的病毒 ． D．振动 ．
生的高度专一的抗体。 生的高度专一的抗体。
胞所产生的抗体与人体B淋巴细胞产生的抗体是不 胞所产生的抗体与人体 淋巴细胞产生的抗体是不 同的。 同的。
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核心要点突破
动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 ．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化 ．诱导方法：物理法 离心、 离心 振动、电激； 学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。 聚乙二醇；生物方法 灭活的病毒。 学法 聚乙二醇 灭活的病毒 3．动物细胞融合的过程 ．
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5．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 ．
比较 植物体细胞杂交 项目 细胞融 细胞膜的流动性、细胞的全 细胞膜的流动性、 能性 合原理 动物细胞融合 细胞膜的流动性
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 用纤维素酶、 细胞融 用纤维素酶、果胶酶去除细 使细胞分散后， 使细胞分散后，诱导细胞 合方法 胞壁后诱导原生质体融合 融合 诱导 离心、电激、振动、显微操 与植物体细胞杂交相比， 离心、电激、振动、 与植物体细胞杂交相比， 手段 作、聚乙二醇等诱导 还可用灭活的病毒诱导 获得杂交细胞， 获得杂交细胞，以生产细 结果 获取杂种植株 胞产品 克服远缘杂交不亲和的障碍, 克服远缘杂交不亲和的障碍 制备单克隆抗体、 制备单克隆抗体、病毒疫 扩展杂交亲本组合范围， 用途 扩展杂交亲本组合范围，培 苗、干扰素等 育新品种
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活力的原生质体， 活力的原生质体，动物细胞工程则需要用胰蛋白酶 处理动物组织。 处理动物组织。动、植物细胞工程所用的培养基是 不同的，植物细胞工程中利用固体或半固体培养基, 不同的，植物细胞工程中利用固体或半固体培养基 含有蔗糖、植物必需的矿质元素、植物激素等， 含有蔗糖、植物必需的矿质元素、植物激素等，动 物细胞工程中利用液体培养基， 物细胞工程中利用液体培养基，含有动物所需的营 养物质、无机盐、维生素、动物血清等。 养物质、无机盐、维生素、动物血清等。 【互动探究】 动物细胞融合中两种不同细胞融合 互动探究】 动物细胞融合中两种不同细胞融合, 则：①融合的方式有几种？②融合完成的标志是什 融合的方式有几种？ 么？
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【提示】 提示】
①三种；②细胞核融合成一个核。 三种； 细胞核融合成一个核。 (1)常用的病毒诱导剂有仙台病毒、 常用的病毒诱导剂有仙台病毒、 常用的病毒诱导剂有仙台病毒
【易误警示】 易误警示】
新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等 其中仙台病毒最常用 其中仙台病毒最常用。 新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。 (2)用做诱导剂的病毒必须事先灭活，使病毒的感染 用做诱导剂的病毒必须事先灭活， 用做诱导剂的病毒必须事先灭活 活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。 活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。
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情景导航 20世纪 年代初，英国科学家成功 世纪90年代初 世纪 年代初， 地利用“生物导弹” 地利用“生物导弹”单克隆抗体瞄 准并杀死了癌细胞， 准并杀死了癌细胞，使患血癌的一 名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失 岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失 了。被称为“生物导弹”的单克隆抗体，能够跟踪 被称为“生物导弹”的单克隆抗体， 和杀死细菌、病毒或癌细胞。 和杀死细菌、病毒或癌细胞。
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单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 ． (1)关键思路 关键思路 ①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。 克隆单一的 淋巴细胞，形成细胞群。 淋巴细胞 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合， ②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因 用 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
DNA 的两个细胞灭活的病毒______ 3．过程 ：不同 ．过程：不同______的两个细胞 ― → 杂交 ― PEG
细胞。 细胞。
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4．意义：克服了______杂交的不亲合性，成为研 ．意义：克服了 远缘 杂交的不亲合性 杂交的不亲合性， 究细胞_____、 细胞免疫 、肿瘤和生物_______培 究细胞 遗传 、_________、肿瘤和生物 新品种 培 育的重要手段。 育的重要手段。 二、单克隆抗体 1．传统抗体的获得 ． (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____，使动 方法： 向动物体内反复注射某种 抗原 ， 方法 物产生_____； 从动物_____中分离所需抗体 中分离所需抗体。 物产生 抗体 ；②从动物 血清 中分离所需抗体。 (2)特点：_______、纯度低、_______差。 特点： 特点 产量低 、纯度低、 特异性 差
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2.2.2 动物 细胞 融合 与单 克隆 抗体
基础自主梳理
核心要点突破
知能过关演练
4
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基础自主梳理
一 、动物细胞融合 1．概念 ：指 ___________动物细胞结合形成一个 ．概念： 两个或多个 动物细胞结合形成一个 细胞的过程，也称细胞杂交。 胞杂交。 细胞的过程 ，也称细 胞杂交 2．结果 ：形成 杂交 细胞。 细胞。 ．结果：形成_____细胞
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4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法 ．优点： 的局限性，使远缘杂交成为可能。 的局限性，使远缘杂交成为可能。 特别提醒 灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感 染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
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思考感悟 什么是单克隆抗体？ 什么是单克隆抗体？鼠的单克隆抗体能否用于人体 疾病的治疗？为什么？ 疾病的治疗？为什么？ 【提示】 提示】 单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞增殖产 不能。因为鼠的 淋巴细 不能。因为鼠的B淋巴细
