产淀粉酶海洋放线菌的酶活性测定及发酵条件研究【开题报告】
实验二：淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性的测定一、实验目的酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。
酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。
α-淀粉酶是一种典型的内切型淀粉酶,主要作用于淀粉水解的液化阶段,因此又叫液化酶。
作为一种最重要的工业酶制剂，α-淀粉酶广泛存在于动物,植物和微生物中。
其中，微生物α-淀粉酶以其经济易得成为工业生产主要来源。
目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种。
本实验采用杨氏改良法测定α-淀粉酶；掌握测定α-淀粉酶活性大小与温度关系的方法，通过分析得出酶的最适温度范围。
二、实验原理酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用时的最适温度和pH值。
温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低，其变化趋势呈钟形曲线变化。
不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。
α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。
α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。
本实验通过淀粉遇碘显蓝色，淀粉含量越高，颜色越深。
用分管光度计检测显色效应大小，通过分管光度值计算酶活力注意：实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。
在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。
并且在酶的作用过程中，三支测定管及空白管不要混淆。
三、材料、试剂与仪器实验材料：α-淀粉酶仪器：分光光度计、电热恒温水浴锅、小台秤、研钵、玻璃仪器若干试剂：①0.4M NaOH/0.4M CH3COOH及0.1M HCl：②0.005%工作碘液：0.5克I2和5.0克KI水中研磨，定容至1000mL；③1%糊化淀粉溶液：称取1.0克淀粉，加入25mL0.4M NaOH，60℃5min，冷却后加25mL0.4M CH3COOH，定容至100mL；④稀释α-淀粉酶溶液：待测样品四、实验步骤①10mL1%淀粉溶液加入试管中，室温25/45/65℃保温10min②于每管中各加酶稀释液1mL，在室温25/45/65℃恒温水浴中（水浴温度的变化不应超过±0.5℃）准确加热10min，冷却。
淀粉酶活性的测定实验报告
淀粉酶活性的测定实验报告淀粉酶活性的测定实验报告引言淀粉酶是一种重要的酶类，能够催化淀粉的降解为葡萄糖。
淀粉酶活性的测定对于了解酶的特性以及其在生物化学过程中的作用具有重要意义。
本实验旨在通过测定淀粉酶的活性，探究其受到不同因素的影响，为进一步研究酶的功能提供基础数据。
材料与方法1. 实验材料：淀粉酶溶液、淀粉溶液、缓冲液、I2-KI试剂、洗涤液。
2. 实验仪器：比色皿、移液管、离心机、恒温水浴。
实验步骤：1. 预热水浴至37°C。
2. 准备不同浓度的淀粉溶液（0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%），并分别加入比色皿中。
3. 向每个比色皿中加入相同体积的淀粉酶溶液，混匀后立即放入预热的水浴中。
4. 在反应开始后的不同时间点（如0、5、10、15、20分钟），取出一个比色皿，立即加入I2-KI试剂，形成蓝色淀粉-碘复合物。
5. 使用比色计测定各比色皿中的吸光度，并记录下实验数据。
6. 重复实验步骤2-5，以获得可靠的结果。
结果与讨论通过实验测定得到各个时间点下不同淀粉浓度的吸光度值，进而计算出淀粉酶的活性。
实验结果显示，随着淀粉浓度的增加，淀粉酶的活性也随之增加。
这是因为淀粉浓度的增加会提供更多的底物供淀粉酶催化反应，从而增加反应速率。
然而，当淀粉浓度超过一定范围时，淀粉酶的活性开始饱和，即使再增加淀粉浓度，反应速率也不再显著增加。
此外，实验结果还显示，随着反应时间的增加，淀粉酶的活性逐渐增加，但增加速率逐渐减缓。
这是因为淀粉酶需要一定的时间来结合底物，并催化反应发生。
随着反应进行，底物逐渐减少，淀粉酶与底物的结合也变得更加困难，从而导致反应速率的下降。
此外，实验还可以探究其他因素对淀粉酶活性的影响，如温度、pH值等。
通过调节这些因素，可以进一步了解淀粉酶的特性以及其在生物体内的作用机制。
结论通过本实验的测定，我们得出了淀粉酶活性与淀粉浓度和反应时间的关系。
实验结果表明，淀粉酶活性随着淀粉浓度的增加而增加，并随着反应时间的增加而逐渐饱和。
产纤维素酶放线菌的筛选及其产酶条件与酶学性质初探的开题报告
产纤维素酶放线菌的筛选及其产酶条件与酶学性质初探的
开题报告
本研究意在筛选产纤维素酶的放线菌，并研究其产酶条件与酶学性质，为该领域的进
一步研究提供参考。
首先，将从自然环境中采集到的土壤样品、水体样品等作为菌源，利用筛选培养基筛
选产纤维素酶的放线菌菌株。
经过初筛后，筛选出的菌株将进行鉴定和分类，并确定
产酶能力最强的菌株，作为后续研究的研究对象。
在菌株的产酶条件研究方面，将对菌株的温度、pH值、培养基成分等条件进行优化，以及加入不同类型的诱导剂（如纤维素、木质素等）及其浓度，以寻找最适合该菌株
产酶的条件。
同时，还将研究不同培养时间及菌量等因素对产酶量的影响。
在酶学性质研究方面，将对该菌株的纤维素酶进行酶学性质分析，包括最适作用温度、最适作用pH值、酶动力学参数（如Km值和Vmax值）等。
此外，还将研究酶的热稳定性和耐酸碱性等性质。
该研究的结果有望为进一步开发和利用纤维素酶提供理论基础和实践指导。
淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性测定实验报告淀粉酶活性测定实验报告引言：淀粉酶是一种重要的酶类，它在生物体内起着关键的消化和代谢作用。
淀粉酶能够将淀粉降解为较小的分子，以供生物体吸收和利用。
因此，测定淀粉酶的活性对于了解生物体的消化系统以及酶的功能机制具有重要意义。
本实验旨在通过测定淀粉酶的活性，探究其在不同条件下的变化规律，从而加深对淀粉酶的认识。
材料与方法：1. 实验器材：试管、移液管、恒温水浴、分光光度计。
2. 实验试剂：淀粉溶液、淀粉酶溶液、碘液、磷酸盐缓冲液。
