菌落总数测定
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数计数是一种常见且重要的实验方法，用于评估菌落的数量和密度。
菌落总数计数方法有多种，常见的包括平板计数法、薄层计数法、过滤膜计数法等。
下面将详细介绍这几种方法的原理和步骤。
平板计数法是最常见的菌落总数计数方法之一。
它的原理是将待测菌液均匀涂布在含有固体营养培养基的平板上，通过菌落的生长扩散形成可见的单个菌落，再通过对菌落进行计数并乘以稀释倍数，最后得到待测菌液的菌落总数。
具体步骤如下：1. 准备固体培养基。
根据所要检测菌落的要求，选择适当的培养基并准备好。
固体培养基一般含有琼脂或明胶等物质，可以提供营养物质和支持菌落的生长。
2. 制备合适浓度的菌液。
将待测菌种培养在含有适宜营养物质的液体培养基中，利用培养箱或摇床进行恒温、恒湿的培养，待菌液呈现合适浓度时即可使用。
3. 稀释菌液。
根据待测菌液的预估浓度，将适量的菌液和无菌生理盐水按一定比例进行稀释，以获得合适浓度的菌液。
4. 涂布菌落。
取一定数量的稀释后的菌液，利用灌注器或鱼鳞划线法将菌液均匀涂布在固体培养基的平板上。
为了保证菌液的均匀分布，可以采取旋转、摇动等方法。
5. 培养菌落。
将涂布好的平板置于恒温、恒湿的培养箱中进行培养。
根据菌种的不同，一般在30-37的温度下培养24-48小时。
6. 计数菌落。
在培养好的平板上，通过肉眼或借助显微镜仔细观察菌落的形态、大小、颜色等特征，并使用菌落计数器或放大镜进行计数。
根据菌落的密度和分布情况，可以选择在整个平板上计数，或者在特定区域计数后进行推算。
7. 乘以稀释倍数。
由于菌液在进行稀释时常用不同倍数的生理盐水进行稀释，所以在计算菌落总数时需要将计数结果乘以稀释倍数，以获得准确的结果。
薄层计数法是另一种常见的菌落总数计数方法。
它的原理是将含有待测菌液的液体培养基均匀地倒入培养基皿中，使其能够覆盖整个底面。
待液体凝固后，菌落会在培养基表面生长，并且可以通过视觉或显微镜观察和计数菌落。
食品微生物检验技术GB4789.2-2010 菌落总数测定
2. 培养 (1) 待琼脂凝固后，将平板翻转，36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h。水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h。 (2) 如果样品中可能含有在琼脂培养基表 面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂 表面覆盖一薄层 琼脂培养基（约 4 mL）， 凝固后翻转平板，按 36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h（水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h）条件进行培养。
GB 4789.2-2010 食品安全国家标 准 食品微生物学检验 菌落总数测定
一、设备和材料 二、培养基和试剂 三、检验程序 四、操作步骤 五、结果与报告
一、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和 材料如下： (1) 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。 (2) 冰箱：2 ℃～5 ℃。 (3) 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。 (4) 天平：感量为 0.1 g。 (5) 均质器。 (6) 振荡器。 (7) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。 (8) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL。 (9) 无菌培养皿：直径 90 mm。 (10) pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。 (11) 放大镜或/和菌落计数器。
三、 检验程序
检
样
25g(ml)样品+225ml稀释液，均质
10倍系列稀释
选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液， 各取1ml分别加入无菌培养皿内 每个皿中加入15ml~20ml平板计 数琼脂培养基，混匀 培养 计数各平板菌落数 计算菌落总数 报告
四、操作步骤
1. 样品的稀释
