邻二氮菲分光光度法测定Fe
《分光光度分析》实验四 邻二氮菲分光光度法测定铁
(7) 盐酸溶液(6 mol· -1) L
(8) 铁标准溶液(20 g· -1，200 g· -1配成250mL，见后面) mL mL 说明： (1) - (7) 由实验室教师配制，(8) 每组配制一份
四、实验内容
条件试验
铁含量的测定 摩尔比法测定配合物的组成比、摩尔吸光系 数及反应的平衡常数
亚铁的含量?试拟出一简单步骤。
4. 制作工作曲线和进行其它条件试验时，加入
试剂的顺序能否任意改变?为什么?
50 mL 容量瓶
1 mL盐酸羟胺溶液 摇匀
用水稀释至刻度，摇匀 放置l0 min
X mL 1 mol· -1 NaOH L
l cm比色皿 绘制A与pH关系 的酸度影响曲线
以蒸馏水为参比 在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度 (用pH计测量溶液pH值) A
pH
X mL NaOH: 0.00 mL，0.20 mL， 0.50 mL，1.00 mL 1.50 mL，2.00 mL ， 2.50 mL, 3.00 mL
2+
Fe2+ + 3 N N N Fe N
3
lg 3=21.3
Fe3+与邻二氮菲生成1:3的淡蓝色配合物，其lg 3＝14.1
盐酸羟胺还原
2 Fe3++2NH2OH· HCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-
为了尽量减少其他离子的影响，通常在微酸性(pH约5)溶液中
显色。
本法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、
实验四
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁
七、思考题
1．本实验量取各种试剂时应分别采取何种量 器较为合适？为什么？ 答：本实验所用的溶液量都比较少，用移液 管或吸量管比较合适。标准铁试样的量取要 特别准确，而其他的试剂，如phen、NaAc 等，都为过量，相对要求不是很严格。
二、实验原理
2、光度法原理
本方法的选择性高。 Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+ 及Ag+ 等离子与邻二氮菲作用生 成沉淀，干扰测定; 相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、 SiO32-，20倍的Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍的Co2+、 Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。 共存金属离子量大需掩蔽或分离。
1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲（phen）， 5mLNaAc ，加水至刻度，摇匀放置10min，用1cm比色 皿，以试剂空白为参比，在510nm波长下，测定样品溶液 吸光度。从标准曲线上查出或由回归方程计算样品液中铁 的含量（mg/L）。 3、光度计与比色皿使用 4、结束工作
测量完毕,关闭电源,取出吸收池, 清洗晾干保存.清理工 作台,罩上
吸光度的测定：用1cm比色皿，以试剂空白为参比(调节吸光 度A为0），在510nm波长下，测定各溶液吸光度A。
标准曲线的绘制：以铁质量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘 制标准曲线。
*注意：每加入一种Βιβλιοθήκη 剂均需摇匀。下同。四、实验步骤
2、样品铁含量的测定 移取适量铁样品液(5.00mL)于50mL比色管中，加入
二、实验原理
1.方法原理
邻二氮菲(phen)是光度法测定微量铁的较好试剂。该法灵敏度高， 稳定性好，干扰易消除，故应用广泛。
实验 邻二氮菲分光光度法测定铁
实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、通过分光光度法测定铁的条件实验，学会如何选择分光光度分析的条件及分光光度测定铁的方法。
2、了解分光光度计的性能、结构及其使用方法3、学会使用TU-1810紫外可见分光光度计二、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图1-1所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
三、仪器和试剂1．仪器TU-1810紫外可见分光光度计，pH酸度计等2．试剂(1)100ug·mL-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)10 ug·mL-铁标准溶液用吸量管移取25mL 100ug·mL-1铁标液于250mL容量瓶中，加入4mL6mol·L-1HCl溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
（学生自配）(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。
邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。
本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。