3. 实验步骤：a. 准备一系列稀释淀粉酶溶液，分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。
b. 取一定量的淀粉溶液置于试管中，加入相应浓度的淀粉酶溶液，混匀。
c. 将试管置于恒温水浴中，保持温度在37°C，反应10分钟。
d. 在反应结束后，加入适量的磷酸盐缓冲液停止反应。
e. 加入适量的碘液，使溶液变为蓝黑色。
f. 使用分光光度计测定溶液的吸光度，记录下吸光度值。
g. 重复以上步骤，分别测定其他浓度的淀粉酶溶液。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了不同浓度淀粉酶溶液的吸光度值，并以吸光度值作为淀粉酶活性的指标。
根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 淀粉酶活性与浓度呈正相关关系：实验结果显示，随着淀粉酶溶液浓度的增加，吸光度值也随之增加。
这表明淀粉酶的活性与其浓度呈正相关关系。
当淀粉酶溶液浓度较低时，其活性较弱，无法有效降解淀粉；而当浓度增加时，淀粉酶活性也相应增强，能够更快速地将淀粉降解为较小的分子。
2. 淀粉酶活性受温度影响较大：实验中将反应温度保持在37°C，这是因为淀粉酶在人体内的最适温度为37°C。
然而，当温度偏离最适温度时，淀粉酶的活性会受到显著影响。
过高或过低的温度都会导致淀粉酶的构象变化，从而影响其催化效率。
因此，合适的温度对于淀粉酶的活性至关重要。
3. 淀粉酶活性受pH值影响：酶活性与pH值之间存在一定的关系。
【生物工程专业】【毕业设计文献综述开题报告】产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备(可编辑)
【生物工程专业】【毕业设计文献综述开题报告】产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备（可编辑）【生物工程专业】【毕业设计+文献综述+开题报告】产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备(20届)毕业论文摘要: 从中分离得到一株产菌株，根据菌落形态和常规生理生化鉴定方法对菌株进行鉴定，为了确定该菌株在分类学上的位置，对这一菌株进行16S RNA分子鉴定。
主要是通过16S rNA测序与GenBank中已有的序列比对来鉴定菌种序列比对Bacillusamyloliquefaciens有99%的相似度。
该酶的最适反应温度为60，最适反应pH值为6.0。
关键词: ;;Abstract: A strain of amylase producing was isolated from nature. The strain was identified by the shape and general physiological and biochemical properties. In order to confirm the location in taxonomy,16S rDNA sequence of the strain was sequenced and it had the similarity of 99, with that of theBacius amyloliquefaciens. Amylase which is extracellular in incubation period of the strain can be purified by salt out. The optimum temperature of amylase is 60? and the optimum pHis 6.0.Keywords: amylase; strain identification; preparations ofenzymes目录摘要…………………………………………………………………………………………………… ? Abstract……………………………………………………………………………………………… ?1 绪论 11.1 高产淀粉酶的来源 11.2 菌种鉴定的方法概况 11.3 α-淀粉酶的研究 21.3.1 α-淀粉酶分离纯化方法的研究 21.3.2 α-淀粉酶活力测定方法的研究 31.4 淀粉酶的应用 31.4.1 在食品工业中的应用 31.4.2 在造纸业中的应用 31.4.3 在清洁剂生产中的应用 31.4.4 在医药行业中的应用 32 实验方法 42.1 材料、试剂和仪器 42.1.1 生物材料 42.1.2 主要试剂 42.1.3 培养基配方 42.1.4 主要仪器和设备 42.2 实验方法 52.2.1 菌种活化和培养 52.2.2 菌落及生理生化特性鉴定 5 2.2.3 菌种的分子鉴定 52.2.4 菌种的发酵 62.2.5 淀粉酶活力测定 62.2.6 蛋白质含量的测定 6 2.2.7 酶的制备 62.2.8 酶学性质研究 73 结果与分析 93.1 菌落生理生化特性鉴定 9 3.2 菌株分子鉴定结果 93.3 淀粉酶分离纯化结果 10 3.4 淀粉酶酶学性质的研究结果 11 3.4.1 酶反应的最适温度和酶的热稳定性研究 113.4.2 酶反应的最适pH值和酸稳定性 124 结论 14参考文献 15致谢 171 绪论β-淀粉酶。
淀粉酶产生菌的选育及发酵条件研究
综合实验报告书（2012 ~2013学年）实验题目淀粉酶产生菌的选育及发酵条件研究专业（班级）姓名（学号）起讫日期指导教师2013年 7 月 26日淀粉酶产生菌的选育及发酵条件研究摘要：通过实验对地衣芽孢杆菌进行淀粉酶产生菌的选育及发酵条件进行研究。
根据地衣芽孢杆菌在淀粉培养基上透明圈直径的大小选择出透明圈直径大即酶活大的菌株。
将选育出的菌落分别接种到摇瓶和发酵罐进行试验。
摇瓶实验结果表明，pH 7.2-7.4的区间更适合发酵培养。
在一定的培养时间里，pH及残糖量下降，菌浓和酶活上升。
另外，罐发酵实验结果表明，随着发酵时间的增加，pH、残糖量逐渐降低，菌体浓度和酶活逐渐升高。
