超声波作用下提取大豆蛋白肽及其抗氧化研究
超声辅助酶解高温豆粕制糖肽技术研究与构效分析
超声辅助酶解高温豆粕制糖肽技术研究与构效分析高温豆粕作为大豆提油后的副产物,其蛋白质含量高达40~45%,是一种高性价比的大宗植物蛋白资源,然而高温豆粕在生产过程中由于经过高温长时处理,豆粕中的蛋白质发生高度变性,其溶解度仅是12~15%,蛋白质提取率较低,导致应用范围较窄,加工工序复杂,成本高,严重降低了高温豆粕深加工产品的开发及其使用价值,限制其在食品加工领域的应用。
本文采用超声波复合酶制剂处理高温豆粕,依次利用乙醇沉淀、DEAE-Cellulose52离子交换层析、Sephadxe G-25凝胶色谱层析分离纯化,制备高温豆粕水溶性糖肽,探究高温豆粕糖肽理化特性和构效分析,拓展了高温豆粕资源的利用价值,增强高温豆粕的高附加值,丰富活性糖肽的种类和功能,富有理论和现实意义。
主要研究结果如下:(1)超声波-纤维素酶处理高温豆粕技术研究超声波同步纤维素酶酶解,在超声功率300 W,超声时间20 min,底物浓度8.36%、纤维素酶添加量646 U/g、酶解pH值为4.1时,可溶性多肽含量为18.51±0.36%,可溶性多糖含量为10.83±0.32%。
(2)碱性蛋白酶酶解技术研究蛋白酶添加量61200 U、酶解pH 9、酶解时间3 h、酶解温度56.4°C,可溶性多肽含量为25.47±0.81%,可溶性多糖含量为13.22±0.49%。
(3)高温豆粕糖肽提取工艺采用无水乙醇(加入量为75%V/V)沉淀粗品糖肽,透析、浓缩,利用DEAE-Cellulose52离子交换层析分离、纯化三种成分:糖肽a1、糖肽a2、糖肽a3,并对三种成分进行抗氧化活性检测,选择具有抗氧化能力较强的糖肽a2进一步分离纯化;采用Sephadex G-25凝胶色谱层析分离、纯化后获得筛选具有糖肽a2b1、糖肽a2b2进行抗氧化活性检测,糖肽a2b1为本研究所提取的具有抗氧化功能的水溶性高温豆粕糖肽。
大豆肽营养功能及脱苦方法研究进展
粮食与油脂42 2009年第4期大豆肽营养功能及脱苦方法研究进展姜 曼,宋俊梅(山东轻工业学院食品与生物工程学院, 山东济南 250353)摘 要:大豆肽系由大豆蛋白经水解所得,由3~6个氨基酸残基组成,分子量以低于1000 D a为主低分子肽混合物;大豆肽生产和应用前景广阔,市场潜力巨大。
该文论述大豆肽营养功能特性及脱苦方法研究进展,并对其发展趋势进行分析。
关键词:大豆肽;大豆蛋白;肽脱苦Research progress on nutritional function and debitteringmethod of soybean peptidesJIANG Man,SONG Jun-mei(College of Food and Bioengineering,Shandong Institute of Light Industry,Jinan 250353,China)Abstract:Soybean peptides is the hydrolysate of soy protein and a mix of low peptides which composes of three to six residences. I ts molecular weight is below 1000 D a. A t present,the production and application of soybean peptides has capacious foreground and the mar k etable potential is enormous.I n this paper,nutritional function and debittering method of soybean peptides are reviewed. B esides,thedevelopment trend of soybean peptides is analyzed.Key words:soybean peptides;soybean protein;peptide debittering method中图分类号:TS201.2+1 文献标识码:A 文章编号:1008―9578(2009)04―0042―03大豆肽系由大豆蛋白经水解所得,由3~6个氨基酸组成低分子肽。
有关大豆多肽的开发价值研究
析 了大 豆 多 肽所 具 备特 性 下 的开 发 价值 ;最后 ,对 今后 相 关 的研 不大 。大 豆多肽 这种稳 定 的吸水性 能 ,可 用于 面包 、糕 点等
究进 行 展望 。
食 品的加工 中,对 于保 持食 品的松软性有着重要的作用 。
3 . 2 大豆多肽的抗氧化性开发价值 当下 ,有关大 豆多肽 的抗氧化研究也有所突破 。有关学者
农业开发 与装 备
2 0 1 3 年第2 期
产 业 开 发
有 关大豆多肽 的开发价值研 究
王 辉
( 辽 宁省鞍 山市 千 山 区达 道 湾镇 政 府 ,辽 宁鞍 山 1 1 4 0 0 0 )
摘要 :大 豆 多肽 是 大豆 蛋 白质 经 过水 解 后 的产 物 ,其 氨 基 酸 的构 要是集 中在它 的开发价值上 ,而 不在 于它的生物体价值 。 成 与 大 豆 蛋 白基 本 相 同 ,但 是 ,被 水 解 后 的 大 豆 蛋 白却 具 备 了 高 溶解 性 、 低渗 透 压 、抗 氧化 性 、 易吸 水 性等 优 与大 豆 蛋 白的性
大豆 多肽 的渗透压较低 ,一般是介于大豆 蛋白质和 同一组 大豆 多肽 的氨基酸构成与大豆蛋 白质 是完 全相 同的 ,与大 豆 蛋 白质 有着 同样 的营养 价值 ,而且 它较ห้องสมุดไป่ตู้ 豆蛋 白质更 易于 成 的氨基 酸之 间 。当人体 内体液 的渗透 压高 于所要 吸收营养 人 体 的消化和 吸收 。 同时,据相 关 的研 究表 明 :低 分子含 量 液 的渗透 压 时,就会 出现 周边细 胞组织 水分 向肠 胃流 动 的现 的大豆 多肽还 具备 了方便 、治病 ,强 身健体 的功 能 。总的来 象 , 从 而 导 致 营 养 吸 收 的 恶 化 , 由此 而 引 发 的 腹 泻 就 是 这 个 物 体价值 。 说 ,大 豆多肽 蕴含 了丰 富的营养 成分 ,具备 了极其 丰 富的生 原因 。通 常来 说 ,氨 基酸 较人体 体液 的渗透压 要高 ,如果 单 纯 以氨 基酸 为 口服 容易 出现腹泻 的状况 。鉴 于此 ,多 以大 豆 2 . 