环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义
阿司匹林是怎样伤胃的，了解一下防护措施，对保护胃黏膜有帮助
阿司匹林是怎样伤胃的，了解一下防护措施，对保护胃黏膜有帮助阿司匹林在药物分类上属于非甾体抗炎药，这类药的抗炎作用主要在于限制环氧化酶的活性。
环氧化酶是我们人体合成前列腺素的重要催化剂，而前列腺素在消除炎症反应中扮演者重要的作用。
服用以阿司匹林为代表的非甾体抗炎药，就是通过这个途径起到了消炎镇痛作用的。
我们的身体是一个复杂的系统，同一类的活性物质也有不同的类型。
环氧化酶也分很多类型，其中重要的类型是：环氧化酶1（COX-1）和环氧化酶2（COX-2）。
环氧化酶1（COX-1）广泛存在于胃黏膜组织中，一方面维持着胃黏膜的完整性，另一方还能促进胃体组织的血液微循环，环氧化酶1（COX-1）的主要生理作用就体现在这里。
而环氧化酶2（COX-2），才是抗炎反应的真正主角。
如果我们大剂量服用了阿司匹林这样的药物，环氧化酶1（COX-1）和环氧化酶2（COX-2）会被同时激活。
在止痛消炎的同时，胃黏膜的保护机制也被削弱了。
久而久之胃黏膜就会受到一些攻击因子的损伤，我们就会感到消化不良、嗳气、反酸、恶心、呕吐、腹痛、腹胀等不适症状。
胃黏膜还会出现慢性炎症、水肿和糜烂性病变，我们就会得上了各类胃炎和胃溃疡等胃肠道疾病。
另一方面，阿司匹林的化学名叫做乙酰水杨酸，是一种具有很强刺激性的酸性物质。
因此阿司匹林也会通过刺激和损伤胃黏膜的方式，使我们得上胃病。
使我们得上胃病的其他因素，还有幽门螺旋杆菌感染、吸烟、喝酒、暴饮暴食、刺激性食物、外伤等。
有些非甾体抗炎药对环氧化酶1（COX-1）作用较弱，如昔布类抗炎药；还有一些非甾体抗炎药对胃黏膜的刺激较小，如对乙酰氨基酚或布洛芬；因此，现在人们已经很少通过服用大剂量的阿司匹林，来达到抗炎、镇痛和解热的目的了。
目前，大家服用的都是小剂量的肠溶剂型的阿司匹林，为的是预防血栓的形成。
小剂量的阿司匹林对胃黏膜的损伤要小很多，而肠溶剂型又进一步减少了对为胃黏膜的刺激，从而大大提高的阿司匹林的安全性。
氧化应激的指标
氧化应激的指标
氧化应激的指标有很多，以下列出了一些常见的指标：
1. ROS（Reactive Oxygen Species，活性氧）：活性氧是氧化应激的主要物质，可以通过荧光染料或自由基捕捉剂等方法检测。
2. MDA（Malondialdehyde，丙二醛）：MDA是膜脂过氧化反应的产物，是氧化应激的重要指标之一，可以通过比色法或荧光法检测。
3. SOD（Superoxide Dismutase，超氧化物歧化酶）：SOD是一种重要的抗氧化酶，可以检测SOD的活性或基因表达水平来评估氧化应激的程度。
4. CAT（Catalase，过氧化氢酶）：CAT也是一种重要的抗氧化酶，可以检测其活性或基因表达水平来评估氧化应激的程度。
5. GSH（Glutathione，谷胱甘肽）：GSH是一种重要的抗氧化剂，可以通过比色法或荧光法等方法检测。
6. 线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential，MMP）：MMP是线粒体功能的重要指标，氧化应激可改变MMP，可通过荧光染料检测。
7. DNA氧化损伤：DNA氧化损伤是氧化应激的重要标志之一，可以通过单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）或8-OHdG 等指标检测。
8. 炎症因子：氧化应激可引起炎症反应，相关炎症因子如TNF-α（Tumor Necrosis Factor-α）和IL-6（Interleukin-6）等可以作为氧化应激的指标之一。
低氧对机体的影响.
低氧对机体的影响氧气是机体进行正常新陈代谢的必要条件，在低氧情况下，如果机体不能够适应这种低氧的环境，则会引起一系列的病理生理上的反应。
在低氧的情况下组织的代谢、机能、形态结构都会发生异常变化，过强的低氧应激反应将导致机体各种功能出现衰竭，机体的神经系统、循环系统、呼吸系统等均会受到不同程度的损伤，最终导致脑、心、肺等重要脏器因能量供应不足而死亡［1］。
1.低氧对中枢神经系统的影响中枢神经对缺氧最为敏感, 氧耗最高 , 占全身体重 2%的大脑组织 ,[2]氧耗占全身氧耗的 20% , 脑组织的代谢以有氧代谢为主 , 几乎没有无氧代谢能力 , 对氧的需求最高。
同时脑组织中的氧和 ATP的储备很少 , 因而对缺氧的耐受性差 , 是机体对缺氧最敏感的组织[3] .低氧对中枢神经系统功能的影响导致睡眠结构的改变，引起失眠、睡眠质量下降，其结果会加重中枢神经功能的紊乱[4] 。
低氧显著影响学习记忆能力，包括瞬时∕延迟记忆、短期记忆和工作记忆能力等[5] . 慢性缺氧易出现疲劳、嗜睡、注意力不集中、记忆力下降等症状，引起的脑功能损害主要表现为反应时间延长 , 动作协调性和准确性降低 , 劳动功效降低。
缺氧进一步加重出现脑功能的改变为 : 兴奋、欣快感、定向力障碍 ,而后出现运动不协调、头痛、乏力等, 甚至出现意识障碍或死亡[6,7]。
缺氧直接扩张脑血管 , 增加脑血流量和脑毛细血管内压 , 组织液生成增多 ; 长期低氧可显著抑制线粒体内膜腺苷酸转运体（ ANT ）转运活性，使脑内自由基增加、膜脂质过氧化、内源性抑制剂增多，进而影响细胞能量代谢[8]。
脑内乳酸和氧自由基与脂质过氧化物生成增加，抗氧化系统减弱，血脑屏障受损[9] , 缺氧致代谢性酸中毒使脑部血管痉挛和通透性增加, 造成间质性脑水肿[10] ;急性吸入含氧量低的空气同样可使脑脊液压力升高, 引起颅内高压[11] , 缺氧致 ATP生成减少 ,细胞膜钠泵功能障碍 , 细胞内钠水潴留 ; 脑充血和脑水肿使颅内压增高,脑压高又可压迫脑血管加重脑缺血和脑缺氧[12] 。
环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义
·论著·2012年7月第9卷第21期门脉高压（PHT）是肝硬化导致的最常见也是最复杂的症状之一，同时也是肝硬化导致死亡的最主要原因。
