应用酶标仪比浊法检测血清纤维结合蛋白含量
纤维连接蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求九强
纤维连接蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)适用范围:用于体外定量测定人血清或血浆中纤维连接蛋白的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品为黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≤ 0.5000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验:相关系数r≥0.975,在[20.0,100.0] mg/L 区间内测定的偏差应不超过±10 mg/L,在(100.0,600.0] mg/L区间内测定的偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为150 mg/L时,其吸光度变化在0.0200~0.1500之间。
2.6 线性范围在[20.0,600.0] mg/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[20.0,100.0] mg/L区间内测定的线性偏差应不超过±10 mg/L,在(100.0,600.0] mg/L区间内测定的线性偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于10%。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
蛋白质含量的测定方法
蛋白质含量的测定方法蛋白质是生物体内重要的营养成分,对于人体的生长发育和健康维护起着重要的作用。
因此,准确测定食品、药物、生物样品中的蛋白质含量,对于保障食品安全和科学研究具有重要意义。
本文将介绍几种常用的蛋白质含量测定方法,供大家参考。
首先,常用的蛋白质含量测定方法之一是比色法。
比色法是通过蛋白质与某种试剂发生化学反应,产生有色产物,再利用光度计测定产物的吸光度来间接测定蛋白质含量。
其中,最常用的试剂是布拉德福试剂和伯尼斯试剂。
这种方法操作简便,测定结果准确,因此被广泛应用于食品、生物样品的蛋白质含量测定。
其次,还有一种常用的蛋白质含量测定方法是比浊法。
比浊法是通过蛋白质与某种试剂发生沉淀反应,根据沉淀的浑浊度来测定蛋白质含量。
常用的试剂有硫酸铵和三氯乙醛。
比浊法操作简便,成本低廉,适用于大批量样品的测定。
另外,还有一种常用的蛋白质含量测定方法是氨基酸分析法。
氨基酸分析法是通过水解蛋白质,然后利用色谱仪或氨基酸分析仪测定水解产物中各种氨基酸的含量,从而计算出蛋白质的含量。
这种方法对于蛋白质的成分分析非常准确,但操作复杂,需要专业设备和技术支持。
最后,还有一种常用的蛋白质含量测定方法是生物素标记法。
生物素标记法是将生物素标记在蛋白质分子上,然后利用生物素与酶的特异性结合来测定蛋白质含量。
这种方法对于高灵敏度的蛋白质测定非常有效,但需要专门的标记试剂和设备支持。
总之,蛋白质含量的测定方法有很多种,每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际应用中,需要根据样品的特点和实验条件选择合适的测定方法,以确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的几种常用方法能够为大家在蛋白质含量测定方面提供一些帮助。
观察血清Hcy、Cys-C、NAG及mALB对妊娠期糖尿病患者早期肾损伤的检验诊断价值
观察血清 Hcy、 Cys-C、 NAG及 mALB对妊娠期糖尿病患者早期肾损伤的检验诊断价值【摘要】:目的观察分析血清Hcy、Cys-C、NAG及mALB对妊娠期糖尿病患者早期肾损伤的检验诊断价值。
方法选取我院2017年7月至2019年6月收治的妊娠期糖尿病患者46例作为观察组,根据肌酐清除率分为肾功能正常组(Ccr > 80 mL/min)25例及肾功能异常组(Ccr≤80 mL/min)21例。
另选取我院2018年1月-2019年6月收治的正常妊娠者46例作为对照组。
检测各组血清Hcy、Cys-C及NAG、mALB、尿Cr、mALB/尿Cr数值水平。
结果与对照组比较,观察组Hcy、Cys-C、NAG、mALB、尿Cr以及mALB/尿水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。