1 大豆 多肽 的降压保健功 能 多肽来 替代氨 基酸 ,作 为 口服和 营养 液的蛋 白质源 ,这样 见 在人 体 的血 压 调节 中 ,A C E( 血 管紧 张转 化 酶 )发挥 着 效会 比较快 。 . 4 大豆 多肽 的高溶解 性开发价 值 重要 的作用 ,它 能够促使 血管 紧张素 I 水 解产生 血管 紧张素 3 I I 。而血管 紧张 素 I I 能够 促使 血管积 极收 缩 ,进 而使 血压增 大豆 多肽 具有 高溶解 性 ,与大豆 蛋 白相 比,大豆 蛋 白在 . 2 ~4 . 5 p H 值时就会 出现 沉淀 ,而这个 时候 大豆 多肽 却显示 高 。经过 酶水解 的大 豆多肽能够有 效地 阻止A C E 酶催化血管 紧 4 出较 好 的溶 解性 。 同时,大豆 多肽 的这种 高溶解 性 ,还 体现 张素 I 水 解 产 生血 管紧 张素 I I ,从而防止了血压的升高 。 在高 温下 的不凝 胶 ,特 别是在 酸性条 件下 常被作 为大豆 蛋 白 2 . 2 大豆多肽的促吸收功能 补充 剂 ,从而拓 宽 了其 在食 品开发 中 的范 围 。另 一方面 ,大 相关研 究表 明,人类摄食的蛋 白质多数是在肠 胃中,经过 豆 多肽还有 抑制 蛋 白质 凝胶 形成 的作用 ,可 以用 来调整 食 品 消化 酶水解 生成 肽而 被吸收 。 同时在合成 肽 的实验研 究 中, 氨基 酸 的吸收 明显是 要低于 二肽和 三肽 的吸 收速度 。在 白 鼠 的硬 度和 口感 。 比如 在火腿 中添加 大豆 多肽 ,可 以防 止肌 肉 强制喂食 蛋 白质 的实验 中,也发 现大豆 多肽 的被吸 收速率 明 蛋 白的凝 固,保持火腿 的 口感,
超声对蛋白提取的影响
超声对蛋白提取的影响
1. 破碎细胞:超声的机械振动可以破坏细胞膜和细胞壁,有助于释放细胞内的蛋白质。
2. 增加溶解度:超声产生的空化作用可以帮助打破蛋白质与其他物质的结合,提高蛋白质在溶剂中的溶解度。
3. 促进提取效率:超声可以加速溶剂与蛋白质的相互作用,缩短提取时间并提高提取效率。
4. 减少酶活性:超声可能会导致一些酶失活,从而减少蛋白质的降解。
5. 影响蛋白结构:高强度的超声处理可能会对蛋白质的结构产生影响,例如导致变性或降解。
然而,超声处理对蛋白提取的具体影响取决于多种因素,如超声的参数 频率、功率、时间等)、溶剂的性质、蛋白质的特性以及提取的具体条件。
在进行超声处理时,需要进行适当的实验优化,以确保最佳的提取效果。
超声处理可能也会对一些蛋白质产生不利影响,例如导致蛋白质的变性或活性丧失。
因此,在进行蛋白提取时,需要根据蛋白质的性质和提取的要求,选择合适的超声条件,并结合其他提取方法,以获得最佳的提取结果。
大豆多肽用途
大豆多肽用途大豆多肽是由大豆中提取的一种特殊蛋白质分子,其氨基酸序列相对较短,分子量较小,具有许多独特的生理功能和保健作用。
下面将详细介绍大豆多肽的用途。
1. 抗氧化大豆多肽具有较强的抗氧化活性,可以清除自由基和抑制氧化反应。
自由基会对细胞和组织产生损害,导致许多慢性疾病的发生,如心脑血管疾病、癌症等。
大豆多肽的抗氧化作用能够有效地保护细胞免受自由基的伤害,提高机体免疫功能。
2. 抗肿瘤作用大豆多肽可以抑制肿瘤细胞的生长和转移,并诱导肿瘤细胞凋亡。
研究发现,大豆多肽可以通过调节细胞周期、抑制血管生成、调节肿瘤相关基因等多种途径抑制肿瘤的生长和扩散。
因此,大豆多肽具有潜在的抗癌作用。
3. 调节血脂大豆多肽可以降低血液中的胆固醇和三酰甘油水平,减少低密度脂蛋白胆固醇的氧化和沉积,提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。
这些作用可以预防和改善心脑血管疾病,保护血管壁的健康。
4. 促进钙吸收大豆多肽中含有丰富的天然钙结合剂,能够与食物中的钙离子结合,增强钙的吸收和利用。
这有益于骨骼的生长和发育,预防骨质疏松症和骨折的发生。
5. 降血压大豆多肽具有一定的降血压作用,可以通过抑制血管紧张素转换酶的活性,促进一氧化氮的产生,扩张血管,降低血压。
而且,大豆多肽还有舒张平滑肌、增加尿量等作用,对肾脏有一定的保护作用。
6. 抗糖尿病作用大豆多肽能够促进胰岛素的分泌和利用,降低血糖水平,提高胰岛β细胞的功能。
此外,大豆多肽还能够抑制糖化反应和糖化终产物的生成,减少糖尿病合并症的发生。
7. 改善睡眠质量大豆多肽中含有丰富的谷氨酸和甘氨酸,这些氨基酸可以促进脑内谷氨酸能和甘氨酸能的合成,增加GABA的水平,从而提高睡眠质量,缓解失眠和焦虑。
8. 保护肝脏大豆多肽对肝脏有一定的保护作用,能够减轻肝细胞损伤,减少肝脏脂肪堆积,促进肝细胞的再生修复。
大豆多肽还能够抑制肝纤维化和肝硬化的发生。
9. 促进免疫大豆多肽可以调节免疫系统的功能,增强机体的免疫力。
抗氧化肽的研究进展
1.1生物体内具有许多蛋白质类抗氧化活性物质。
随着对蛋白酶解技术的深入研究,人们发现,介于蛋白质和氨基酸间的肽类,与其他生物分子如氨基酸、大分子蛋白质等相比较在食品方面安全性更高,且具有极强的活性和多样性,动植物蛋白水解所得的具有一定生理活性的功能性多肽及寡肽产品被广泛开发利用,如具有抑制血压升高的食品,及有特殊氨基酸组成的、可以作为患者营养补剂的寡肽等。
随着人们发现某些蛋白质具有清除生物体内过量的游离基,抑制脂质氧化的作用后,肽的抗氧化性的研究成为一大热点。
目前对以多种动植物蛋白为原料,制备高效、低毒的天然抗氧化肽的研究,已经取得的一定的成果。
1.1.1抗氧化肽的种类人们对抗氧化肽研究的种类有很多,常见的有大豆肽、乳蛋白肽和肌肽,也有一些特殊的蛋白肽,如苜蓿叶蛋白肽等。
有些活性肽是直接提取的,也有通过蛋白水解方法获得的。
1.1大豆肽大豆肽是大豆蛋白水解得到的小肽Wendee Chiang 等采用酶膜反应器连续生产大豆多肽,由于及时分离了酶解生成的多肽,消除了产物反馈干扰,提高了酶解效率,并采用氧化稳定指数(OSI检测了大豆分离蛋白及其水解物的抗氧化活性,结果显示大豆分离蛋白酶解后抗氧化活性明显提高。
Hua- Mingchen 等采用5种蛋白酶对大豆7S球蛋白进行水解,采用硫酸氰铁法检测了不同水解产物的抗氧化活性,并采用G-25凝胶层析和反相高压液相色谱对水解产物进行分离、提纯,检测不同大豆多肽的抗氧化活性,得到了6个抗氧化肽的氨基酸序列。
1.2乳蛋白肽乳蛋白肽是乳品深加工的理想产品,刘志东等研究乳清分离蛋白(WPI)酶解物对自由基的清除效果,并证明了木瓜蛋白酶酶解物和胰蛋白酶酶解物对DPPH 自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力和还原能力强于胰凝乳蛋白酶酶解物和胃蛋白酶酶解物。