许多临床和实验室数据表明酒精、非甾体类抗炎药物、缺血再灌注、胃黏膜损伤与修复都增加了胃黏膜损伤的敏感性[1-2]。
现在人们已经逐渐接受了PHT导致局部血液量增加、外周血液循环抵抗降低而导致心输出量增加，因而被称之为高动力循环的观点[3-5]。
胃黏膜的机能障碍被认为与PHT有关，而这些机能障碍被称为门脉高压性胃病。
然而具体的失代偿机理现在仍不清楚。
1材料与方法1.1材料1.1.1试剂兔抗鼠COX-1单克隆抗体；兔抗鼠COX-2单克隆抗体；兔抗鼠Fas-L单克隆抗体；山羊抗小鼠LgG；5%BSA封闭液；SABC。
以上试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.1.2动物及分组雄性SD大鼠20只，体重220~250g（山西医科大学实验动物中心提供）。
随机分为两组。
实验组：半结扎门静脉及左肾静脉组；对照组：单纯暴露游离门静脉组。
1.2方法1.2.1建立门静脉高压大鼠模型大鼠于术前12h禁食，术前8h禁饮。
3%戊巴比妥钠针腹腔注射麻醉（0.1mL/100g BW）。
实验组大鼠开腹后游离暴露门静脉主干后用7号钝性针头平行放置于门静脉干，用3-0丝线结扎后将钝性针头抽出，待门静脉结扎处部分充盈后轻轻结扎。
然后暴露左肾上腺静脉然后结扎。
1.2.2大鼠门静脉压力测量于术后两周将所有大鼠麻醉后开腹，实验组大鼠用20号套管针穿刺肠系膜上静脉近端，退出针芯并将套管送入门静脉结扎远端，该处测得压力作为门静脉压；对照组则将套管针直接插入门静脉处测压，另一端环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义郭志坤郭建昇苗晋阳山西医科大学第一医院普通外科，山西太原030001[摘要]目的利用门脉高压大鼠模型观察环氧化酶-1（cyclooxygenase-1，COX-1）、环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、Fas配体（Fas ligand，Fas-L）在其胃组织的表达情况并探讨其在门脉高压性胃病中的意义。
环氧化酶
环氧化酶环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)又称前列腺素内氧化酶还原酶,是一种双功能酶,具有环氧化酶和过氧化氢酶活性,是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶。
目前发现环氧化酶有两种COX-1和COX-2同工酶，前者为结构型，主要存在于血管、胃、肾等组织中，参与血管舒缩、血小板聚集、胃粘膜血流、胃黏液分泌及肾功能等的调节，其功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管的阻力和调节肾血流量分布有。
后者为诱导型，各种损伤性化学、物理和生物因子激活磷脂酶A2水解细胞膜磷脂，生成花生四烯酸，后者经COX-2催化加氧生成前列腺素。
COX-2的生物学性质COX是花生四烯酸代谢过程中前列腺素（prostaglandins，PGs）合成的限速酶。
传统观念认为，COX 有两种结构亚型，即结构型COX-1和诱导型COX-2。
近期，COX的第三种同工酶——COX-3，在神经系统组织内被发现。
COX-1主要存在于正常的组织细胞中，催化产生维持正常生理功能的PGs。
COX-2是一种膜结合蛋白。
研究证实，在巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和单核细胞中COX-2均可被诱导表达。
生理状态下绝大部分组织细胞不表达COX-2；而在炎症、肿瘤等病理状态下受炎性刺激物、损伤、有丝分裂原和致癌物质等促炎介质诱导后，呈表达增高趋势，参与多种病理生理过程，具体是细胞膜磷脂通过磷脂酶A2途径被水解释放出花生四烯酸，在COX-2的催化下，合成前列腺素E2（PGE2），最后产生系列炎症介质，并通过瀑布式级联反应参与机体各生理、病理过程。
人类COX-2基因位于1号染色体q 25.2～q 25.3，长8.3 kb，含有10个外显子和9个内含子，编码604个氨基酸，含有17个氨基酸残基的信号肽。
COX-2与糖尿病Pickup研究发现，炎症细胞因子、氧化应激等在2型糖尿病中具有重要作用，首次将2型糖尿病和亚临床炎症联系起来。
COX-2作为重要的炎症介质，参与糖尿病的发病机制以通过诱导合成PGs类衍生物来实现。
环氧化酶的作用
环氧化酶的作用环氧化酶是一类在生物体内广泛存在的酶，它在许多生物化学反应中起着重要的调节作用。
环氧化酶能够催化环氧化反应，将某些化合物中的不饱和双键氧化成环氧化合物。
这种反应在许多生物体内都是必需的，因为环氧化酶催化的环氧化反应能够产生一些重要的生理活性物质。
环氧化酶是一类金属酶，其催化活性依赖于其活性位点上的金属离子。
常见的环氧化酶活性位点上的金属离子包括铁离子、钴离子和锰离子等。
这些金属离子能够与底物分子中的不饱和双键形成配位键，使底物分子发生环氧化反应。
环氧化酶催化的环氧化反应具有高度的立体选择性，它能够选择性地将双键氧化成环氧化合物。
这种立体选择性是由环氧化酶的活性位点和底物分子的结构决定的。
环氧化酶的活性位点上存在着一些特定的氨基酸残基，它们能够与底物分子的特定部位发生氢键或范德华力作用，从而使底物分子以特定的立体构型进入活性位点，并与金属离子发生配位键，从而实现立体选择性催化。
环氧化酶催化的环氧化反应在生物体内起着重要的生理调节作用。
例如，环氧化酶能够催化一些内源性化合物的环氧化反应，从而产生一些具有生理活性的代谢产物。
这些代谢产物可以参与许多生理过程，如炎症反应、血管舒缩调节等。
另外，环氧化酶还能够催化一些外源性化合物的环氧化反应，从而使其具有更好的溶解性和生物活性。
这些外源性化合物包括一些药物和毒物，环氧化酶的催化作用能够影响它们的药效和毒性。
除了参与生理调节，环氧化酶还具有一定的应用价值。
由于环氧化酶具有高度的立体选择性和底物特异性，它可以用于合成一些具有特定立体构型和生物活性的化合物。