(1) 固体和半固体样品：称取 25 g 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲 液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min~2min，或放入盛有 225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击 式均 质器拍打 1 min～2 min，制成 1:10 的样品匀液。 (2) 液体样品：以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓 冲液或生理盐水的无菌锥形瓶 （瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠） 中，充分混匀，制成 1:10 的样品匀液。 (3) 用 1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1 mL，沿管 壁缓慢注于盛有 9 mL 稀释液的 无菌试管中（注意吸管或吸头尖 端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1 支无菌吸管反复吹打 使其混 合均匀，制成 1:100 的样品匀液。
菌落总数测定
菌落总数测定菌落总数测定一、设备和材料250ML 锥形瓶3个 100ML烧杯1个250ML 量筒1个 1000ML烧杯1个15*150mm试管3个 1ML刻度吸管4个培养皿7个玻璃棒1个洗耳球剪刀1把药匙2个均质器天平（感量0.1g ）电炉酒精灯二、实验准备1、平板计数琼脂的配制用天平称取11.75g 培养基于锥形瓶中加入500ML 蒸馏水加热煮沸至完全溶解高温灭菌备用2、生理盐水取4.25g 氯化钠于大烧杯中加入500ML 蒸馏水溶解取225ML 生理盐水于锥形瓶中分别取9ML 生理盐水于3只小试管中将分装好的生理盐水进行高温灭菌3、灭菌：将均质杯、100ML 烧杯、刻度吸管、剪刀、洗耳球高温灭菌备用三、取样在提交的产品中随机抽取三箱，从每箱中随机抽取未打开包装的产品1袋~3袋，抽取不低于250g 的样品作为微生物指标检验试样。
四、检验程序五、操作步骤1、称取25g 样品，放人盛有225m 生理盐水的无菌均质杯内，800or/min-10 000r/min 均质1 min-2 min ，制成1:10 的样品匀液。
2、用1ml 无菌吸管吸取1:10 样品匀液1ml ，沿管壁缓缓注人9ml 生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管，使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。
3、换一只新的1ml 无菌吸管吸取1:100样品匀液1ml ，沿管壁缓缓注人9ml 生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管，使其混合均匀，制成1:1000 的样品匀液。
4、将三个连续稀释梯度的样品原液在进行10倍递增稀释时，吸取1ml 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
同时，分别吸取1 ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照。
5、及时将15-20 ml冷却至46℃的平析计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
6、待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48±2小时。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数是指在特定条件下，通过培养基培养和统计法，对食品中细菌和真菌等微生物菌落数的测定。
食品中菌落总数是评价食品卫生质量的重要指标之一，可以反映食品是否受到污染、保存条件是否良好等情况。
对食品中菌落总数进行准确测定和不确定度分析，对于食品卫生和质量控制至关重要。
二、食品中菌落总数的测定方法食品中菌落总数的测定方法通常采用菲尔氏杯平板法和薄膜法。
菲尔氏杯平板法是将食品样品稀释后均匀铺在富含寒天的琼脂培养基上，培养并统计菌落数；薄膜法是将食品样品均匀涂抹在琼脂培养基上，培养并统计菌落数。
三、食品中菌落总数的不确定度分析1. 采样不确定度：食品中菌落总数的测定首先要进行食品样品的采样和样品的制备，采样过程中可能会存在采样不均匀、采样器具的精密度等因素，引入采样不确定度。
2. 复现性不确定度：食品中菌落总数的测定通常需要进行多次重复测定，由于操作者、环境等因素的影响，可能会出现不一致的结果，引入复现性不确定度。
3. 实验条件不确定度：食品中菌落总数的测定受到实验条件的影响，如温度、湿度等条件会对微生物生长产生影响，引入实验条件不确定度。
4. 测量设备不确定度：食品中菌落总数的测定需要借助于培养箱、平板计数器等设备，设备的准确度和精度会影响测定结果，引入设备不确定度。
四、食品中菌落总数的不确定度评定食品中菌落总数的不确定度评定需要考虑上述不确定度因素的影响，并采用合适的方法进行计算评定。
不确定度评定的目的是为了确定测定结果的可靠性和准确性，提高测定结果的可信度。
1. 不确定度计算方法食品中菌落总数的不确定度可以采用GUM不确定度评定方法，通过不确定度传递法和不确定度组分法计算总的不确定度。
在实际计算中，需要考虑到各种不确定度来源的具体数值和权重，综合计算得出总的不确定度值。
2. 不确定度控制方法为了减小不确定度的影响，可以采取以下控制方法：（1）采样不确定度的控制：采用合适的采样方法和器具，确保样品的均匀性和代表性；（2）复现性不确定度的控制：严格控制实验条件和培养操作流程，尽量减小操作者和环境的影响；（3）实验条件不确定度的控制：控制实验条件的稳定性和准确性，进行实验前后的环境监测和校准；（4）测量设备不确定度的控制：对测量设备进行定期维护和校准，确保设备的准确度和精度。