Sandrine G.Rival 等[1]研究了酪蛋白及酪蛋白水解肽的抗氧化活性,认为酪蛋白本身具有抗氧化活性,并不因脱磷酸作用和水解作用而失去这一活性,并使用酪蛋白及酪蛋白水解肽作为抗氧化剂进行研究。
大豆肽研究进展范文
大豆肽研究进展范文大豆肽是一种由大豆中的蛋白质水解产生的小分子多肽,具有多种生理功能。
大豆肽含有丰富的必需氨基酸,并且具有抗高血压、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。
近年来,大豆肽的研究进展如下。
首先,研究表明大豆肽对高血压有明显的降压作用。
一项针对大豆肽的临床研究显示,长期摄入大豆肽能显著降低高血压患者的血压水平。
大豆肽主要通过抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性,减少血管紧张素Ⅱ的生成,从而降低血压。
此外,大豆肽还能增加一氧化氮的释放,扩张血管,进一步降低血压。
其次,大豆肽具有抗氧化作用。
研究显示,大豆肽可以通过清除自由基、抑制氧化酶的活性等途径,减少氧化应激对细胞的损伤。
大豆肽的抗氧化作用对于预防和治疗氧化应激相关的疾病,如心血管疾病、癌症等有重要的意义。
此外,大豆肽还具有抗菌和抗病毒作用。
研究发现,大豆肽可以抑制多种细菌和病毒的生长,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型流感病毒等具有较强的抑制能力。
这些发现表明,大豆肽在预防和治疗感染性疾病方面具有潜在的应用价值。
此外,大豆肽还具有抗肿瘤作用。
多项研究发现,大豆肽可以通过多种途径抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭,并诱导肿瘤细胞凋亡。
大豆肽还可以增强化疗和放疗的敏感性,降低其对正常细胞的毒性。
这些结果表明,大豆肽可能成为肿瘤治疗的有力辅助药物。
当前,大豆肽的研究热点主要包括制备技术、生理功能机制和应用研究。
制备技术方面,研究人员通过酶解、发酵等方法提高大豆蛋白质的水解率和产豆肽率,并改善大豆肽的稳定性和抗氧化性。
生理功能机制方面,研究人员通过细胞和动物模型研究大豆肽的生物活性和作用机制。
应用研究方面,研究人员将重点放在大豆肽的应用开发上,如开发大豆肽的保健品和药物、研究其在食品中的应用等。
综上所述,大豆肽具有多种生理功能,包括降压、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等。
大豆肽的研究进展主要集中在制备技术、生理功能机制和应用研究三个方面。
未来的研究应进一步深入探究大豆肽的作用机制,并发展更多的应用。
抗氧化活性肽的研究
抗氧化活性肽的研究进展摘要:随着各种生物活性肽的不断发现,其研制开发成为一大热点。
抗氧化活性肽如肌肽、谷胱甘肽、大豆蛋白酶解物等由于低毒、高效等特点,作为天然抗氧化物显示出在医药、食品和饲料行业的应用优势。
对抗氧化活性肽的结构、抗氧化作用以及应用前景进行了综述,以期为抗氧化活性肽的开发研究提供可借鉴的信息。
关键词:抗氧化作用;活性肽;肌肽;谷胱甘肽;大豆蛋白酶解物近年来,由于化学抗氧化添加剂的不安全性,高效、低毒的天然食品抗氧化剂成为目前一大研究热点;同时由于自由基生命科学的发展,具有抗氧化作用的功能性食品和药物也引起了众多学者的关注。
研究发现,肌肽、谷胱甘肽以及大豆肽具有抗氧化作用,并逐渐显示出它们在医药、食品、饲料等领域应用的优势。
本文就国内外抗氧化活性肽的研究进展作一综述。
1肌肽1.1结构与分布典型的抗氧化活性小肽是肌肽,肌肽是一种以毫摩尔浓度(1~20 mmol/L)天然存在于多种陆生脊椎动物骨骼肌中的水溶性二肽,由β-丙氨酸和L-组氨酸通过肌肽合成酶合成,它可以在许多体系中起抗氧化作用。
1.2肌肽的抗氧化作用1.2.1肌肽对活性氧的清除作用王爱民等以硫酸钡做刺激物,建立了一个稳定的全血多形核白细胞鲁米诺依赖的化学发光体系,并研究了肌肽对氧自由基的清除作用。
当该体系中加入不同浓度的肌肽后,可见明显的对化学发光的抑制作用。
如设标准对照的发光值为100%,则测得肌肽在2.5、5、10和15 mmol/L不同浓度下的抑制发光作用分别为47.2%、71.4%、85.4%和97%。
Calvert等建立了一个由铁催化产生羟基自由基,以使脱氧核糖降解的体系,发现肌肽可以有效抑制脱氧核糖的降解,表明它具有捕捉羟基自由基的能力。
Chan与Haila等的离体研究表明,在生育酚存在条件下,一些天然肌肽可清除各种活性氧自由基。
1.2.2肌肽抗脂质过氧化的作用Decker等报道,肌肽的确可以抑制铁或铜催化的脂肪氧化反应,其中肌肽对铜催化的脂肪氧化反应产生的抑制作用最强。
大豆肽免疫调节作用的研究进展
大豆肽免疫调节作用的研究进展富校轶;孙茂成;高永欣;张佰荣;王舒然【摘要】通过体内和体外实验发现,大豆肽是一类具有免疫调节作用的生物活性肽,可以改善机体的免疫功能,在功能性食品领域将大有所为。
文章就大豆肽对免疫系统中非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫等方面的调节作用进行综述,并对目前研究过程中存在的问题进行了讨论。
%Soybean peptides is a class of bioactive peptides with immunological regulation function in numerous studies. The present situations of immunological regulation of soybean peptides, including non-specific immunity, cellular immunity and humoral immunity were summarized in this review. Then the potential problems of soybean peptides in the research process were discussed at last.【期刊名称】《大豆科技》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】5页(P38-42)【关键词】大豆肽;免疫调节作用;研究进展【作者】富校轶;孙茂成;高永欣;张佰荣;王舒然【作者单位】吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林化工学院化工与生物技术学院,吉林吉林132022;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013【正文语种】中文【中图分类】TQ937大豆是生物活性肽极好的来源。
