鹅细小病毒研究进展

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鹅细小病毒感染雏鹅研究

鹅细小病毒感染雏鹅研究禽类MHC对细胞之间的相互作用实行免疫调节，其结构与疾病防控研究密切相关1。

MHC是编码与免疫应答直接相关的一类细胞膜糖蛋白基因群，存有高度多态性，能适合和抵抗绝大多数病原微生物2。

病原体驱动的选择是有利于MHC杂合子，表明MHC基因型和与宿主的抗病性或免疫应答水平密切相关。

MHCⅠ类等位基因与诸多疾病相关，并且复杂性和多态性使个体间的免疫应答有所不同3。

当前主要研究鸡和鸭的MHC，而鹅的MHC研究较少，鹅的MHCⅠ存有高度多态性4，MHCIIβ片段来自不同的MHCIIB基因座5，MHC基因间存有着复杂的功能及协同互作，为此本试验分析GPV感染雏鹅的MHC多态性变异，以期为进一步研究鹅的易感性及抗病机理奠定基础。

1.1试验动物随机选择生长一致、健康的3日龄雏鹅，由青岛农业大学莱阳五龙鹅实验基地提供。

1.2.1雏鹅处理将种毒GPVYZ经口腔接种6日龄的雏鹅，每只接种0.2mL，感染组雏鹅（YZ）。

同时对照组雏鹅（CK）接种等量的生理盐水，连续观察发病症状，分别采集肝脏。

1.2.2制备细胞悬液参照文献6的方法，收集鹅肝脏细胞膜。

1.2.3膜蛋白的提取参照文献7的方法，用TritonX-100抽提膜蛋白，丙酮沉淀，PEG6000浓缩，冷冻真空干燥粗膜蛋白。

1.2.4MHC的分离纯化PBS溶解粗蛋白样品，上样于经同样缓冲液平衡的SephadexG-200柱脱盐，梯度（0～0.6mol/LNaCl，PBS0.02mol/L）洗脱，收集合并活性蛋白部分，再上样于预先用pH值6.3100mmol/LPBS平衡的BioGelP-100凝胶柱纯化，用PBS（pH值6.3，100mmol）洗脱，收集纯化的MHC，冷冻真空干燥。

1.2.5蛋白质含量检测总蛋白含量，参照文献8，以BSA为标准，紫外法检测，总蛋白含量（mg/mL）=1.55×A280-0.76×A260，系数F1=1.115，系数F2=0.76；MHC的含量，参照鹅MHCⅠ/Ⅱ酶联免疫分析试剂盒（上海沪鼎生物科技公司LOT10-45-618）实行测定，λ=450nm。

鹅细小病毒分子生物学研究进展

维普资讯
ＨｉｎａｇＪｕｎｌｆｉｌｅｏ￣ｉｒａｏｍａｌｕｏＡｎ
鹅妇小病毒分子生糟学研究进展～田丽红
Ｓｉｃｎｅｅｎｒｄｉｅ５ｃｎｅａｄＶｔｉａｙＭｅｉｎｌｅｒｃ
一
话毒可以通过ＤＮＡ技术进行突变，其毒力致弱。为达使
到这个目的．首先对与表达毒力相美的基因重组进行定位，然后进行突变或部分地缺失Ｊ。早在２０世纪８０年代中期，该方法就己用于ＤＮＡ病毒的修饰。例如在研究新的ＡＤ疫苗过程中，码晦苷激酶、Ｅ、Ｇ或ｇ编ｇｇｃ的基因就被映失掉了。重组ＤＡ技术最韧只使用于ＤＮ病毒，来开始用于正链ＮＡ后ＲＡ病毒。反遗传学的发展为遗传上修饰负链ＲＮＮＡ开辟了道路，该技术包括利用ＴＲＡ聚合酶对ＣＮＡ编码的基因组ＴＮＤＲＮＡ进行转录，同时用共转染质粒进行表达。目前，利用反遗传学产生了多种感染性病毒，而为安生有效的活Ｒ从ＮＡ病毒疫苗的开发奠定了基础。
毒和伪牲犬病病毒话载体疫苗等的构建。
２４非复制型栽体疫苗
在２０世纪８０年代首先研制了复制载体疫苗，进人２０世纪９０年代以来，使用的载体可感染细胞，但不经历整个复制
周期。禽痘病毒载体在哺乳动物细胞中不产生感染性病毒为此，利用该载体产生的重组病毒可以抗哺乳动物伪狂犬和犬瘟热Ｊ目前麒病毒载体已经发展到了复制缺陷型。例如，。人

新型鹅细小病毒研究进展

新型鹅细小病毒研究进展卞国志1,21，袁建丰2（1.广州 511400）摘要：，MDPV）引起的一种传染病。

经典MDPV和GPV高。

但是2008年下半年以来，福建省、浙江省、安徽省及江苏省等地的雏半番鸭和樱桃谷鸭陆续出现一种新型细小病毒病，该病发病率10%~30%，病死率低于3%，临床症状主要为软脚、短嘴和生长障碍。

通过对该病病原进行全基因组测序及系统发育树分析，结果发现该病原与鹅细小病毒亲缘性很近。

本文通过比较新型鹅细小病毒（Novel goose parvovirus，N-GPV）与经典的MDPV和GPV在基因组、感染宿主范围和致病性的区别，为新型鹅细小病毒病的防控提供理论依据。

关键词：新型鹅细小病毒；鹅细小病毒；番鸭细小病毒中图分类号：S852.659.2 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2019）04-0102-06 PROGRESS OF A NOVEL GOOSE PARVOVIRUS VIRUS BIAN Guo-zhi1,2, MA Hai-bin2, LUO Meng-ping2, GONG Feng-ping2, WANG Gui-ping2,LIAO Ming1, YUAN Jian-feng2(1.Veterinary Medicine College of South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 2.Guang dong Haid Institute of AnimalHusbandry&Veterinary, Guangzhou 511400, China)Abstract:Duck parvovirus disease is caused by Goose parvovirus or Muscovy duck parvovirus. The main clinical signs of classic MDPV and GPV infections are diarrhea, foot soft and exudative enteritis. The morbidity and mortality of Muscovy ducks are high. However a new type duckling parvovirus (N-GPV) emerged in Mule ducks and Cherry Valley ducks in the second half of 2008 in Fujian, Zhejiang, Anhui and Jiangsu provinces. The morbidity of N-GPV was 10-30% and the mortality was generally below 3%. The clinical signs of N-GPV were foot break easily, short beak and dwarfism syndrome. N-GPV caused serious economic loss to the duck industry in our country. The whole genome sequencing and phylogenetic analysis of N-GPV isolates revealed a similarity to goose parvovirus. This review provided the latest information on host range, genomic analysis, pathogenicity and prevention and control of N-GPV.Key words: Novel goose parvovirus; Goose parvovirus; Muscovy duck parvovirus收稿日期：2018-08-16基金项目：国家重点研发计划（2017YFD0500800）；广州市科技计划项目（201704020083）；广东省科技发展专项资金项目(2016B020234006，2017B090904029)；广东省技术开发及产业化类别（2015B020203006）；广州市科技发展专项资金项目重点项目专题(201804020006)；广东省新型研发机构建设--初创期补贴专题作者简介：卞国志，男，博士研究生，预防兽医学专业；马海彬，男，硕士研究生，预防兽医学专业通信作者：袁建丰，E-mail：peteryuanfeng@年分离得到该病的病原体鹅细小病毒（G o o s e parvovirus，GPV）[1]。