实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。
（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。
（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。
（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。
2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。
（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。
（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。
（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。
测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。
1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。
离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。
荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。
2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。
荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。
总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。
这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。
邻菲罗啉分光光度法测定铁
邻菲罗啉分光光度法测定铁邻菲罗啉分光光度法是一种常用的测定铁的方法。
邻菲罗啉，也称为邻二氮菲，是一种常用的螯合剂，可以与铁离子形成稳定的络合物。
下面将对这种方法进行详细的介绍。
一、实验原理邻菲罗啉分光光度法是一种基于络合反应的分光光度法，用于测定铁离子。
邻菲罗啉与铁离子形成稳定的络合物，该络合物的最大吸收波长位于530nm左右，因此可以通过测量该波长下的吸光度来测定铁离子的浓度。
二、实验步骤1.准备试剂和样品：邻菲罗啉溶液、铁标准溶液、缓冲溶液（PH=7）、去离子水、待测样品。
2.校准仪器：使用空白试剂校准仪器，确保仪器处于正常状态。
3.绘制标准曲线：分别取不同浓度的铁标准溶液于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，记录各浓度下的吸光度。
以吸光度为纵坐标，铁离子浓度为横坐标绘制标准曲线。
4.测定样品：取适量待测样品于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，测量吸光度。
5.计算结果：根据标准曲线计算待测样品中铁离子的浓度。
三、实验结果与分析1.结果记录：记录实验过程中各浓度下的吸光度和待测样品中铁离子的浓度。
2.结果分析：通过对比标准曲线和样品的吸光度值，可以得出待测样品中铁离子的浓度。
如果需要进一步分析，可以对实验数据进行处理和分析，例如计算相对误差、变异系数等指标，以评估实验结果的准确性和可靠性。
四、实验注意事项1.实验过程中要注意安全，避免直接接触皮肤或吸入粉尘。
2.试剂和样品应当存放在棕色瓶中，避免阳光直射和长时间暴露在空气中。
3.在绘制标准曲线时，要使用相同浓度的缓冲溶液和邻菲罗啉溶液，以确保实验条件的一致性。
4.在测定样品时，要保证样品的均匀性和稳定性，避免出现误差。
5.在计算结果时，要根据标准曲线进行线性回归分析，以得出准确的浓度值。
五、实验结论通过邻菲罗啉分光光度法测定铁离子的实验，可以得出待测样品中铁离子的浓度。
该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于测定水中、土壤中或生物样品中的铁离子浓度。
2[1].邻二氮菲分光光度法测定铁
![2[1].邻二氮菲分光光度法测定铁](https://img.taocdn.com/s3/m/b49a29fbc8d376eeaeaa31b3.png)
实验二邻二氮菲分光光度法测定铁一、目的要求1.了解分光光度计的结构和正确的使用方法。
2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的原理及方法。
3.学会制作标准曲线的方法。
二、原理邻二氮杂菲是测定微量铁较好的试剂。
在pH为2~9的溶液中，邻二氮杂菲与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，显色反应如下：Fe2+＋其lgK稳＝21.3，摩尔吸光系数ε510＝1.1×104。
橙红色配合物的最大吸收峰在510nm 波长处。
Fe3+与邻二氮杂菲作用形成蓝色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+，再与邻二氮杂菲作用。
常用盐酸羟胺NH2OH·HCl（或对苯二酚）作还原剂。
4Fe3+＋2NH2OH 4Fe2+＋4H+＋N2O＋H2O 测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。
