果蝇唾腺染色体标本制备与观察

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果蝇唾腺染色体的制备与观察

2.多线染色体：果蝇的唾腺细胞停止在分裂间期（永久间期），染色体核蛋白纤维不断复制，平行排列形成巨大而伸展的多线染色体唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体

3.染色体联会：类似有丝分裂中的同源染色体联会。由于同源染色体紧密配对几乎相互融合，使果蝇的唾腺染色体只有二倍体染色体数目的单元数。
果蝇唾腺染色体的制备与观察
一、实验目的

练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法；��
了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾腺染色体的形态特征，并根据唾腺染色体上横纹的形态和排列，识别不同的染色体识别染色体结构变异的细胞学表现。练习绘制多线染色体图

二、实验原理
固定染色5－10分钟后，盖上干净的盖玻片，用吸水纸覆盖上，然后放在平的桌子上，用大拇指用力压下住。
制成标本进行观擦。

4.横纹结构：每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。

5.Puff结构：幼虫的不同发育期，浓缩的染色质纤维会成群解旋、松开，形成泡状松散结构，这种泡状结构称 Puff结构，亦称染色体的疏松。
三、实验用品

实验材料果蝇的三龄幼虫用品解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、吸水纸等

果蝇唾液腺染色体的制片与观察

果蝇唾液腺染⾊体的制⽚与观察

121140083 朱琪璋

⼀实验⽬的

1观察果蝇的唾腺染⾊体，练习果蝇幼⾍唾腺分离技术及唾腺染⾊体的制⽚⽅法2观察了解果蝇唾液腺染⾊体的形态特征

3了解果蝇唾腺染⾊体在遗传学研究中的意义

⼆实验原理（预备知识）

1果蝇唾液染⾊体的介绍

果蝇、摇蚊幼⾍唾液腺细胞中的巨⼤染⾊体。双翅⽬昆⾍的唾液腺细胞发育到⼀定阶段之后就不再进⾏有丝分裂，⽽永久停留在分裂间期。但随着幼⾍的⽣长，唾液腺染⾊体仍不断地进⾏⾃我复制⽽且不分开，经过许多次的复制形成约 1 000—4 000拷贝的染⾊体丝，合起来直径达5µm，长度达400µm，⽐普通细胞中期染⾊体约⼤100～150倍，所以⼜称为多线染⾊体或巨⼤染⾊体。

唾液腺染⾊体的另⼀特点是体细胞中同源染⾊体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋⽩纤维丝唾液腺染⾊体是⼀类存在于双翅⽬昆⾍，如果结合在⼀起，紧密盘绕。所以细胞中染⾊体只呈单倍数。⿊腹果蝇的染⾊体数⽬2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染⾊体为中部着丝粒染⾊体，第Ⅳ染⾊体和第IX染⾊体为端着丝粒染⾊体。唾液腺染⾊体形成时，染⾊体着丝粒和近着丝粒的异染⾊质区聚于⼀起形成⼀个染⾊中⼼，所以在光学显微镜下可见从染⾊中⼼处伸出6条配对的染⾊体臂，其中5

条为长臂，l条为紧靠染⾊中⼼的很短的臂。

唾液腺染⾊体经染⾊后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹。这些横纹的数⽬，位置，宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。研究认为这些横纹与染⾊体的基因是有⼀定关系的。通过⼀定的实验⽅法使果蝇唾液腺染⾊体各臂分散开，并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显⽰出来，是进⾏果蝇遗传学研究的很重要的⼀个环节．果蝇唾液腺染⾊体在不同种间的共同点是染⾊体的着丝点位于⼀个染⾊区域，但不同的种类往往其染⾊体臂数⽬不同．每条染⾊体臂上分布着染⾊深浅不同、粗细各异的磺纹，这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数⽬⼜都有种的特异性和种内的差异．由此，果蝇唾液腺染⾊体近⼏⼗年来，已⼴泛⽤于种内系统发⽣和种间亲缘关系的研究中，因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染⾊体的不联会、形成泡、缢虞和间带区的伸缩性以及顶体的形态等多⽅⾯的差异，⽽特别重要的是研究它的基因序列的差异(观察是否产⽣了例位以及染⾊体的断裂、融合和重排)。因此，⽆论从细胞遗传学的⾓度研究基因与突变性状之间的联系，还是从进化遗传遗传学⽅⾯研究染⾊体的系统发⽣，探讨种间以及近缘种间的遗传差异和⽣殖隔离的机制等，唾液腺染⾊体的分析研究都是⼗分重要的．从其横纹分布特征可对物种的进化特征进⾏⽐较分析，⽽⼀旦染⾊体上发⽣了缺失，重复，倒位。易位等结构变化，也可较容易地在唾液腺染⾊体上观察识别出来。