大豆肽是指以大豆蛋白为原料,经水解、分离和精制等过程后,获得通常由3~6个氨基酸组成的相对分子质量低于1 000的肽混合物[1-2]。
大豆肽的制备及其营养功能研究进展
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f i ,1 9 , 9 : 9— 0 u s r t 95385 7
m sro 【 _nent nlo ra o o c nea dt h o g, uhom J Itra oa ju l fodsi c n e nly J i u f e c o 2 1 ,56 :0 7 1 0 0 0 4 ()19 - 3 1
摘 要: 大豆肽是 大豆蛋 白水解后 , ~ 个氨基酸残基 组成的低肽混合物 , 由36 分子量在 1 0 以下 。 了提 高大豆蛋 白 0u 0 为
资源的利用率, 降低 大豆 肽 的 成 本 , 述 了以 豆粕 为 原 料 制 备 大 豆肽 的2 方法 , 酵法 和 酶 解 法 。 综 种 发 同时也 阐 述 了其 功
压、 促进矿物质吸收和脂肪代谢 。 大豆肽克服 了大豆蛋
作者简介: 王龙(9 9 , 汉) 18 一) 女( , 本科, 主要研究方向: 生物技术 。 通信作者
● ● ¨● i4 ,b , ◆ ◆ ◆ I ●
白质在 营养学上 的弱点 ,具有 比大豆蛋 白质更 丰富的
I ● hl l ◆ ● l t● l t l I ● ◆ I ◆ ◆ I ◆ ● 1 ● ” ● ● ◆ i◆ ● i I 1◆ 3 I◆ I◆ 1 ] ◆ ◆ ● ●
【】 1 谢雯君 , 4 林启训, 王则金 , 双孢蘑菇涂膜 保鲜技术研 究【 . 等. J 中 J 国农学通报, 0 5 2 ( ) 2 7 2 0 , 11 : — 6 07
【5 eui A rn , ari M. f c o oert o a a 1】B a luM, paoG D L cox Ef t f s a f mm e e d e g
大豆蛋白酶水解物抗氧化活性的研究
水解结束后沸水浴 5m n i 使酶灭活 , 水解液用来测定
抗氧 化 能力 。 12 2 水解 度 的测定 ..
根 据 p — Sa H t t法 , 解 度 计 算 公 式 为 水
DH = h /h
P 自由基清除能力进一步对 大豆蛋 白多肽抗氧化 H
机 理进 行 探讨 。
F A 亚铁 还 原 能力 ,er eu i blyo o - R P( F rcR d cn A it f w i g i P
基金 项 目 : 3计 划 (06 1Z2 ) 8 6 20 AA 0 32 收稿 日期 : 0 2 9—1 2 0 0— 0 作者简介: 吴瑕 , 17 年 出生 , 女,9 8 讲师 , 博士 , 粮食、 油脂及植物蛋 白工程 通讯作者: 江连洲 , ,90年出生 , 男 16 教授 , 博士生导师, 粮食 、 油脂 及植物蛋 白工程
基 自由 基 ( , 2 2一d hn l i ey 一1一pcy y rzl D - p i l day, P rh
P : 国Sm H) 美 i a公 司 ; g 其他试 剂 均为 国产分析 纯 。
12 方 法 .
12 1 大豆蛋 白水 解物 的制备 .. 将 大豆蛋 白溶解 后 , 调节 溶 液 p 值 、 度 至 最 H 温 适 条 件 , 入 碱 性 蛋 白 酶 , 应 过 程 中 不 断 加 入 加 反 1m lL N O 使 p 值 保 持 恒 定 , 录 耗 碱 量 0,的 a H, / H 记 ( ) 用 于计算 水解度 (ereo yrls ,H)待 mL , dge f do i D , h ys
酶制备的大豆蛋白水解物 , 在卵磷脂脂肪氧化体 系中可以降低硫代巴比妥酸值( B R ) 且具有较好的清除 D . TA S , P
大豆精深加工关键技术创新与应用
大豆精深加工关键技术创新与应用大豆精深加工关键技术创新与应用引言:作为重要的农产品之一,大豆在世界各国都具有广泛的种植和消费市场。
随着人们对食品营养和功能性要求的不断提高,大豆精深加工技术的创新和应用已成为当前农业发展的热点领域。
本文将介绍大豆精深加工的关键技术创新和应用,以期推动大豆产业的升级和增值。
一、大豆蛋白分离与提纯技术创新1. 酸溶解法:通过酸溶解大豆蛋白,进而分离和提纯蛋白质。
创新的酸溶解剂和工艺条件可提高蛋白质提取率和质量。
2. 超滤技术:利用膜分离原理,通过膜孔径的选择性排除大豆中的杂质和低分子物质,实现蛋白质的高效提纯。
3. 高效分离杂质技术:采用离心、遇沉法等新型杂质分离技术,有效去除大豆中的颗粒、沉淀、油脂等杂质,提高蛋白质的纯度和功能性。
二、大豆异黄酮提取与应用技术创新1. 超声波提取技术:利用超声波的机械作用和热效应,促进大豆异黄酮的溶解和扩散,提高提取效率和品质。
2. 液液萃取技术:采用适宜溶剂与大豆异黄酮进行反应,形成非极性复合物,通过溶剂的萃取分离,提高提取效果。
3. 污泥活性炭吸附技术:通过选择性吸附,去除大豆中的杂质和色素,提高大豆异黄酮的纯度和活性。
三、大豆功能性食品开发与创新1. 大豆异黄酮功能性饮品:在保留大豆天然营养的基础上,根据不同人群需求,创新开发大豆异黄酮饮品,比如能量补充饮品、儿童成长饮品等,满足消费者对功能性饮品的需求。
2. 大豆蛋白功能性食品:通过蛋白质组分的调整和工艺的创新,开发大豆蛋白的各类功能性食品,如高蛋白饼干、蛋白粉等,满足不同人群的膳食需求。
3. 大豆菌胶和酸奶颗粒技术:通过菌胶和酸奶颗粒的添加,提高大豆产品的口感和口感稳定性,增强消费者的食欲和食品体验。
结论:大豆精深加工的技术创新与应用,对于提高大豆产品的附加值和市场竞争力具有重要意义。
通过持续创新和优化工艺,大豆的蛋白质和异黄酮等功能性成分可以更好地应用于食品、保健品和药物等多个领域,推动大豆产业的健康发展和扩大应用范围。
豆类及其制品抗氧化活性研究进展
中 图分 类 号 :T 2 42 S 1. 文 献 标 志码 :A d i 1.9 9 i n17 — 6 6 X) 0 20 .0 o: 03 6 /s . 1 9 4 ( . 1.3 1 js 6 2 0