与肾功正常组比较,肾功异常组Hcy、Cys-C、NAG、mALB、尿Cr以及mALB/尿水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论联合检测血清Hcy、Cys-C及NAG、mALB、尿Cr、mALB/尿Cr有利于诊断早期肾损伤,值得临床推广。
【关键词】:Hcy;Cys-C;NAG;mALB;妊娠期合并糖尿病;早期肾损伤妊娠期糖尿病(GDM)是指妊娠前糖代谢正常或有潜在糖耐量减退,直至妊娠期才出现的糖尿病,占糖尿病孕妇中的 80%以上[1]。
肾损伤是 GDM 常见并发症之一,早期通常难以发现,病变较为隐匿,因此,需要及早发现进行治疗。
本文观察分析了血清Hcy、Cys-C、NAG及mALB对妊娠期糖尿病患者早期肾损伤的检验诊断价值,现报告如下。
1 资料与方法1.1一般资料选取我院2017年7月至2019年6月收治的妊娠期糖尿病患者46例作为观察组,根据肌酐清除率分为肾功能正常组(Ccr > 80 mL/min)25例及肾功能异常组(Ccr≤80 mL/min)21例。
另选取我院2018年1月-2019年6月收治的正常妊娠者46例作为对照组。
蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法
蛋白质是生物体内重要的营养成分之一,对于食品、生物医药等领域具有重要意义。
因此,准确测定蛋白质含量是很多领域的研究和生产工作中必不可少的一项内容。
在科学研究、食品加工、药物生产等领域,蛋白质含量的准确测定对于保证产品质量、促进科学研究具有重要作用。
一、总蛋白质含量测定方法。
1. 琼脂糖凝胶电泳法。
琼脂糖凝胶电泳法是一种常用的蛋白质含量测定方法,通过电泳技术将蛋白质在凝胶中进行分离,然后根据蛋白质在凝胶中的迁移距离和分子量进行定量测定。
2. 分光光度法。
分光光度法是利用蛋白质特有的吸收光谱特性来进行测定的方法,通过比较样品溶液和空白溶液的吸光度差异来计算蛋白质含量。
3. 比色法。
比色法是利用蛋白质与某种试剂发生显色反应,然后通过比色计或分光光度计测定溶液吸光度的方法来进行蛋白质含量测定。
二、特定蛋白质含量测定方法。
1. 酶联免疫吸附法(ELISA法)。
ELISA法是一种常用的特定蛋白质含量测定方法,通过将待测蛋白质与特异性抗体结合,然后加入酶标记的二抗来进行测定。
2. 荧光素酶标记法。
荧光素酶标记法是利用荧光素酶标记的抗体与待测蛋白质结合,然后通过荧光素底物的反应来进行蛋白质含量的测定方法。
以上介绍的是一些常用的蛋白质含量测定方法,不同的方法适用于不同的实验目的和样品类型。
在进行蛋白质含量测定时,需要根据实际情况选择合适的方法,并且在测定过程中要严格按照操作规程进行,以保证测定结果的准确性和可靠性。
总之,蛋白质含量的准确测定对于各个领域的研究和生产工作都具有重要的意义,希望本文介绍的方法能够对相关工作者有所帮助。
免疫比浊法测C反应蛋白
免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。
其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。
当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。
通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原的含量。
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。
在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。
免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。
2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。
3、易受到脂血的影响。
分类1.免疫透射比浊法抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。
当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。
免疫复合物量越多,光线吸收越多。
光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。
利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。