果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告

一、实验原理

双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。

二、实验材料

果蝇的三龄幼虫

三、实验器材

双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。

四、实验试剂

生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。

五、实验步骤

1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。剔除脂肪体并

实验四---果蝇唾腺染色体的观察

实验四果蝇唾腺染色体的观察

温度：21-24 摄氏度大气压：80.1-82.42Kpa 日期：2016.4.28

姓名：郑元跃学号：20140322225 班级：14级生物二班

一目的

1、观察果蝇唾腺染色体的形态特征；

2、掌握剥离果蝇幼虫唾液腺的技术以及制作唾腺染色体玻片标本的方法；

3、观察果蝇唾液腺染色体的结构特征及了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的

意义；

二原理

双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾

腺染色体。这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普

通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。唾腺染色体处于体细胞染色

体联会配对状态。并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约

有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。多线染色体经染色后，

出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表

着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，容易在唾

腺染色体上观察出来。观察多线染色体的特征：巨大；体细胞中同源染色体配

对，所以细胞中染色体只可以观测出半数(n)；各染色体的异染色质的着丝粒部

分互相靠拢形成染色中心(chromocenter)；横纹有深浅、疏密的不同，各自对

应排列，这意味着基因的排列。

果蝇的染色体组成

由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒相互连结在一起形成染色盘或异

染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色

较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。在这些染色体臂

果蝇唾腺染色体

❖ 1933年，美国学者贝恩特（Painter）等又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。
❖ 这种染色体宽约5μm，长400μm，使其比一般体细胞中的染色体粗1000一2000倍，长100一200倍。因而又称为巨大染色体。
巨大染色体的形成
果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞不再分裂，停留在永久间期，染色体螺旋化程度低呈充分伸展状态。在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂．复制后的染色单体DNA也不分开，大约有 1000—4000根染色体丝的拷贝，这种现象叫做核内有丝分裂，这种染色体也称为多线染色体。另外唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，称为体联会。
色中心。（4）横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排
列，这意味着基因的排列。
三、实验材料
果蝇的三龄幼虫 0.7%生理盐水, 改良石碳酸品红或醋酸洋红双筒解剖镜, 解剖针, 吸水纸，显微镜等
唾液腺
位置：在幼虫体前约1/3处。形状：形如一对香蕉，上小下大。一边常附着带
状的不透明的脂肪。
颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围的组织都透明。
实验四果蝇唾腺染色体
一、实验目的
➢ 掌握果蝇幼பைடு நூலகம்唾腺染色体的制片技术。
➢ 观察果蝇唾腺染色体的主要形态特征。
二、实验原理
❖ 1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。

果蝇唾腺染色体的制备与观察

生技1402 王江勤 14110703061

引言

实验原理：

果蝇属于双翅目昆虫，其唾液腺细胞发育到一定阶段会停止在间期，但紧密配对的同源染色体，仍能不断复制，复制后产生的子染色体彼此不分开。复制可达9次之多，因此一对染色体最终可产生1024条染色质丝。他们集结在一起形成一条多线染色体，约为普通中期染色体的100`150倍，因而又称为巨大染色体，在显微镜下清晰可见。

研究表明，对于一种果蝇来说，带纹的宽窄、数目、位置等是恒定的，标志着物种的特征。

材料方法

1主要材料试剂

1.1实验材料：黑腹果蝇三龄幼虫

1.2器具：显微镜双筒显微镜、解剖针、镊子、载破片、盖破片、吸水纸等。

1.3试剂：生理盐水、卡宝品红染液、1摩尔每升的盐酸、蒸馏水

2 实验流程和操作要点

2.1三龄幼虫的培养

2.2剥离唾液腺

2.3染色：用盐酸解离后用卡宝品红染液染色。

2.4压片

2.5镜检

结果与讨论

1.结果

果蝇唾腺细胞染色体

2 讨论

黑腹果蝇唾腺染色体组成为2N=8，其中一号染色体是端着丝粒染色体，着丝粒的一端附在染色中心，另一端游离；2号和3号染色体是中部着丝粒染色体，每条染色体呈“V”字形向外伸展出两条臂，形成2L、2R、3L、3R四条臂。4号染色体短小，呈点状负在染色中心边缘。所以光学显微镜下可见巨大染色体从染色中心向四周发射状的伸出5长1短共6条臂。

