实验二 徒手切片法和临时装片的制作方法以及植物细胞和组织观察

实验二临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察

一、实验目的

1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法

2、了解植物细胞结构。

二、实验材料

显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、

0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄

三、实验内容和实验方法

（一）临时装片的制作

1、擦净载玻片和盖玻片

（1）擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻片上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。

（2）擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。

2、取样

用滴管滴一点水或其他溶液（根据需要）于载玻片的中央，把观察物放于载玻片上的液滴中，展开或摇匀。

3、盖盖玻片

右手持镊子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触，然后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。如盖玻片下的液体过多，可用吸水纸将多余的液体吸掉。

（二）徒手切片法

徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。

1、选材

选择软适度的材料，先截成适当的段块。一般直径大小以3~5mm、长度以20~30mm为宜。若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。

2、切片

用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口损伤手指。材料和刀刃上蘸水，使其湿润。右手拇指和食指横向平握刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置，以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。切片时要用臂力而不用腕力，手腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。

每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。如发现材料切面出现倾斜，应修平切面后再继续切片。

3、镜检观察

连续切下很多切片后，挑选最薄的切片放于加了1滴清水的载玻片，盖上盖玻片，制成临时装片，进行镜检、观察。

（三）植物细胞的结构观察

1、洋葱表皮细胞的观察

取一洁净载玻片，于载玻片中央加上一滴水。取洋葱一个，剥下一片新鲜的带紫色的南鳞叶，和刀片从外表面（或内表面）切一个面积为4mm2左右的方形小格，然后用镊子将表皮撕下，迅速入入载玻片上的小水滴中（表面向上）。并使其平展，盖上盖玻片，即制成临时装片。将装片放在显微镜下，用低倍镜观察细胞结构。

（1）细胞的形状

洋葱表皮由一层细胞构成，所有的细胞都有相似的—扁砖状。细胞之间排列紧密，没有间隙。

（2）细胞壁

为植物细胞所特有的结构，较透明，因此只能看到其侧壁。

初看时，好像两个相邻细胞只有一层壁，但是，通过增加反差和仔细调焦就能发现这实际上是三层，即两侧相邻两细胞的细胞壁及中间的胞间层。

（3）细胞质

为无色透明的胶状物，充满整个细胞。由于中央有大的液泡，被挤成一薄层，分布于细胞周围，仅细胞两端较明显。

（4）细胞核

为球形小体。由于中央有大液泡，也被挤向近细胞壁处。

（5）细胞膜

非常薄，而且与细胞壁紧贴在一起，因此不易观察到。

（6）液泡

一个或几个，位于细胞中央，里面充满细胞液，所以比细胞质透明。

2、果肉离散细胞观察

用解剖针挑取少许已经红熟的的番茄果肉（以临近果皮的为好），把它们放在载玻片上的水滴中，用解剖针将果肉细胞拨匀，分散得越开越好，盖上盖玻片，在显微镜下观察。可以看到圆形或卵圆形的离散细胞，同样也可以观察到细胞壁、细胞核和很大的液泡。此外，还可以看到带色的圆形小颗粒，即有色体。

3、厚角组织

用徒手切片法做芹菜叶柄的横切片，选取薄而透明的切片制成临时装片，置于低倍镜下观察。在芹菜叶柄棱角处的表皮内方有厚角存在，这些细胞的细胞壁在角隅处有增厚。实验三植物根、茎、叶、花结构的观察

一、实验目的

1、掌握双子叶植物和单子叶植物根的初生结构以及根的次生结构

观察并掌握叶片的内部结构；

2、掌握茎的初生结构和次生结构；

3、观察并掌握叶的内部结构；

二、实验材料

双子叶植物幼根（棉花）横切片，小麦或玉米根横切片、棉花老根横切片；双子叶植物幼茎横切片、玉米茎横切片、椴树茎横切片；棉花（或蚕豆、迎春叶）叶片横切片，玉米（或小麦、水稻等单子叶植物）叶片横切片

三、实验内容

（一）根的结构

1、xx根的初生结构

取双子叶植物幼根横切片显微镜观察。双子叶植物根的初生结构从外向内由表皮、皮层和维管柱一部分组成。

（1）表皮是根的最外一层细胞，排列紧密整齐，无细胞间隙。有的表皮细胞可观察到向外突起形成的根毛（或根毛残体）。

（2）皮层在表皮之内维管柱之外的部分，占幼根的大部分，由多层薄壁细胞组成，可进一步分为外皮层、皮层薄壁细胞和内皮层三部分。

A、外皮层：

靠近表皮之下的几层细胞（一般为1~3层），细胞较小，细胞壁常木栓化，代替表皮起暂时的保护作用。

B、皮层薄壁细胞：

细胞体积较大，排列疏松，有较大的细胞间隙，细胞具有储藏作用。

C、内皮层：

是皮层最内层的细胞，围绕着内部的维管柱，细胞小，排列紧密，细胞横壁和径向壁上具有木栓化的加厚带状物——凯氏带，在根的横切面上可见两相邻的内皮层细胞间明显的加深的点状结构——凯氏点。

（3）维管柱内皮层以内的中央部分，细胞较小，排列紧密，可分为中柱鞘、初生韧皮部、初生木质部、薄壁细胞。

A、中柱鞘：

内皮层里面的1~2层薄壁细胞，排列紧密整齐。这些细胞具有潜在的分生能力，侧根、木栓形成层（首次）、维管形成层的一部分由这部分发生。

B、初生木质部和初生韧皮部：

蚕豆的初生维管组织由4个木质部束和4个韧皮部束组成，它们彼此单独成束，相间排列。初生木质部在维管柱中心呈十字形辐射排列。靠近4个辐射角的是原生木质部，近中央的是后生木质部。初生木质部的导管细胞壁厚，腔大。原生导管口径比后生导管口径小。初生韧皮部位于两木质部束之间，同样原生韧皮部在外，后生韧皮部在内。

C、薄壁细胞：

位于初生木质部和初生韧皮部之间，这部分细胞可以恢复分生能力，形成维管形成层的一部分。蚕豆根中央的薄壁细胞形成髓。

2、xx植物根的初生结构

取小麦或玉米根横切片观察。单子叶植物的根只有初生结构，其也是由表皮、皮层和维管柱三部分组成。