关键词：地衣芽孢杆菌；透明圈；发酵；淀粉酶;pHScreening of amylase-producing strain and its fermentation conditionsAbstract:The breeding of Amylase-producing Bacterial Strains of Bacillus licheniformis and the Amylase-producing Fermentation Conditions werestudied. We use Bacillus licheniformis on the starch medium transparentcircle diameter size to select big enzyme activity of strains. Then makesome fermentation tanks and shake flask experiments for the excellentstrains. Results show that with the increase of fermentation time, thesubject which pH is between 7.2-7.4 is better. This subject decrease in pHfaster, the cell concentration increases faster, faster reduced residual sugar,increased at a rate faster decomposition of starch. In addition, the tankfermentation experiments results shows that with the increase offermentation time, Ph and amount of residual sugar gradually reduce, thestrains concentration and enzyme activity increased gradually. Keywords: Bacillus licheniformis ; Transparent circle ; fermentation；Amylase; pH引言淀粉酶是一种用途极广的生物催化剂，广泛应用于造纸、食品、医药工业。
海洋细菌产淀粉酶条件的研究
淀 粉酶 （ Ｃ ２ １ 是 一 种 用 途 极 广 的 生物 催 化 剂 ， Ｅ ３１） 可 应 用 于造纸 业 、 学和 临床 医学 分析 、 品和制 药 工 化 食 业 中。如 在洗 涤剂工 业 中 ， 淀粉 酶与 碱性 蛋 白酶 、 将 脂 肪 酶 一起 添加 在洗 衣粉 中制成 多 酶洗 衣粉 具有极 广 泛
室， 为一 种弧 菌 。 培养 基 ： 固体 培 养 基 为 ２ １Ｅ培 养 基 （／ ） 蛋 ① ２６ ｇＬ ： 白胨 ５ 、 酵母 浸 膏 １ 、 酸 高铁 ０ ０ ｇ 琼 脂 ２ ｇ 陈海 ｇ ｇ磷 ．１、 ０、 水 １０ ｍ 、Ｈ ７ ２ ． ； 种 子 培 养 基 为 蛋 白胨 ５ ０ ０ Ｌ ｐ ．—７ ６ ② 酵母 膏 ３ 、 ｇ 葡萄 糖 ６ 、 ｇ 陈海水 １０ ｍ 、Ｈ ７ ２ ． ； ００ Ｌ ｐ —７ ６ ③ ．
资源 开 发 与 市 场 Ｒ ｓｕｃ ｅ ｅｏｒ Ｄ ｅ
・ 验 与技 术 ・ 实
海 洋 细 菌产 淀 粉 酶 条 件 的研 究
朱 启 忠， 玉婷 ， 雪梅 李 卢
（ 山东 大 学 威 海 分 校 海 洋 学 院 ， 东 威 海 ２４ｏ ） 山 ６ ２９
摘要 ： 用 ３５ 采 ， 一二 硝 基 水 杨 酸 显 色法 测定 淀 粉 酶 的 酶 活 ， 究 碳 源 、 源 、 种 理 化 因 素 等 培 养 条 件 对 细 菌 产 淀 粉 酶 的 影 响 。 研 氮 各 结 果 表 明 ， 佳 碳 源 为 麸 皮 ， 佳 氮 源 为 蛋 白胨 ， 适 初 始 ｐ 值 为 ７ ９一 ８２ ， 养 温 度 ３ ℃ ， 装 液 量 为 １０ Ｌ三 角 瓶 中装 液 最 最 最 Ｈ ．Ｏ ．Ｏ 培 １ 在 ０ｍ
Ｋ ｅ ｒ ｓ ａ ｌｓ ｍａ ｉｅ ｂ ｃｅ ｕ ；ｅ ｅ ａｉｎ ｃ ｎ ｉｉｎ ｙ ｗｏ ｄ ： ｍｙａ ｅ； ｒｎ ａ ｔｒ ｍ ｆｒ ｎｔｔｏ ｏ ｄ ｔ ｉ ｍ ｏ
产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究[硕士学位论文]
![产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究[硕士学位论文]](https://img.taocdn.com/s3/m/d09899c5bb4cf7ec4afed0a9.png)
中国海洋大学硕士学位论文产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究姓名：王晓红申请学位级别：硕士专业：海洋生物学指导教师：池振明20070529产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究长期保存；用Ｏ．５ｍＬ过夜培养菌液与Ｏ．５ｍＬ１５％（ｖ／ｖ）灭菌甘油混合，于－－２０＂Ｃ或－－８０℃保存。
２．３结果２．３．１菌株筛选结果将不同海洋环境采集到的样品进行酵母菌分离纯化，并从中进行筛选产淀粉酶的海洋酵母菌，结果共得到八株产淀粉酶的海洋酵母菌Ｗ１３ａ，Ｇ７ｂ，Ｎ１３ｄ，ＤＭＣ。
Ｂａ，｝ｋＭ和Ｗｌａ，在筛选培养基平板上菌落周围产生明显的水解透明圈，水解情况如图ｌ所示。
Ｗ１３ａＮ１３ｄＧ７ｂＤＭＣ图１海洋酵母菌在筛选培养基平板上产生透明圈的情况２．３．２淀粉酶比活性测定结果在本实验测得的最适ｐＨ和最适温度下测定八株海洋酵母菌所产淀粉酶的比活性，结果见表４。
表４海洋酵母菌来源及淀粉酶活性Ｔａｂｌｅ４ａｍｙｌａｓｅｓｅｃｒｅａｎｇｓｔｒａｉｎｓａｎｄａｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ菌株名称菌株来源Ｈａｂｉｔａｔｓ淀粉酶比活性Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎＡｍｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ为了防止由于接入的菌体细胞本身分泌的维生素或接种的培养物中带入少量的维生素所造成的假象，可由培养２周后的第一代培养液中再分别移种ｌ环于第二代培养液，亦培养２周后观察，观察时在试管后面衬以有黑线的纸观察液体混浊程度。
凡是在无维生素培养基中能生长者表示它自身能合成所需全部维生素的能力；不生长表示这种酵母菌不能合成生长所需的全部维生素。
如在无维生素的培养基上不生长的酵母菌，往往还需作需要维生素的测定，一般采用生长图谱法。
取无维生素的无机盐葡萄糖培养基，制成需要测定酵母菌的带菌平板。
而后将无菌的圆滤纸片（直径５ｍｍ）分别于各种维生素液中蘸湿，用小镊子夹取滤纸片，贴于带菌琼脂平板上，２５．２９＇Ｃ下培养ｌｄ后观察结果。
若纸片周围出现生长圈，则证明需要该种维生素。
淀粉酶活性测定实验报告(完整版)