唾腺染色体解析

1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 尽量将脂肪组织清除干净 3. 吸水时勿将唾腺一起吸走 4. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃 5. 染色时间不可过长，否则背景也着色 6. 压片时用力要均匀
六、作业与思考
1.每人制1张染色体分散、横纹清晰的临时装片。 2.绘制你在显微镜下所看到的果蝇唾腺巨染色体图。 3.什么是染色中心（chromocenter）? 4.根据你所学的知识，联会（synapsis）应出现在什么类型的细胞中？ 5.分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。
四、实验步骤
1、选取幼虫
三龄虫
一龄虫两龄虫
（获取较多、较大幼虫的方法：低温培养、大场地、富营养、多亲本）
2、腺体剖取：
取行动迟缓、肥大，爬上管壁的三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐水，观察幼虫结构：具一钝尾和带黑色口器的尖头端；取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近中部，固定幼虫，另一针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。
4、染色与压片
滴加改良苯酚品红染液，染色20-30min。染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片滑动，可以朝一个方向揉动，不要来回揉！）
5、观察标本
先用低倍物镜观察片子，找到好的染色体图像后，放到视野中心，再用高倍镜观察。
五、注意事项

实验二、果蝇唾液腺染色体的制备与观察

唾腺染色体的特征：染色体巨大；体细胞联会；形成染色中心；具有深浅不同、疏密相间的横纹。由于唾腺染色体的重要特征，其在遗传学上，如染色体结构变异、染色体化学组成、基因差别表达等方面都是重要的研究材料。
Xபைடு நூலகம்
ⅢR
果蝇唾腺染色体模式图
Ⅳ ⅡL
染色中心
ⅡR
ⅢL

三龄幼虫 0.9%生理盐水醋酸洋红染色液显微镜解剖镜

双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞。因为这些细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂，停止在间期。但是染色质还是不断地复制不分开，经过许多次的复制形成约1000-4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm 长，比普通中期相染色体大得多（约100--150 倍），所以称为多线染色体和巨大染色体。
唾液腺
头部口器
脂肪带
拉出唾液腺
唾液腺
3.染色:将唾腺与其他组织分离，腺体留下，用滤纸吸去生理盐水，加上一滴醋酸洋红，染色 10-15分钟； 4.压片:染色结束时，将盖玻片轻轻放在染液和唾腺上，用滤纸吸去盖玻片上面多余的染液，平放于桌面上，用大拇指压片，使唾腺染色体破膜而出； 5.镜检:先在低倍镜下找到染色体分散良好的图像，再在高倍镜下仔细观察唾腺染色体的特征并绘图
压片
镜检结果
1. 拉前水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。 2. 拉后注意勤加生理盐水，否则唾腺易干。 3. 一定要将脂肪组织清除干净。 4. 染色前吸水时请小心，切勿将唾腺一起吸走。 5. 压片时要揉，用力要均匀。

果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察

一.实验目的

通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。

二.实验原理

唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。

由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。

三.实验用品

1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水

2.实验器材和试剂：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI

四.实验方法和步骤

1. 幼虫的培养

为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。

A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置

的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。

B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～

20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。

2. 剖取唾腺

用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上，并滴加1滴生理盐水。将载片放在载物台上，用解剖镜进行观察。首先将幼虫的头尾分清，果蝇的头部有一黑点（口器），头部不断作伸缩状。解剖时，双手各持一个解剖针，一支针先压在幼虫身体的前1/3处，另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动，即可将头部与身体拉开，仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。果蝇的唾腺是单层细胞构成的，因此在解剖镜下可以看出其细胞界限。如果唾腺没有被拉出来，可用解剖针轻压虫体的断开处，把唾腺挤压出来。操作时解剖针一定要轻轻拨动，切不可将肠管、神经管等全部截断从而影响视线。由于果蝇唾腺几乎透明，但是其上连带的脂肪体为乳白色，因此还是容易辨认出来的。

果蝇唾腺染色体标本的制备与观察

摘要：多线染色体广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。为遗传学，尤其是果蝇研究带来不少便利。不论在经典细胞遗传学时代，还是当今的基因组时代，多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。本次实验中，我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。分辨了果蝇的不同染色体，练习了果蝇唾腺染色体标本的制备与观察。

染色体研究通常面临两个困难：一是染色体很小；一是初级少数动植物，如玉米祖先期的染色体上具有染色体里这样的结构可以作为识别或定位的标志外，大多数生物的染色体都没有标志。而作为遗传学研究的模式生物黑腹果蝇，有丝分裂中期的染色体格外小。多线染色体就是在这样的背景下被重新发现的。