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A.1 C．3 ． 【尝试解答】 尝试解答】 【解析】 解析】 B
B．2 ． D．4 ． 选B。植物细胞工程常采用的技术手段 。
有植物组织培养和植物体细胞杂交。 有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程 常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、 常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单 克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。 克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、 植物细胞工程中都需要对所取材料进行特殊处理， 植物细胞工程中都需要对所取材料进行特殊处理， 植物细胞工程要利用酶解法去除细胞壁， 植物细胞工程要利用酶解法去除细胞壁，得到有生
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(2)第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个 第二次筛选需先在多孔培养皿上培养， 第二次筛选需先在多孔培养皿上培养 孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养， 孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后 再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细 胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的， 胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的 抗体一定是化学性质单一、 抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗 体。 特别提醒 上述B淋巴细胞为经过免疫的 淋巴细胞 上述 淋巴细胞为经过免疫的B淋巴细胞。 淋巴细胞为经过免疫的 淋巴细胞。
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2．单克隆抗体的制备 ．
脾 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 淋巴细胞 增殖 克隆化 抗体 杂交瘤细胞 产生抗体
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小鼠腹腔 腹水
3．单克隆抗体的应用 ． (1)优点：_________、_________、产量大。 优点： 优点 特异性强 、 灵敏度高 、产量大。 (2)应用 应用 ①作为诊断试剂，具有准确、_____、简易、_____ 作为诊断试剂，具有准确、 高效 、简易、 快速 的优点。 的优点。 用于_________和 运载药物 。 ②用于 治疗疾病 和_________。
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例1 (2010年安庆高二检测 某同学在学习“细胞工 年安庆高二检测)某同学在学习 年安庆高二检测 某同学在学习“
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淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体； ①每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不 每一个 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同。 同种类的 淋巴细胞分泌的抗体不同。 淋巴细胞分泌的抗体不同 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖； ②B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖；骨髓瘤 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖 细胞能够无限增殖。 细胞能够无限增殖。 2．单克隆抗体的制备过资源网
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(2011年滦县高二检测 能使动物细胞融 年滦县高二检测)能使动物细胞融 年滦县高二检测 )
合的特有的诱导因素是( 合的特有的诱导因素是 A．离心 ． C．电激 ． 答案： 答案：B
B．灭活的病毒 ． D．振动 ．
生的高度专一的抗体。 生的高度专一的抗体。
胞所产生的抗体与人体B淋巴细胞产生的抗体是不 胞所产生的抗体与人体 淋巴细胞产生的抗体是不 同的。 同的。
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动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 ．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化 ．诱导方法：物理法 离心、 离心 振动、电激； 学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。 聚乙二醇；生物方法 灭活的病毒。 学法 聚乙二醇 灭活的病毒 3．动物细胞融合的过程 ．
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5．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 ．
比较 植物体细胞杂交 项目 细胞融 细胞膜的流动性、细胞的全 细胞膜的流动性、 能性 合原理 动物细胞融合 细胞膜的流动性
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 用纤维素酶、 细胞融 用纤维素酶、果胶酶去除细 使细胞分散后， 使细胞分散后，诱导细胞 合方法 胞壁后诱导原生质体融合 融合 诱导 离心、电激、振动、显微操 与植物体细胞杂交相比， 离心、电激、振动、 与植物体细胞杂交相比， 手段 作、聚乙二醇等诱导 还可用灭活的病毒诱导 获得杂交细胞， 获得杂交细胞，以生产细 结果 获取杂种植株 胞产品 克服远缘杂交不亲和的障碍, 克服远缘杂交不亲和的障碍 制备单克隆抗体、 制备单克隆抗体、病毒疫 扩展杂交亲本组合范围， 用途 扩展杂交亲本组合范围，培 苗、干扰素等 育新品种
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活力的原生质体， 活力的原生质体，动物细胞工程则需要用胰蛋白酶 处理动物组织。 处理动物组织。动、植物细胞工程所用的培养基是 不同的，植物细胞工程中利用固体或半固体培养基, 不同的，植物细胞工程中利用固体或半固体培养基 含有蔗糖、植物必需的矿质元素、植物激素等， 含有蔗糖、植物必需的矿质元素、植物激素等，动 物细胞工程中利用液体培养基， 物细胞工程中利用液体培养基，含有动物所需的营 养物质、无机盐、维生素、动物血清等。 养物质、无机盐、维生素、动物血清等。 【互动探究】 动物细胞融合中两种不同细胞融合 互动探究】 动物细胞融合中两种不同细胞融合, 则：①融合的方式有几种？②融合完成的标志是什 融合的方式有几种？ 么？