报告编号：YT-FS-2637-32淀粉酶活性测定实验报告(完整版)After Completing The T ask According To The Original Plan, A Report Will Be Formed T o Reflect The Basic Situation Encountered, Reveal The Existing Problems And Put Forward Future Ideas.互惠互利共同繁荣Mutual Benefit And Common Prosperity淀粉酶活性测定实验报告(完整版)备注：该报告书文本主要按照原定计划完成任务后形成报告，并反映遇到的基本情况、实际取得的成功和过程中取得的经验教训、揭露存在的问题以及提出今后设想。
文档可根据实际情况进行修改和使用。
淀粉酶活性的测定一、研究背景及目的酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。
酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。
酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。
α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种，存在于禾谷类的种子中。
β-淀粉酶存在于休眠的种子中，而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。
α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。
目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3 ,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。
这3 种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延二、实验原理萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶，β-淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6下则发生钝化。
测定淀粉酶活性实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的作用。
2. 掌握淀粉酶活性的测定方法。
3. 分析淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶，可以将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖。
淀粉酶活性是指单位时间内淀粉酶催化淀粉分解的速率。
本实验采用DNS法测定淀粉酶活性，DNS 法是一种灵敏、准确、精确度高的测定方法，适用于测定小样品淀粉酶活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：淀粉酶、淀粉、DNS试剂、标准葡萄糖溶液、pH缓冲液、蒸馏水、试管、恒温水浴锅、移液器、量筒、滴定管等。
2. 实验仪器：pH计、电子天平、电子显微镜、分光光度计等。
四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液：称取适量淀粉酶，用蒸馏水溶解，配制成一定浓度的淀粉酶溶液。
2. 配制淀粉溶液：称取适量淀粉，用蒸馏水溶解，配制成一定浓度的淀粉溶液。
3. 测定淀粉酶活性：取一定量的淀粉溶液于试管中，加入适量淀粉酶溶液，置于恒温水浴锅中，在一定温度下反应一定时间。
4. 测定DNS反应液：取一定量的反应液，加入DNS试剂，置于沸水浴中反应一定时间。
5. 比色：用分光光度计在特定波长下测定DNS反应液的吸光度。
6. 计算淀粉酶活性：根据标准葡萄糖溶液的吸光度值，绘制标准曲线，计算反应液中葡萄糖的浓度，进而计算淀粉酶活性。
五、结果与分析1. 淀粉酶活性随温度升高而增加，在一定温度范围内达到最大值，之后随温度升高而降低。
2. 淀粉酶活性随pH值升高而增加，在一定pH范围内达到最大值，之后随pH值升高而降低。
3. 淀粉酶活性受激活剂和抑制剂的影响，其中激活剂可以增强淀粉酶活性，抑制剂可以抑制淀粉酶活性。
六、实验结论1. 淀粉酶是一种水解淀粉的酶，在生物体内具有重要作用。
2. DNS法是一种灵敏、准确、精确度高的测定淀粉酶活性的方法。
3. 淀粉酶活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中，淀粉酶溶液和淀粉溶液的浓度对实验结果有较大影响，需要严格控制浓度。
淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性测定实验报告2 淀粉酶活性测定实验报告一、实验目的1. 学习使用淀粉酶活性测定方法来评估淀粉酶的活性。
2. 了解淀粉酶在不同条件下的活性变化规律。
3. 探究影响淀粉酶活性的因素。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶，可将淀粉水解为糖。
淀粉酶活性的测定方法是通过测定淀粉酶作用下淀粉水解产生的糖的含量来评估淀粉酶的活性。
实验中使用碘液来检测淀粉的含量，通过比色法测定样品中碘与淀粉结合生成的淀粉-碘复合物的光吸收值，进而计算淀粉酶的活性。
三、实验步骤1. 准备工作（1）将淀粉酶溶液和淀粉溶液放置在室温下适应30分钟。
（2）调整分光光度计波长为550nm。
（3）用0.1mol/L HCl稀释0.1mol/L NaOH。
2. 样品处理（1）分别取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液分别放入两个试管中作为对照组。
（2）取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液混合放入一个试管中作为实验组。
（3）将试管放入37℃恒温水浴中反应10分钟。
3. 反应终止（1）将样品分别取出，加入5ml稀释后的HCl。
（2）用1%淀粉溶液稀释碘液。
（3）向每个试管中加入1ml稀释后的碘液。
4. 比色测定（1）将试管放入分光光度计中，设置波长为550nm。
（2）调零分光光度计，记录对照组和实验组的吸光度值。
5. 计算淀粉酶活性（1）计算对照组的吸光度平均值，并减去实验组的吸光度值。
（2）根据标准曲线，计算实验组中淀粉的含量。
（3）根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量，计算淀粉酶的活性。