本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。
2.免疫散射比浊法一定波长的光沿水平轴照射,通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子,光线被粒子颗粒折射,发生偏转,光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。
散射光的强度与复合物的含量成正比,即待测抗原越多,形成的复合物也越多,散射光也越强。
散射光的强度还与各种物理因素,如加入抗原或抗体的时间、光源的强弱和波长、测量角度等密切相关。
散射比浊法又分为速率散射比浊法和终点散射比浊法。
3.免疫胶乳比浊法胶乳比浊法即是将待测物质相对应的抗体包被在直径为15-60nm的胶乳颗粒上,使抗原抗体结合物的体积增大,光通过之后,透射光和散射光的强度变化更为显著,从而提高试验的敏感性。
d二聚体检测方法及仪器
d二聚体检测方法及仪器一、d二聚体检测方法的原理d二聚体(D-dimer)是纤维蛋白降解产物,也是血浆中血栓溶解系统活化的标志物。
在血液凝结过程中,纤维蛋白被降解为D-二聚体。
因此,d二聚体的水平可以反映出血液凝结和纤维蛋白溶解的状态。
二、常用的d二聚体检测方法1. 免疫比浊法免疫比浊法是一种简单、快速的d二聚体检测方法。
该方法利用特异性抗体与d二聚体结合形成免疫复合物,然后通过比浊度的变化来定量测定d二聚体的含量。
这种方法操作简单,结果可靠,常用于急诊检测。
2. 免疫化学发光法免疫化学发光法是一种高灵敏度的d二聚体检测方法。
该方法利用特异性抗体标记荧光物质,当特异性抗体与d二聚体结合时,荧光物质发出的光信号可以被仪器检测到,并通过计算荧光信号的强度来定量测定d二聚体的含量。
3. 酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是一种常用的免疫测定方法,可用于检测d二聚体的含量。
该方法利用特异性抗体与d二聚体结合,然后通过酶标记的二抗与抗体结合形成复合物,最后加入底物使酶产生发色反应。
通过测量反应产生的颜色强度来定量测定d二聚体的含量。
三、相关仪器1. 免疫比浊仪免疫比浊仪是一种常用的d二聚体检测仪器,用于测定免疫比浊法检测d二聚体的结果。
该仪器通过测量样品溶液的比浊度来定量测定d二聚体的含量,具有操作简单、结果快速的优点。
2. 免疫化学发光仪免疫化学发光仪是一种常用的d二聚体检测仪器,用于测定免疫化学发光法检测d二聚体的结果。
该仪器通过测量样品溶液中荧光信号的强度来定量测定d二聚体的含量,具有高灵敏度、精确度高的优点。
3. 酶标仪酶标仪是一种常用的d二聚体检测仪器,用于测定ELISA法检测d 二聚体的结果。
该仪器通过测量反应产生的颜色强度来定量测定d 二聚体的含量,具有高精确度、可靠性高的优点。
总结:d二聚体检测方法主要包括免疫比浊法、免疫化学发光法和酶联免疫吸附试验(ELISA),这些方法都有各自的优点和适用范围。
血清清蛋白测定方法
血清清蛋白测定方法血清清蛋白(serum albumin,SA)是人体血浆中含量最丰富的蛋白质,它在维持血浆渗透压、调节血液的黏稠度和酸碱平衡等方面起着重要作用。
因此,准确测定血清清蛋白的含量对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍几种常用的血清清蛋白测定方法,希望能为相关研究和临床实践提供参考。
一、免疫比浊法。
免疫比浊法是常用的血清清蛋白测定方法之一,其原理是利用血清清蛋白与特定抗体结合后形成免疫复合物,从而使溶液浑浊度增加。
通过测定浑浊度的变化来计算血清清蛋白的含量。
该方法操作简便,结果准确可靠,适用于大批量样品的测定。
二、免疫电泳法。
免疫电泳法是一种利用免疫反应原理进行蛋白质分离和测定的方法。
通过将血清样品在电泳条件下与特定抗体结合,然后在电泳板上进行电泳分离,最后通过染色或放射自显影的方法来定量测定血清清蛋白含量。
该方法对血清清蛋白的测定灵敏度高,分辨率好,适用于测定血清中各种蛋白质的含量。
三、免疫比浊法。
免疫比浊法是一种利用抗原与抗体结合后形成免疫复合物而产生光学测定信号的方法。
该方法操作简便,准确性高,适用于各种类型的血清样品,尤其适用于测定含量较低的血清清蛋白。
四、免疫化学发光法。
免疫化学发光法是一种利用化学发光技术进行免疫分析的方法。
该方法利用特定抗体与血清清蛋白结合后,通过化学发光底物产生发光信号,再通过光度计测定发光强度来计算血清清蛋白的含量。
该方法具有高灵敏度、高特异性和高稳定性的特点,适用于各种类型的血清样品。
五、高效液相色谱法。