鹅常见传染病特点、诊断与防治技术研究

在规模化养鹅场中，传染病是导致鹅死亡的重要因素，会给养殖场带来严重经济损失。

鹅的常见传染病为小鹅瘟、鹅大肠杆菌病、鹅副黏病毒病、鹅浆膜炎、禽流感以及鹅巴氏杆菌病等，在养殖过程中要做好传染病的诊断与防治工作，以避免造成传染病大流行。

一、小鹅瘟小鹅瘟是一种急性病毒性传染病，是对养鹅场影响最大的传染病之一。

小鹅瘟的病原为鹅细小病毒，存在于鹅的内脏器官中，具有较强的抵抗力。

1、流行特点未满30日龄的雏鹅易发生小鹅瘟，当未满20日龄的雏鹅感染小鹅瘟后，死亡率高达50%以上。

小鹅瘟的发病率和死亡率随着雏鹅日龄的增长而降低，症状随之减轻。

小鹅瘟大流行后，当年存活的鹅群产生抗体，能够主动免疫鹅细小病毒，并对次年产出的雏鹅产生被动免疫力。

小鹅瘟的发生与舍内环境、饲养场地卫生情况有着直接关系，当饲养场地出现严重污染时，小鹅瘟的发病程度也会随之加重，且发病日龄越来越小。

小鹅瘟流行具有周期性特点，如果当年发生大流行，则会在次年以及今后几年不会再发生小鹅瘟。

日龄较大的病鹅症状相对较轻，病程不少于7天，主要以腹泻、食欲减退为主要症状。

2、诊断方法小鹅瘟的主要发病群体为不满30日龄的雏鹅，7日龄雏鹅染病后步行艰难，远离群鹅，精神萎靡，腹泻严重，口鼻处流出稀薄液体，颜色为褐色；病鹅肛门粘有稀粪，粪便为黄绿色或黄白色稀薄排泄物；部分雏鹅临死前出现全身抽搐、颈部扭转等症状，从出现症状到死亡一般不超过48h；多剖检几只病鹅后发现小肠肿大，含有灰白色假膜性凝固栓子。

病鹅十二指肠内填充大量黏液，黏液呈黄色。

肝脏、胆囊肿大，心脏颜色较浅。

用病鹅鹅肝做病毒分离试验、中分试验、琼脂扩散试验，可对小鹅瘟作出准确诊断。

3、防治技术（1）预防①当发现已确诊的病鹅后，要将健康鹅与病鹅隔离，彻底消毒饲养环境。

在日常饲养管理，采用0.5%复合酚消毒剂对种蛋入孵前消毒，种蛋消毒时长为15-20分钟。

或者采用福尔马林熏蒸消毒法进行孵化场地消毒，消毒时长控制在1-2小时。

小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测方法的建立

１４ＤＡ模板制备．Ｎ
将毒种用灭菌生理盐水１倍稀释后，Ｏ接
种于９～１日龄鹅胚，胚尿囊腔接种１每０２Ｌ．。接种后封闭针孔，３３． ℃继ｍ置７— ７５续孵育（翻蛋）取９１８不，６— ６ｈ之间死亡的
鹅胚，４Ｃ经￣冷藏６～２１ｈ后收获尿囊液，冷冻保存。分别将两种病毒的尿囊液１０Ｌ，０置沸水中水浴５ｉ，水中冷却３ｉ，ｎ冰ｍｎｍ３０ｒｎ离心２ｍｎ取上清液作为ＰＲ００／ｉｒａ０ｉ，Ｃ
ｄＴ２，１和ＰＮＰＬＰ２各１，板５，模Ｌ
ＴｑＮａＤＡ酶ｌ，ｄＨＯ补足５Ｌ按加ｄ２Ｏ。
以下程序进行ＰＲ扩增：ＰＲ扩增仪中，Ｃ在Ｃ启动热盖功能，下述程序和条件进行ＤＡ按Ｎ扩增：６预变性５ｍｎ９ ℃ 变性４，４Ｉ９℃ ｉ；４０ｓ５ｃ＝退火４，２Ｃ延伸４３５ｓ７￣０ｓ０个循环；２Ｃ延，７ｏ伸１ｍｉ；℃ 保存。将ＰＲ产物各取９，０ｎ４Ｃ分别加入１ＬａｉｇＢｅ０× ｏｄｎｕｒ混合，到ｆ１加ｌ琼脂糖凝胶的点样孔中，另加入％
５ＤＡＭａｋｒＤ２００，８５ｍ电ＮｒｅＬ０以０Ｖ，０Ａ
圈１ＧＶ和ＮＶ￣ＰＲ结果ＰＧＥＣ
Ｍ：ＤＮＡｌｒｅ２００ｎａｋｒＤＩ０
５０ｐ０ｂ２０ｐ５ｂ

小鹅瘟(鹅细小病毒感染)