例如，环氧化酶可以催化一些合成药物的中间体的环氧化反应，从而提高合成药物的产率和选择性。
另外，环氧化酶还可以用于环境保护领域。
由于环氧化酶能够催化一些有机污染物的环氧化反应，将其转化为无毒或低毒的物质，因此可以用于处理工业废水和废气中的有机污染物。
环氧化酶是一类在生物体内广泛存在的酶，它能够催化环氧化反应，将某些化合物中的不饱和双键氧化成环氧化合物。
选择性环氧化酶-2抑制剂
选择性环氧化酶-2抑制剂【摘要】目的介绍选择性环氧化酶-2[COX -2]抑制剂的相关专业知识。
方法通过查阅国内外有关选择性环氧化酶-2抑制剂的文献资料。
结果与结论非甾体类抗炎药是世界上应用最广泛的镇痛抗炎类药物，广大医师应充分了解选择性COX -2抑制剂的特性，更好的发挥此类药物的作用。
【关键词】COX -2抑制剂安全性心血管风险非甾体类抗炎药是世界上应用最广泛的镇痛抗炎类药物，在镇痛抗炎的同时，绝大多数非甾体抗炎药常见的不良反应是对消化系统的损害。
研究表明，非甾体类抗炎药的镇痛和抗炎作用主要由于环氧化酶-2受抑制的结果，而环氧化酶-1则与胃肠道副作用有关，选择性COX -2抑制剂正是基于这一理论发明的。
1COX -2抑制剂的作用机制20世纪80年代证明人体内的环氧化酶COX有两个同工酶，构建型COX -1和诱导型COX -2，COX -1的酶促产物参与保护胃黏膜血小板功能，肾血流量调节和电解质平衡等生理功能。
COX -2则促进介导疼痛和炎症过程的前列腺素的形成。
选择性COX -2抑制剂选择性抑制COX -2，而对COX -1的作用较弱，因此，在产生抗炎镇痛作用的同时，对胃肠道和肾脏的不良反应却有了明显下降。
[1]2cox-2抑制剂的临床应用2.1抗炎镇痛作用与传统非甾体类抗炎药一样可以改善风湿性疾病症状，并可缓解疼痛。
2.2心血管系统作用通过抑制血管炎症，促进内皮细胞功能。
增强冠脉斑块的稳定性。
2.3抗肿瘤作用[2] 最新研究表明COX -2抑制剂具有抑制血管增生和诱导细胞凋亡作用，单独或联合化疗放疗应用对乳腺癌胃癌等恶性肿瘤有预防和治疗作用。
2.4脑保护作用最新研究表明第三代COX -2抑制剂DFU具有脑保护作用。
3COX -2抑制剂的安全性不良反应主要是胃肠道损害，急性肾衰和心血管风险有关。
选择性COX -2抑制剂与传统非甾体类抗炎药的差别主要是降低胃肠道损伤。
研究表明传统非甾体类抗炎药与COX -2抑制剂有促使心血管事件发生的可能。
环氧化酶-2与肺部疾病的关系
环氧化酶-2与肺部疾病的关系摘要】环氧化酶-2（COX-2）为一种诱导酶，在正常组织中很少表达，当细胞受到炎症等刺激时可高表达。
近年来研究表明，COX-2与肺部疾病的发展密切相关。
本文就COX-2与肺部疾病的研究进展作一综述。
【关键词】环氧化酶-2 肺部疾病环氧化酶（COX）又称前列腺素合成酶，是催化花生四烯酸(AA）合成前列腺素(PGs)和血栓素(ATXA2)的限速酶。
COX具有环氧化酶和过氧化物酶双重功能，目前发现COX至少有2种亚型，即COX-1和COX-2。
前者为结构型，主要存在于血管、胃、肾等组织中，参与血管舒缩、血小板聚集、胃粘膜血流、胃黏液分泌及肾功能等的调节，其功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管的阻力和调节肾血流量分布。
COX-1的表达基本是恒定的，在大多数组织和细胞中表达，被称为“管家基因”。
后者为诱导型，静息时不表达，当细胞受到炎症信号、某些细胞因子、促癌剂等刺激后表达增加，因此被称为“炎症诱导基因”。
1 COX-2的结构特点及表达人类COX-2基因位于第1号染色体，长度约为8.3Kb，由10个外显子和9个内含子组成，其mRNA产物约为4.5 Kb。
环氧化酶-2在其转录起始位点上游5'侧翼区有一个30bp保守的TATA盒。
其中5'端有许多调节转录的位点如CCAAT/EBP、IL-6反应元件、cAMP反应元件、AP2、SP1、NF-KB、糖皮质激素等反应元件。
正常情况下,绝大部分组织细胞不表达COX-2基因,只有在细胞内外受到广泛刺激后经过一系列信号转导并作用到5'端转录，诱导COX-2表达，目前证实上述反应元件是影响COX-2转录调控的重要因素，调控COX-2的主要表达[1]。
2 COX-1与COX-2的区别COX的两种异构酶在分布、结构、调控、功能等方面均有差别,COX-1分布于内质网，COX-2分布于核膜，因此COX-2产生的前列素产物优要进入核内，调节其转录。
Keap1、Nrf2和HO－1在大鼠应激性胃溃疡中的表达
Keap1、Nrf2和HO－1在大鼠应激性胃溃疡中的表达黄攀;陆瀚文;周峥嵘;宋广浩;安珂;张庄;丁威【摘要】探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白－1（Kelch－like epichlorohydrin－associated protein 1，Keap1）／核因子E2相关因子2（nuclear factor－E2－related factor 2，Nrf2）／血红素氧合酶－1（heme oxygenase 1，HO－1）信号通路在应激性胃溃疡发生及发展中的作用。
建立大鼠水浸束缚应激性（water immersion and restraint stress，WRS ）胃溃疡模型，按Guth标准计算溃疡指数（ulcer index，UI），应用免疫组织化学检测Keap1、Nrf2、HO－1在胃黏膜组织中的定位和表达情况。
结果表明，WRS处理7 h后，大鼠胃黏膜出现明显的点线状出血；WRS处理前后，Keap1、Nrf2、HO－1蛋白均主要定位于大鼠胃底腺细胞胞质中，其中Nrf2在溃疡周围胃底腺细胞胞核中也有表达；WRS处理7 h后，Keap1表达量显著降低（P＜0．05），于7 d后恢复至正常水平，而HO－1表达量显著升高（P＜0．05），于3 d后恢复至正常水平；Nrf2恢复3 d 后表达量显著升高（P＜0．05），随后出现下降。
