草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展

江西农业学报2010，22(8)：88～90A ct a A gr i cul t ur ae J i an gxi草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展肖君泽，黄益鸿，姜放军，邓沛怡，阎珂(湖南生物机电职Ⅱk技术学院，湖南长沙410127)摘要：介绍了在草莓病毒病为害特点及其作用机理。

综述了热处理、茎尖培养、花药培养等草莓脱毒技术和运用指示植物、血清学和分子生物学等检测技术。

介绍了草莓无毒苗的栽培效果。

关键词：草莓；病毒病；脱毒；检测技术；无毒苗中图分类号：$668．4文献标识码：A文章编号：1001—8581(20LO)08—0088-03R esear ch P r ogr e s s i n D e t oxi cat i on and Tes t i ng of St raw berr y V i r us D i s ea seX I A O J哪一ze，H U A N G Y i—ha ng，JI A N G Fan g—j u n，D E N G P e i—yi，Y A N K e(H un an B i o l ogi cal a nd E l ec t r om ec hani cal P o l”e chni c，Chan gsha410127，Chi na)A bs t r act：111j S a rt i cl e i nt r oduced t he i niur i o us charact er is t i cs a nd act ion m ec ha ni sm of s t r aw ber r y vir us di seas c，sum m ar i zed s o m e detoxi cati on t echni ques of s t r aw b er r y vi r us di se ase．suc h签he at—t r ea t m ent，m er i s t em—t i p cul t ur e，ant h er cul t ur e，and de—scr i be d appl yi ng s ev er al t est i ng t echn i ques of st r aw ber r y vi r us di s eas e suc h as i nd i cat ion pl ant s，s er ol ogy and m ol ecul ar bi ology t o en‘s ur e a gre at deal of vi r us—f r ee s eedli ngs br ed f r om vi r us—f r ee m at er nal pl ants．K e y w o r ds：S t r aw ber r y；V i r u s di s eas e；D et oxi cat i on；T es t i ng t ech nol ogy；V i r u s—f r ee s eedl i ng草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本水果常绿植物，它具有适应性广、结果早、生长周期短、果实营养丰富、经济价值高的特点，是深受人们喜爱的时令水果之一。

在草莓的生产过程中，为了发展和保持其优良品种的经济性状，人们一直采用匍匐茎埋压及分株等营养繁殖技术繁育种苗，这导致了病毒病不断地传播和积累，为害也日趋严重…。

由于病毒病的为害，植株生长衰弱、结果期推迟、产量减少、果品质量明显降低。

l草莓病毒病及其为害世界革莓种植区出现的病毒病、类病毒病和菌原体病害等有25种之多，其中分布广泛、为害严重的有6～7种旧p1。

在我国草莓生产区，已调查和鉴定的草莓病毒病主要有4种：草莓斑驳病毒病、草莓轻型黄边病毒病、草莓皱缩病毒病和草莓镶脉病毒病’21。

目前，在生产上，草莓带病毒株率平均为80．2％，单种病毒侵染株率为41．6％，2种以上病毒复合侵染株率为38．6％¨1。

1．1病毒病的致病机理病毒侵染草莓植株后，在植株体内的活细胞中迅速传播和繁殖。

它既消耗植株的大量能量，又从植株体细胞中获取大量的核糖体、核酸及蛋白质以构建新的病毒个体，进而影响草莓整个植株细胞的正常代谢和生长发育[3：。

同时，病毒在代谢中还产生多种醛类、醌类或其他大分子有毒物质，进而促进植株活细胞的衰老和死亡。

还有的病毒代谢产物能激活某些氧化酶，破坏活细胞中叶绿体的形成，造成叶沿、叶脉失绿(如草莓镶脉病和轻型黄边病)或形成一些褪绿叶斑(如草莓斑驳病)”j。

1。

由于病毒的为害，破坏了草莓植株的正常代谢，抑制了植株的正常生长，降低了果实的产量和品质，同时，还增加了植株对肥料的无效消耗¨1。

1．2病毒病的为害草莓病毒病为害面广，是草莓生产上的重要病害之一。

病毒具有潜伏侵染的特性，植株不会很快表现出症状而被忽视。

在诸多研究报道中，由于草莓病毒源不同，表现的为害症状也各不相同。

1．2．1草莓斑驳病毒(SM oV)草莓斑驳病毒分布极广，凡有草莓栽培的地方几乎均有分布。

该病毒单独侵染草莓时无明显症状，但病株长势衰退，果实品质下降。

与其他病毒混合侵染，在指示种森林草莓上弱毒株系侵染时，病株叶片出现黄白不整齐的褪绿斑驳；而强毒株系侵染时，病株出现严重的矮化，叶片变小，扭曲并产生褪绿斑，呈丛簇状，叶脉透明，脉序混乱一川。

1．2．2草莓轻型黄边病毒(SM Y E V)草莓轻型黄边病毒单独侵染时，无明显症状，仅使植株轻微矮化，草莓长势变弱。

该病毒与其他病毒复合侵染时，容易引起叶片黄化或叶缘失绿，幼叶反卷，成熟叶片产生坏死条斑或叶脉坏死、扭曲，甚至出现叶片枯死。

植株的矮化、叶柄短缩、老叶变红，造成草莓长势锐减，产量和品质严重下降，减产严重时可高达75％‘6，。

…。

1．2．3草莓镶脉病毒(SV B V)草莓镶脉病毒单独侵染时，无明显症状，但会引起植株生长衰弱，匍匐茎抽生量减少，草莓的产量和品质均下降；与其他病毒复合侵染收褐目期：2010一05—0r7基金项目：湖南省农业厅重点科研项目“章姬草莓脱毒快繁技术研究”(20097614)。