菌落总数测定
菌落总数测定菌落总数测定一、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。
菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内，、所含能于某种周体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。
菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态．以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据．二、茵落总数测定的几项说明1．菌落总数的测定。
是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。
由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20％)，因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长，有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
2．鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。
3．每种细菌都有它一定的生理特性，培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。
因此，要得到较全面的细菌菌落总数，应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧气供应等。
但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定，都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的，因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。
菌落总数的测定标准
菌落总数的测定标准一、采样方案1.1 采样对象：本标准适用于各类食品、药品、化妆品等产品。
1.2 采样量：根据产品类型及实际需要，一般采样量为10-50g（mL）。
1.3 采样方法：用无菌采样器随机取样，然后将样品混匀，制成1:10的稀释液。
二、培养基2.1 选择培养基：使用国家规定的标准培养基，如营养琼脂、孟加拉红培养基等。
2.2 培养基配制：按照培养基说明书进行配制，加入适量添加剂以满足实验要求。
三、培养温度3.1 培养温度：菌落总数培养温度为36℃±1℃。
3.2 恒温培养：培养过程中需保持恒温，不得超过±2℃。
四、培养时间4.1 培养时间：菌落总数培养时间为48小时±2小时。
4.2 时间记录：记录每个平皿的培养时间，以获得准确的菌落计数。
五、结果报告5.1 计数方法：使用菌落计数器对各稀释度平皿进行计数，并记录每个稀释度的平均菌落数。
5.2 结果报告：根据平均菌落数计算出每克（mL）样品中的菌落总数，并按照规定格式填写结果报告。
六、精度要求6.1 重复精度：同一稀释度同一平皿的菌落数偏差不得超过10%。
6.2 仪器精度：菌落计数器的精度应符合国家相关标准要求。
七、空白对照7.1 空白培养基：取适量空白培养基放入恒温培养箱中，观察其是否受到污染。
7.2 空白样品：取适量空白样品（如无菌水）进行实验，观察其是否受到污染。
八、重复试验8.1 重复次数：同一批次样品至少进行两次独立实验，以验证实验结果的可靠性。
8.2 异常情况处理：如出现异常数据或不符合要求的数据，应重新进行实验或采用备用样品进行实验。
菌落总数测定
菌落总数测定菌落总数测定⼀、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育⽽形成的能被⾁眼所识别的⽣长物，它是由数以万计的相同细菌聚集⽽成的，故⼜有细菌集落之称。
菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表⾯积(clni)内，、所含能于某种周体培养基上，在⼀定条件下培养后所⽣成的细菌集落的总数。
菌落总数主要是作为判定⾷品被细菌污染程度的标记，也可以应⽤这⼀⽅法观察⾷⼀中细菌的性质以及细菌在⾷品中繁殖的动态．以便对被检样品进⾏卫⽣学评价时提供科学依据．⼆、茵落总数测定的⼏项说明1．菌落总数的测定。
是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后，每个细菌细胞都能形成⼀个可见的单独菌落的假定为基础的。
由于检验中采⽤37℃于有氧条件下培养(空⽓中含氧约20％)，因⽽并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数，厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不⽣长，有特殊营养要求的⼀些细菌也受到了限制，因此所得结果，只包括⼀群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。