WRS处理后，Keap1、Nrf2、HO－1在大鼠胃黏膜中的定位和表达量均出现变化，提示Keap1／Nrf2／HO－1信号通路可能在应激性胃溃疡的发生及发展过程中发挥了一定抗应激作用。
【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2016(044)012【总页数】3页(P280-282)【关键词】应激性胃溃疡;Keap-1;Nrf2;HO-1;大鼠【作者】黄攀;陆瀚文;周峥嵘;宋广浩;安珂;张庄;丁威【作者单位】江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏大学医学院，江苏镇江212013;江苏农林职业技术学院，江苏句容212400【正文语种】中文【中图分类】S858.91应激性胃溃疡是动物受到环境应激后，交感神经系统（SNS）兴奋性升高，血管收缩，引起胃黏膜缺血、缺氧、抵抗力下降，从而产生的急性出血性损伤［1］。
大鼠谷胱甘肽过氧化物酶正常范围
大鼠谷胱甘肽过氧化物酶正常范围大鼠谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）是一种重要的抗氧化酶，具有保护细胞免受氧化应激损伤的重要功能。
它能够将有害的过氧化物质转化为无害的代谢产物，从而维护细胞内氧化还原平衡。
该酶的正常范围可作为综合评估大鼠健康状况的重要指标。
一般来说，正常大鼠的GPx活性应在一定的范围内。
实验研究表明，GPx活性与大鼠的年龄、性别、营养状况等因素相关。
首先，GPx活性随着大鼠的年龄增长而发生变化。
在幼年阶段，大鼠体内GPx活性较低。
随着成长，GPx活性逐渐增加，达到成年期的稳定水平。
然而，在老年阶段，GPx活性又会逐渐降低。
因此，根据大鼠的年龄，我们可以了解其GPx活性是否处于正常范围内。
其次，性别也会对大鼠GPx活性产生一定的影响。
一项研究发现，雄性大鼠的GPx活性明显高于雌性大鼠。
这可能与雄性大鼠对氧化应激的抵抗能力更强有关。
因此，在评估大鼠GPx活性时，应考虑到性别差异。
此外，营养状况也会对大鼠GPx活性产生影响。
一项研究发现，摄入富含谷胱甘肽的食物可以提高大鼠体内GPx活性。
这表明，适当的营养摄入对维持GPx活性的正常范围非常重要。
总结起来，大鼠GPx活性的正常范围受到多种因素的影响，包括年龄、性别以及营养状况等。
我们可以通过测量大鼠的GPx活性来评估其细胞内氧化还原平衡情况。
如果GPx活性超出正常范围，则可能存在氧化应激损伤等问题。
因此，掌握大鼠GPx活性的正常范围对于研究大鼠健康状况具有指导意义。
在实际应用中，我们可以通过特定的实验方法检测大鼠GPx活性，并结合其他指标综合评估大鼠的氧化应激状况。
这为大鼠健康管理和疾病研究提供了重要的参考依据。
环氧化酶的作用(一)
环氧化酶的作用(一)
环氧化酶的作用
简介
•环氧化酶是一类重要的酶类
•环氧化酶介导了多种化学反应
•研究环氧化酶的作用有助于解析生物体内的代谢过程
物理作用
•环氧化酶能够催化底物的氧化反应
•通过将底物的双键上的氧原子转移到其它位置，形成环氧化物生物过程
•环氧化酶参与多种生物过程
•在细胞中，环氧化酶常参与代谢物的转化和调节
•环氧化酶还能影响生物体内的信号传递
应用领域
•环氧化酶可应用于工业领域的催化反应中
•可以将环氧化酶用于研发新型药物
•还能用于分离和净化废水中的有机污染物
研究进展
•近年来，环氧化酶的研究取得了重要的突破
•通过结构生物学手段揭示了环氧化酶的催化机制
•进一步研究有助于设计和合成具有特定功能的环氧化酶
结论
•环氧化酶是一类重要的酶类，具有多种生物和工业应用价值•对环氧化酶的深入研究有助于揭示生物体内的代谢过程
•进一步研究和应用环氧化酶有助于推动生物技术和工业化进程的发展。
漆酶结构与催化机理
漆酶结构与催化机理万云洋杜予民#（中国石油大学（北京）资源与信息学院北京 102249 #武汉大学资源与环境科学学院武汉 430079）摘要本文阐述了漆酶的研究进展，对漆酶研究中的铜离子活性中心、三维结构和催化机理研究作重点阐述。
关键词漆酶金属酶三维结构三核中心催化机理Structure and Catalytic Mechanism of LaccasesWan Yunyang, Du Yumin#(Faculty of Natural Resources and Information Technology, China University of Petroleum, Beijing, 102249; # College of Resource and EnvironmentalSciences, Wuhan University, Wuhan 430079)Abstract The progress on the research of laccases is reviewed the active centre of copper ions, the three-dimensional structure of protein, and catalytic mechanism are emphasized in this paper.Key words Rhus laccase, Metal enzyme, Three dimensional structure, Trinuclear centre, Catalytic mechanism漆酶(EC1.10.3.2)，(对)-二酚：双氧氧化还原酶，是多铜氧化酶中的一种含铜的糖蛋白氧化酶(表1)，按照来源大致可以分为植物漆酶、微生物(包括真菌和细菌)漆酶和动物漆酶[1]。
从首次在生漆液成份中发现这种酶成份(1883年)、漆酶(laccase)概念的提出(1898年)与沿用、真菌漆酶的发现、含铜蛋白质和铜活性中心地位的确立，到第一种工业微生物漆酶制剂的应用(1997年)[2]，及对漆酶分离纯化[3,4]、晶体结构[5,6]等的研究，已有一百多年的历史，并一直经久不衰，几乎涉及到化学、分析、食品、医疗、生物和环保等各个领域，同时预计它在新兴的蛋白质组学对糖蛋白的研究中也会有一席之地。
环氧化酶