作者简介：肖君泽(1952一)，男，湖南望城人，教授，硕士，主要从事植物遗传育种、栽培等面教学与研究。

8期肖君泽等：草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展89后，引起病株叶皱缩，扭曲，植株极度矮化，小叶向背面反卷，形成黄色或紫色病斑，匍匐茎抽生量明显减少，成熟叶片的网脉变黑或坏死，后期部分或全株枯死[9卅“。

1．2．4草莓皱缩病毒(SC r V)草莓皱缩病毒是对草莓为害最大的病毒病之一。

感病植株表现为叶片畸形，叶片上产生绿斑，沿叶脉出现小而不规则的褪绿斑或坏死斑，叶脉褪绿透明，幼叶生长不对称，扭曲皱缩，小叶黄化，叶柄缩短，叶小，植株矮化。

病毒株草莓匍匐茎的抽生量减少，繁殖力下降，果实变小，强毒株单独侵染时可造成草莓减产35％～40％。

与其他病毒复合感染，为害更严重，可导致草莓产量大幅度下降，甚至绝收一．12J。

2草莓病毒脱除技术草莓与其它植物的营养繁殖途径一样，在长期的营养繁殖中，多种病毒会不断地传播和蔓延。

由于草莓植株本身没有对病毒的免疫能力，而且目前又没有特效的药剂或方法治愈草莓病毒病。

因此，实现草莓无病毒栽培的惟一有效途径就是脱除草莓植株中的病毒，获得无病毒原种母株，而后以此大量繁育无病毒苗，以不断满足生产的需要¨L“。

2．1热处理脱毒技术热处理脱毒是最早应用于培育各种营养繁殖植物无病毒母株的有效方法。

多数研究者认为：在一定的高温条件下，能使一些病毒钝化。

取下在热处理期间长出的新芽进行实生嫁接，以及对土壤进行消毒，或进行组织培养，得到无病毒的原种植株。

热处理采用恒温或变温的热空气处理带病母株，其脱毒效果较好_L”j。

草莓采用37—38cc恒温或35—38℃变温处理能有效地减少热处理中植株的死亡。

热处理中相对湿度宜保持在70％一80％，在光照5000I x下处理16h，处理后取其匍匐茎繁殖后代。

9’”’”。

2．2茎尖培养脱毒技术草莓植株在感染病毒后，其传播、扩散速度迅速，很快就能遍布全株。

陈爱萍等…1研究报道，病毒在植株的各器官和组织中分布并不均匀，茎尖和根尖分生组织一般都不会感染或很少感染病毒。

在解剖镜下，把含有2个叶原基的O．2I／l nl大小的茎尖切下，用无菌操作方法接种在培养基上，在适宜的温度和光照下培养，组培苗在栽后1周内宜保温、保湿以使之成活哺]。

茎尖培养是目前草莓脱毒中应用最广的方法，对较大的分生组织可结合短期高温处理，以提高脱毒效果[11J。

2．3花药培养脱毒技术自20世纪70年代日本大泽胜次等发现草莓花药培养植株可以脱除病毒后，乔奇、孟志卿、马洪爱、曹善东等研究并验证了通过花药培养可以获得无病毒苗。

因此，花药培养已成为草莓培养无毒苗的重要方法。

采集草莓现蕾后2—4m m大小的花粉发育的单核期花蕾，经过消毒处理后，在无菌条件下取花药进行接种培养，诱导愈伤组织的产生，再由愈伤组织分化形成不定芽，最后分化出带有茎叶的植株，这样就可以实现草莓脱除病毒的目的。

1’7””18j。

3草莓无病毒检测鉴定许多报道表明，采用各种脱毒技术所获得的草莓苗并不一定都能完全脱除病毒，因此，在把这些草莓植株作为生产无病毒原种苗的母株之前，需要进行无病毒检测鉴定。

3．1指示植物检测鉴定指示植物检测鉴定是指通过指示植物对某种或几种病毒及类似病原物敏感的特性，能较快地显现出特有症状的检测鉴定方法。

谷建田等’171研究报道，检测草莓病毒病的植物有野生草莓的2个类群：森林草莓(F觥口)和深红草莓(F ar g／n一／anh)。

目前国际检测草莓病毒病通用的是森林草莓中的EM C、A pl i ne、U C。

、U C，和U C。

，以及深红草莓中的C、uc。

o、ucl。

及uC。

2。

其中以EM C、A pl i ne、U C。

和uC5的应用最广泛。

马崇坚认为：各种病毒在指示植物上虽有不同的典型症状，但在生产实践中，同一株草莓大多有几种病毒的复合侵染，导致某种指示植物常有多种症状反应，使得症状的变化差异很大。

2’”。

因此，为了能更好地明确病毒种类而采用了成套应用指示植物的做法，常将U C。

、U C，、U C。

和ucm这4种指示植物同时应用，并进行比较分析，从而保证了检测结果的准确性。

在常用的指示植物中，U C，对多种草莓病毒的敏感性都比较高，而且生长势强、叶柄粗、易嫁接成活，因此是一种检测草莓病毒比较理想的指示植物一’”J。

3．2血清学检测鉴定植物病毒是由蛋白质与核酸组成的核蛋白。

它是一种很好的抗源，将其给动物注射后，在动物体内产生抗体；当抗原和抗体结合时，就会产生血清反应。

由于抗体主要存在于血清中，所以把含有抗体的血清称为抗血清。