本实验采用HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显色反应进行完全。
本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-等离子不干扰测定。
但Bi3+、Cd2+、Hg2+、Zn2+、Ag+等离子与邻二氮杂菲作用生成沉淀干扰测定。
三、仪器与试剂仪器：分光光度计（型号以实际为准）一台（含一套比色皿），吸量管一套（1ml，1ml，2ml，5ml）, 50ml比色管一套，洗瓶一个，滴管一个，吸耳球一个，滤纸盒一个试剂：1.铁标准溶液（100μg·mL-1）：准确称取0.8634g铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O(A.R)，置于烧杯中，加入20mL 6mol·L-1HCl溶液和少量水，溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇匀。
或准确称取铁粉0.1g左右，加入10mL 10%硫酸，待完全溶解后，冷却，用水稀释至100mL。
邻二氮杂菲分光光度法测定铁量
邻二氮杂菲分光光度法测定铁量邻二氮杂菲分光光度法（o-Phenanthroline Spectrophotometric Method）是一种常用于测定水或土壤中铁含量的方法。
本文将介绍该方法的原理、步骤、注意事项和优缺点等。
一、原理该方法基于邻二氮杂菲（o-Phenanthroline）与铁离子形成的配合物在特定波长下具有特征的吸收光谱。
在酸性条件下，铁离子与邻二氮杂菲反应生成红色的三价铁-邻二氮杂菲配合物，其在510nm处有一明显的吸收峰。
因此，可以根据该峰的吸光度值计算出样品中铁的浓度。
二、步骤1.样品的制备：将待测样品中的铁离子还原成两价铁。
通常使用稀硫酸或氢氧化钠溶液作为还原剂。
具体方法为：取约1g待测样品，加入10ml稀硫酸或氢氧化钠溶液，加热至沸腾，保持沸腾1-2分钟，冷却至室温。
2.标准曲线的制备：取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml等不同体积的0.1mol/L FeSO4溶液分别置于不同的10ml量瓶中，加稀硫酸或氢氧化钠溶液定容至刻度线，得到含铁浓度从0到5mg/L不等的标准溶液。
将标准溶液分别用同样的方法制备成多个含铁浓度不同的溶液。
3.测定：在比色皿中分别放入10ml标准溶液和处理后的待测样品溶液，加入适量的邻二氮杂菲溶液和稀硫酸和。
混合均匀后，用分光光度计在510nm测定溶液的吸光度值，并记录。
4.计算：根据标准曲线上对应的吸光度值和铁的浓度，计算待测样品中铁的浓度。
三、注意事项1.为保证测定结果准确，建议在同一天内测定所有样品，避免不必要的误差。
2.邻二氮杂菲吸收光谱易受到空气氧化的影响，因此需在实验过程中尽量避免接触空气。
3.样品中存在其他金属离子时，可能会影响铁的测定结果。
在此情况下，可选用其他方法或采取特殊的前处理方法（如离子交换树脂法）。
4.注意安全操作，避免酸和邻二氮杂菲对身体造成伤害。
四、优缺点优点：测定方法简单、对常见杂质不敏感、灵敏度高。
缺点：其他离子的存在可能会影响测定结果，样品预处理过程复杂，操作需要熟练。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握分光光度计的测定原理、方法及其结构。
2、掌握吸收曲线、标准曲线的绘制及样品的测定原理。
二、实验原理可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。
邻二氮菲与Fe2+在PH2、0~9、0溶液中形成稳定橙红色配合物。
在实际应用中加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。
三、仪器与试剂仪器：722型分光光度计、容量瓶（50 mL）、吸量管、比色皿、吸收池试剂：0、1g/L铁标液、100g/L 盐酸羟胺、1、5g/L邻二氮菲、1、0mol/L乙酸钠、样品铁四、操作步骤1、配制标准溶液取6个容量瓶标号1~6，依次加入0、00、0、20、0、40、0、60、0、80、1、00(mL)的铁标液；接着在各个容量瓶按序加入1mL盐酸羟胺、2mL邻二氮菲、5mL乙酸钠；最后将每个容量瓶稀释至刻度线50mL，待测。
2、吸收曲线的绘制用1cm比色皿，以1号溶液为参比，在440~560nm之间，每隔10nm测定一次5号溶液的吸光度A。
作出吸收曲线，找出λmax 作为工作波长。
3、标准曲线的绘制以1号为参比，在λmax处测定2~6号标液的吸光度A。
在坐标纸或电脑上，以铁的浓度CFe2+对相应的吸光度A作图，得到标准曲线。
4、未知样品铁含量的测定按步骤1，取1、00mL样品铁与标准溶液在相同条件下显色，并测出Ax值，通过标准曲线求出Cx。
五、数据记录与处理吸收曲线的绘制和测量波长的选择实验数据波长(nm)440450460470480490500吸光度0、2460、2560、2760、3050、3010、3270、357波长(nm)510520530540550560吸光度0、3630、3330、2570、1760、0980、055★由上图分析知，最适宜波长为λ=510nm标准曲线的制作实验数据铁标液体积(ml)0、200、400、600、801、00吸光度0、0920、1730、2630、3480、241由分光光度计测得样品铁Ax=0、241,由标准曲线方程可求得Cx=1、108,则样品中铁含量=1、108100=110、8(mg/L)。