试验证 明此化合 物有很 好的抗 氧化功能 。黄酮类化 合物具有强烈的抗 氧化 性 ,对于氧 自由基和脂过氧
收稿 日期 :2 1- 2 0 0 1 1— 6 基金项 目 :国家 自然科学基金项 目 ( 9 2 8 ,3 1 1 3 ) 3 72 6 1 7 7 9 ;教育部新 世纪优 秀人才支持计 划项 目 ( E C 1— 7 6 ;教 育部 2 1 年度 0 N T 一0 07) 01 基本科研业务费支持项 目;北京市优秀人才培养资助计划 ( 1D 0 0 7 0 0 1 ; 2 0 9 0 0 0 0 ) 北京市大学生科学研究与创业行动计划项 目。 01 作者简介 :廖举兰 ( 9 一 ) 1 1 9 ,女 ,广西人 ,在读本科 ,研究方 向 : 品科学 。 食
P o r s e n t e An ix d n t i fS y e n F o s r g e s so 1 AO J -a L U a - a CHE Jn AT I u ln , I Xio n n , N ig ,S ORU Nrs wa, L U S u , EI O T  ̄u ‘ HENG n - in ‘ iaa s I h m Z a mi, C Yo g qa g
h v e n o e o e h ts o so e fo e e r h r o o g t , i n ix d n ci i a e n a mp r n s e t a e b e n ft o p t ft o d r s a c e s fr a ln i h h me wh l a t i a t t t h s b e n i o t t p c . e o a vy a a I h s p p r we s mma ie s me i - i o a d i - io s d e ft e a t xd n cv t n s y e n f o s n o a e t e n t i a e , u r o n vt n n vv t is o h n i i a ta ti i o b a o d ,a d c mp h z r u o y r d f r n e mo g df r n s e sn t o so n ix d n a a i . i e e c sa n i e e t s si g meh d f t i a tc p ct a a o y Ke r s sy e n;s y e n p o u t ; a t x d n a a i ; f n t n c ii y wod : o b a o b a r d cs n i i a t p ct o c y u ci a a t t ol vy
超声波辅助酶解黑豆蛋白工艺优化
( anColg f n nUnv ri f eh oo y He a h n z o 5 0 2 C ia) Gr i l e a ies yo c n lg , n nZ e g h u4 0 5 , hn e o He t T
21 年第 1 01 2期
粮 食 与 油 脂
3 9
超 声 波 辅 助 酶 解 黑 豆 蛋 白 工 艺 优 化
王 璇。 田少君 , 张 酷, 白 雪, 朱 玲 ( 南工 业 大学粮 油食 品 学 院 , 河 南郑 州 4 0 5 河 50 2) 摘 要: 利用不同蛋 白酶酶解黑豆蛋 白, 根据水解度选择最佳用酶为碱性蛋 白酶, 采用超声波辅助 酶 法提 取 黑 豆 肽 ; 析超 声波 处 理 时 间、 率 、 酶 量 、 H、 解 时 间及 底物 浓度 对 水 解度 及 二苯 分 功 加 p 酶 代苦味酰基 自由基( P H・清除能力影响。在单 因素 实验基础上 , DP ) 依据响应面分析确定最优提取 工艺条件为: 声功率 12 . 酶解 p . 、 超 09 7W、 2 H 8 4 底物 浓度 4 4 加酶量 41%、 6 . %、 O . 0 温度 5  ̄ 、 0( 超声 2 时间 2 n在 该 条件 下 可得 D P 0 mi, P H自由基 清 除率 为 8.7 的黑 豆肽 。 63% 关键词 : 黑豆蛋 白; 超声波 ; 酶水解
O p i i a i n o lr s n c a ss e n y a i y r l zn f tm z to f t a o i - s it d e z m tch d o y i g o u bl c . o be n pr t i a k.s y a o en .
大豆抗氧化肽的制备、分离纯化及结构鉴定
研究生物活性肽的构效关系,有助于深入了解肽链的结构与功能之间的关系, 为开发新的生物活性肽药物提供理论依据。例如,某些研究表明,某些具有抗 肿瘤活性的生物活性肽通过与肿瘤细胞表面的受体结合,抑制肿瘤细胞的增殖 和转移。而另一些研究发现,某些具有抗菌活性的生物活性肽通过与细菌细胞 膜结合,破坏细菌细胞膜的完整性,从而抑制细菌的生长和繁殖。
泥鳅是一种富含营养的水生生物,其蛋白质含量高,且具有多种生物活性成分。 近年来,研究发现泥鳅蛋白中富含抗氧化肽,对于抗疲劳、抗癌等方面具有显 著的功效。本次演示旨在对泥鳅蛋白抗氧化肽的分离纯化及抗疲劳、抗癌功效 进行深入探讨。
在国内外研究中,泥鳅被认为是一种具有广泛应用前景的生物活性成分。泥鳅 蛋白具有较高的营养价值,包含多种必需氨基酸,且其脂肪酸组成对人体健康 也有益。此外,泥鳅还富含多种生物活性物质,如抗氧化肽、胶原蛋白等,具 有抗氧化、抗疲劳、抗癌等多种功效。
结构鉴定大米蛋白抗氧化肽:使用质谱仪对纯品进行结构鉴定。通过数据库搜 索,比对鉴定结果。同时,采用核磁共振技术对鉴定结果进行验证。
结果与讨论
通过上述实验步骤,成功制备了大米蛋白抗氧化肽的粗品和纯品。在分离纯化 过程中,采用SephadexG-75凝胶柱进行分离,得到洗脱峰整齐、纯度较高的 抗氧化肽。经过冷冻干燥后,得到米白色粉末状纯品。
4、联合作用研究:考虑多种因素对大豆抗氧化肽抗氧化效果的影响,如与其 他营养物质的相互作用等,综合研究其抗氧化作用及机制。
参考内容
引言
随着人们对营养和健康的度不断提高,食品营养和功能性成为研究的热点。大 米作为世界上最重要的粮食之一,不仅含有丰富的淀粉和蛋白质,还具有许多 生物活性物质,如抗氧化肽。这些肽段具有清除体内自由基、延缓衰老、预防 慢性病等多种生物功能。因此,本次演示旨在探讨大米蛋白抗氧化肽的制备、 分离纯化和结构鉴定,以期为食品营养和功能性研究提供理论依据。
大豆蛋白提取方法
大豆蛋白提取方法