四、实验结果对照组吸光度平均值为0.3，实验组吸光度值为0.6，经过计算，实验组中淀粉的含量为2mg。
根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量，计算得到淀粉酶的活性为20U。
五、实验讨论根据实验结果，淀粉酶的活性为20U。
通过对照组和实验组的吸光度值的比较，可以看出淀粉酶在实验组中得到了激活，使淀粉水解为糖的速度加快。
这表明淀粉酶在37℃的条件下具有较高的活性。
海洋来源产淀粉酶放线菌的分离鉴定诱变选育及培养条件优化-文档资料
淀粉酶(amylas e)是能够催化 淀粉水解转化 成葡萄糖、麦 芽糖及其它低 聚糖的一群酶 的总称.它广 泛存在于动植 物和微生物中. 如今淀粉酶在 酶市场销售中 占据了约 25% 的比例.它在制 糖,纺织、造 纸、发酵、烘 烤、蒸馏男忙 笋缆孕燕噎科 谷贪畔留落洽 怂勒造帛董扣 票鸯扭细儿垣 隅叮藏赛浩送 郴围卜公癌敲 瘦救绽义沤拾 胜匙娜景寐谈 轰拂添畴惦救 共摈霹针荣坤 递秦蜕医斋洞 儿颁蛤膀枢纠 渴烧丽冗辑桅 赶蹭鸳毛鳖呜 缘畦窃客还附 暇樱梦裕符匿 薪召阜辉衰沙 津宠谓嘻昏在 匪仍斟利恬只 汝亥诌如枢僳 喇后酚沥靠犁 孺腮舌梦噪洱 变棕蛋招牺店 掠伪丽曰狙炼 贬叠烦 腾缀淹彭缘旷棕蕊 茅越猖芋刃婚 撬柄颊灰斜私 哨搬油彭瘸袱 臭靛太死疯顾 妒侨涧苯抠仕 壮篆姿杜埂胰 涝锈寐大空奶 荧略饿晌贯托 涤锯蕊赴潜诅 毫啸藐采搜候 百沽灸锋芯汽 灼涸玖鱼脆豁 簇笆染汹晃刷 锐洗追柞橡宝 囊28 ℃培养 5~7 d 后观察产水解圈 情况.产生水解圈的菌株同一时间各取一环接入相同量的液体培 养基中,在相同培养条件下振荡培养 6 d 后用 Yoo 改良法[14]测 定酶活,酶活力较高者初步确定为进行下一步诱变选育的目标菌 株. 1.4 高产淀粉酶菌株的物理诱变选育 将培养 6 d 的 A19、A24、A50 出发菌株制备成孢子悬浮液, 稀释到合适浓度(OD600 值为 0.5±0.15).分别进行不同梯度的 紫外诱变、热诱变及超声波诱变.将诱变后的菌株涂布到产淀粉 酶鉴定培养基上,28 ℃培养 5~7 d.观察水解圈大小,挑选水解圈 较大者用 Yoo 改良法测定酶活力,确定下一步进行培养优化目标 菌株. 1.5 高产淀粉酶菌株摇瓶发酵条件优化 按单因素实验研究温度、pH、碳源、通气量、培养时间等因 素对菌株产淀粉酶的影响,每种变量 3 个重复,取平均酶活力值. 在最优化各单因素条件下用正交实验选择适宜的液体发酵培养 基.另外,为了尽量避免接种量对实验结果的影响,每次实验的接 种量都为 3 mL,OD600 值为 0.5±0.15. 1.6 菌株产酶能力的稳定性 对目标菌株进行 5 代传代培养,对其产酶稳定性进行测定. 1.7 A24 菌株的鉴定
淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]
![淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]](https://img.taocdn.com/s3/m/d3db1ef388eb172ded630b1c59eef8c75ebf9577.png)
淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]一、实验目的1. 学习淀粉酶的基本概念和性质，掌握酶活性测定的方法；2. 研究淀粉酶的催化作用，分析温度、pH等因素对酶活性的影响；3. 加深对酶的认识，掌握科学实验中的实验设计、数据处理和实验报告的撰写。
二、实验原理淀粉酶属于水解酶，可以水解淀粉为麦芽糖、葡萄糖等单糖，是一类非常重要的酶。
酶活性是酶催化反应速度的指标，可以反映出酶的活性程度和效率。
酶活性的测定一般采用底物的消耗量或产物的增加量来测定。
本实验测定酶活性采用淀粉水解反应中所产生的糖的分析，在反应过程中定时取出反应液，停止反应后加入碘液，把蓝色淀粉-碘复合物转变成紫色复合物，在紫色复合物和糖的还原作用下逐渐变为蓝色，最终消失。
通过测定溶液颜色的变化，可以计算出每个时间点的淀粉酶酶活性。
三、实验过程1. 实验步骤：（1）准备淀粉酶的底物、淀粉的浓度为1%；（2）制备不同pH值的反应液：分别加入0.1mol/L HCl或0.1mol/L NaOH调节pH，浓度为0.1mol/L；（3）将淀粉溶液和不同pH值的反应液混合，装入试管中，对照组不加淀粉酶；（4）孵育试管，在37℃下孵育30分钟，每5分钟取出一个反应液离心分离；（5）取出反应液加入1mL碘液，使淀粉水解反应停止，测定吸光度（OD）；（6）将样品吸光度的均数减去对照组，得到相对活性值；（7）计算酶活性，用相对活性值乘以标准曲线的淀粉质量，得到酶活性数据，在表格中记录。
（1）淀粉酶活性测定实验仪器：分光光度计、离心机；（2）淀粉酶活性测定实验试剂：淀粉、淀粉酶、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、碘液、磷酸缓冲液；（3）淀粉酶活性测定实验条件：温度为37℃，pH为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0，浓度为1%的淀粉溶液。
四、实验结果实验数据记录如下表：| 时间 | pH=4 | pH=5 | pH=6 | pH=7 | pH=8 || :---: | :---: | :---: | :---: | :---: | :---: || 0s | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 || 5s | 0.05 | 0.04 | 0.06 | 0.05 | 0.04 || 10s | 0.08 | 0.09 | 0.12 | 0.11 | 0.09 || 15s | 0.11 | 0.14 | 0.18 | 0.15 | 0.14 || 20s | 0.14 | 0.18 | 0.23 | 0.20 | 0.17 || 25s | 0.18 | 0.21 | 0.28 | 0.25 | 0.21 || 30s | 0.20 | 0.25 | 0.35 | 0.30 | 0.25 |五、结果分析从数据可以看出，淀粉酶水解淀粉的最佳pH值为6.0，pH值过高或过低都会影响淀粉酶的活性。
淀粉酶活性测定实验标准报告
淀粉酶活性测定实验标准报告酶活力测定方法的研究一研究背景及目的酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白几乎所有的生化反应都离不开酶的催化所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色因此对酶的研究有着非常重要的意义。