实验47 邻二氮菲分光光度法测定铁含量
▪ 二者的结合称为朗伯—比耳定律。
2020/4/10
Analytical chemistry
7
朗伯—比耳定律 吸光度A：表征物质对光吸收程度的量。 A= lgIi/It = -lgT =bc
▪ A--吸光度 ▪ --摩尔吸光系数 ▪ C--被测物浓度 ▪ Ii--入射光强
1、体系酸度 2、显色剂用量 3、显色时间 4、显色温度 5、溶剂
3.3 测定波长 ❖ 选择原则：吸收最大，干扰最小
3.4 参比溶液
作用： ❖ 仪器调零 ❖ 消除吸收池壁和溶液对入射光的反射 ❖ 扣除干扰 选择： ❖ 试剂空白 ❖ 试样空白 ❖ 褪色空白
四、实验内容
4.1 原理
在pH2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen) 生成稳定的橘红色配合物Fe(phen)32+
▪ 常用光源：钨丝灯和卤钨灯，可使用的波长范 围在360 ~2500nm。
2020/4/10
Analytical chemistry
11
2、单色器
▪ 单色器作用：从光源发出的复合光中分出所需 要的单色光。
▪ 单色器组成：由入射狭缝、准光器（透镜或凹 面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚 焦元件和出射狭缝等组成。
实验47
邻二氮菲分光光度法测定铁含量
铁的定量分析方法很多，有分光光度法、原子吸 收法、原子发射光谱法、离子色谱法、毛细管电泳法 和电位滴定法等。
其中分光光度法由于其具有灵敏度高、选择性好、 线性响应范围宽以及分析仪器结构简单等特点，在微 量分析领域得到了广泛应用。
适用在金属矿物、化工产品、环境和食品工业中 微量铁的分析。
▪ 单色器的核心部分是色散元件（如玻璃棱镜和 光栅），起分光的作用。
邻二氮菲分光光度法测铁
ml容量瓶中，加入10%盐酸羟胺1 ml，
3ml ，以水
A
稀释至刻度。然后在分光光度计上，
用2cm比色皿，以水为参比液，在波长
570nm~430nm，每隔10nm或20nm测一
次吸光度。以波长为横坐标，吸光度
为纵坐标制出吸收曲线，从吸收曲线
上确定最大吸收波长（ max ).
6
2.铁含量的测定
10 mg/ml 铁标准溶
液
（1）标准曲线的绘制：
1
2
3
4
5
6
参比 2 ml 3 ml 4 ml 5 ml 6 ml
然后1~6号中 依次加1 ml 10%盐酸羟胺、 5 ml 1mol/L醋 酸钠溶液和 3ml 0.1%邻二 氮杂菲溶液，
以水稀释至刻 度、摇匀 。
邻二氮菲分光光度法测铁
2+
N
Fe
N
3
1
一、实验目的
❖学习分光光度法主要测量条件的选择。 ❖掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法。 ❖了解721型（或其他型号）分光光度计的构 造和学习使用方法。
2
二、实验原理
分光光度法测定物质含量时的主要测量条 件是通过吸收曲线的测绘而选择的入射波长。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂， 反应式如下：
11
六、讨论题
➢哪些是邻二氮菲分光光度法测定 铁的适宜条件？ ➢为什么显色前要加盐酸羟胺？ ➢怎样选择本实验中的参比溶液？ ➢根据你的实验数据，试计算在最 大吸收波长下邻二氮菲-亚铁配合 物的摩尔吸光系数。
12
仪器：721（或其他型号）型分光光度计、容 量瓶、吸量管。
100mg/ml铁标准溶液、10 mg/ml铁标准溶液、 10%盐酸羟胺（临时配置）、0.1%邻二氮杂 菲溶液（新配置）、1mol/L醋酸钠溶液、铁 未知液。
邻二氮菲分光光度法测定铁
Exp 21 光谱法测定铁一、原理作为二价铁的化合物中微量铁的测定采用的是分光光度法。
测定铁II使用的是经典的试剂（还原为二价铁后）是有机试剂1,10-邻菲罗啉。
这个试剂有一个分子式C12H8N2和结构式O-ph。
她的别名叫亚铁。
化合物中含有三分子的1,10-邻菲罗啉和一个铁：Fe2+ + 3(o-ph) = Fe (o-ph)3个别的金属离子也能与之形成化合物，但惟有含铁的化合物颜色很深。
Ag+、Co2+、Cu2+、Ni2+是主要干扰。
柠檬酸和EDTA的混合物可以隐蔽Ag+、Cu2+、Ni2+以及大量的其他金属离子。
这个方法用于测定铁的化合物有一个吸光系数（1.1×104）。
测定的极限（A＝0.01）大约是10-6，而在1cm吸收池中分析的范围在0.4至8个ppm。
在这个步骤中，铁首先用还原剂还原成二价铁，如盐酸羟胺（NH2OH·HCl）。
加入的1,10-邻菲罗啉与铁反应的量必须是超计量的，而溶液的pH是通过NaAc缓冲来控制（这一步很重要，因为真正显色就在这一pH区间）。
最后，溶液稀释至刻线然后用光度计测量吸光度。
二、步骤：1、用移液管吸取10.00ml的0.100mg/ml的Fe2+到50ml的容量瓶中。
用蒸馏水稀至刻线并混均。
该溶液含0.0200mg/ml的铁。
2、取10ml的数个（系列）比色管，吸取0.2、0.4、0.8、1.6ml的铁标液（20µg/ml）。
在比色管中加入1.0ml的蒸馏水【做空白】。
未知样品（1.00ml）装入6管。
对于回收，0.4ml的标液和1.00ml的未知物装入7管。
所有的管（包括未知物）加0.2ml的10%盐酸羟胺、0.5ml的0.1%的1,10-邻菲罗啉、通过加入1.0ml的10%醋酸钠缓冲液以产生出红色的1,10-邻菲罗啉，然后稀释至10.00ml。