大豆蛋白是一种优质的植物蛋白质,具有丰富的营养价值和广泛的应用前景。
目前,大豆蛋白的提取方法主要包括水提法、盐酸法、异丙醇法、超声波辅助法等。
水提法是传统的大豆蛋白提取方法,其原理是将大豆粉浸泡于水中,通过搅拌和加热使蛋白质溶解于水中,随后通过离心、过滤、干燥等过程得到蛋白质粉末。
该方法简单易行,但提取率较低,且不易去除杂质。
盐酸法是一种酸解法,其原理是将大豆粉与盐酸混合,通过酸解使蛋白质溶解于水中,随后通过中和、沉淀、洗涤、干燥等工艺得到蛋白质粉末。
该方法提取率较高,但酸性条件容易破坏蛋白质结构,影响蛋白质的功能性。
异丙醇法是一种有机溶剂法,其原理是将大豆粉浸泡于异丙醇中,通过超声波和搅拌使蛋白质溶解于异丙醇中,随后通过过滤、洗涤、干燥等过程得到蛋白质粉末。
该方法提取率较高,但工艺复杂,成本较高。
超声波辅助法是一种新型的大豆蛋白提取方法,其原理是将大豆粉浸泡于水中,通过超声波的作用使蛋白质溶解于水中,随后通过离心、过滤、干燥等工艺得到蛋白质粉末。
该方法不仅提取率高,且可以获得较好的蛋白质功能性和组织结构,具有广泛的应用前景。
总之,不同的大豆蛋白提取方法各有优缺点,具体应根据产品的需要和工艺条件进行选择。
超声辅助酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的研究
超声辅助酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的研究李芳;侯伟伟;任海波;张文;马欣;孔令明【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2015(000)013【摘要】本文利用超声波辅助酶解鹰嘴豆蛋白粉制备抗氧化多肽,采用响应面分析法考察了超声功率、超声温度和超声时间对酶解产物的超氧阴离子清除率、羟基自由基清除率和还原能力的影响。
结果表明,最优的超声酶解条件为:超声功率200 W、超声温度40℃、超声时间28 min,在此条件下,酶解产物对超氧阴离子的清除率、对羟基自由基的清除率和还原能力分别为80.4%、9.2%和71.8%,实际的清除率分别为81.6%、9.4%和72.9%。
在相同的浓度下,鹰嘴豆多肽对超氧阴离子的清除率、对羟基自由基清除率和还原能力占维生素C百分比较未经超声波处理的分别提高了4.0%、1.2%和7.8%。
【总页数】4页(P35-38)【作者】李芳;侯伟伟;任海波;张文;马欣;孔令明【作者单位】新疆轻工职业技术学院,新疆乌鲁木齐830021;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐830052;新疆轻工职业技术学院,新疆乌鲁木齐830021;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐830052【正文语种】中文【相关文献】1.复合风味蛋白酶酶解麦麸蛋白制备麦麸抗氧化肽的研究 [J], 张春红;郭维维;曹向宇;王雪2.碱性蛋白酶酶解红花籽蛋白制备抗氧化肽工艺的研究 [J], 孙立;毛晓英;陈计峦;李保山3.酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽工艺优化研究 [J], 李艳红;刘坚;张涛;江波;沐万孟4.酶解制备苦荞蛋白抗氧化肽及其分离纯化研究 [J], 陈金玉; 曲金萍; 张坤生; 闫怡君; 任云霞5.响应面法优化复合酶酶解制备可口革囊星虫胶原蛋白抗氧化肽工艺研究 [J], 彭易鑫;陆旭丽;代亚萍;曹玉坡;李积华;龚霄;庞杰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大豆肽脱苦及其生理功能的研究
大豆肽脱舌及具生理功能的研冗减肥目的,又能保证减肥者体质‘101。
一名日本学者在研究小儿肥胖症时,通过给患儿服用大豆肽,患儿的皮下脂肪有明显减少【111。
1.2.3抗氧化功能目前研究抗氧化活性所用的原理是:1,1.二苯基。
2.苦肼基(DPPH)在有机溶剂中是一种稳定的呈现紫色的自由基,当向其溶液中添加抗氧化剂时,DPPH会被氧化而颜色变浅,在最大吸收波长517hill处的吸光度也会变小,而且这种颜色变浅的程度与配对电子数有化学计量关系。
研究结果表明,584.0g大豆肽的抗氧化能力与1.0g特丁基对苯二酚(TBHQ)纯品相当。
抗氧化机理是由于其氨基酸残基中含有组氨酸或酪氨酸,而这两种氨基酸能够消除自由基112,13J。
1.3苦昧的产生机理关于蛋白酶解之后产生苦味的机理,早期有两种不同的观点,一种认为蛋白酶解之后的苦味是由多肽产生的,另一种则认为是水解生成的氨基酸引起的【141。
1952年,蛋白水解物的苦味首次被系统地研究‘”】,人们发现用酸将带有苦味的酪氨酸进行彻底水解后,其风味会得到很大的改善,这说明苦味肽中的苦味是由肽而不是氨基酸产生的【161。
如Leu、Arg、Gly、Pro、和Phe,其疏水性残基是苦味受体的结合位点【17】。
大豆蛋白水解液中含有多种苦味肽,如Gly-Leu、Leu-Lys、Arg-Leu、Phe.Leu、Arg.Leu.Leu等【1引。
1.3.1分子量与苦味的关系大豆蛋白在水解之后会呈现出原来没有的苦味,主要是因为水解的过程中一些肽链发生断裂,使得一些疏水性氨基酸残基暴露出来。
而大豆肽苦味形成的主要原因就是疏水性氨基酸残基的暴露,这些暴露出结构与味蕾上的受体蛋白紧密接触,产生苦味【191。
研究证明,多肽的苦味强度主要是由其相对分子质量的大小和疏水性决定的。
分子量大于6000Da的多肽是没有苦味的【201。
Raija-LiisaHeinioa等研究表明,黑麦悬浮液在添加了高活力酶制剂之后,其苦味值升高了。
大豆蛋白肽的测定方法
大豆蛋白肽的测定方法
大豆蛋白肽是一种重要的蛋白质来源,因其具有高营养价值和广泛的应用前景而备受关注。
为了保证大豆蛋白肽的质量和安全性,需要对其进行测定和分析。
目前,常用的大豆蛋白肽测定方法包括光学方法、生物学方法、物化方法和分子生物学方法等。
光学方法主要是指利用紫外-可见光谱法、荧光光谱法、旋光度测定法等技术来测定大豆蛋白肽的含量和质量。
这些方法可以对大豆蛋白肽的结构、组成和活性进行准确的测定和分析,具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。
生物学方法主要是指利用酶法、生物传感器等技术来测定大豆蛋白肽的含量和活性。
酶法是一种常用的测定方法,其原理是利用特定的酶对大豆蛋白肽进行水解反应,然后测定产生的反应产物的含量来确定大豆蛋白肽的含量。