高效液相色谱法是一种利用高效液相色谱技术进行血清清蛋白测定的方法。
该方法操作简便,分离效果好,准确性高,适用于各种类型的血清样品,尤其适用于测定含量较低的血清清蛋白。
总结。
以上介绍了几种常用的血清清蛋白测定方法,每种方法都有其特点和适用范围。
在选择测定方法时,需要根据实际样品的特点和要求来进行选择,以确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文能为相关研究和临床实践提供一定的参考价值。
晶钥匙生物:生化试剂盒常见的5点应用方法
生化试剂盒是一个大类,包含了众多的种类,以酶标仪为例,生化试剂盒主要是检测人体内的酶、维生素等成分,是临床检验中必不可少的工具。
随着科技的不断发展,现在实验室中已经有很多生化试剂盒可以直接使用了。
生化试剂盒也是现在医院、科研机构常用的检测项目之一,今天我们就来看看生化试剂盒在科研行业中都有哪些应用。
生化试剂盒的使用主要是为了检测样品中是否含有某种酶或者是某种维生素等物质。
检测的主要目的也是为了确保检验结果的准确性。
1.酶标仪酶标仪是一种仪器,其原理是以酶催化底物产生有色产物,通过测定吸光度值来测定物质的含量。
酶标仪主要有比色法、比浊法、免疫法和光度法四种。
比色法是检测维生素类物质常用的方法之一,在临床上也被广泛应用,以酶标仪为例,一般都是采用比色法来检测维生素类物质的含量。
免疫法和光度法是用来检测抗体的常用方法,但由于抗体有一定的免疫原性,在临床上并不常用。
酶标仪既可以检测抗体也可以检测抗原,其功能比较齐全。
2.时间分辨荧光检测时间分辨荧光技术(TRFIA)是一种基于荧光染料标记的荧光检测技术,该技术基于时间分辨荧光显微镜上的荧光染料标记的探针,并在一定时间内激发、发射荧光,通过对样品进行检测,获得被测物质的光吸收曲线,从而判断出样品中被测物质含量。
这种检测方法可以用来检测DNA、蛋白质以及生物大分子等物质。
3.酶联免疫吸附检测酶联免疫吸附检测法(ELISA)是应用酶的特异性结合反应进行抗原抗体的标记和检测,是目前最常用的一种定性和定量分析方法。
在科研中,酶联免疫吸附检测主要用于肿瘤标志物、药物代谢产物、药物浓度、食品污染物、环境污染物等的测定,具有快速、准确、简便等优点。
4.化学发光免疫分析化学发光免疫分析技术(Chemiluminescence immunoassay, CLIA)是利用鲁米诺-过氧化物酶(RGO)和化学发光底物的化学反应作为信号分子,将待测抗原与标记抗体(或抗原)进行特异性结合反应,并在一定条件下使标记抗体或抗原和反应产物中的化学发光信号放大,从而检测待测标本中的目标分子。
酶标仪测蛋白实验报告
一、实验目的1. 掌握酶标仪的使用方法。
2. 学习蛋白质定量分析的基本原理和操作步骤。
3. 通过BCA法测定蛋白质浓度,并验证实验结果的准确性。
二、实验原理蛋白质是生物体内重要的生物大分子,其含量的测定对于生物科学研究和生物技术产业具有重要意义。
酶标仪是一种用于检测生物分子浓度的仪器,基于酶催化反应产生的颜色变化来定量分析目标分子。
本实验采用BCA法(比色法)测定蛋白质浓度,其原理是蛋白质与铜离子在碱性条件下发生络合反应,生成紫蓝色复合物,该复合物在特定波长下具有特征性吸收峰,其吸光度与蛋白质浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 蛋白质标准品(如牛血清白蛋白)- 待测蛋白质样品- BCA工作液- 96孔微孔板- 试剂:硫酸铜、硫酸钠、氢氧化钠等2. 实验仪器- 酶标仪- 电子天平- 移液器- 移液枪- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 标准曲线制作1.1. 按照试剂盒说明书配置BCA工作液。
1.2. 将蛋白质标准品用去离子水稀释成不同浓度梯度(如0、1、2、4、8、16、32、64、128、256 μg/mL)。
1.3. 将稀释后的标准品分别加入96孔微孔板中,每孔加入100 μL。
1.4. 向每孔中加入100 μL BCA工作液,混匀。
1.5. 将微孔板放入酶标仪,在562 nm波长下测定吸光度值。
1.6. 以蛋白质浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定2.1. 将待测蛋白质样品用去离子水稀释成适当浓度。
2.2. 将稀释后的样品分别加入96孔微孔板中,每孔加入100 μL。
2.3. 向每孔中加入100 μL BCA工作液,混匀。
2.4. 将微孔板放入酶标仪,在562 nm波长下测定吸光度值。
3. 结果分析3.1. 根据样品的吸光度值,在标准曲线上查找对应的蛋白质浓度。