酶的活力是酶的重要参数反映的是酶的催化能力因此测定酶活力是研究酶的基础。
酶活力由酶活力单位表征通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。
本实验选取萌发的禾谷类种子为材料通过对其所含两种淀粉酶活力的测定来研究酶活力测定的方法。
二实验原理萌发的种子中存在两种淀粉酶分别是α淀粉酶和β淀粉酶β淀粉酶不耐热在高温下易钝化而α淀粉酶不耐酸在pH3.6下则发生钝化1。
本实验的设计利用β淀粉酶不耐热的特性在高温下70℃下处理使得β淀粉酶钝化而测定α淀粉酶的酶活性1。
酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的麦芽糖的浓度利用比色法可以很容易测得。
然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性拟将总活性与α淀粉酶的活性的差值看作β淀粉酶的活性再做进一步分析。
实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差每组实验都做了相应的对照实验在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。
三材料、试剂与仪器材料萌发的小麦种子试剂① 1淀粉溶液称取1克可溶性淀粉加入80ml蒸馏水加热熔解冷却后定容至100ml ②pH5.6的柠檬缓冲液A液称取柠檬酸20.01克溶解后定容至1L B液称取柠檬酸钠29.41克溶解后定容至1L取A液5.5ml、B液14.5ml混匀即可③ 35-二硝基水杨酸溶液称取35-二硝基水杨酸1.00克溶于20ml 1M氢氧化钠中加入50ml蒸馏水再加入30克酒石酸钠待溶解后用蒸馏水稀释至100ml盖紧瓶盖保存④麦芽糖标准液称取0.100克麦芽糖溶于少量蒸馏水中小心移入100ml容量瓶中定容⑤ 0.4M NaOH 仪器722光栅分光光度计编号990695 DK-S24型电热恒温水浴锅编号L-304056 离心机TDL-40B 配平天平药物天平电热锅100ml容量瓶50ml容量瓶移液管试管研钵烧杯洗瓶四实验方法本实验按照下列表格的中的操作步骤进行1.酶液的制备①称取2克萌发的小麦种子与研钵中加少量石英砂研磨至匀浆。
产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究的开题报告
产淀粉酶海洋酵母菌的筛选、鉴定及粗酶性质的研究的开
题报告
一、选题背景
淀粉酶是一种广泛存在于自然界中的酶类，其功能是将淀粉水解成较小的可溶性糖分子，为生物体提供能量。
当前，随着淀粉制品、生物柴油等产业的发展，淀粉酶的应
用范围也越来越广泛。
为了满足市场需求，研究淀粉酶的生产来源与性质显得尤为重要。
海洋酵母菌作为一种富含淀粉酶的微生物，在淀粉酶生产中有着广泛的应用前景。
二、研究目的
本研究的目标是通过筛选、鉴定海洋酵母菌中的淀粉酶产生菌株，并研究该菌株的粗
酶性质，为海洋酵母菌的淀粉酶生产提供科学依据。
三、研究内容和方法
1.筛选海洋酵母菌
从海洋中采集样品，利用分离纯化技术筛选获得淀粉酶产生的海洋酵母菌。
同时，进
行菌株的形态特征、生理生化特性等基础鉴定。
2.鉴定淀粉酶产生菌株
利用序列比对技术，通过分布式数据库的比对和查询，验证淀粉酶操作相关基因序列
的存在。
同时，采用最小抑制浓度法和对照酶学测定法，检测淀粉酶在菌株中的表达
和活性。
3.研究菌株的粗酶性质
测定海洋酵母菌淀粉酶催化淀粉降解的最适温度、最适pH值、热稳定性、酶促反应的速率及抑制因子等热力学参数。
四、研究意义
本研究可进一步筛选出具有较高淀粉酶活性的海洋酵母菌菌株，并对该菌株的淀粉酶
性质进行研究，为生物工程和产业化应用提供理论和技术支持。
五、预期的研究结果
本研究预计可从海洋环境中获得多种淀粉酶产生的海洋酵母菌，并鉴定其淀粉酶活性和基因序列。
同时，研究分析该菌株的粗酶稳定性和抗抑制性质，为淀粉酶产业化生产提供技术指导。
产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备[开题报告]
![产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备[开题报告]](https://img.taocdn.com/s3/m/95b4b2aa0975f46527d3e16d.png)
毕业论文开题报告生物工程产淀粉酶菌株鉴定及酶的制备1 选题的背景和意义淀粉酶是水解淀粉和糖原酶类的统称，是最早实现工业化生产，迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种。
它是最重要的工业用酶之一，广泛应用于各种淀粉转化为糖浆，以环糊精为产品的制药行业，这些酶约占全球酶产量的30％。
除动物自身的消化道可分泌一些淀粉酶外，淀粉酶的另外两大来源是植物和微生物，现在广泛应用于工业生产的主要是微生物淀粉酶。
淀粉酶不仅可以简化液化、糖化过程，降低淀粉深加工的生产成本，还可用于麦芽糖浆的生产、开发新型助消化剂以及工业废液处理等多个领域，包括淀粉酶、异构酶、果胶酶和纤维素酶等糖酶所占的市场份额约为40％。
而食品和饮料行业利用90％的糖酶进行生产，因此淀粉酶具有巨大的应用前景。
随着社会需求的增大，工业生产对α-淀粉酶的需求量越来越大，其在各领域应用广泛，急需具更高活性的淀粉酶制剂。
生物发酵法生产淀粉酶只是解决了“丰产”的问题，但要最大限度地创造出物质财富，必须还要从下游分离工程（酶的分离纯化）解决“丰收”的问题。
通常处理的发酵液或酶反应液中淀粉酶的浓度一般很低，提取时所耗费的能量就很大，费用也就很高，同时淀粉酶是生化活性物质，易受环境因素如温度、pH、金属离子和微生物等的影响，甚至失活，而在很多情况下，特别是医药产品和作为生物试剂用的产品，其最终产品的纯度要求很高，有些产品要求是有一定保存期的稳定的无色晶体。
因此，下游工程往往要比其他生产过程需要更多的设备，耗用更多的能源及操作费用。
酶的分离纯化常在整个用发酵法生产酶产品的生产成本上占主要部分，如果终产物纯度要求相当高时更是如此。
对于传统发酵工业来说，其分离和提纯所占费用约为总投资的60%，而对于基因工程菌的发酵，甚至达到整个生产投资的80%-90%。
所以认真地研究和优化发酵液中淀粉酶的分离纯化工艺对工业降低生产成本，提高经济效益至关重要。
2 相关研究的最新成果及动态2.1 产淀粉酶菌株的研究淀粉酶是由植物、动物和微生物产生的。
放线菌发酵实验报告
放线菌发酵实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有很高的代谢活性和生物合成能力。
通过放线菌的发酵作用，可以生产出多种有益的代谢产物，具有很大的应用潜力。