小鹅瘟(鹅细小病毒感染)小鹅瘟(鹅细小病毒感染)【病因】本病为雏鹅的急性传染病，主要病原体是小鹅瘟病毒，存在于病鹅脑、肝、脾、肠内容物及其他组织中。

主要是通过消化道感染，与病鹅直接接触或接触病鹅的排泄物沾污的饲料和饮水、带病毒的种蛋是传播的主要途径。

【症状】7日龄左右的雏鹅感染后，往往是最急性型，有时不见任何症状即突然死亡，只有半天或1天的病程。

病初精神不振，缩颈，打瞌睡，拒食，但多饮水，排出灰白色或黄绿色稀粪，并混有气泡，气喘流涎，两腿麻痹或抽搐，两脚缩起，半小时即死。

【诊断】主要是1日龄鹅易感，成年鹅不感染。

临床症状表现为严重的下痢和排出灰白色或黄绿色水样稀粪，剖检见肠管膨大，里面含有带状或圆柱状的白色栓子，基本可确诊。

【预防】小鹅瘟主要是通过孵坊传播的，因此孵坊中的一切用具设备，在每次使用后必须清洗消毒。

收购来的种蛋最好用福尔马林熏烟消毒。

刚出壳的雏鹅要注意不与新收进的种蛋和大鹅接触，以防感染。

预防可接种小鹅瘟鸭胚化GD弱毒疫苗。

每只小鹅喂服2粒白胡椒，只用1次，可预防小鹅瘟。

【治疗】方l新鲜鱼腥草适量，捣汁灌服或自饮。

病鹅每只每次1～2毫升，分早、午、晚3次灌服，也可让其随意自饮。

何日远[《中兽医学杂志》介绍，用此方给病鹅每次灌服2毫升，1日3次，连灌2天痊愈，取得100％的治疗效果。

方2马齿苋120克，黄连50克，黄芩80克，黄柏80克，连翘75克，双花85克，白芍70克，地榆90克，栀子70克(200只鹅用量)。

上述药物以水煎煮，药液灌服或拌饲料喂，1日2次，连用3～4天。

治疗效果很好[卢文贵，《中兽医医药杂志》。

方3每10只小鹅，每天用鲜半边莲50～100克，以冷开水捣烂取其汁。

肉豆蔻15～25克、大风藤(入地麝香、过山香)20～30克、砂仁3～5克，如下痢不止或遇寒冷阴雨天可再加肉桂3克、鸡矢藤5～10克，加清水共煎。

取上述两种药液和大米粉混成米浆(或浸米)，饲喂病鹅(7日龄内的小鹅应极少喂或不喂青菜)。

小鹅瘟病毒

小鹅瘟病毒基本介绍鹅细小病毒（Goose Parvoviruse,GPV）是小鹅瘟（Gosling Plague,GP）的病原，1956年我国学者方定一于扬州首次发现并分离到GPV。

GPV属于细小病毒科细小病毒属成员，GPV可引起雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。

1、形态病毒颗粒直径20～25nm。

2、理化特征病毒浓缩：在0.5 M N a C I 的条件下,6 % P E G 能将绝大部份病毒沉降下来。

氯仿处理与P E G 沉淀相结合,可使96.4 % 的杂质蛋白被排除。

层析纯化：病毒经P E G 沉淀和蔗糖密度梯度离心后,再经CsC I平衡密度涕度离心,出现两条沉淀带,主带位于1.3 1 ~ 1.3 5g/ml。

电镜观察发现大量病毒粒子,有空心和实心两种,大小为 2 0 ~2 2 n m。

另一区带极小,密度1.4 2 g / m l左右,但在电镜下未发现病毒粒子。

抵抗力：不能凝集禽类、哺乳动物和人类的红细胞，病毒对外界因素的抵抗力很强，能抵抗乙醚、氯仿、胰蛋白酶、pH3和56℃3h 作用处理。

方定一等先后用SYG61-3和SDG65-1毒株鹅胚绒尿液进行试验，结果经氯仿、乙醚、胰酶、pH3处理的绒尿液试验组接种鹅胚，和未经处理的绒尿液对照接种鹅胚无差异。

证明鹅胚绒尿液中的小鹅瘟病毒能抵抗氯仿、乙醚、胰酶、pH3的作用。

结果经56℃作用3小时，仍然使鹅胚致死，但死亡时间较原来病毒延长至96-120小时；置-7℃冰箱内10个月也使鹅胚致死，但死亡时间延长至96-112小时。

在0℃下用真空抽气干燥的病毒和-7℃真空中贮存10个月的病毒，对鹅胚致死的时间并无差异；置-20℃冰箱2年仍能使鹅胚致死。

3、抗原性抗原分析表明，国内外所有GPV分离株属于同一个血清型，目前研究表明GPV 只有一个血清型。

4、培养特性GPV可在鹅胚、鸭胚上适应和培养。

（1）鹅胚：小鹅瘟病毒存在于病鹅的内脏组织、肠管、脑及血液中。

动物细小病毒致病机制的研究进展

河南农业科学，2018,47(8):6-10Journal of Henan Agricultural Sciences d〇i：10. 15933/ki. 1004-3268.2018.08.002动物细小病毒致病机制的研究进展杨一鸣，姜萌，鄢雨晴，何天琦，董浩！(吉林农业大学生命科学学院，吉林长春130118)摘要：因动物细小病毒的高危害性、高传染性，使其得到越来越多的关注与研R%为了给诊断技术、疫苗预防的研究提供借鉴，对猪细小病毒、犬细小病毒、猫细小病毒和鵝细小病毒从病原学、分子生物学特征方面进行介绍，并对4种动物细小病毒致病机制进行综述。

关键词：细小病毒；致病机制；猪；犬；猫；鵝中图分类号％ S852.65 文献标志码：A文章编号％1004 -3268(2018)08 -0006 -05Research Progress in the Patliogenesis of Animal ParvovirusYANG Yiming，JIANG Meng，YAN Yuqing，HE Tianqi，DONG Hao!(College of Life S c ience，Jilin Agricultural University，C h a n g c h u n 130118，China)Abstract%Due to the high harmfulness and the high contagiousness of animal parvovirus，its biology and etiology h ad been studied extensively.To provi(de references for the research of diagnostictechniques and vaccines，the c haracteristics of molecular biology and etiology of parvovirus from pig，canine，cat，and goose were discussed in this paper，and the patiiogenic mechanisms were reviewed.Key words%Parvovirus;Patiiogenic mechanism；Pig;Canine;Cat；Goose细小病毒是一类目前发现存在于自然界中形态最小的动物病毒，该病毒表面无囊膜，由正二十面体的衣壳包裹[1]。

