药理学实验课
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学习基本的实验方法
C
培养实事求是的学习作风
D
培养动手能力、科研能力
药理学实验
一、基本实验操作 不同给药途径的药物对小鼠睡眠时间的影响
1
实验目的及原理
实验目的： 1）掌握小鼠给药的基本方法。 2）比较不同给药途径药物起效的时间快慢。
实验原理：不同的给药途径的药物起效时间不 相同。
2
主要实验材料
实验动物：小鼠
3 主要实验过程（热板法）
设定仪器温度（55℃）
动物初筛
腹腔注射
给药组： 0.4%吗啡 0.1ml/10g
给药组：生理盐水 0.1ml/10g
给药后30min、45min、60min再次测定各组小鼠痛阈值。
小鼠筛选方法：
• 筛选指标：小鼠的痛阈值——即小鼠出现 疼痛反应的时间。 以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。 测定2次痛阈值，以痛阈值大于5秒，小于 30秒，做为筛选合格动物。
物未添足，将动物取出，痛阈值以60s计算。 • 实验中保持小鼠足底及热板内干燥。 • 冰醋酸现用现配。
问题与思考
？
吗啡药理学 作用、机制 ？
两种镇痛模 型的区别？
药理学实验
三、抗炎实验
1
实验目的及原理
1.1 实验目的：
学习利用化学药物或者鸡蛋清制急性炎症动物 模型方法。
观察糖皮质激素的抗炎作用。
大鼠足外踝标记 皮下注射新鲜蛋清
3 主要实验步骤（小鼠耳肿胀）
小鼠称重、标记、分组
腹腔注射
给药组：氢化可的松
对照组： 生理盐水
0.1ml/10g
0.1ml/10g
30min后用二甲苯50μl均匀涂抹每只鼠的右耳
90mim后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同部位左右耳 片，电子天平称重。
4 实验注意事项
3 主要实验过程（扭体法）
动物随即分组
腹腔注射
给药组： 0.4%吗啡 0.1ml/10g
对照组： 生理盐水 0.1ml/10g
小鼠扭体反应
30min后各组小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）； 记录15min内各组小鼠的扭体次数。
4
实验注意事项
• 热板仪温度设定：55℃±0.5 ℃。 • 室温 :以15 ～20ºC为宜 。 • 热板法中动物性别的选择：雌性。 • 痛阈值判定指标：添后足。 • 痛阈值时间：初筛（＞5s、＜30s）。 超过60s动
4
实验注意事项
（1）注意基本给药途径的正确操作。 （2）注意小鼠翻正反射消失时间判定
（＞1min）。 （3）客观真实的记录实验数据。
问题与思考
？
仔细观察记录实验 结果，结合药理学 总论知识思考，何 种给药途径起效最 快。为什么？
影响药物起效的 因素有哪些？
请分析本次实验 中，那些因素可 影响实验结果。
药理学实验课
实验课程简介
实验课程安排
共18学时
（1）实验基本技能 （2）吗啡镇痛实验 （3）药物抗炎实验 （4）药物对家兔离体肠平滑肌的作用 （5）药物对家兔尿量的影响 （6）传出神经药物对家兔血压的影响
•实验课程学习要求
实验前
1.预习实验指导 ，明确实验目的 和要求，充分了 解实验方法 2.进入实验室， 必须穿白大衣. 3.检查实验器材
实验药物：1%戊巴比妥钠
3
主要实验过程
称重、分组
（0.1ml/10g）
腹
皮
灌
腔
下
胃
给
给
给Biblioteka Baidu
药
药
药
小鼠翻正反射消失时 翻正反射再次恢复时间
实验基本技能
1
小鼠基本捉拿、固定方法
2
小鼠基本给药方法
•小鼠固定方法
图1
图2
注意事项：
➢ 右手提起鼠尾, 左手拇指 和食指捏住双耳及头部 皮肤，无名指、小指和 掌心夹其背部皮肤及尾 部,便可将小鼠完全固定。 如图-1。
药理学实验
二、吗啡镇痛实验
1 实验目的及原理
➢实验目的： ①掌握镇痛药的实验方法。（热板法、扭体法） ②观察药物的镇痛作用。
➢实验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生疼痛反应，观察给药前后小鼠疼痛反应 的变化。（痛阈值、扭体次数）
2
主要实验材料
实验动物：小鼠（雌性） 实验药物： 0.4%吗啡 主要仪器：热板测痛仪（RB-200智能热板仪）
➢ 单手捉持，用拇指和食 指抓住小鼠尾巴，用小 指、无名指和手掌压住 尾根部，再用腾出的拇 指、食指及中指抓住鼠 双耳及头部皮肤而固定 。 如图-2。
•皮下注射
注意事项：