Fe2+标液的浓度分别是0.40、0.80、1.60、3.20µg/ml。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的：1、学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。
2、掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理：1、邻二氮菲：，即“1,10-邻二氮杂菲”，也称邻菲罗啉、邻菲咯啉，是一种常用的氧化还原指示剂。
在pH=2～9的溶液中，Fe 2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+：2+NN3Fe 2++N NNNNNFe此配合物的lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L ·mol -1·cm -1，而Fe 3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK 稳=14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH 2OH ·HCl)将Fe 3+还原为Fe 2+，其反应式如下：2Fe 3++2NH 2OH ·HCl →2Fe 2++N 2+H 2O+4H ++2Cl -因此，分光光度法测定试样中的微量铁实验时常用盐酸羟胺(NH 2OH ·HCl)将Fe 3+还原为Fe 2+，用邻二氮菲测定试样中铁的总量（控制溶液的酸度为pH ≈5较为适宜）。
该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
2、根据朗伯－比耳定律：A=εbc ，当入射光波长λ及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A 与该物质的浓度c 成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c 为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
3、确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
实验10-邻二氮菲分光光度法测铁
实验十邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1.了解分光光度计的结构和使用方法；2.掌握用吸光光度法测定铁的原理和方法。
二、实验原理在可见光区进行吸光光度测量，如果被测组分本身很浅，或者无色，那么就要用显色剂与其反应，生成有色化合物，然后进行测量。
用光度法测定铁，显色剂种类较多，邻二氮菲光度法测铁，由于灵敏度较高，稳定性较好，干扰容易消除，因而目前普遍采用的一种测定方法。
在pH为2~9的溶液中，邻二氮菲与Fe2+反应生成稳定的橙红色络合物：F e2++3NNNN3F e2+在pH=2~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
三、试剂和仪器试剂：1.00×10-3ug/mL 的铁标液、1mol/L的NaAc溶液、100g/L的盐酸羟胺溶液、1mol/L的NaAc 溶液。
仪器：50mL容量瓶、2.00mL、10mL、25.00mL吸量管、通用滴定管、玻璃比色皿、分光光度计四、实验过程1、吸收曲线的绘制用吸量管吸取10mL 1.00×10-3ug/mL 的铁标准溶液于50mL容量瓶中，加入1ml 100g/L的盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2mL 1.5g/L邻二氮菲溶液、5mL 1mol/L的NaAc溶液，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
放置十分钟。
在可见光分光光度计上，用1cm的比色皿，以蒸馏水为参比溶液，从450nm至550nm每改变10 nm 测定一次吸光度。
绘制A~λ吸收曲线。
找出最大吸收波长。
2、标准曲线的绘制标准溶液及样品溶液的配制：在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以0号溶液作为参比溶液，分别测定1至5号溶液的吸光度，绘制标准曲线。
邻二氮菲分光光度法测定铁
邻二氮菲分光光 度法测定铁
三、 仪器与试剂
仪器：722型分光光度计，1 cm比色皿（一套），1 mL吸量 管，5 mL吸量管，10 mL吸量管、6只50 mL
试剂：铁标准溶液(含铁100 μg·mL-1)，0.15％邻二氮菲(新配 制的水溶液)，10％盐酸羟胺（新配制的水溶液），1 mol·L-1醋酸 钠溶液
邻二氮菲分光光 度法测定铁
五、 数据记录与处理
（1）吸收曲Βιβλιοθήκη ：（2）标准曲线（λ= nm）（表格自行设计）。 （3）原始待测液含铁= (μg·dm-3)。
邻二氮菲分光光 度法测定铁
六、 实验注意事项
（1） 取含铁液时体积一定要准确。
分光光度计要预热，所配溶液 （2） 不要弄混了。
（4）
（3） 用操作液洗比色皿，按由稀到浓的顺
分析化学
邻二氮菲分光光 度法测定铁
二、 实验原理