鹅细小病毒基因组与致病机制研究进展

解释这些现象，需要基于病毒反向遗传学与高通量
ＧＰＶ只引起雏鹅和雏番鸭发病，猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）仅引起猪发病；而另一些病毒却引起一类动物发病，如禽腺病毒（ＦＡＶ）可引起禽类动物发病，口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）￣Ｉ起偶蹄动物发病。疾病的发生
的流行形式也发生了新的转变，易感群的发病日龄
些因素的不同组合，同时表型和基因型之间并不遵循经典的盂德尔遗传学规律。
对某种生物性病原的易感或非易感是由动物种属的遗传性决定的，受基因组和基因表达的调控。
依据，也为当归苁蓉汤的进一步研究奠定了基础。
参考文献：
… １中冈兽药典委员会．中华人民共和同兽药典，中药卷［Ｍ］．北京：巾国农业出版丰＿卜２０１０：９８ — ９９．［２］袁久荣，容蓉，杨东．当归饮片挥发油成分的研究ｌＪ缺陷的差别本质是兽医领域
一
逐渐增大，呈现无规律的散发性流行，用传统方法难以确诊此类带病个体。全基因组关联研究发现了数百种与复杂疾病相关的基因突变，但这些突变大部分对增加患病风险的贡献都非常小，其大部分的遗传性无法检测到 …。因为影响较小的大量变异体尚
收稿日期：２０１２ — １０－２９基金项目：Ｉｎ东省自然科学基金（ＺＲ２０１１ＣＭ００８１；青岛市科技发展计划（１２ — １ — ４ — ５一（２）－ｊｃｈ）作者简介：朱峰伟（１９８６一），男，硕士，从事畜牧兽医ｒ作，Ｅ — ｍａｉｌ：ｘｃｚｈｕ

小鼠抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备

收稿日期：０１０ — １２１ — ８项目（０９２２００）
将抗原与弗氏不完全佐剂进行乳化，行二免及三进免。在取小鼠脾脏细胞进行细胞融合的前３ｄ尾静
１２３融合用骨髓瘤细胞的制备从液氮中取出．．液，于３置７℃、积分数为５Ｃ。养箱中培养。体Ｏ培
（边大学农学院动物医学系，延吉林延吉１３０）３００
摘
要：用杂交瘤技术，纯化的鹅细小病毒（ｏｅｐｒｏｉｓＧＶ）３蛋白免疫Ｂｌ／采用Ｇｏｓａｖｖｒ，ＰＶＰｕａｃ小鼠制ｂ
备单克隆抗体（ｍＡｂ，间接ＥＩＡ方法筛选和有限稀释法进行３次亚克隆后获得一株抗鹅细小病毒）经ＬＳ
１２方法．
ＶＰＬ，３２分子质量分别为８６５．ｕ其中ＶＰ］５、１、７５ｋ，３
为主要结构多肽ｒ引。研究发现ＶＰ３基因是鹅细小
１２１抗原制备．．
鹅细小病毒ＶＰ３基因原核表达
蛋白经亲和层析法进行蛋白纯化。取含１０ｍｇ的融
（ｏｅｐｒｏｉｕ，Ｖ）ＧｏｓａｖｖｒｓＧＰ引起的主要侵害４１龄～ｍｅｉｍ）ＨＴ培养基（ｙｏａｔｈｍｉｉｄ－３ｄｕ、ｈｐｘｎｉｔｙｄｎｍｅｉｎ２ｏ日龄雏鹅和雏番鸭的一种烈性传染病。由于该ｕ）辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠ＩＧ、克隆抗ｎｒ、ｇ单病病程短，播速度快，死率高［，传病１严重危害养鹅体亚类鉴定试剂盒为Ｓｇ公司产品。］ｉｍａ业的发展。ＧＶ结构多肽有３种，ＶＰ、Ｐ、Ｐ即１Ｖ２

鹅细小病毒YBLJ株VP3基因的真核表达

鹅细小病毒YBLJ株VP3基因的真核表达张颖;鲁承;赵文婧;陈海迪;高旭【摘要】为了研究鹅细小病毒(GPV)YBLJ株VP3基因的生物学特性,根据已克隆的GPV YBH株VP3基因序列(GenBank:JN836326),设计并合成一对特异性引物,经PCR扩增、克隆、转化、酶切与亚克隆,构建真核表达载体pcDNA-VP3,将鉴定正确的质粒转染至Vero细胞,经RT-PCR检测VP3基因转录水平,通过间接免疫荧光试验(IFA)观察VP3基因表达水平.结果显示,克隆的VP3基因全长约1 605 bp;构建了真核表达载体pcDNA-VP3,经RT-PCR对转染细胞总RNA扩增得到特异性目的片段,IFA检测显示VP3基因在Vero细胞中获得了稳定表达.本研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2012(033)012【总页数】3页(P23-25)【关键词】鹅细小病毒;VP3基因;真核表达【作者】张颖;鲁承;赵文婧;陈海迪;高旭【作者单位】延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133000【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2鹅细小病毒病是由鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）引起的主要侵害4日龄～20日龄雏鹅的一种病毒性传染病，该病病程短，传染性强，病死率高，给养鹅业造成了严重的危害［1-3］。

该病毒由我国学者方定一于1956年在江苏扬州首次发现。

研究发现VP3基因是GPV核衣壳的主要成分，约占总蛋白含量的80%，具有较高的保守性，能够诱导机体产生中和抗体，是GPV的主要保护性抗原［4-5］。

本研究拟以本课题组前期分离的延边株（YBLJ）鹅细小病毒为毒株，克隆VP3基因和构建真核表达载体，并研究GPV的VP3基因在Vero细胞中表达情况，为进一步研制GPV的VP3基因核酸疫苗奠定基础。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 病毒、菌种 GPV（YBLJ株）为本实验室从延边某养鹅场发生鹅细小病毒病的病死鹅脾脏中分离得到。

小鹅瘟综述

小鹅瘟（Gosling Plague, GP）又称鹅细小病毒病（Goose Parvovirus, GPV），也称德舍氏病，该病主要侵害3～20日龄的雏鹅，也感染雏番鸭，传播快，发病率和死亡率较高，特征表现为水样腹泻，渗出性肠炎，乃至腊肠样栓塞。