环氧化酶环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)又称前列腺素内氧化酶还原酶,是一种双功能酶,具有环氧化酶和过氧化氢酶活性,是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶。
目前发现环氧化酶有两种COX-1和COX-2同工酶，前者为结构型，主要存在于血管、胃、肾等组织中，参与血管舒缩、血小板聚集、胃粘膜血流、胃黏液分泌及肾功能等的调节，其功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管的阻力和调节肾血流量分布有。
后者为诱导型，各种损伤性化学、物理和生物因子激活磷脂酶A2水解细胞膜磷脂，生成花生四烯酸，后者经COX-2催化加氧生成前列腺素。
COX-2的生物学性质COX是花生四烯酸代谢过程中前列腺素（prostaglandins，PGs）合成的限速酶。
传统观念认为，COX 有两种结构亚型，即结构型COX-1和诱导型COX-2。
近期，COX的第三种同工酶——COX-3，在神经系统组织内被发现。
COX-1主要存在于正常的组织细胞中，催化产生维持正常生理功能的PGs。
COX-2是一种膜结合蛋白。
研究证实，在巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和单核细胞中COX-2均可被诱导表达。
生理状态下绝大部分组织细胞不表达COX-2；而在炎症、肿瘤等病理状态下受炎性刺激物、损伤、有丝分裂原和致癌物质等促炎介质诱导后，呈表达增高趋势，参与多种病理生理过程，具体是细胞膜磷脂通过磷脂酶A2途径被水解释放出花生四烯酸，在COX-2的催化下，合成前列腺素E2（PGE2），最后产生系列炎症介质，并通过瀑布式级联反应参与机体各生理、病理过程。
人类COX-2基因位于1号染色体q 25.2～q 25.3，长8.3 kb，含有10个外显子和9个内含子，编码604个氨基酸，含有17个氨基酸残基的信号肽。
COX-2与糖尿病Pickup研究发现，炎症细胞因子、氧化应激等在2型糖尿病中具有重要作用，首次将2型糖尿病和亚临床炎症联系起来。
COX-2作为重要的炎症介质，参与糖尿病的发病机制以通过诱导合成PGs类衍生物来实现。
cox-2
环氧化酶-2人类COX- 2 基因定位于1 号染色体的1q25.2—q25.3, 全长8.3 kb，由10 个外显子和9个内含子构成，编码604 个氨基酸残基组成的多肽。
在5′端转录起始点上游有一些转录调控序列，包括2个核转录因子- κB （nuclear factor- κB，NF-κB）位点、2个激活蛋白质-（2 activator portein- 2，AP- 2）位点、TATA box 序列、cAMP 反应元件（cAMPresponsive element, CRE）、CCAAT 增强子结合蛋白位点（CCAAT/enhancer binding protein, C/EBP）、Ets- 1转录因子位点等。
COX- 2 与COX- 1具有61%的同源性，但却表现出明显的功能差异。
COX- 2主要分布于细胞核膜上，其表达调控主要集中在转录水平。
诱导其表达的因素包括癌基因、白细胞介素- 1、缺氧、紫外线、转化生长因子和肿瘤坏死因子- α （tumor necrosis factor- α,TNF- α）等，而地塞米松、抗氧化剂、抑癌蛋白P53 则可抑制其表达。
COX- 2 的致癌机制，现在比较认同的观点是认为COX- 2 可通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进血管形成、抑制免疫功能等机制，参与肿瘤的发生和发展。
其中主要是促进细胞增殖和抑制凋亡、促进血管形成。
2.1 COX- 2 通过促进细胞增殖和抑制细胞凋亡参与肿瘤的发生和发展COX- 2 的催化产物前列腺素E2 （prostaglandinE2，PGE2）和其他前列腺素可诱导Bcl- 2 原癌基因的表达，同时下调E- cadherin 和转化生长因子- D受体表达并提高细胞内Cyclin AMP 浓度从而抑制细胞凋亡，促进肿瘤发生。
研究表明，PGE2 的释放在介导生长因子和癌基因的生长促进起决定作用。
研究发现，COX- 2 特异抑制剂和非特异抑制剂在多种肿瘤细胞包括胰腺癌、胶质瘤、结肠癌等均可引起凋亡。
环加氧酶1和2作用机制
环加氧酶1和2作用机制环加氧酶1和2（Cyclooxygenase-1和2，简称COX-1和COX-2）是两种重要的酶，它们在炎症和疼痛的调节、细胞增殖和凋亡等生理和病理过程中起着关键作用。
本文将生动、全面、有指导意义地介绍COX-1和COX-2的作用机制。
首先，我们来介绍一下COX-1和COX-2的基本特点。
COX-1是一种常见的酶，它广泛分布于几乎所有的组织中，特别是在胃肠道和肾脏等组织中表达丰富。
COX-2则主要在炎症过程中被诱导表达，其表达量受到外界刺激和细胞内信号传导通路的调控。
COX-1和COX-2主要区别在于它们的调控方式和功能。
COX-1是一种结构相对稳定的酶，其表达量相对恒定。
它主要参与到生理过程中的调节，如维持胃肠道黏膜的完整性、肾功能稳定等。
COX-1通过将花生四烯酸（AA）转化为前列腺素H2（PGH2），进而产生其他各种类型的前列腺素，如PGE2、PGD2等。
这些前列腺素的产生参与到炎症、血小板聚集、胃酸分泌调节等生理过程。
同时，COX-1也参与到血管内皮细胞的生理功能调节。
COX-2的表达量在炎症、损伤和肿瘤等条件下被高度诱导，它主要参与到炎症反应和疼痛调节过程中。
在外界刺激和细胞内信号传导通路的作用下，细胞内的转录因子如NF-κB和AP-1会结合到COX-2基因的启动子区域，从而促使COX-2基因的转录活性增强，进而产生更多的COX-2酶。
COX-2同样将AA转化为PGH2，但在产生PGH2的同时，还会产生一些其他的炎症介质，如白三烯B4（LTB4）等。
这些炎症介质会进一步导致炎症过程中的血管扩张、细胞黏附分子表达增加等炎症反应。