邻二氮菲(o-ph)是测定微量铁的较好试剂。在pH值为2～9的 溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的红色配合物，其lg K形＝21.3，摩 尔吸光系数ε=1.1×104，其反应式如下：
红色配合物的最大吸收峰在510 nm波长处。本方法的选择性 很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、 SiO32-，20倍的Cr3+、Mn2+、PO43-，5倍的Co2+、Cu2+等均不 干扰测定。
准确称取0.8634 g的NH4Fe(SO4)2·12H2O，置于烧杯中，加 入20 mL 6 mol·dm-3HCl和少量水,溶解后,定量地转移至1 L容量瓶 中，以水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮菲分光光 度法测定铁
邻二氮菲分光光度法测定铁
邻二氮菲分光光度法测定铁一．[实验目的]1、了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法。
2、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法。
3、了解721型（或722型）分光光度计的构造和使用方法。
二、[实验原理]Fe2+与邻二氮菲反应生成红色配合物，在波长510nm （最大吸收波长）处，其吸光度的高低与浓度的关系符合朗伯—比尔定律Fe2+与邻二氮菲在PH 为2—9范围都能形成稳定的红色配合物，但在5—6时最佳。
铁必须是以Fe2+形式反应，因此显色前要加入还原剂，通常用盐酸羟胺作为还原剂，反应式如下：4Fe3+＋2NH2OH = 4Fe2+＋N2O↑＋4H+＋H2O Fe2+与邻二氮菲的反应式如下：三、[试剂和仪器]试剂：0.1mg/mL 标准铁溶液：准确称取0.8634g 分析纯铁铵矾［NH4Fe （SO4）2·12H2O］置于烧杯中加入20mL6mol·L -1的HCl 溶液，溶解后转入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
0.1%邻二氮菲溶液（新配） 10%盐酸羟铵溶液（新配） 1mol·L -1NaAc 溶液0.1mol·L -1NaOH 溶液2、仪器 721（或722）型分光光度计一台（包括比色皿一套）、50mL 容量瓶8只、5mL 吸量管2支其它辅助器皿 [实验步骤] 工作条件试验1、吸收曲线的绘制 用吸量管吸取2mL 标准铁溶液，注入50mL 容量瓶中，依次加入1mL 盐酸羟铵溶液（摇匀）、3mL 邻二氮菲溶液、5mL1mol/LNaAc 溶液，定容至刻度，摇匀。
在721（或722）型分光光度计上，用1cm 比色皿，一试剂空白为参比溶液在波长为440～860nm 间，间隔10nm 测定一次吸光度（在最大吸收波长附近，每隔2nm 测定一次）。
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择吸收峰最高点所对应的波长为工作波长。
用8个50mL 容量瓶中，分别按下表的用量加入各种试剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
0910-邻二氮菲分光光度法测铁含量
邻二氮菲分光光度法测铁铁含量的测定1.测定方法电化学分析法色谱分析法（离子色谱法、毛细管电泳法）光谱分析法（紫外可见分光光度法、原子吸收分析法、原子发射光谱法、荧光分析法、化学发光分析法）2.分光光度法测定铁GB/T5750.6-2006生活饮用水标准检验方法金属指标GB/T3049-2006工业用化工产品铁含量测定的通用方法1，10-菲啰啉分光光度法GB/T12496.19-2015木质活性炭试验方法铁含量的测定第一部分实验目的第二部分实验原理第三部分试剂和仪器第四部分实验步骤第五部分数据处理第六部分思考题要内容1. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理；2. 学习如何选择适宜的显色条件和光度分析方法；3. 学会绘制吸收曲线和利用标准曲线定量的方法；4. 了解UV1601型分光光度计的构造，熟悉其使用方法。
当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产生很强的紫外-可见吸收光谱。
)21.3(20lg Θf℃=K酸度过低，Fe2+水解。
pH 2∼9Fe Fe2+：2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl-A c FeA未知c Fe 未知A =κbc(1)朗伯-比尔定律：κ510=1.1×104L ⋅mol -1⋅cm -1标准曲线法：式中：k-标准工作曲线的斜率。
(2)1.试剂铁标准溶液（20.00µg⋅mL-1），邻二氮菲溶液（0.5g⋅L-1，新配制），盐酸羟胺溶液（10 g⋅L-1，使用时配制），NaAc溶液（0.5 mol⋅L-1），NaOH溶液(0.1mol⋅L-1)，铁未知溶液；2. 仪器容量瓶，移液管，吸量管，滴定管，玻璃比色皿（1 cm），酸度计，UV1601型分光光度计可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm 。
紫外区：氢、氘灯。
发射185～400 nm的连续光谱。
光源单色器样品室检测器显示四、实验步骤1.绘制吸收曲线并选择测量波长以去离子水为参比溶液，在360∼650nm 波长范围内进行光谱扫描，得到吸收曲线，找到最大吸收波长λmax 。