雏鹅群感染小鹅瘟后，传播迅速，死亡率高，新疫区往往高达100%。

10日龄以内的雏鹅发病率和死亡率常常高达95%-100%。

10日龄以上者死亡率一般不超过60%,20日龄以上的发病率低，而30日龄以上则极少发病，日龄越小的雏鹅对本病的易感性越高。

目前，世界上许多饲养鹅及番鸭的地区都有本病的发生，以前在我国的南方多发，目前，在我国北方也很猖獗，我国已经有22个省市有本病的流行和发生报道。

该病仍是危害养鹅业最严重的传染病之一，每年都有不同程度的流行，造成严重的经济损失。

近年来在珠江三角洲及其附近地区大面积流行的部分毒株的毒力有所增强，使得所流行的GPV发病日龄、发病死亡率均有增大倾向，严重影响了养鹅行业持续、稳定、健康的发展。

1956年我国学者方定一在我国扬州地区发现本病，并进行首次报道。

在我国首次发现该病毒后，东欧和西欧又有很多国家报道有该病的存在，其中苏联、德国、匈牙利、荷兰、法国、英国、意大利等10个国家均有本病的发生，后证明了这10个国家所分离的病毒具有相似的血清型，美洲至今没有相关的报道。

1961年方定一成功分离到世界第一株鹅细小病毒，1962年方定一又用成年鹅研制出高免血清，1963年研制成功种鹅活疫苗，1980年研制成功雏鹅活疫苗，有效地控制了本病的发生。

1980年，徐为燕等初步确定了该病毒粒子的直径为20nm-25nm。

1985年，郑玉美等测定了病毒的核酸类型，证明该病毒是一种DNA 病毒；并用匈牙利毒株和扬州毒株作交叉中和试验证明二者具有较大的抗原相关性。

1981年，方定一和王永坤报道了该病是由一种细小病毒引起的。

从20世纪60年代到90年代，我国山东、江苏、浙江、广西、广东、安徽、四川、河北、内蒙古、辽宁等省、市、自治区都相继报道过此病的流行，并由试验得出结论：我国的小鹅瘟是由同一种病毒所引起的，与鸭瘟病毒、雏鹅肝炎病毒和新城疫病毒无抗原相关性。

番鸭细小病毒和鹅细小病毒的抗原相关性研究

程晓霞，陈仕龙，陈少莺，等．番鸭细小病毒和鹅细小病毒的抗原相关性研究ＥＪ］．福建农业学报，２０１３，２８（９）：８６９－８７１．
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鹅细小病毒PCR诊断方法的初步建立

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畜牧兽医科技文摘

成：ＯＦ１ｆＯ）ＯＦｒｈＯＦ。ＬＲ编码非结构蛋白ＬＲ（ｔＲＦ和ＲＲ（ｇｔＲ）ＯＦｅｉ农学通报．２１，７１）３～３－０ｌ２（１．ｌ４－（ｏｓｕｔｒｌｒｔｎＳＮ１Ｓ，ＯＦｎｎｔｃｕａｐｏｉ，）Ｓ和Ｎ２ＲＲ编码Ｖ１Ｐ和Ｖ３ｒｅＮＰ、Ｖ２Ｐ为制备抗犬Ｉ型腺病毒单克隆抗体，将犬Ｉ型腺病毒（Ａ —）ＣＶＩ三种结构蛋白。本文针对近年来鹅细小病毒基因组结构特征细胞培养液饱和硫酸铵沉淀，差速离心浓缩，氯化铯密度梯度离的研究进展进行了综述。心的方法纯化后免疫ＢＢｃ￣三免后效价过１ｌＯＯ０ＡＬ／ｄ鼠，：ＯＯ￣可
取脾细胞与Ｓ２０Ｐ／细胞在聚乙二醇（Ｅ）ＰＧ作用下融合，间接通过ＬＳ有制柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因Ｍ２的克隆与表达／０程军ＥＩＡ方法筛选阳性杂交瘤细胞株，限稀释法亚克隆，备单并对制备完成的单克隆抗体进行生物学特性鉴定。（上海师范大学生命与环境科学学院），董辉，郭涛等克隆抗体，获得２能稳定分泌抗ＣＶ— 的单克隆抗体杂交瘤细胞，名株ＡＩ命／中国动物传染病学报．２０，９１６～６／－０１ｌ（）２７－
孢子化卵囊、子孢子以及裂殖子阶段虫体。将该基因克隆于
为表达犬细小病毒Ｖ２白（ＰＶ２，Ｐ蛋ＣＶＰ粒ｐＴ８中，重组质粒ｐＴ８ — ０转化大肠的诊断、疫苗研制和Ｖ２白功能研究，Ｅ２ｂ构建Ｅ２ｂＭ２，Ｐ蛋根据基因库已发表犬Ｐ基对特异引物，以细小病毒杆菌Ｂ２（Ｅ）￣ＩＴ诱导表达获得了重组蛋白，子量约细小病毒序列设计合成了Ｖ２因的１Ｌ１Ｄ３后，ＰＧ分感染的犬粪样品中提取的总ＤＮＡ为模板，行ＰＲ进Ｃ扩增，把扩增约为２ｕ该蛋白以包涵体形式存在，ＰＧ３ｋ，在ＩＴ诱导８ｈ后表达稳定，ｓｒｌｔＷｅｔｂｏｅｎ检测表明，其具有较好的免疫原性。产物克隆至ｐＤｌ一载体进行测序、鉴定。将克隆的Ｖ２凶Ｍ８ＴＰ基片段克隆至原核表达载体ＰＥ一Ｐ１再将构建成功的原核表ＧＸ６一，ＧＸ６ — Ｐ转化至大肠杆菌Ｂ２中，Ｌ１进行鉴定、羊种布氏菌体外药物敏感性分析／姜海（中国疾病预防控达质粒载体ＰＥ一ＰＶ２克Ｐ基７５ｐ与６制中心传染病预防控制所）崔步云，，赵鸿雁等／中国人测序、表达。结果表明，隆的Ｖ２因片段全长１５ｂ，个／Ｖ２Ｐ基因序列的同源性为９．％一９．％。Ｗｅｔｎｂｏｉｇ８７９７ｓｒ— ｌｔｎ分析ｅｔ兽共患病学报．２１，７４．３５２，３０－０ｌ２（）－２～３６３目的了解羊种布氏菌对常用抗生索的耐药情况及耐药机显示，产物约为９ｋ表达０Ｄ的融合蛋白，可被犬细小病毒阳性血清

用鹅胚成纤维细胞系培养小鹅瘟病毒的方法[发明专利]

(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201410710792.1(22)申请日 2014.12.01C12N 7/00(2006.01)C12N 5/073(2010.01)C12R 1/93(2006.01)(71)申请人黑龙江省兽医科学研究所地址161006 黑龙江省齐齐哈尔市建华区西二道街112号(72)发明人刘力威李洪彬黄宇翔张军王志强邹跃杨旭东陈亮(74)专利代理机构大庆知文知识产权代理有限公司 23115代理人梁超(54)发明名称用鹅胚成纤维细胞系培养小鹅瘟病毒的方法(57)摘要用鹅胚成纤维细胞系培养小鹅瘟病毒的方法。