了解了COX-1和COX-2的基本特点后，下面我们来介绍它们的作用机制。
COX-1和COX-2的作用机制主要包括底物结合、催化和产物释放三个关键步骤。
首先是底物结合。
COX-1和COX-2都是具有底物选择性的酶，它们只能选择性地识别和结合AA作为底物。
2015年《ESC-ERS肺动脉高压诊断与治疗指南》解读
表 6 动脉性肺动脉高压的危险分层
预后决定因素 (1 年死亡率 )
低危 (<5%)
中危 (5%~10%)
右心功能障碍
治疗基础疾病
核素肺通气灌注扫 描有无灌注缺损？ 转诊到肺动脉高压中心
脉动脉高压诊治中心
是
否
考虑 CTEPH：行 CT 肺血管造 影 / 右心导管和肺动脉造影
右心导管术：mPAP ≥ 25 mmHg， PAWP ≤ 15 mmHg，PVR>3 WU
CTD 药物素物
HIV
是 PAH 特异性检查
3 肺部疾病和（或 ）低氧所致的肺动脉高压
4 慢性血栓栓塞性肺动脉高压和其他肺动 脉堵塞性疾病
5 原因不明和（或 ）多种因素所致的肺动 脉高压
包括的具体疾病 特发性；可遗传性（真核生物翻译起始因子 2α 激酶 4、其他 ）；药物和毒物所致；相关性（结缔组织病、人
类免疫缺陷病毒感染 ） 特发性肺动脉高压；可遗传性肺动脉高压（骨成型蛋白Ⅱ型受体、其他 ）；药物和毒物所致的肺动脉高压；
图 1 肺动脉高压的诊断策略
中国循环杂志 2015 年 11 月 第 30 卷 Chinese Circulation Journal，November，2015，Vol. 30 Supplment
31
表 3 支持肺动脉高压诊断的超声心动图表现
心室 右心室与左心室
基底部直径比 值大于 1.0
室间隔反向运动 （左心室离心 指数大于 1.1）
30
中国循环杂志 2015 年 11 月 第 30 卷 Chinese Circulation Journal，November，2015，Vol. 30 Supplment
表 2 肺动脉高压临床分类
交替氧化酶名词解释
交替氧化酶名词解释
交替氧化酶(alternative oxidase，AO)也称抗氰氧化酶(cyanide resistant oxidase)。
它广泛存在于高等植物及部分真菌和藻类中，是植物体线粒体内膜上的线粒体呼吸链中抗氰呼吸途径(cyanide-resistant respiration pathway)的末端氧化酶。
其作用是将UQH2的电子经FP传给O2生成H2O。
其P/O为1。
该酶不为氰化物等所抑制，易被所水杨基羟肟酸（水杨羟肟酸）抑制。
交替氧化酶的分子量为27×10^3～37×10^3，是一种双铁羧基蛋白(di-iron carboxylate protein)，Fe2+是其活性中心的金属。
它不仅具有其它双铁羧基蛋白共有的结构特点以及去除分子氧的功能，更重要的是它还可以通过改变自身结构等方式来主动调节抗氰呼吸途径的运行程度，进而调节细胞多方面的代谢和功能，以适应环境条件的改变，增强植物适应各种逆境的能力，调节植物生长速率，并与细胞凋亡和光合作用相关。
环氧化酶 (cox-i) 和细胞色素c还原酶
环氧化酶 (cox-i) 和细胞色素c还原酶下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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环氧化物水解酶
微生物环氧化物水解酶引言环氧化物水解酶广泛分布于动物界（包括人类），在肝脏中，环氧化物水解酶主要分布在内质网网上，最近的研究表明，它也分布于肝细胞的核膜、胞浆中，而在环氧化物酶体、溶酶体和线粒体中缺失。
环氧化物水解酶以多种同工酶形式存在，酶的单体相对分子量为48k-54k之间，没有血红蛋白和黄素做辅基。
环氧化物水解酶也可催化内源性和外源性的环氧化物，其中对内源性环氧化物的速率远大于外源性的环氧化物。
因为环氧化物水解酶在致癌物的形成中扮演一定角色，所以被作为肝癌的早期标志二受到广泛关注！环氧化物(epoxide)在多种生物体的代谢过程中广泛存在，又在多种生物活性物质的合成中被广泛应用，它们是一类很有价值的手性有机合成砌块和中间体。
环氧化物具有环氧乙烷三元环，该环中各原子的轨道由于不能在正面充分重叠，而是以弯曲键连接，因而具有较强的张力，其碳氧键具有很强的亲电性，故其能与各种亲核试剂反应，通过选择性开环及官能团转换，就可以很方便地合成很多种光学活性物质，而且它们的反应活性高，其开环反应中通常具有极好的位置选择性和立体选择性。
环氧化物水解酶(epoxide hydrolase)又称环氧化物水合酶(epoxide hydratase)或环氧化物水化酶(epoxide hydrolase)，能立体选择性地将水分子加到环氧底物上生成相应的手性1,2-二醇。
应用此酶，能够得到具有光学活性的剩余环氧化物和相应的二醇化合物。
该酶在生物体内的外源性化合物代谢中起着重要的作用。
因此，环氧化物水解酶在生物体内，尤其是微生物体内，是普遍存在的。
一、选育对细菌EH的研究最早是在1967年，Schroepfer等人在Pseudomonad(NRRL.2994)中发现了EH，并利用该酶成功催化水解了环氧油酸。
此后奥地利的K.Faber研究小组开辟了对微生物环氧化物的研究。
细菌环氧化物水解酶在自然界中普遍存在，分组成型和诱导型两大类。
第三节 第Ⅰ相的生物转化
第三章化学结构与药物代谢(Chemical Structure and Metabolism) 第三节第Ⅰ相得生物转化(PhaseⅠ Biotransformation)药物得第Ⅰ相生物转化就是指体内各种酶对药物分子进行得官能团化反应,主要发生在药物分子得官能团上,或分子结构中活性较高、位阻较小得部位,包括引入新得官能团及改变原有得官能团。
本节讲授得主要内容包括氧化反应、还原反应、脱卤素反应与水解反应。
一、氧化反应药物代谢中得氧化反应包括失去电子、氧化反应、脱氢反应等,就是在CYP—450酶系、单加氧酶、过氧化酶等酶得催化下进行得反应。