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实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。
二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
配合物的稳K lg ＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂1．醋酸钠：l mol·L -1；2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1；3．盐 酸：2 mol·L -1；、4．盐酸羟胺：10％（临时配制）；5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。
6．铁标准溶液(1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。
(2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
如以硫酸铁铵NH 4Fe(S04)2·12H 20配制铁标准浴液，则需标定。
7．仪器 分光光度计及l cm 比色皿。
四、实验步骤1.吸收曲线的绘制 用吸量管准确吸取10-4 mo1·L -l 铁标准溶液10 mL ，置于50 mL 容量瓶中，加人10%盐酸羟胺溶液1 mL ，摇匀后加人1mol·L -l 醋酸钠溶液5 mL 和0.1％邻二氮菲溶液3 mL ，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用l cm 比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从430～570 nm ，每隔20 nm 测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。
然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）。
2.测定条件的选择（1）邻二氮菲与铁的配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，在最大吸收波长510 nm处，从加人显色剂后立即测定一次吸光度，经15min，30 min，45 min，60 min后，各测一次吸光度。
以时间（t）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制A－t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。
（2）显色剂浓度的影响取25 mL容量瓶7个，用吸量管准确吸取10-4 mo1·L-1铁标准溶液5 mL于各容量瓶中，加人10％盐酸羟胺溶液1mL摇匀，再加入l mol·L-1醋酸钠5 mL，然后分别加入0.1％邻二氮菲溶液0.3，0.6，1.0，l.5，2.0，3.0和4.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用适宜波长（510 nm），1 cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。
然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A 一V曲线，由曲线上确定显色剂最佳加人量。
（3）溶液酸度对配合物的影响准确吸取10-4 mol·L-l铁标准溶液10 mL，置于100 mL 容量瓶中，加人2 mol·L-1盐酸5 mL和10％盐酸羟胺溶液10 mL，摇匀经2 min后，再加人0.1％邻二氮菲溶液30 mL，以水稀释至刻度，摇匀后备用。
取25 mL容量瓶7个，用吸量管分别准确吸取上述溶液10 mL于各容量瓶中，然后在各个容量瓶中，依次用吸量管准确吸取加人0.4 mol·L-1氢氧化钠溶液l.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0及10.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从小于等于2开始逐步增加至l2以上，测定各溶液的pH值。
先用pH为l～14的广泛试纸确定其粗略pH值，然后进一步用精密pH试纸确定其较准确的pH值（采用pH计测量溶液的pH值，误差较小）。
同时在分光光度计上，用适当的波长（510 nm）l cm比色皿，以水为参比测定各溶液的吸光度。
最后以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A－pH曲线，由曲线上确定最适宜的pH范围。
（4）根据上面条件实验的结果，找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。
3．铁含量的测定（1）标准曲线的绘制取25 mL容量瓶6个，分别准确吸取的10μg·mL-l铁标准溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL于各容量瓶中，各加10％盐酸羟胺溶l mL，摇匀，经2 min后再各加1mol·L-l醋酸钠溶液5 mL和0.1％邻二氮菲溶液3 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上用l cm比色皿，在最大吸收波长（510 nm）处以水为参比测定各溶液的吸光度，以含铁总量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）吸取未知液5 mL，按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。
