枣核中总皂苷提取工艺的研究
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枣核中总皂苷提取工艺的研究
许牡丹,张瑞花*,王瑾锋
(陕西科技大学生命与工程学院,西安 710021)
摘要:以木枣核为实验材料,通过正交设计实验,探讨乙醇体积分数、浸提时间、固液比、提取温度对总皂苷提取率的影响。研究表明,木枣核总皂苷提取的最佳工艺条件:提取温度70 ℃、固液比1:15、乙醇体积分数70%、提取时间2 h ,此时木枣核总皂苷的提取率为0.91%。关键词:枣核;总皂苷;提取;分光光度法
中图分类号:R 284.2 文献标志码: 文章编号:1005-9989(2011)01-0181-03
Extraction process of total saponins from Zizyphus Jujuba pit
XU Mu-dan, ZHANG Rui-hua *, WANG Jin-feng
(College of Life Science & Engineering, Shaanxi University of Science & T echnology, Xi’an 710021)
Abstract: In this paper by means of orthogonal array design, the effect cf ethanol concentration, time, ratio of solid to liquid and temperature on the extraction rate of Zizyphus Jujuba pit total saponins was discussed. The total saponins content was analyzed by colorimetric method. The optimal parameters for extracting total saponins of Zizyphus Jujuba pit at 0.91% is were as follows: ethanol concentration 70% and ratio of solid to liquid 1:15 by the 2 h extraction at 70℃.
Key words: Zizyphus Jujuba pit; total saponins; extraction; colorimetric method
收稿日期:2010-05-05 *通讯作者
基金项目:陕西省科技攻关项目(2008K03-15)。
作者简介:许牡丹(1963—),女,硕士,教授,研究方向为食品生物技术及分析检测。
大枣(Ziziphus jujuba)为鼠李科落叶小乔木或灌木植物枣的成熟果实,是一种难得的药食同源的保健医疗佳品。《本草纲目》载有“熟则可
食,干则可补,丰俭可以剂时,疾苦可以备药,辅助粮食以养民生”,“干枣润心肺,止咳,补五脏,治虚损,除肠胃避气”[1], 民间也有“日
食三枣,长生不老”之说。研究表明,枣果中除含有大量的糖、蛋白质等营养成分外,还含有黄酮、cAMP、皂苷等生物活性成分。其中皂甙对人体的新陈代谢起着重要的生理作用,它可以抑制血清中脂类氧化,抑制过氧化脂质的生成,降低血清中胆固醇的含量抑制血小板凝聚、抗菌、抗病毒、免疫调节作用[2-3]。而在枣产品的生产工艺中,一般需去核,由于大枣核进行利用的研究报道很少,因此,本课题拟从枣核中提取皂苷,这对促进大枣的综合利用具有重要的意义。
1 材料与方法
1.1 材料与设备
木枣核粉:木枣购于西北农贸市场,手动去核机去核,枣核清洗后45 ℃恒温干燥,粉碎,过40目筛,贮存于棕色试剂瓶中备用;齐墩果酸:成都思科华生物技术有限公司;高氯酸、冰醋酸、香草醛均为分析纯。
752型紫外可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司;DKZ-2型电热恒温振荡水槽:上海精宏实验设备有限公司;YHG型干燥箱。
1.2 实验方法
1.2.1 对照品储备液的制备[4] 精密称取齐墩果酸对照品5 mg,置25 mL容量瓶中,加甲醇溶解,并定容至刻度,摇匀,即得浓度为0.2 mg/mL的对照品储备液。
1.2.2 标准曲线的绘制[4] 精确吸取对照品储备液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL,分别置于10 mL容量瓶中,加0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液,再加入0.8 mL高氯酸溶液,于70 ℃恒温加热20 min,取出后冰水浴冷却5 min,加冰醋酸5 mL,摇匀,以第一管试剂作空白,于545 nm处分别测定其吸光度。以齐墩果酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,以浓度对吸光度进行回归,计算回归方程。
1.3 总皂苷提取的单因素和正交实验
分别研究提取溶剂浓度、固液比、提取时间、提取温度等因素对木枣核总皂苷提取率的影响。根据单因素实验结果设计正交实验,每次吸取1 mL样液,按照标准曲线的测定方法测定提取液的吸光度,并根据线性回归方程计算总皂苷提取率,以总皂苷提取率为考察指标,确定总皂苷的最佳提取工艺条件。
总皂苷提取率(%)=1000
M
100
7
C
×
×
×
式中:M 为枣核粉末的质量,g ;
C为枣核总皂苷的浓度,mg/mL;
7为稀释倍数。
2 结果与分析
2.1 齐墩果酸标准曲线及回归方程
图1 齐墩果酸标准曲线
吸
光
度
浓度/(mg/mL)
图2 乙醇浓度对木枣核总皂苷提取率的影响
12345提
取
率
乙醇浓度/%
由图1可知,齐墩果酸标准曲线的回归方程为:y=6.3894x+0.0021,R
2=0.998。
2.2 木枣核总皂苷提取的单因素实验结果
2.2.1 乙醇浓度对木枣核总皂苷的提取率的影响
实验结果如图2所示,在60 ℃、固液比为1:15、提取2 h的条件下,乙醇的浓度与枣核总皂苷的提取率基本成正比。当乙醇的体积分数超过60%时,总皂苷提取率增加缓慢,原因可能是浓度超过60%时,其他的一些脂溶性的物质在乙醇中的溶出量增加,因此,确定60%为最佳的提取浓度。
2.2.2 固液比对木枣核总皂苷的提取率的影响
图3 固液比对木枣核总皂苷提取率的影响
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
提
取
率
固液比/(m/v)
实验结果如图3所示,在60 ℃、乙醇浓度为60%、提取2 h的条件下,当固液比在1:10和1:20之间时,总皂苷的提取率随着固液比的增加而增大,但当固液比超过1:20时,提取率反而稍有下
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