1. 取背部及后腿皮下，注 射时用左手拇指及食指轻 轻捏起皮肤，右手持注射 器将针头刺入，固定后即 进行注射。
•腹腔注射
注意事项：
踝关节的突起点标记， 作为测量标志（见后图）
腹腔注射
给药组：氢化可的松溶液 1ml/100g 体重
对照组：生理盐水 1ml/100g 体重
30min， 从右后足掌心向掌跖关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清 0.1ml。 (见后图)
注射蛋清后30min、60 min、90min，测量右后足的体积，
实验照片
• 抗炎实验中动物性别的选择：雄性。 • 测定大鼠足体积时，选定统一测量位置（大鼠足外
踝关节突起）。 • 小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免滴
1.2 实验原理：
化学刺激物或者蛋清，可致动物急性炎症，出 现局部肿胀。比较給予药物前后动物局部肿胀 程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。
2 主要实验材料
✓ 实验动物：小鼠、大鼠（雄性） ✓ 实验药物：氢化可的松 ✓ 主要仪器（PV-200足趾肿胀测定仪）
3 实验主要步骤（大鼠足肿胀）
动物称重、分组
实验中
1.根据实验内容 进行小组内分工 2.严格、准确地 按照指导中的实 验方法进行实验 操作。 3.仔细、真实的 记录实验结果。
实验后
1.死亡动物放在 指定地点；存活 动物放入笼内。 2.将器材洗净擦 干，放回原处 3.每小组轮流负 责搞好实验室内 卫生 。
实验课程学习目的
A
巩固药理学基本理论
B
1、针头刺入部位不宜太接近 上腹部或太深，以免刺破内脏。 针头与腹腔的角度不宜太小， 避免刺入皮下。 2、使用针头不宜太粗，避免 药液注射后从注射孔流出。注 射后可用棉球按一下注射部位。
•灌胃给药
注意事项：
1.用左手拇指和食指抓住鼠两耳 和头部皮肤，其他三指抓住背部 皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定 好动物，头部和颈部保持很平,右 手取注射器进行灌胃。 2.灌时针头沿鼠口角通过食管进 入胃内。灌时如很通畅，则表示 针头已进入胃内；如动物有呕吐 动物或强烈挣扎，必须拔出后按 上述方法重新操作。决不可进针 不顺硬向里插。
C
培养实事求是的学习作风
D
培养动手能力、科研能力
药理学实验
一、基本实验操作 不同给药途径的药物对小鼠睡眠时间的影响
1
实验目的及原理
实验目的： 1）掌握小鼠给药的基本方法。 2）比较不同给药途径药物起效的时间快慢。
实验原理：不同的给药途径的药物起效时间不 相同。
2
主要实验材料
实验动物：小鼠
3 主要实验过程（热板法）
设定仪器温度（55℃）
动物初筛
腹腔注射
给药组： 0.4%吗啡 0.1ml/10g
给药组：生理盐水 0.1ml/10g
给药后30min、45min、60min再次测定各组小鼠痛阈值。
小鼠筛选方法：
• 筛选指标：小鼠的痛阈值——即小鼠出现 疼痛反应的时间。 以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。 测定2次痛阈值，以痛阈值大于5秒，小于 30秒，做为筛选合格动物。
物未添足，将动物取出，痛阈值以60s计算。 • 实验中保持小鼠足底及热板内干燥。 • 冰醋酸现用现配。
问题与思考
？
吗啡药理学 作用、机制 ？
两种镇痛模 型的区别？
药理学实验
三、抗炎实验
1
实验目的及原理
1.1 实验目的：
学习利用化学药物或者鸡蛋清制急性炎症动物 模型方法。
观察糖皮质激素的抗炎作用。
大鼠足外踝标记 皮下注射新鲜蛋清
3 主要实验步骤（小鼠耳肿胀）
小鼠称重、标记、分组
腹腔注射
给药组：氢化可的松
对照组： 生理盐水
0.1ml/10g
0.1ml/10g
30min后用二甲苯50μl均匀涂抹每只鼠的右耳
90mim后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同部位左右耳 片，电子天平称重。
4 实验注意事项
3 主要实验过程（扭体法）
动物随即分组
腹腔注射
给药组： 0.4%吗啡 0.1ml/10g
对照组： 生理盐水 0.1ml/10g
小鼠扭体反应
30min后各组小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）； 记录15min内各组小鼠的扭体次数。
4
实验注意事项