生物传感器则是一种新兴的测定方法,通过生物分子与电子器件的结合实现对大豆蛋白肽的灵敏检测。
物化方法主要是指利用电泳、色谱等技术对大豆蛋白肽进行分离和纯化,并对其进行定量测定和质量分析。
其中,凝胶电泳和高效液相色谱是常用的方法,可以实现对大豆蛋白肽的分离和纯化,并对其在不同环境下的结构和功能进行研究。
分子生物学方法主要是指利用PCR、实时荧光定量PCR等技术对大豆蛋白肽的基因进行检测和测定。
这些方法可以对大豆蛋白肽的基因序列、表达水平和遗传变异等进行分析,为大豆蛋白肽的生产和应用提供有力的支持。
综上所述,大豆蛋白肽的测定方法多种多样,选择合适的方法可以有效保证大豆蛋白肽的质量和安全性。
豆渣蛋白肽的酶解工艺、抗氧化作用及其特性研究
豆渣蛋白肽的酶解工艺、抗氧化作用及其特性研究高义霞;周向军;魏苇娟;马子真;孙龙龙【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2014(029)004【摘要】以豆渣蛋白为原料、对DPPH·清除率为考察指标,从胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和碱性蛋白酶中筛出中性蛋白酶为最佳水解酶;利用单因素和正交试验探讨豆渣蛋白肽的最佳制备工艺;以抗坏血酸(VC)为对照,研究豆渣蛋白肽的总还原力、对·OH、O2-的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用;研究豆渣蛋白肽的部分特性.结果表明,豆渣蛋白肽的最佳制备工艺为:pH 7,温度70℃,豆渣蛋白浓度4 mg/mL及酶量100 U.VC和豆渣蛋白肽对·OH的半数抑制浓度(IC50)分别为0.274和0.046 mg/mL;对O2-的IC50分别为0.026和0.084 mg/mL;VC和豆渣蛋白肽的总还原力与其浓度呈剂量依赖关系,且对脂质过氧化有一定抑制能力.豆渣蛋白肽等电点约为3.0,在pH 3~12范围内,其提取率逐渐增加.【总页数】8页(P46-52,67)【作者】高义霞;周向军;魏苇娟;马子真;孙龙龙【作者单位】天水师范学院生命科学与化学学院,天水741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水741001;天水师范学院生命科学与化学学院,天水741001【正文语种】中文【中图分类】TS201.1【相关文献】1.蛋白酶水解豆渣制备大豆肽的研究 [J], 陈洁;许尨;刘爱红;汪浩明;严文莉;倪学文2.林蛙皮胶原蛋白肽酶解工艺数学建模及抗氧化作用的研究 [J], 邱芳萍;王长周;季晓枫3.响应面优化南极磷虾蛋白酶解工艺及蛋白肽组分分析 [J], LIU Yun-jiao;ZHANG Hai-yan;LIU Shu-han;WANG Yu;HAN Feng;KONG Cong;WANG Yuan;ZHANG Xuan;SHEN Xiao-sheng4.牦牛乳酪蛋白水解制备DPP-IV抑制肽的蛋白酶发掘及其酶解工艺优化 [J], 王玲丽;刘同杰;张兰威;公丕民;易华西5.富硒辣木叶蛋白ACE抑制肽的酶解工艺优化及活性研究 [J], 陈冰冰;欧颖仪;叶灏铎;金昶言;梁兴唐;尹艳镇;郑韵英;曹庸;苗建银因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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水解度随着水解时间的延长先增大后不变,t>3h时,水解过程基本结束,水解度恒定不 变。蛋白肽的抗氧化活性随水解时间的延,先减小后增大,t=3h时最佳,t>3h时,水 解基本结束,但是肽链会自行旋转折叠,得到抗氧化活性肽。
5. 4 大豆多肽抗氧化性研究 —— 对羟自由基的清除
按照金鸣等的比色法,0.75mmoL/L 的邻二氮菲溶液1mL, 加入 pH7.4 的磷酸 缓冲溶液(PBS)2mL 和蒸馏1mL,充分混 匀后,加入0.75mmol/L 硫酸亚铁溶液 1mL,然后再加入0.0 1% 过氧化氢 1mL ,于37 ℃保持60min ,在波长 536nm 处 测吸光度 Ap ;用 1mL 乙 醇代替1mL 过氧化氢,测得吸光度 A b ,1mL 不同质量浓度的样液代替蒸馏水,测得吸光度As。 1mL 以下式计算大豆蛋白肽对OH自由基的清除率(H/%): AS -Ap H/%= ————×100 Ab -Ap
四、酶活的测定——福林酚法 酶活的测定
标准曲线的制作 酪氨酸浓度与吸光度的关系 以吸光值为横坐标,以酪氨酸浓度为纵坐标,绘制标准曲线
浓度 c(ug/ml)
吸光度( ) 吸光度(A)
0 0
10 0.034
20 0.070
30 0.110
40 0.146
50 0.197
60 0.210
由图可计算得K=273.97 木瓜蛋白酶的酶活=(A样品-A对照) *K*V*N/t=60000U/g
随着底物浓度的 短时间内接触作用。蛋白肽的抗氧化活性先增加后减少,浓度为6%时,抗氧化性最大
5.2.2 温度的选择
(已有研究木瓜蛋白酶在60℃左右时对水解大豆蛋白有较高的活性,高于或低于这个 温度都会造成酶活性的下降,在低于这个温度时,酶活性变化较为平缓。) 将5%(0.5g-10ml)的大豆分离蛋白溶液预处理后用木瓜蛋白酶进行酶解, [E]/[S]=5%,酶水解条件为pH=6.5,分别在50℃,55℃,60℃,65℃,70℃, 超声波处 理20min,水解3h,灭酶后,比较其DH值的大小和抗氧性能
∗ 抗氧化 螯合肽卸妆洁面乳
肽营养藻粉
太阳神多肽咀嚼片
胶原蛋白肽饮料
大豆蛋白肽的生产制备
∗ 目前生物活性肽的生产主要采用酶水解 法,酶法水解可以在不降低营养价值的 前提下改善蛋白质的理化和功能性质, 另外,适当强度的超声波产生的稳态空 化作用可改变细胞膜的通透性,促进可 逆渗透,强化反应物进入及生成物离开 酶活性中心的过程,能够提高酶的活性。
实验操作过程
大 豆 蛋 白 的 提 取 干 燥 含 粉 质 喷 蛋 白 定
氧 化
大 豆 蛋 白 定 测
量 大 豆 蛋 白
酶 活 力 的 验 测 实 解
酶
性 测 定
水 解 度 和 肽 抗
一、大豆蛋白的提取
1、大豆的处理 清洗 烘干 研磨 过40目筛 2、大豆蛋白的提取 加热并加入蒸馏水约200ml至60℃ 量取120ml 加 入豆粉10g(豆粉:水=1:2) 转入分液漏斗加NaOH,摇 至pH为8-9 ,静置1h 水状浆液A 固装B 与水5:1混合搅拌 取水状D 油状C A与D混合 HCl调pH为4.5 蛋白质固形物沉淀 离心3000r\min 10min 固形物G 冷冻保存(-80℃ ) 乳清状H