2．鉴于⾷品检样中的细菌细胞是以单个，成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因⽽在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数，⽽应以单位重量、容量或表⾯积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units，CFU)报告之。
3．每种细菌都有它⼀定的⽣理特性，培养时，应⽤不同的营养条件及其他⽣理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满⾜其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。
因此，要得到较全⾯的细菌菌落总数，应将检样接种到⼏种不同的⾮选择性培养基上，并培养在不同条件下，如温度，氧⽓供应等。
但国家颁发的⾷品卫⽣标准对不同⾷品的菌落总数的规定，都是根据⽤普通营养琼脂进⾏需氧培养所得的结果确定的，因此在⾷品的⼀般卫⽣学评价中并不要⽤⼏种不同的⾮选择性培养基培养。
菌落总数测定
如果平板上菌落太多，不能计数时，不能 用多不可计作报告。应在最高稀释度平板 上任意选取2个1cm2的面积，计算菌落数， 除2求出每cm2面积内平均菌落数，乘以 63.6(皿底面积cm2数)。
菌落计数
可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计 数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。 菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，cfu）表示。
选取菌落数在30cfu～300cfu之间、无蔓延 菌落生长的平板计数菌落总数。低于30cfu 的平板记录具体菌落数，大于300cfu的可记 录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采 用两个平板的平均数。
平板接种与培养：
根据食品卫生标准要求和对样品污染情况 的估计，选择2~3个稀释度。加入样品时要 注意外来的污染。
培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否 的关键。（倾注的温度：一般35~45℃，温 度过高会造成已受损伤的菌细胞死亡。厚 度：直径9cm的平皿一般要求15~20mL培养 基，若培养基太薄，在培养过程中可能因 水分蒸发而影响细菌的生长）。
对照试验：
检样的稀释液中往往带有食品颗粒，在这 种情况下，为避免与细菌菌落混淆，可作 一检样对照，不经培养，置4℃环境放置， 在计数时用于对照。
或可选用TTC营养琼脂作培养基。
菌落计数：
如果高稀释度平板上的菌落数比低稀释度 平板上的菌落数高，则说明检验过程中可 能出现差错或样品中含抑菌物质，这样的 结果不 可用于结果报告。
若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌 落蔓延。
菌落总数的测定
菌落总数的测定一、菌落总数介绍：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
二、检验方法菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。
检验方法参见：GB4789.2-94《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168-92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》三、说明（一）样品的处理和稀释：1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
菌落总数测定
菌落总数的测定基础知识：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每g（mL）检测样品所生长出来的细菌菌落总数。
由于厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际其中的所有细菌总数，也不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数、需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生长过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价，菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
中国国家标准是国内常用的检验方法。
菌落总数测定的卫生学意义：食品本身的新鲜程度加工、贮存运输过程中是否受到污染卫生学指标：食品中菌落总数越多，则食品含有致病菌的可能性越大，食品质量越差；菌落总数越小，则食品含有致病菌的可能性越小。
须配合大肠菌群和致病菌的检验，才能对食品做出较全面的评价。