属于兽用生物制品领域。

它解决了现有的小鹅瘟病毒培育方法生产效率较低的问题。

该方法步骤如下：原代细胞培养：取发育良好的鹅胚，经剪成小块并洗涤后消化，经洗涤后吹打分散消化细胞，得到细胞悬液，培养至细胞形成完整单层后，得到原代细胞；鹅胚成纤维细胞系的建立：将鹅胚成纤维原代细胞弃去培养液，洗涤、消化，培养至形成完整单层细胞，得到F1代细胞，可传3代；繁殖与收获：将形成70%单层的F1～F4代细胞接毒，当75%以上细胞出现病变时，收获繁殖病毒。

本发明收获的病毒液量是原代细胞接毒培养量的255倍，较细胞形成100%单层时接毒培养收获的病毒液毒价高10~100倍。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页说明书4页(10)申请公布号CN 104450630 A (43)申请公布日2015.03.25C N 104450630A1.用鹅胚成纤维细胞系培养小鹅瘟病毒的方法，其特征在于：该方法的具体步骤如下：（一）鹅胚成纤维原代细胞的培养：取12日龄发育良好的鹅胚，用碘酒棉及酒精棉对蛋壳气室部位消毒，无菌取出鹅胚，去头四肢和内脏，放入灭菌的玻璃平皿内，用DMEM溶液洗涤胚体三次，用灭菌的剪刀剪成米粒大的小组织块，再用DMEM溶液洗2次，然后加入0.25%胰酶溶液（每个鹅胚加3~5ml），在37.5℃水浴中消化5~10min，吸出胰酶溶液，用DMEM溶液洗涤2次，然后加入含8%犊牛血清、pH值7.0~7.5的DMEM溶液吹打分散消化细胞，过滤后得到每毫升含活细胞数100~150万的细胞悬液，分装于培养瓶中，37℃恒温静止培养，细胞形成完整单层后，得到鹅胚成纤维原代细胞；（二）鹅胚成纤维细胞系的建立：将步骤（一）中得到的鹅胚成纤维原代细胞弃去培养液，加入PBS缓冲液洗涤2次，吸出洗液，然后加入0.25%胰酶溶液，37.5℃培养消化3~5min，当单层细胞拉空、边缘脱离瓶壁时，吸出消化液，加入营养液并吹打分散消化细胞；按80~100万/ml的细胞浓度加入营养液，分装于培养瓶中培养，37℃恒温静止培养至形成完整单层细胞，即得到F1代细胞；然后将F1代细胞继续传代培养，可传3代，得到F1~F4代细胞；所述的营养液为含8%犊牛血清、pH值7.0~7.5的DMEM溶液；（三）小鹅瘟病毒的繁殖与收获：步骤（二）培养的鹅胚成纤维细胞F1～F4代用于病毒繁殖，将形成70%单层的F1～F4代细胞弃去培养液，按1ml/中方瓶的接种量接入小鹅瘟病毒毒种，37℃吸附培养1h，然后弃去病毒吸附液，10ml/中方瓶的量加入营养液，37℃恒温静止培养72~96小时，当75%以上细胞出现病变时，收获繁殖病毒，将病毒培养瓶反复冻融三次，无菌收集细胞培养液；所述的营养液为含8%犊牛血清、pH值7.0~7.5的DMEM溶液。

我国部分地区规模化鹅场五种重要病毒病的流行病学调查

我国部分地区规模化鹅场五种重要病毒病的流行病学调查我国是世界养鹅大国,鹅的存栏量和出栏量一直稳居世界第一位。

但是随着我国养鹅业的不断发展,鹅的饲养密度不断增大,发病率逐年增多,特别是小鹅瘟、禽流感、新城疫、坦布苏病毒感染和鹅圆环病毒感染等,它们单一感染或共感染,造成鹅的发病、死亡或生产性能降低,给养鹅业造成了巨大的经济损失。

1、建立针对鹅病毒病的快速检测方法是进行流行病学调查的重要前提。

本研究根据H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)的HA基因、新城疫病毒的HN基因和坦布苏病毒的NS3基因的保守序列,设计合成3对特异性引物；采用Tizol法提取H9-AIV、NDV和TMUV的RNA并反转录为cDNA,混合后作为PCR体系模板。

在普通PCR方法的基础上,通过对退火温度、ExTaq DNA聚合酶、Buffer浓度、2.5mmol/L dNTP浓度、引物浓度比等反应体系及条件进行优化,建立同时扩增H9-AIV (560bp)、NDV (427 bp)和TMUV (277 bp)的多重RT-PCR方法。

经特异性、敏感性及临床验证性试验,结果表明：在同一RT-PCR反应体系中可以同时检测到这3种病毒,而对鹅呼肠孤病毒、鹅细小病毒、鸭呼肠孤病毒的检测均为阴性；H9-AIV、NDV和TMUV的最低检出限分别为5.8×105个拷贝、7.2x105个拷贝和4.6x105个拷贝。

利用该方法对临床阳性样品进行检测验证,结果均一致。

证明建立的多重RT-PCR方法可对H9-AIV、NDV和TMUV同时进行检测,具有简便快速、特异性好、灵敏度高、实用性强的特点,可为鹅群这三种疾病的检测和诊断提供快速准确的方法,便于及时有效的采取防控措施,减少养鹅业的损失。

2、为了解小鹅瘟、H9亚型禽流感、新城疫、坦布苏病毒感染和鹅圆环病毒感染等重要鹅病毒病在我国的流行情况,本研究于2014-2015年间在我国11个主要养鹅省份的规模化鹅场,采集临床上发病鹅的病料478羽份,应用建立的针对H9-AIV、NDV和TMUV多重RT-PCR检测方法进行H9-AIV、NDV和TMUV的检测；应用建立的针对GPV和GoCV的普通PCR检测方法进行鹅细小病毒和鹅圆环病毒的检测；并对检测结果进行统计分析。

小鹅瘟的流行病学、临床特征、药物治疗和免疫预防

doi：10.19369/ki.2095—9737.2021.01.080小鹅瘟的流行病学、临床特征、药物治疗和免疫预防郭静（黑龙江省伊春市农业农村局动物疫病预防控制中心，黑龙江伊春153000）摘要：小鹅瘟也叫做鹅细小病毒感染，是由于感染小鹅瘟病毒而发生的一种急性或者亚急性败血性传染病,主要危害雏鹅和雏番鸭。