随着加酶量的增多,大豆蛋白的水解度先增大后不变,说明了加酶量为7%时,所有的蛋 白基本与酶有效结合位点结合。当加酶量为5%时,蛋白肽抗氧化性最大,酶的量继续增 多时可能过度水解,使活性肽水解为氨基酸。
5.2.4 pH的选择
(木瓜蛋白酶在pH值为6.5左右时具有较好的生理活性) 将5%(0.5g-10ml)的大豆分离蛋白溶液预处理后用木瓜蛋白酶进行酶解, [E]/[S]=5%,pH值分别取5.5, 6.0,6.5,7.0, 7.5,T=50℃, 超声波处理20min,水解3h,灭 酶后,比较其DH值的大小和抗氧性能。
三、大豆蛋白蛋白质含量的测定
凯氏定氮法
空白 V(HCl)\ml
1 69.20
2 70.70
3 70.50
2.70
W1=[(69.20-2.70)*0.1*0.014*6.25*100]*100%=58.19% W2=59.50% w3=59.32% ¯w=59.00% 所以制备的大豆蛋白粉的蛋白质含量是59.00%,虽然有所 提高,但达不到脱脂豆粉的蛋白含量,且精制的条件不足。
。
由于超声波对酶的空化作用可以提高酶的活性,提高作用效果。随着超声作用的延 长,水解度和抗氧化活性均为先增大后减小。当超声时间为30min时,水解效果做好, 继续超声时可能破坏了酶的结构。超声时间为20min时,抗氧化活性最佳,时间太长 会造成肽过度水解,甚至沉淀变性。,
5.2.6 水解时间的选定
将5%(0.5g-10ml)的大豆分离蛋白溶液,分别在60℃,70℃, 80℃,90℃,100℃水浴中加热15min,然后用木瓜蛋白酶进行酶解, 酶水解条件为pH=6.5,T=60℃,[E]/[S]=5%,超声波处理20min,水解3h后, 比较其DH值的大小和抗氧性能。
随着预处理温度的升高,DH的变化趋势均为先增大后减少。当预处 理温度为90℃时,蛋白质结构充分打开,与酶充分接触,水解度达 到最大;此时,使具有抗氧化活性的肽充分暴露,抗氧化活性最好。
5.3 蛋白质水解度的测定
采用pH-Stat滴定法。根据多肽在不同pH的条件下解离状态不同:当pH值恒定时酶 水解蛋白后形成的自由羧基、自由氨基或氨基酸残基数目不等;当在碱性条件下水 解时,释放的氨基酸使溶液pH值明显下降,用稀碱液将其滴定回起始pH值,可以知 道蛋白质的肽键断裂的情况,根据消耗的碱量计算水解度DH值。 水解开始时,调节反应体系的pH为6.5,反应过程中用0.5mol/L的NaoH不断地调节pH 为6.5,反应结束后,记下所用碱液的量。 则DH%=[(CNaOH×VNaOH)/(α ×Mp×htot)] ×100% C,V 分别为水解过程中所加NaOH 或HCl 浓度/(mol/L)和体积ml; MP,为原料中净蛋白质质量/g; Htot 为每克原料蛋白质中所含肽键的毫摩尔/(mmol/g),对于大豆分离蛋白,该值取 9.2 mmol/g。. α为氨基的平均解离度,(50度时,pK=7.1+-0.09) 可按 计算, (PH:反应起始的PH值, PK:α -氨基的解离度的负对数 ,pK=7.8+2400*(298-T)/298T T=273.15+t t:反应环境的温度(℃)
五、酶解实验
1、预处理条件(温度,pH)对DH和大豆蛋白肽抗氧化性的 预处理条件(温度 ) 预处理条件 和大豆蛋白肽抗氧化性的 研究 2、木瓜蛋白酶水解时的单因素分析 、木瓜蛋白酶水解时 底物浓度 加酶量 温度 pH 超声波时间 水解时间
5.1.1预处理温度对水解反应的影响 预处理温度对水解反应的影响 预处理
5.1.2热处理时间对水解度及肽抗氧化 性的影响
将5%(0.5g-10ml)的大豆分离蛋白溶液,分别在最优水浴温度中加热5min, 10min,15min,20min,30min,然后用木瓜蛋白酶进行酶解,酶水解条件为pH=6.5, T=60℃,[E]/[S]=5%,超声波处理20min,水解3h后,比较其DH值的大小和抗氧性能。
实验材料
∗ 大豆,凯氏定氮仪,粉碎机,干燥箱,研钵,40目 筛 ∗ 木瓜蛋白酶,大豆蛋白粉,0.75mmoL/L 的邻二氮菲 溶液,pH7.4 的磷酸 缓冲溶液(PBS) , ∗ 0.75mmol/L 硫酸亚铁溶液,0.01% 过氧化氢,乙 醇 ∗ pH计,超声波清洗仪,恒温水浴锅,离心泵,移液 枪
二、大豆蛋白喷粉干燥 因冷冻干燥机没
真空干燥
∗ 将大豆蛋白置于真空干燥 ∗ 箱, 60℃下按操作要求 干燥24h,取取出干燥蛋 白,得到的大豆蛋白为一 薄层、脆皮状、黄色,研 碎后得到大豆蛋白粉
真空泵工作故障, 真空度一直未变 化,操作失败
冷冻干燥
按操作规范放入冷冻 干燥箱中干燥,温度 保持—80℃,24h后 取出
结论
∗ 1 用一定强度的超声波作用于蛋白酶水解液, 可以提高蛋白质的水解度及蛋白肽的抗氧化 活性。 ∗ 2 大豆蛋白水解度达到最大的最优条件是预处 理温度90℃,预处理时间15min, 酶解初期超 声波30min,底物浓度4%,加酶量7%,pH=6.5, 水解温度65℃,水解时间3h。 ∗ 3 大豆肽抗氧化性达到最大的最优条件是预处 理温度90℃,预处理时间25min, 酶解初期超 声波20min底物浓度6%,加酶量6%,pH=6.5, 水解温度55℃,水解时间4h。
超声波作用下制备大豆蛋白肽 及其抗氧化性的研究
研究背景
∗ 在植物性蛋白中,大豆蛋白是最理想最方便的蛋白质来 源,其氨基酸组成与动物蛋白相近,且赖氨酸含量较高, 但是,由于大豆蛋白分子结构复杂,80%的蛋白质分子 量在10万以上,分子结构高度压缩,折叠,从而使大豆 蛋白质溶解性较差,消化吸收率和生物效价远不及动物 蛋白,如牛乳蛋白,鸡蛋蛋白等。 ∗ 但如果将蛋白质进行水解,分离精制后,可得到大豆蛋 白肽,其蛋白质含量为85%左右,氨基酸组成并未破坏, 且大豆肽分子量大部分在1000以下,易于人体消化吸收; 并且,大豆肽具有多种生物活性功能,可抗血栓,抗高 血压,抗高血脂,抗氧化,抗疲劳,促进矿物质的吸收, 提高机体免疫力,促进微生物发酵等等。因此大豆肽已 开始应用于各种发酵食品,冷饮食品,医疗食品,营养 食品,减肥食品,化妆品等中。
随着pH的变化,DH先增大后减小,酶在不同pH时,活性不同,pH=6.5是木瓜蛋白酶的 最适pH,此时,蛋白的水解度最大。蛋白肽的活性随pH的变化先增大后减小,pH=6.0 时达到最大。