根据未知液吸光度，在标准曲线上查出未知液相对应铁的量，然后计算试样中微量铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（g·L-1）。
五、数据记录与处理1．记录分光光度计型号，比色皿厚度，绘制吸收曲线和标准曲线；2．计算未知液中铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（g·L-1）。
六、问题与讨论1.三价铁离子溶液在显色前加盐酸羟胺的目的是什么？2.根据自己的实验结果数据，计算在最适宜波长下邻二氮菲与铁配合物的摩尔吸光系数，计算时注意单位换算（实验中所配制溶液的浓度单位为mg·mL-1）。
3.所绘制曲线图均应有结论（即找出最佳值或最佳区间）。
4.注意工作曲线法定量的方式，未知物的定量应用虚线表示。
实验十邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。
在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）2+lgK=21.3，在510nm下，其摩尔吸光系数为1.1104L/moL.cm, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成3兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-本方法的选择性很高。
相当于含铁量40倍的Sn、AI、Ca、Mg、Zn、Si,20倍的Cr、Mn、V、P和5倍的Co、Ni、Cu不干扰测定。
三、试剂与仪器仪器：1．721型分光光度计2．50mL容量瓶8个（4人/组）,100mL1个,500mL1个3．移液管：2 mL1支，10 mL1支4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支试剂：1．铁标准储备溶液100ug/mL：500 mL（实际用100mL）。
准确称取0.4317g铁盐NH4Fe（SO4）12H2O置于烧杯中，加入6moL/LHCI20mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
22．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加入6moL/LHCI2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。
3．HCI6moL/L：100mL（实际用30mL）4．盐酸羟胺10%（新鲜配制）：100mL（实际80mL）5．邻二氮菲溶液0.1%（新鲜配制）：200mL（实际160mL）6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL（实际400mL）：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500 mL7．水样配制（0.4ug/mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL四、实验步骤1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、2.0、4.0 mL分别放入50 mL 容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、2.0 mL0.1%邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。
当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。
然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。
2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL依次放入7只50mL容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入0.1%邻二氮菲溶液2.0 mL及5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。
以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。
3．水样分析：分别加入5.00mL（或10.00mL，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。
求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。
五、思考与讨论1．邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为什么要加入盐酸羟胺溶液？2．吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？。