细菌在平板计数琼脂上的菌落特征蔓延菌在平板计数琼脂上的菌落特征方法来源：GB 4789.2-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定1、范围本标准规定了食品中菌落总数（Aerobic plate count）的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2、术语和定义菌落总数aerobic plate count食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
3、设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：36℃±1℃。
3.2 冰箱：2℃~5℃。
3.3 恒温水浴箱：46℃±1℃。
菌落总数测定
测
据。
定
— 1—
• 菌落总数检测意义
菌 落
2.用来预测食品耐存放程度或期限
总
一般讲，细菌数越少，食品耐放时间越长。例如用0℃保存牛肉，菌落总
数 测
数为103cfu／cm2时，可保存18天，而当菌落总数增至l05cfu／cm2时则只
定
能保存7天。
— 1—
• 菌落总数测定方法
菌
菌落总数检测的依据：
落 总
10-3
空白 对照
菌落总数 报告方式
/[cfu/g（mL /[cfu/g（
）]
mL无）效]
定
多不可计
180，184 40，42 3
5.称重取样以 CFU/g 为单位报告， 体积取样以CFU/mL 为单位报告。
定
稀释度及菌落数
10-1
10-2
10-3
空白 对照
菌落总数 报告方式
/[cfu/g（mL /[cfu/g（
）]
mL）]
多不可计
310
15
0
31000 3.1×104
— 1—
• 菌落总数计算报告
菌 落
结果报告：
总
数
1.菌落数小于 100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
测
定
2.菌落数大于或等于 100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修
菌落计数器
— 1—
• 菌落总数测定方法
菌 落 总
2.培养基的制备：
培养基由营养琼脂改为平板计数琼脂，更加容易观察计数。
数
测
定
— 1—
• 菌落总数测定方法
菌 落 总 数
3.稀释液的准备：ห้องสมุดไป่ตู้
微生物检测——菌落总数测定你知道多少？
微生物检测——菌落总数测定你知道多少？菌落总数就是在一定的条件下，每克或每毫升样品所生长出来的细菌菌落总数。
菌落总数测定的意义在于判定样品被细菌污染的程度以及卫生质量，能够预测样品存放、使用的期限长短，也便于研究人员了解细菌在不同环境中的繁殖动态。
1.设备和材料除了微生物实验室常规灭菌以及培养设备之外，在菌落总数测定的过程中所需要的设备和材料如下：（1）恒温培养箱，温度控制在36℃±1℃，30℃±1℃；（2）冰箱：温度控制在2℃-5℃；（3）恒温水浴箱，温度保持在46℃±1℃；（4）天平：感量为0.1g；（5）均质器；（6）振荡器；（7）无菌吸管：其标准为1ml（具有0.01ml刻度），10ml（具有0.1ml刻度）或微量移液器以及吸头；（8）无菌锥形瓶：容量为250ml和500ml；（9）无菌培养皿：直径为90mm；（10）pH计或pH比色管或精密的pH试纸；（11）放大镜和菌落计数器。
2.平板倾注法测定菌落总数所需要的检验步骤如下：（1）首先要采取样品；（2）对样品进行稀释处理，得到所需要测定的样品；（3）做平板；（4）对样品中的细菌进行培养，为其创造良好的繁殖环境；（5）菌落计数；（6）对菌落总数测定的结果进行报告。
2.1样品的稀释以及做平板在处理固体和半固体样品时，需要的操作如下。
称取25g样品放置在盛有225ml磷酸盐缓冲液或者生理盐水的无菌均质杯中，8000r/min-10000r/min均质1min-2min，或者放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min-2min，制作成1:10的样品均液。
在处理液体样品时，需要的操作如下。
以无菌吸管吸取25ml样品放置在盛有225ml磷酸盐缓冲液或者生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内放置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分摇晃均匀，制作成1：10的样品均液。
用1ml无菌吸管或者微量移液器吸取1:10样品均液1ml，沿着管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管中，注意吸管或者吸头尖端不要触及稀释液面，振摇试管或者换用一支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制作成1:100的样品均液。
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食品安全菌落总数测定菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
菌落总数检验工作中会遇到各种实验平板的菌落计数工作，如倾注法平板，螺旋接种平板，3M菌落总数测试纸片，滤膜法平板等。