多线染色体最早在要闻幼虫的唾液腺中发现。广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。这些戏胞发育到一定阶段后，停止在间期，，但紧密配对的同源染色体不断复制。，而复制后产生的染色体彼此不分开而形成。少数植物中也发现有多线染色体，但没有昆虫体内的大。

多线染色体为遗传学，尤其是果蝇研究带来不少便利。一个重要进展是Pardue等1907建立了双翅目昆虫多县染色体的原位杂交方法。有了这种方发，确定一条RNA或DNA序列在染色体上的位置就变得非常简单。不论在经典细胞遗传学时代，还是当今的基因组时代，多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。

在本次实验中，我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。

1.实验步骤

1.1试验材料

显微镜，双筒体式显微镜，解剖针两只，小毛笔一只，眼科镊，载玻片，盖玻片，滤纸片，香柏油，镜头纸，果蝇三龄幼虫，卡宝品红染液，盐酸1mol/L，蒸馏水，生理盐水。

果蝇唾液腺染色体观察

注意：压片时适当多加些染液有利于染色体臂的伸展，但要防止染液过多而造成材料随染液而溢出。 6．镜检在低倍镜选择唾腺细胞多且染色体分散好的视野，换高倍镜仔细观察唾腺染色体的染色中心、染色体臂和横纹以及可能有的疏松区、裴氏环、或因易位而形成的十字形图象和因倒位而形成的倒位环等各种结构。
六本卷须知
果蝇种间或种内不同品系与近缘种之间的遗传差异常表现为唾液腺染色体不联会，形成泡〔puff〕、缢痕〔constrictions〕、间带区〔interband〕的伸缩性以及顶体〔telomere〕的形态等多方面的变异，特别重要的是可观察是否产生了倒位、染色体的断裂、融合或重排，据此研究其基因序列的差异。因此，无论从细胞遗传学的角度研究基因与突变性状之间的关系，还是从进化遗传学方面研究染色体的系统发育，探讨近缘种间的遗传差异和生殖隔离机制等，唾液腺染色体的分析研究都是十分重要的。果蝇唾液腺染色体已广泛用于种内系统发育和种间亲缘关系的研究中。
3．解离将剥好的唾腺移到载片中央，加一滴1
mol/L HCl于腺体上，解离２～３min，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体展开。 4．染色
用吸水纸吸去HCl，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后，小心吸干。加1～2滴改进苯酚品红或其它染液，染色10～15min。
5．压片
染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。〔注意不要使盖片移动。〕

果蝇唾液腺染色体制片与观察

同源染色体的两条臂紧密结合，自由伸展。因此唾液腺细胞染色体数看不出2n的染色体数，只能观察到从染色中心向空间伸展的染色体臂。与其它细胞染色体相比的另一个特点是，唾液腺染色体上有深浅不同、宽窄不一的带纹，这些带纹的数目和位置是恒定的，代表着种的特征和一些基因的位置。
由于这些带纹的存在，染色体上发生缺失、重复、倒位、易位等很容易在唾液腺染色体上识别出来。
三、实验材料

野生果蝇
四、实验步骤

1、剥离果蝇幼虫的唾液腺
取一洁净的载玻片，滴上1滴0.75%生理盐水。在瓶壁上挑选肥大的充分发育的三龄幼虫放在的生理盐水中，唾液腺位于幼虫食道的两侧，长度约占身体总长的1/3—— 1/4左右。
解剖时把载玻片放在解剖镜或放大镜下,一手用解剖针压住头部 (外型似一个黑色小点)，压住的地方越小越好，同时，用镊子夹住幼虫身体1/2处，轻轻地将幼虫的头部自身体拉开。唾液腺随同内脏一起拉出。如果头部拉断,腺体没有拉出,可以用解剖针从镊子附近的腹部缓缓地向头端挤压,也可压出唾液腺。然后在镜下细心分离，理出双叉形半透明的囊状腺体即为唾液腺，在生理盐水中无论怎样触动它都不会发生形状改变。
果蝇唾液腺染色体制片与观察
一、实验目的

1、练习解剖果蝇幼虫、分离唾液腺的方法 2、掌握唾液腺染色体的制片技术 3、了解唾液腺染色体的特点

2 果蝇幼虫唾液腺染色体标本的制备与观察

果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察

摘要

果蝇幼虫唾腺细胞染色体是一种特化的巨大染色体，由于其外形具横纹与胀泡等结构，可作为物种区别标志与基因定位标志。实验采用普通果蝇的三龄幼虫，剥离出其唾腺，通过固定、染色与压片等步骤制成果蝇幼虫唾腺染色体标本，在显微镜下观察，最终对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征做出简要描述。

引言

果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。

由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。[1]