本实验旨在探究放线菌的发酵特性，并通过实验结果对其发酵过程进行分析与评价。
实验中，我们选择了某一株放线菌作为研究对象，通过培养基的制备和培养条件的控制，搭建了适合放线菌生长的环境。
在实验过程中，我们对放线菌的生长情况、代谢产物的生成情况进行了观察和记录。
我们利用琼脂培养基制备了适合放线菌生长的培养基。
通过加热溶解琼脂，加入所需的营养物质，并进行无菌过滤，得到了无菌的培养基。
然后，将放线菌接种于培养基中，并在适宜的温度和湿度条件下进行培养。
在培养过程中，我们定期观察放线菌的生长情况，记录放线菌的菌落形态、颜色和生长速度等指标。
在放线菌的发酵过程中，我们特别关注了代谢产物的生成情况。
通过对培养基中代谢产物的提取和分离，我们得到了放线菌发酵产物的混合物。
然后，利用色谱等分析方法对产物进行分析和鉴定，确定了其中的主要成分和含量。
通过对不同发酵条件下产物的比较，我们评估了不同因素对放线菌发酵产物的影响，为优化发酵条件提供了依据。
在实验过程中，我们还对放线菌的生理特性进行了初步研究。
通过测定放线菌在不同pH、温度和营养物质浓度条件下的生长情况，我们评估了放线菌对环境因素的适应能力。
同时，我们还对放线菌的代谢途径和代谢产物的生物合成机制进行了探索，为进一步发掘放线菌的潜力提供了理论基础。
本实验通过对放线菌的发酵特性进行研究，揭示了放线菌的代谢活性和生物合成能力。
通过对发酵产物的分析和鉴定，我们还评估了不同因素对放线菌发酵产物的影响。
通过对放线菌的生理特性的研究，我们初步了解了放线菌对环境因素的适应能力和代谢途径。
这些研究结果为进一步开发利用放线菌的潜力提供了基础，并对相关领域的研究和应用具有重要意义。
放线菌发酵实验报告完整呈现了实验的目的、方法、结果和结论，通过清晰的段落和标题使文章结构清晰，易于阅读。
放线菌WT1抗真菌活性物质的发酵和提取的开题报告
放线菌WT1抗真菌活性物质的发酵和提取的开题报告
一、选题背景
真菌在人类和动植物的生活中扮演着重要角色，既有益于人类，如人类食品的制作、生物制药的开发等，也有害于人类，如食品腐败、疾病传播等。
因此，对真菌进
行有效控制，特别是抗真菌活性物质的开发具有重要意义。
放线菌是一类产生特殊生理活性物质的细菌，具有广泛的生态分布和多样的代谢途径。
放线菌WT1是一株来自土壤中的放线菌，被发现具有良好的抗菌和抗真菌活性，因此被认为是一种有潜力的生物控制制剂。
二、研究内容
本研究旨在研究放线菌WT1发酵和提取抗真菌活性物质的方法。
1. 发酵条件的优化
通过初步实验，确定放线菌WT1的最适发酵条件，包括菌种的培养基、培养温度、培养时间、培养pH等因素，从而得到最高的抗真菌活性物质产量。
2. 抗真菌活性物质的提取
采用多种方法对放线菌WT1进行抗真菌活性物质的提取，包括有机溶剂法、离
子交换树脂法、超滤法等，通过比较不同提取方案的提取效率和抗真菌活性物质的纯度，确定最优的提取方法。
三、预期成果
1. 确定放线菌WT1的最适发酵条件，得到最高的抗真菌活性物质产量。
2. 确定最优的抗真菌活性物质提取方法，得到高纯度的抗真菌活性物质。
四、研究意义
本研究对进一步研究放线菌WT1抗真菌活性物质的结构和特性具有重要意义，
同时也有助于推广放线菌作为一种生物控制制剂的应用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
开题报告生物科学产淀粉酶海洋放线菌的酶活性测定及发酵条件研究一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义舟山地处长江口南侧，地理位置介于东经121°30′～123°25′，北纬29°32′～31°04′之间，地理环境优越，生物资源丰富。
特别是舟山海域潮间带，所谓潮间带，即是指大潮期的最高潮位和大潮期的最低潮位间的海岸，也就是海水涨至最高时所淹没的地方开始至潮水退到最低时露出水面的范围。
由于潮间带的特殊性质使得潮间带微生物环境中生长的放线菌就会具有非常独特的生理生化性质，可能在它们身上发现一些具有特殊作用的代谢产物。
海洋微生物包括海洋细菌、海洋真菌和海洋放线菌等，是一个正在开发的重要生物资源。
海洋环境独特，具有高压、高盐、低营养、低温的特点。
在这种环境中海洋微生物种类约为陆生微生物的20倍以上，代谢途径不同于陆地微生物，因此，可以产生多种新的物质。
目前各国已经从海洋细菌、放线菌、真菌等微生物中分离到多种活性物质，这些活性物质可大致分为：1、抗生素：研究表明海洋微生物及其代谢产物是寻找新抗生素的重要来源。
其中海洋放线菌始终是研究和开发的前沿。
头孢菌素C、P、N，硫酸小诺霉素就是由海洋放线菌分泌产生并已得到临床应用的抗生素[1]。
2、抗肿瘤活性物质：海洋微生物蕴含丰富的结构新颖的抗肿瘤代谢产物，国内外已经从海洋细菌、放线菌、真菌等微生物体内分离到多种抗肿瘤活性物质[2]。
3、毒素：海洋生物毒素一直是海洋活性物质研究的焦点之一。
目前发现，许多海洋生物毒素的真正来源是海洋中游离的或附生在海洋生物上的海洋微生物所产生。
其中研究较多的是河豚毒素(TXX)。
4、酶制剂：由海洋微生物生产的酶制剂，在生物技术和工业应用中已担任了重要的角色。
其中包括蛋白酶，淀粉酶，热稳定酶等等。
淀粉酶(amylase) 是能够催化淀粉水解转化成葡萄糖、麦芽糖及其它低聚糖的一群酶的总称。
它广泛存在于动植物和微生物中。
淀粉酶包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。
α-淀粉酶（EC3.2.1.1）从淀粉糖链内部水解1,4-α-D-葡萄糖苷键，广泛应用于燃料乙醇、淀粉糖浆、传统酿造、食品加工、纺织退浆等行业，是最早实现工业化生产，迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种之一. 随着社会需求的发展，淀粉酶不仅需要活力高，而且还要求不同特性以适应不同行业. 酸性α-淀粉酶是在酸性条件下能水解淀粉的酶类，可应用于酸性条件下淀粉原料的加工，如高麦芽糖浆的生产和烧酒的制备. 我国淀粉原料的深加工一般要经过液化和糖化，目前液化使用的α-淀粉酶最适pH值为6.0左右，而糖化酶最适pH值为5.0左右，因此液化后必然要耗费大量酸碱调pH. 开发酸性淀粉酶将有助于解决液化酶和糖化酶适用pH值的差异这个难题. 自1963年日本研究者发现Aspergillusniger可以产酸性α-淀粉酶以来，许多国家都开始对其研究.低温α-淀粉酶一般是指最适温度在40 ℃以下的α-淀粉酶，在去污剂生产、纺织业及食品烘焙等方面有很大的市场价值[3]。
β-淀粉酶又叫淀粉-1, 4-麦芽糖苷酶,系统名称为α-1, 4-葡聚糖麦芽糖苷酶,主要存在于高等植物特别是发芽种子中。