在药物代谢中得氧化反应中,我们主要介绍芳环及碳—碳不饱与键得氧化、饱与碳原子得氧化、含氮化合物得氧化、含氧化合物得氧化、含硫化合物得氧化、醇与醛得氧化六个方面得内容。
(一)芳环及碳—碳不饱与键得氧化1.含芳环药物氧化代谢得特点①含芳环药物得氧化代谢主要就是在CYP—450酶系催化下进行得。
芳香化合物在酶得催化下首先被氧化成环氧化合物,由于环氧化合物比较活泼,在质子得催化下会发生重排生成酚,或被环氧化物酶水解生成二羟基化合物。
②生成得环氧化合物还会在谷胱甘肽S—转移酶得作用下与谷胱甘肽生成硫醚;促进代谢产物得排泄。
环氧化合物若与体内生物大分子如DNA、RNA中得亲核基团反应生成共价键得结合物,就会使生物大分子失去活性而产生毒性。
③含芳环药物得氧化代谢以生成酚得代谢产物为主,一般遵照芳环亲电取代反应得原理,供电子取代基能使反应容易进行,生成酚羟基得位置在取代基得对位或邻位;吸电子取代基则削弱反应得进行程度,生成酚羟基得位置在取代基得间位。
如芳环上含有强吸电子取代基,如可乐定(Clonidine,3—4)与丙磺舒(Probenecid,3—5),则不发生芳环得氧化代谢。
与一般芳环得取代反应一样,芳环得氧化代谢部位也受到立体位阻得影响,通常发生在立体位阻较小得部位。
如苯妥英(Phenytoin,3—1)与保泰松(Phenylbutazone,3—2)在体内经代谢后生成羟基化合物。
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·论著·2012年7月第9卷第21期门脉高压（PHT）是肝硬化导致的最常见也是最复杂的症状之一，同时也是肝硬化导致死亡的最主要原因。
许多临床和实验室数据表明酒精、非甾体类抗炎药物、缺血再灌注、胃黏膜损伤与修复都增加了胃黏膜损伤的敏感性[1-2]。
现在人们已经逐渐接受了PHT导致局部血液量增加、外周血液循环抵抗降低而导致心输出量增加，因而被称之为高动力循环的观点[3-5]。
胃黏膜的机能障碍被认为与PHT有关，而这些机能障碍被称为门脉高压性胃病。
然而具体的失代偿机理现在仍不清楚。
1材料与方法1.1材料1.1.1试剂兔抗鼠COX-1单克隆抗体；兔抗鼠COX-2单克隆抗体；兔抗鼠Fas-L单克隆抗体；山羊抗小鼠LgG；5%BSA封闭液；SABC。
以上试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.1.2动物及分组雄性SD大鼠20只，体重220~250g（山西医科大学实验动物中心提供）。
随机分为两组。
实验组：半结扎门静脉及左肾静脉组；对照组：单纯暴露游离门静脉组。
1.2方法1.2.1建立门静脉高压大鼠模型大鼠于术前12h禁食，术前8h禁饮。
3%戊巴比妥钠针腹腔注射麻醉（0.1mL/100g BW）。
实验组大鼠开腹后游离暴露门静脉主干后用7号钝性针头平行放置于门静脉干，用3-0丝线结扎后将钝性针头抽出，待门静脉结扎处部分充盈后轻轻结扎。
然后暴露左肾上腺静脉然后结扎。
1.2.2大鼠门静脉压力测量于术后两周将所有大鼠麻醉后开腹，实验组大鼠用20号套管针穿刺肠系膜上静脉近端，退出针芯并将套管送入门静脉结扎远端，该处测得压力作为门静脉压；对照组则将套管针直接插入门静脉处测压，另一端环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义郭志坤郭建昇苗晋阳山西医科大学第一医院普通外科，山西太原030001[摘要]目的利用门脉高压大鼠模型观察环氧化酶-1（cyclooxygenase-1，COX-1）、环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、Fas配体（Fas ligand，Fas-L）在其胃组织的表达情况并探讨其在门脉高压性胃病中的意义。
方法雄性SD大鼠20只随机分为实验组和对照组，实验组采用门静脉半结扎法制作门静脉高压大鼠模型并于模型制作成功两周后测量门静脉压力；对照组为假手术组，单纯游离门静脉后缝合切口并于两周后测门静脉压力；测门静脉压后分别取实验组与对照组大鼠胃组织，运用免疫组织化学方法观察COX-1、COX-2、Fas-L的表达情况。
结果实验组大鼠门静脉压力明显大于对照组大鼠门静脉压力（P＜0.05）；实验组大鼠胃组织中COX-1表达明显低于对照组（P＜0.05）；COX-2的表达二者没有明显差别；Fas-L的表达明显增高（P＜0.05）。
结论COX-1一定程度上参与了门脉高压性胃疾病的形成，而COX-2可能并没有参与这一过程的实现。
[关键词]环氧化酶-1；环氧化酶-2；Fas配体；门脉高压性胃病[中图分类号]R573[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2012）07（c）-0016-03Expression and significant of cyclooxygenase-1,cyclooxygenase-2,Fas ligand in the gastric tissue of portal hypertensive ratsGUO Zhikun GUO Jiansheng MIAO JinyangDepartment of General Surgery,the First Hospital of Shanxi Medical University,Shanxi Province,Taiyuan030001,China [Abstract]Objective To observe the expression of cyclooxgenase-1(COX-1),cyclooxgenase-2(COX-2)and Fas ligand (Fas-L)in the gastric tissue of portal hypertensive rats and investigate the significance in portal hypertensive gastropathy on the model of portal hypertensive rats.Methods Male SD rats were