因此要高效准确的进行各类平板的菌落计数并保存所有实验数据和图片，必须要求采用的自动计数仪器支持各类平板的自动分析。
迅数菌落分析仪器采用了菌落放大图象拍摄，高分辨率的1000万像素CCD数字成像技术和Colonfast 菌落智能识别技术。
在菌落自动计数方面，仪器可以快速完成包含细菌、霉菌、酵母菌等样品的各类倾注法平板、涂布法平板、滤膜法平板、空气沉降法平板、螺旋接种平板、3M纸片的菌落自动计数和浓度计算，这个功能可以促进我们食品卫生检验中“菌落总数”测定项目的自动化；自动计数菌落的速度高于500个菌落/秒，最小可以分辨的菌落直径可达 0.01mm；可构建专用计数模板以适应复杂实验室环境，计数误差控制在10%以内。
“迅数”是采用最多的菌落仪品牌。
食品行业适用标准：GBT 4789.2-2008 食品卫生微生物学检验菌落总数测定需要进行菌落计数的行业有：疾病控制，卫生检验中心检验检疫局质量技术监督局大学：食品科学与工程微生物发酵免疫医学检验公共卫生科学院，研究机构环境监测部门自来水公司制药企业：生物制药，化学制药，抗生素企业化妆品企业食品企业：饮料、饮用水、乳品、保健食品、糕点糖果、膨化食品、食品添加剂、粮食及其制品、酒类、调味品、微生态、保健食品消毒剂、消毒器械：消毒剂；消毒器械；生物指示剂；化学指示剂；灭菌包装物一次性使用医疗用品：输注类；导管类；诊断、治疗器具类；透析器具类；麻醉器具类；手术巾、敷料类；护理器材类卫生用品：卫生巾；尿布；皮肤、粘膜卫生用品；隐形眼睛护理用品；其他的一次性卫生用品●大肠菌群计数传统的大肠菌群最可能数(MPN)法必须经过：初发酵实验，复发酵证实试验。
步骤烦琐，而且阳性样品需要最少4天时间得出结果。
2008年国家颁布了新标准GB/T4789.3-2008《食品卫生微生物学检验-大肠菌群计数》。
标准中的第2法-大肠菌群平板计数法，只需最少42小时即可得大肠菌群数。
大肠菌群平板计数法分两个步骤：VRBA平板计数和BGLB肉汤管复发酵证实实验。
第一步：VRBA培养基培养后，对平板上大肠菌群的典型菌落进行计数。
计数的要求是：选取菌落数在30到150的平板，计数典型大肠菌群菌落-“紫红色，有沉淀环，且直径不小于0.5毫米”的菌落。
第二步：证实实验。
然后将证实实验中的阳性管比例数乘以上一步计数的菌落数，再乘以稀释倍数，即得每克（或毫升）样品中大肠菌群数。
迅数全自动菌落分析仪在GB/T4789.3-2008新标准中的快速计数应用：迅数仪器的自动菌落计数能力可帮助实验人员快速准确选取“菌落数在30到150的VRBA平板”；利用彩色高像素CCD成像及Colonfast 图象智能识别软件，迅数菌落仪能迅速识别“紫红色，有沉淀环，且直径不小于0.5毫米”的大肠菌群菌落，只需1秒就计算出大肠菌群典型菌落的菌落数。
综上：应用新标准GB/T4789.3-2008，结合迅数菌落分析仪，可快速测得大肠菌群典型菌落数，从而实现大肠菌群计数的快速检验。
●霉菌和酵母计数由于霉菌和酵母能抵抗热、冷冻，以及抗菌素和辐照等贮藏及保藏技术，它们能转换某些不利于细菌的物质，而促进致病细菌的生长；有些霉菌能够合成有毒代谢产物－霉菌毒素。
霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。
因此霉菌和酵母也作为评价食品卫生质量的指示菌，并以霉菌和酵母计数来制定食品被污染的程度。
具体检测标准参见：GB/T 4789.15-2003 食品卫生微生物检验霉菌和酵母计数。
霉菌和酵母的计数方法，与菌落总数的测定方法基本相似。
主要步骤为：将样品制作成10倍梯度的稀释液，选择3个合适的稀释度，吸取1mL于平皿，倾注培养基后，培养观察，菌落计数。
对霉菌的计数，还可以采用显微镜直接镜检计数的方法。
迅数菌落分析仪器内置特殊算法，支持对包含霉菌和酵母菌样品的各类倾注法平板、涂布法平板、滤膜法平板、螺旋接种平板的菌落自动计数和浓度计算。
●金黄色葡萄球菌计数典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌的单个菌落在Baird-Parker琼脂平板上呈圆形,表面光滑、凸起、湿润,直径2～3mm。
灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈 (沉淀),其外常有一清晰带。
仪器快速计数应用：迅数自动菌落计数仪利用彩色高像素CCD成像及Colonfast图象智能识别软件，能迅速识别Baird-Parker琼脂平板上的典型金黄色葡萄球菌菌落，只需1秒就计算出金黄色葡萄球菌典型菌落数。
适用GBT 4789.37-2008 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌计数●乳酸菌检验仪器快速计数应用：迅数自动菌落计数仪利用彩色高像素CCD成像及Colonfast图象智能识别软件，能迅速识别MRS兼性厌氧培养平板上的典型乳酸菌菌落（含有乳杆菌属、双歧杆菌属、嗜热链球菌），只需1秒就计算出乳酸菌典型菌落数。
适用GBT 4789.35-2008 食品卫生微生物学检验食品中乳酸菌检验●双歧杆菌检验仪器快速计数应用：迅数自动菌落计数仪利用彩色高像素CCD成像及Colonfast图象智能识别软件，能迅速识别培养平板上的典型双歧杆菌菌落，只需1秒就计算出双歧杆菌典型菌落数。