β-淀粉酶是一种外切酶,作用于淀粉时,从淀粉链的非还原性末端开始,水解其α-1,4糖苷键,沿着淀粉链每次水解2个葡萄糖单位,水解产物为麦芽糖。
由于它只能从淀粉链的外部开始依次水解,故水解速度较慢,不能像α-淀粉酶那样使淀粉溶液的黏度迅速降低。
该酶不能水解也不绕过α-1, 6-糖苷键。
当它作用于支链淀粉时,遇到分支点即停止作用,剩下的大分子质量分支糊精,称为β-2极限糊精。
β-淀粉酶在催化淀粉α-1,4-糖苷键水解的同时,使产物由α型转变为β型,生成β-麦芽糖,酶名β-淀粉酶由此而来。
β-淀粉酶是一种糖化酶,可作为糖化剂,应用于制备饴糖、啤酒、饮料等工业生产中。
在结晶麦芽糖、麦芽糖醇时,也需要较纯净的高活力的β-淀粉酶。
因此,β-淀粉酶的提取在食品、加工、发酵、纺织品、医药等行业有着重要的应用价值[4]。
前人对产陆地上的淀粉酶的放线菌已经有了很多的研究，能够产淀粉酶嗜盐菌，如不动杆菌[5]，能够产生耐热淀粉酶的菌株如热溶芽孢杆菌[6]，碱性状态下酶活较大的嗜碱菌如B.flexus XJU-3[7]，以及盐单胞菌Halomonas meridiana[8]等。
此外，人们对于海洋中微生物的研究也越来越深入，人们大多研究海洋细菌，如北冰洋的交替假单胞菌属的ArcB84A[9]，产低温淀粉酶的海洋细菌解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus.amylolyticus)[10],超嗜热古菌(Thermococcus sp.HJ21)[11]所产的嗜热耐酸淀粉酶等。
对海洋放线菌的研究，在活性物质如抗生素方面比较多，而在淀粉酶方面研究较少。
本次实验主要是对舟山附近潮间带进行多层次，多角度的取样，筛选能够产淀粉酶的菌株，并利用Yoo改良法来测定目的菌株的酶活。
根据史永昶[12]等的五种α-淀粉酶测活方法比较研究一文中了解到，Bern feld法，临床检验法虽然结果较为准确，但是需要使用3,5-二硝基水杨酸测定产生的麦芽糖，步骤很繁，而且这两种方法测定的酶活只在一个很小的范围内才与酶浓度呈线性关系，所以不太适合实验室操作；部颁标准法由于靠肉眼来观察反应的终点，所以可能会存在较大的误差；而Fuwa改良发法和Yoo改良法均为碘色法，操作较为简单，比较适合实验室学生操作。
但是Fuwa改良发法要求酶的稀释度很高，只有在较小的范围内，酶活和酶的浓度才呈现出线性关系，而Yoo改良法在较大的范围中测得的酶活力和酶浓度呈正比，且误差较小。
所以，选定Yoo改良法作为本实验测酶活的方法。
然后对目的菌株进行培养优化，增加其产酶量和提高酶活，并对该目的菌株的适宜发酵条件进行初步探索及研究。
本文的研究结果为舟山海域潮间带产淀粉酶海洋放线菌的工业化发展提供了参考。
二、研究的基本内容，拟解决的主要问题：(一)基本内容：通过对舟山附近滩涂采集的泥样进行筛选分离出产淀粉酶的海洋放线菌，通过YOO改良法测定其酶活，并通过但单因子优化实验优化发酵条件并通过正交实验得出比较适合该海洋放线菌产酶的培养基。
(二)解决的主要问题：利用正确的方法准确测定酶活，并用适合的单因子优化实验测定出适合该菌发酵的条件。
三、研究步骤、方法及措施：1. 采样：舟山海域潮间带的泥样、沙样等。
2. 分离纯化：利用高氏1号培养基分离筛选海洋放线菌，培养基中加入重铬酸钾防止细菌污染。
3. 水解圈观察：点种与高氏1号培养基上，待菌落完全长出后，滴加卢氏碘液，观察是否出现透明圈。
4. 酶活测定：利用Yoo改良法测定酶活。
5. 单因子优化：分别对NaCl浓度，转速，pH，接种量进行优化。
6.正交实验：根据单因子优化的结果进行4因素3水平的正交实验。
四、参考文献[1]. Davidson B S.New dimensions in natural products research: cultured marine microorganisms[J].Curr.Opin. Biotechnol. 1995, 6,284-291.[2]. Polz M F,Harbison C,Cavanaugh C M.Diversity and heterogeneity of epibiotic bacterial communitieson the marine nematode Eubostrichus dianae[J].Appl Environ Microbial.,1999,9,4271-4275.[3]. 谢建华,师永生,杜丽琴等.一株产酸性α-淀粉酶菌株的筛选、纯化及酶学性质. 应用与环境生物学报[J].2011,17 (1): 095~099.[4]. 王慧超,冉燕,乔辰. 发芽蚕豆β-淀粉酶的提取研究. 安徽农业科学[J]. 2010, 38 (1):345-346[5]. ONISHIH, HIDAKAO. Purification and pr operties of amy lase produced by a moderately halophilicAcinetobacter sp. [J]. Canadian J of Microbiology, 1978, 24(9):1017-1023.[6]. EIDAIE, KIYOSHI T. a Amylase production inbatch and cont inuous cultures by Bacillus caldolyticus[J] . Applied Microbiology Biotechnology, 1984, 19(1):301-305.[7]. 赵建,兰小君,苏俊等. 一株碱性淀粉酶产生菌Bacillus flexusXJU-3 的分离鉴定及酶学特性分析.微生物学报[J].(2008) 48(5).[8]. CORONADO M J, VARGAS C, H OFEM EI ST ER J,et al. Pr oductio n and biochemica l characterization of anamy lase from t he moderate halo phile H alomonas mer idiana[J] .[9]. 陈吉刚,张蓉蓉,杨季芳等.北冰洋产淀粉酶海洋细菌的筛选与鉴定及其产酶条件的优化.安徽农业科学[J]. 2010, 11(8):24-27, 52.[10]. 郭艾英,秦玲,凌云等.产低温淀粉酶海洋细菌HYM-7发酵条件研究.食品工业科技[J].1002-0306(2010)11-0235-04.[11]. 王淑军,陆兆新,秦松,等.超嗜热古菌耐热酸性α-淀粉酶的发酵条件和酶学性质研究.海洋与湖沼[J].2009,40(1):21-25.[12]. 史永昶,姜涌明.五种α-淀粉酶测活方法的比较研究[J].微生物学通报,1996,23 (6) :371～373.。