在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。

遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察

【实验目的】

1.练习解剖果蝇幼虫的技术

2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法

3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点

【实验原理】

果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。

双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。

黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。各

染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染

色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条

极短的染色体。（如右图）染色体Ⅰ为端着丝

粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一

端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他

们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能

看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；

点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。因此

可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短

小的染色体。在雄性幼虫中，唾腺染色体上不

见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着

丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形

成。这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。

果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，

DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。

整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。

果蝇唾腺染色体标本的制备及观察

果蝇唾腺染色体标本的制备和观察

摘要本实验通过用黑腹果蝇的三龄幼虫的唾腺，来观察果蝇的唾腺染色体。目的在于学会辨认果蝇的唾腺的特征和识别各条不同的染色体以及掌握其基本的特征。了解唾腺染色体的作用和意义。

１．引言

果绳唾睬染色休为多线染色休,形成原因是由于染色休不断复制,但细胞不分裂从而形成了多线染色休,其上每一横纹相当于一个顺反子,横纹的形态特征有着种的特异性和稳定性。因此果蝇唾睬染色休成为了研究染色休结构、基因定位、基因功能的重要实验材料。1881年Ba}biani首次在摇蚊幼虫的唾腺细胞中发现多线染色体.20世纪30年代Painter首先用果蝇唾腺体作为遗传学数据在细胞学上的验证材料,他研究了多线染色体上的横纹跟基因的关联性以及染色体的物种特异性。Bridges也对果蝇唾腺体进行了广泛详细的研究,制成一系列与已有的基因连锁图相对应的果蝇细胞学图。

２．实验材料和方法

２．１实验材料

受精的雌果蝇、盖玻片和载玻片、镊子、解剖针解剖镜和显微镜、醋酸地衣红染液、指甲油

生理盐水、香柏油、镜头纸。

２．２实验方法

２．２．１实验材料的获取和处理

（1）三龄幼虫的培养：取20-30只受精的雌果蝇于培养基中，在22摄氏度的恒温冰箱中饲养7天得到肥大的果蝇三龄幼虫。

（2）唾腺的剥取和制片：取果蝇三龄幼虫于一滴加了生理盐水的载玻片上，用两根解剖针，一根扎住口器，一根扎住体前1/3处像两端拉唾腺腺体随之而出。唾腺是一对透明的茄子状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）在腺体的前端各延伸出一细管汇合在一起与口器相连，相对于其他组织唾腺最为透明因此在黑色背景下其他组织呈白色,而唾腺是半透明的,辨别时应在明亮的光源下进行，果蝇的唾腺细胞很大，在解剖镜下可以看见其轮廓。幼虫被拉断时唾腺也可能随之被拉出,也可能仍连在口器上,这时可用解剖针轻轻将其挤压出来。拉出的腺体有可能仍为完整的左右对称的长茄状囊体,也可能分开、断裂。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。快速的将唾腺染色体转移到另一干净的载玻片上，每片2-3个，然后用醋酸地衣红染液染色10-15分钟，用吸水纸吸去多余的染液盖好盖玻片，敲散细胞，压匀，涂上指甲油。然后镜检。

果蝇唾液腺染色体观察

注意：压片时适当多加些染液有利于染色体臂的伸展，但要防止染液过多而造成材料随染液而溢出。 6．镜检在低倍镜选择唾腺细胞多且染色体分散好的视野，换高倍镜仔细观察唾腺染色体的染色中心、染色体臂和横纹以及可能有的疏松区、裴氏环、或因易位而形成的十字形图象和因倒位而形成的倒位环等各种结构。
六注意事项
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 将脂肪组织清除干净。 3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。 4. 染色时间不可过长，否则背景也着色。 5. 压片时要揉，用力要均匀。 6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片。 7. 吸水时勿将唾腺一起吸走。
七作业１．制效果较好的唾腺染色体临时片1张。２．绘出你所观察到的果蝇唾腺染色体略图，并仔细描绘各染色体臂末端５条横纹。
普通果蝇（2n=2x=8）唾腺染色体的特点表现在：各染色体着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的染色中心，第Ⅱ、Ⅲ对染色体呈Ｖ形（中着丝粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第Ⅳ对染色体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿蜒伸展。
三实验材料果蝇三龄幼虫活体。
四实验器具、药品试剂显微镜，生化培养箱；果蝇培养瓶，镊子，
实验5 果蝇唾腺染色体的观察
一实验目的 1．练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。 2．了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾腺染色体的形态特征，并根据唾腺染色体上横纹的形态和排列，识别不同的染色体。 3．识别染色体结构变异的细胞学表现。