该病的主要特征是快速传播、感染率高、死亡率高，病鹅表现出严重下痢、渗出性肠炎以及肠道内出现腊肠样的栓子。

通常是4〜20日龄的雏鹅易发,成年鹅在自然感染情况下往往呈隐性感染，但能够经由种蛋和粪尿传播+该病是当前危害鹅的一种主要疾病，严重影响养鹅业的发展。

关键词：小鹅瘟；流行病学；临床症状；剖检变化；药物治疗；免疫预防；饲养管理中图分类号：S85&33文献标识码:B11.1病原小鹅瘟病毒属于细小病毒，呈六角形，直径大约为20nm,外壳没有囊膜。

该病毒与哺乳动物的细小病毒不同，其对红细胞没有凝集作用。

细胞感染病毒后，可在细胞内大量繁殖，在宿主细胞发生破裂后即可释放病毒，并侵入血液，再通过血液循环来感染其他细胞。

一般来说，病鹅的血液、内脏组织、肠道以及神经组织中都存在病毒+该病毒具有非常强的抵抗外界环境的能力，如果进行低温巴氏消毒至少需要3〜4h才可将其杀死;另外，该病毒耐酸但不耐碱，使用胰酶无法对其造成破坏；此外，由于病毒没有囊膜，对有机溶剂（如乙醞等）不敏感+1.2感主要是小于3周龄的雏鹅易感，且随着年龄的增大易感性逐渐降低。

越小日龄有越高的发病率及病死率，其中7日龄可高达100%,10〜20日龄大约为60%+1.3传染源及传播途径该病的主要传播源是病鹅和带毒鹅。

该病主要经过直接或者间接接触病鹅的分泌物、排泄物及其污染的饮水、饲料、育雏用具以及孵化房等进行传播。

另外，种鹅感染后，病毒可通过垂直传播导致幼鹅被感染+文章编号：2095—9737（2021）01—0147—021.4病该病全年任何季节都能够发生，但由于我国北方和南方地区养鹅季节和饲养方式有所不同，导致其呈季节性流行，且呈现周期性。

感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究的开题报告

感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究的开题报告
题目：感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究
摘要：鹅细小病毒是一种引起雏鹅高死亡率的病原体，其感染会导致雏鹅的呼吸道、消化道、中枢神经系统等器官受到损害，严重影响其生长和发育。

本研究旨在探
讨鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化及其发生机制，为该病的防治提供理论依据和实
验基础。

研究内容：本研究计划选取一定数量的健康雏鹅和感染鹅细小病毒的雏鹅，观察并比较它们的病理学变化。

具体研究内容如下：
1.采集标本：收集健康雏鹅和感染鹅细小病毒的雏鹅的组织标本，包括肝脏、脾脏、肺、肠、脑等。

2.病理学检查：对收集到的组织标本进行病理学检查，观察各器官在感染后是否有炎症、水肿、坏死等病理变化。

同时，应对比健康雏鹅和感染雏鹅的病理学变化，
分析感染鹅细小病毒对雏鹅各器官的影响。

3.分子检测：通过PCR法检测感染鹅细小病毒的雏鹅组织标本中是否存在该病毒。

4.病理学变化机制研究：结合病理学检查和分子检测结果，分析鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化机制，探讨该病毒对雏鹅器官的损害机理。

预期结果：通过本研究，预计可以得到以下结果：
1.明确鹅细小病毒对感染雏鹅各器官的具体损害情况；
2.探讨鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化机制，为该病的防治提供理论依据和实验基础；
3.为鹅细小病毒的防治提供理论依据和实验基础。