• 热板仪温度设定：55℃±0.5 ℃。 • 室温 :以15 ～20ºC为宜 。 • 热板法中动物性别的选择：雌性。 • 痛阈值判定指标：添后足。 • 痛阈值时间：初筛（＞5s、＜30s）。 超过60s动
4
实验注意事项
（1）注意基本给药途径的正确操作。 （2）注意小鼠翻正反射消失时间判定
（＞1min）。 （3）客观真实的记录实验数据。
问题与思考
？
仔细观察记录实验 结果，结合药理学 总论知识思考，何 种给药途径起效最 快。为什么？
影响药物起效的 因素有哪些？
请分析本次实验 中，那些因素可 影响实验结果。
药理学实验课
实验课程简介
实验课程安排
共18学时
（1）实验基本技能 （2）吗啡镇痛实验 （3）药物抗炎实验 （4）药物对家兔离体肠平滑肌的作用 （5）药物对家兔尿量的影响 （6）传出神经药物对家兔血压的影响
•实验课程学习要求
实验前
1.预习实验指导 ，明确实验目的 和要求，充分了 解实验方法 2.进入实验室， 必须穿白大衣. 3.检查实验器材
实验药物：1%戊巴比妥钠
3
主要实验过程
称重、分组
（0.1ml/10g）
腹
皮
灌
腔
下
胃
给
给
给Biblioteka Baidu
药
药
药
小鼠翻正反射消失时 翻正反射再次恢复时间
实验基本技能
1
小鼠基本捉拿、固定方法
2
小鼠基本给药方法
•小鼠固定方法
图1
图2
注意事项：
➢ 右手提起鼠尾, 左手拇指 和食指捏住双耳及头部 皮肤，无名指、小指和 掌心夹其背部皮肤及尾 部,便可将小鼠完全固定。 如图-1。
药理学实验
二、吗啡镇痛实验
1 实验目的及原理
➢实验目的： ①掌握镇痛药的实验方法。（热板法、扭体法） ②观察药物的镇痛作用。
➢实验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生疼痛反应，观察给药前后小鼠疼痛反应 的变化。（痛阈值、扭体次数）
2
主要实验材料
实验动物：小鼠（雌性） 实验药物： 0.4%吗啡 主要仪器：热板测痛仪（RB-200智能热板仪）
➢ 单手捉持，用拇指和食 指抓住小鼠尾巴，用小 指、无名指和手掌压住 尾根部，再用腾出的拇 指、食指及中指抓住鼠 双耳及头部皮肤而固定 。 如图-2。
•皮下注射
注意事项：
1. 取背部及后腿皮下，注 射时用左手拇指及食指轻 轻捏起皮肤，右手持注射 器将针头刺入，固定后即 进行注射。
•腹腔注射
注意事项：
踝关节的突起点标记， 作为测量标志（见后图）
腹腔注射
给药组：氢化可的松溶液 1ml/100g 体重
对照组：生理盐水 1ml/100g 体重
30min， 从右后足掌心向掌跖关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清 0.1ml。 (见后图)
注射蛋清后30min、60 min、90min，测量右后足的体积，
实验照片
• 抗炎实验中动物性别的选择：雄性。 • 测定大鼠足体积时，选定统一测量位置（大鼠足外
踝关节突起）。 • 小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免滴
1.2 实验原理：
化学刺激物或者蛋清，可致动物急性炎症，出 现局部肿胀。比较給予药物前后动物局部肿胀 程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。
2 主要实验材料
✓ 实验动物：小鼠、大鼠（雄性） ✓ 实验药物：氢化可的松 ✓ 主要仪器（PV-200足趾肿胀测定仪）
3 实验主要步骤（大鼠足肿胀）
动物称重、分组
实验中
1.根据实验内容 进行小组内分工 2.严格、准确地 按照指导中的实 验方法进行实验 操作。 3.仔细、真实的 记录实验结果。
实验后
1.死亡动物放在 指定地点；存活 动物放入笼内。 2.将器材洗净擦 干，放回原处 3.每小组轮流负 责搞好实验室内 卫生 。
实验课程学习目的
A
巩固药理学基本理论
B
1、针头刺入部位不宜太接近 上腹部或太深，以免刺破内脏。 针头与腹腔的角度不宜太小， 避免刺入皮下。 2、使用针头不宜太粗，避免 药液注射后从注射孔流出。注 射后可用棉球按一下注射部位。
•灌胃给药
注意事项：
1.用左手拇指和食指抓住鼠两耳 和头部皮肤，其他三指抓住背部 皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定 好动物，头部和颈部保持很平,右 手取注射器进行灌胃。 2.灌时针头沿鼠口角通过食管进 入胃内。灌时如很通畅，则表示 针头已进入胃内；如动物有呕吐 动物或强烈挣扎，必须拔出后按 上述方法重新操作。决不可进针 不顺硬向里插。