randomly divided into a experimental group and a contral group.The SD rats in experimental group were performed by partial portal vein ligation plus the ligation of the left adrenal vein and the portal vein pressure was measured in two weeks.The contral group was sham-operated,the same op-eration was performed with the exception that no ligature was placed after isolating the portal vein.The portal vein pressure was measured in two weeks.The expression of COX-1,COX-2and Fas-L in the gastric tissue were observed after the portal vein measured by immunohistochemistry.Results The portal vein pressure of rats in the experimental group were significantly higher than the rats in the control group(P＜0.05).The expression of COX-1in the gatric tissue of portal hy-pertensive rats in experimental group was down regulated(P＜0.05),however the expression of COX-2in the gastric tissue these two groups were not significantly different between the experimental group,and the control group and the expression of Fas-L was upregulated in the experimental group(P＜0.05).Conclusion The data indicate that the COX-1certain ex-tent in the portal hypertensive gastric disease formation,however COX-2is probably not involved in this process.[Key words]Cyclooxgenase-1;Cyclooxgenase-2;Fas ligand;Portal hypertensive gastropathy[作者简介]郭志坤（1984.8-），男，2009级在读硕士，主要从事胃肠疾病方面的研究。
[通讯作者]郭建昇（1961.4-），男，教授，主要从事胃肠疾病方面的研究。
接压力传感器（型号TSD104A），传感器将收集的压力信号转化为数字信号后输入计算机，采用MP2100型多道生理记录仪测定门静脉压力。
1.2.3大鼠胃组织中COX-1、COX-2、Fas-L的表达门静脉半结扎两周后处死大鼠，收集胃组织，甲醛固定，脱水，石蜡包埋，切片。
用免疫组织化学的方法检测大鼠胃组织中COX-1、COX-2、Fas-L的表达情况。
应用MIAS-2000型医学图像彩色分析系统测定胃组织中COX-1、COX-2、Fas-L的平均面积密度值，每张切片随机选取5个视野，取其均值转化为阳性单位。
1.3统计学方法所有数据均采用SPSS13.0统计软件处理。
计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料采用百分率表示，组间对比采用χ2检验。
以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1门静脉压力的变化门静脉半结扎两周后，实验组大鼠门静脉的压力为（28.25±2.89）cm H2O（1cm H2O=0.098kPa），对照组大鼠门静脉压力为（13.07±2.74）cm H2O，实验组压力明显高于对照组（P＜0.05）。
2.2胃组织中COX-1、COX-2、Fas-L的表达胃组织中COX-1阳性表达于黏膜层，可见黄色产物，阳性细胞为胞浆内可见棕黄色颗粒，实验组COX-1表达强度较对照组明显减弱。
胃组织中COX-2阳性表达于黏膜层，可见黄色产物，阳性细胞为胞浆内可见棕黄色颗粒，实验组COX-2表达强度较对照组无明显差别。
胃组织中Fas-L阳性表达于黏膜层，可见棕黄色产物，阳性细胞为胞浆内可见棕黄色颗粒，实验组Fas-L表达强度较对照组明显增强。
见表1。
表1胃组织中COX-1、COX-2、Fas-L的表达（x±s）注：对照组比较，*P＜0.053讨论目前在认识PHT的过程中，前列腺素类（PG s）在其中所起的作用仍比较有争议。
在人体试验中胃黏膜中的前列腺素水平显示出增加，降低，或并无差异，但动物试验中胃黏膜中前列腺素水平显示降低[6-8]。
但无论是在动物模型还是人体试验中运用前列腺素抑制剂后，胃黏膜均呈现不同程度的损害。
环氧合酶（COX）是花生四烯酸合成前列腺素和血栓素中的关键酶。
目前至少存在3种环氧化酶。
COX-1主要存在于胃肠道以及大多数组织中，COX-2更容易在炎症部位表达，而COX-3则是新一代抗炎镇痛药物的重要代表[9-10]。
COX-1和COX-2在不同组织细胞中的作用有所不同，而对同一细胞在不同条件下其作用也不相同。
COX-1与COX-2是否参与了门脉高压性胃病形成过程以及其形成的机理目前并不清楚。
通过本试验笔者证明了两步结扎法可以明显的使大鼠门静脉压力增高，且可诱导内脏血管阻塞和肠系膜静脉扩张。