适用食品卫生微生物学检验/双歧杆菌检验GB/T4789.34-2003●细菌计数-螺旋平板法螺旋接种菌落计数方法是一种新的食品，化妆品以及研究用样品中微生物的快速定量方法。
这种螺旋接种菌落计数方法创建于1976年，由Donnelly, C.B., J.E. Gilchrist等人最先提出，经过20多年的实际应用，国外微生物学界已经普遍认可，并列为国际分析化学家协会（AOAC）的官方方法，已被美国食品药品监督管理局（FDA）收录为国家标准。
螺旋接种菌落计数是依据阿基米德螺旋原理，使样品以对数规律螺旋线形式接种在平板上。
样品接种后，菌落即分布在螺旋轨迹上，随半径的增加分布得越来越稀。
采用特殊的计数栅格，自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数，即可得到样品中微生物的数量。
螺旋接种菌落计数方法加样量精确，菌落分布均匀，且可以很大程度上减少或免除样本稀释过程，因此在国外食品药品的菌落计数实验中得到广泛应用。
2008年1月，中国国家质量监督检验检疫总局也通过审定了中国的SN行业标准-“食品和化妆品中的菌落计数检验方法-螺旋平板法”，于2009年2月1日正式实施。
迅数G6全自动菌落分析仪包含“螺旋接种平板分析模块(Shineso spiral plate counter)”，符合国家质检总局SN标准和美国FDA螺旋计数标准，并可兼容分析知名品牌螺旋接种仪(西班牙IUL,美国SBI)接种的螺旋平板，其兼容性已在中国知名微生物研究和检测机构得到验证。
●Petrifilm测试法(菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)3M Petrifilm测试片法是2008年中国食品卫生标准修改后进入国家标准的菌落总数测定新方法。
这种方法不需要专门的实验室和专业检验人员，也不需要配制专门的培养基及有此带来的消毒、清洗工作。
因此受到不需要精确定量的基层食品微生物实验室的极大欢迎。
迅数G型菌落分析仪对2009年最新颁布的国家食品卫生标准SN/T2098-2008-“食品和化妆品中的菌落计数检测方法-螺旋平板法”中的“螺旋平板计数”和GB4789-2008食品卫生微生物学检验标准中的“3M Petrifilm细菌总数测试片”等新方法的自动分析支持，使迅数菌落仪一机多用且支持最新国家标准。
●乳及乳制品中舒巴坦敏感β－内酰胺酶类药物检验β-内酰胺酶为我国不允许使用的食品添加剂,该酶的使用掩盖了牛奶中实际含有的抗生素。
β-内酰胺酶能够使青霉素内酰胺结构破坏而失去活性，导致青霉素、头孢菌素等抗生素类药物耐药性增高，从而大大降低了人们抵抗传染病的能力，给消费者的身体健康带来危害。
在2009年全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治中，适用标准：杯碟法“测定乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验”，该方法为卫生部指定方法。
原理：该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株，利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶的活性，并加入青霉素作为对照，通过比对加入β-内酰胺酶抑制剂与未加入抑制剂的样品所产生的抑制圈的大小来间接测定样品是否含有β-内酰胺酶类药物。
测量与判定：迅数“抑菌圈测量”模块对单碟（每碟含4到12个抑菌圈）测量时间小于1秒，可在自动完成平板上多个抑菌圈准确测量的基础上结合报告“β- 内酰胺酶类药物检验结果阳性或阴性”的卫生部新标准规定，轻松实现舒巴坦敏感β-内酰胺酶类物质是否存在的自动化分析。
●培养基质量控制在微生物研究和检测工作中，最基本的研究工具就是培养基！培养基的质量控制就成为影响微生物研究和检测工作质量的重要方面。
迅数菌落仪可以快速菌落总数的准确统计，其菌落形态分析功能可以自动完成对平板上所有菌落的形态分析（直径，面积，圆度等）和直径平均值统计；从而帮助微生物实验室进行更高质量的培养基质量控制生物评价（如：生长率实验，菌落平均直径计算等）。
国内微生物培养基最高评价机构-中国药品生物制品检定所培养基室从2004年底就开始在使用迅数这个品牌菌落仪做培养基质量控制。
迅数全自动菌落分析仪不仅在应用中体现了上述技术优势，而且由于实验效率的提高，使用部门得以提高对培养基质控评价的频次，进一步也提升了培养基的质量管理指标。
抗生素残留检测随着我国养殖的集约化，饲料药物添加剂和各类抗生素在生产中广泛应用，使畜禽类产品药物残留问题日益突出。
而根据卫生研究及临床资料，人们食用被药物污染和残留的水产品后容易出现毒性反应和增强细菌耐药性。
因此各种畜禽产品中的抗生素残留检验就变得至关重要。
微生物抑制法是抗生素残留量检验最广泛应用的简便而费用低廉的方法。
测定原理是根据抗生素对其敏感的特定微生物的生长抑制作用,通过抑菌圈的大小来进行样品中抗微生物药物残留的定量检验或定性判断(测定抑菌圈直径，样品抑菌圈直径小于阳性对照抑菌圈直径判定为阴性，否则判定为阳性)。
迅数_ZS 型自动抑菌圈测量与分析系统是替代人工实现抑菌圈自动测量和标准化的有力工具。