关键词：鹅细小病毒；雏鹅；病理学；感染；发生机制。

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ＧＰＶ的卯１基因的核苷酸序列的相似性为８７％，
而位于ＶＰｌ基因上的ＶＰ２至ＶＰ３基因起始密码子之间的核苷酸序列的差异较大，相似性仅为６４％；而ＭＤＰＶ株和ＧＰＶ株与各地方毒株的ＶＰｌ
和忡３基因核苷酸差异较小；宋永峰等（２００９）扩增
ＧＰＶ
ＺＱ株ＶＰ２全基因并进行了序列测定，结果表
明ＺＱ株ＶＰ２基因为１７６４ｂｐ，编码５８７个氨摹酸，其基因序列与其他参考毒株同源性在８９．１％～９９．３％之间，差异较大；与番鸭细小病毒参考毒株同源性在９２．０％＂－－－９２．５％之间，在基因水平上解释了ＧＰＶ与ＭＤＰＶ在血清学上存在交叉反应的原因。
０ｌ，２００１，１４６（６）：１１９７～１２１１．
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ＧＰＶ分子生物学研究ＧＰＶ全基因组由５１０６个核苷酸组成，包括左、
右两个开放阅读框，其间隔１８个碱基。左侧开放阅读框编码两个非结构蛋白（即ＮＳｌ和ＮＳ２），在病毒复制早期产生，也称ＲｅＰ蛋白。ＮＳｌ基因蛋白能够与ＡＴＰ结合，具有ＡＴＰａｓｅ活性、解旋酶活性，参与ＧＰＶ病毒ＤＮＡ复制、病毒基冈表达及对细胞具有专一性作用；ＮＳ２可能与病毒ＤＮＡ和蛋白的有效合成及病毒增殖有关。孔宪刚等（２００５）发现中国分离株ＨＧ５／８２与国内外其他鹅细小病毒株相比，其ＮＳ基因表现出较高的相似性，并具有相同的分子特征。右侧阅读框编码ＶＰｌ、ＶＰ２和ＶＰ３三种结构蛋白，其中衣壳蛋白ＶＰｌ和ＶＰ３的起始密码子为二个比较常见的ＡＴＧ起始密码（Ｚｄｄｏｒｉ等，２００１）。胡晓静等（２００８）发现ＧＰＶ的ＶＰ２基因是由不典型的起始密码子ＡＣＧ起始的，而且各ＧＰＶ病毒株均是由该密码子起始的，具有高度的保守性，在ＧＰＶ的进化中扮演着十分重要的角色。马波等（２０１０）构建了ＧＰＶＨ１株ＶＰｌ基因原核表达载体ｐＧＥＸ－６Ｐ—ＶＰｌ，获得了１０８ｋｕ的融合蛋白，该融合蛋白可与ＧＰＶ阳性血清发生特异性反应，具有良好的抗原性。季芳等（２００４）研究结果表明，ＭＤＰＶ和
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ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００１１，Ｃｈｉｎａ）
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（７）：１８１５～１８２４．
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卯３基因是病毒的主要衣壳蛋白，约占总蛋白含量
的８０％。毕玉海等（２００７）根据ＧＰＶＢ株全基因序列对ＧＰＶ
ＧＤ－０１株的＂３基因进行扩增、测序分
布日额等（２００９）应用ＧＰＶ卯３基因以外的
ＶＰｌ－ＶＰ３基因片段原核表达多肽作为检测抗原，建立了鉴别ＧＰＶ全病毒抗体及ＶＰ３亚单位抗体的Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ方法，检测ＧＰＶ血清抗体的阳性率为
ｐｌａｇｕｅ，ＧＰ）的病原体，由于其传播快、病死
率高，引起国内外学者的广泛重视。自１９６１年中国学者方定一首次发现并分离到ＧＰＶ后，亚洲其他国家和欧洲也有分离到该病毒的报道（Ｇｏｕｇｈ等，２００５；Ｊａｎｓｓｅｎ等，２００７），使其成为严重危害养鹅业的重要病原之一。
收稿日期：２０１０—１１—２２作者简介：马磊（１９８３一）。男。河北人，硕士生，主要从事分子生物学与免疫学研究。通信作者：胡桂学（１９６３一），男，博士，教授，主要从事动物病毒学研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｕｇｕｉｘｕｅ９０１１０３＠１６３．ｃｏｒｎ基金项目：吉林省科技厅发展计划项目（２００４０２０６—２—２）。
析并进行了原核表达，结果发现ＧＰＶ的ＶＰ３基因具有较高的遗传稳定性，其表达产物能与鼠抗ＧＰＶ阳性血清反应。孔宪刚等（２００５）研究结果表明，中
万方数据
中国畜牧兽医
２０１１年第３８卷第６期
疾病防治
・１６７・
１００％，为ＧＰＶＶＰ３基因工程疫苗的成功应用和推广提供了可靠的技术支撑。刘家森等（２００７）和鲜思美等（２００９）分别建立了鉴别番鸭细小病毒与鹅细小病毒ＰＣＲ诊断方法，对ＧＰＶ、ＭＤＰＶ病毒培养物及其核酸进行扩增，结果发现该方法可以有效地区分出ＭＤＰＶ和ＧＰＶ，从而为ＭＤＰＶ和ＧＰＶ的鉴别提供了一种简洁、快速的方法。余兵等（２００２）利用地高辛标记核酸探针，建立了检测病料中ＧＰＶ核酸的斑点杂交法，这在国内甚至国际上尚属首次。该法较上述常规的血清学方法快速、敏感，其灵敏度可达３ｐｇ，从而又为小鹅瘟的诊断提供了一种新而更有效的方法。付薇等（２００８）采用ＳＹＢＲ
７
ＭａｈｅＤ，ＢｌａｎｃｈａｒｄＯＲＦ２
ｐｒｏｔｅｉｎ
ＰｔＴｒｕｏｎｇＣ，ｅｔｔｙｐｅ１ａｎｄｔｙｐｅ
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ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ［Ｊ］．ＡｒｃｈＶｉｒｏｌ，１９８６，９１：２７１～２７６．
万方数据
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疾病防治
中国畜牧兽医
２０１１年第３８卷第６期
便和泪腺排泄物将病毒排出体外，成为该病毒的主要传播途径，其主要通过消化道感染。ＧＰＶ不与本属其它病毒呈交叉血清学反应，而且国内外所有ＧＰＶ分离株仅有一个血清型（刘洪雨等，２００５）。
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国分离株ＨＧＳ／８２株与国内外鹅细小病毒ＶＰ３基因有较高相似性，并认为这是目前ＧＰＶ只有一个血清型的分子基础，为基因Ｔ程苗的研制提供了可行性。张云等（２００８）发现鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因（ＮＳ）全长为１８８４ｂｐ，编码６２７个氨基酸；结构摹因（ＶＰ）全长为２１９９ｂｐ，编码７３２个氨基酸；鹅细小病毒和番鸭细小病毒ＮＳ之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为８０．９％～８２．９％和８９．５％～９１．２％，而鹅细小病毒间为９３．７％～９９．８％和９６．８％～９９．７％，番鸭细小病毒间为９８．８％～９９．８％和９８．６％～９９．５％；鹅细小病毒和番鸭细小病毒ＶＰｌ之间核苷酸和氨基酸同源性分别为７９．７％～８８．７％和８５．５％～９３．３％，而相应的鹅细小病毒问为８８．８％～９９．６％和９１．５％～９９．２％，番鸭细小病毒间为９８．１％～９９．６％和９７．１％～９８．８％；由此可知鹅细小病毒和番鸭来自共同的祖先，但随着宿主的不同而演化为不同的分支。２检测技术研究进展目前，ＧＰＶ的检测方法很多，包括琼脂扩散试验、免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩｓＡ）、电镜技术、ＰＣＲ技术、免疫酶扩散试验、免疫组织化学技术等，但是近年来ＧＰＶ检测技术有了新的发展。布日额等（２００６）首次应用ＧＰＶ的ＶＰ３基因重组原核表达产物建立检测ＧＰＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ方法，为进行ＧＰＶ准确、快速的检测及ＧＰＶ全毒苗免疫抗体的检测及流行病学调查提供了有效地方法。周春宇等（２００６）制备了兔抗ＧＰＶ多克隆抗体，以人工感染ＧＰＶ的四川Ｉ白鹅无母源抗体雏鹅为材料，建立了检测鹅细小病毒的间接免疫酶组织化学法，结果发现人工感染ＧＰＶ雏鹅死亡后，肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠、盲肠、空肠和回肠免疫组化呈阳性或强阳性，为ＧＰＶ感染的临床诊断、感染雏鹅体内的ＧＰＶ抗原定位和动态分布提供一种试验检测手段。该法具有特异、直观、敏感的特点，在人类肿瘤等检测中得到了广泛使用。邹叔和等（２００２）报道了ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法具有较高的特异性和敏感性，可用于小鹅瘟病毒的定性和定量分析，为以后小鹅瘟的疫情监测、疗效检查和流行病学的调查等提供了依据。