3.2. 计算样品的蛋白质含量。
五、实验结果与分析本实验通过BCA法成功测定了蛋白质样品的浓度,结果如下:- 标准曲线的相关系数R²为0.996,说明标准曲线具有良好的线性关系。
血清miR-200c-3p结合PA表达水平对重症肺炎儿童预后的评估价值
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vWF和vWF裂解酶水平对糖尿病肾病的影响
vWF和vWF裂解酶水平对糖尿病肾病的影响曹磊,胡恩赑,李晓楠摘要:目的探讨糖尿病肾病(DN)患者血清血管性血友病因子(vWF)、vWF裂解酶(ADAMTS13)的水平及其作用。
方法选取健康体检者(正常对照组)50例和2型糖尿病(T2DM)组合并DN患者144例,根据尿微量白蛋白与尿肌酐比值(ACR),将患者分为单纯T2DM组(42例,ACR<30mg/g)、微量白蛋白尿组(56例,30mg/g≤ACR˂300mg/g),大量白蛋白尿组(46例,ACR≥300mg/g)。
采用免疫透射比浊法检测vWF水平;双抗体夹心法检测ADAMTS13水平,并检测血肌酐(sCr)、尿素氮(BUN)、糖化血红蛋白(HbA1c)、D-二聚体和纤维蛋白原(Fib)等,计算估计的肾小球滤过率(eGFR)。
结果正常对照组、单纯T2DM组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组HbA1c、Fib、D-二聚体及vWF依次增加,而ADAMTS13依次降低(P<0.05)。
多元线性回归分析显示,白蛋白与D-二聚体是血清vWF的影响因素,而D-二聚体是ADAMTS13水平的影响因素。
ROC曲线分析显示,vWF诊断DN肾脏损伤敏感度较高,D-二聚体诊断DN肾脏损伤敏感度和特异度较均衡,特异度更有优势。
结论血清vWF、ADAMTS13在糖尿病肾病的发生及发展中可能起着重要作用,其水平可以成为DN早期的诊断和预测的参考指标。
关键词:糖尿病肾病;糖尿病,2型;von Willebrand因子;ADAMTS13蛋白质;白蛋白尿中图分类号:R587.24文献标志码:A DOI:10.11958/20211643Effects of plasma vWF and vWF lyase levels on diabetic nephropathyCAO Lei,HU Enbi,LI XiaonanDepartment of Nephrology,Anhui Bengbu Third People's Hospital(Bengbu Central Hospital),Bengbu233000,China Abstract:Objective To explore the levels and their possible effects of serum von Willebrand factor(vWF)and vWF lyase(ADAMTS13)in patients with diabetic nephropathy(DN).Methods Fifty cases of healthy physical examination(the normal control group)and144patients with type2diabetes(the T2DM group)were selected in this study.According to the ratio of urine microalbumin to urine creatinine(ACR),the diabetic T2DM patients were divided into the simple diabetes group(n=42,ACR<30mg/g),the microalbuminuria group(n=56,30mg/g≤ACR˂300mg/g),and the macroalbuminuria group(n=46,ACR≥300mg/g).The immunoturbidimetric method was used to detect vWF levels.The double antibody sandwich method was used to detect ADAMTS13level,creatinine(sCr),urea nitrogen(BUN)and glycosylated hemoglobin (HbA1c).The glomerular filtration rate(eGFR),D-Dimer and fibrinogen(Fib)were estimated.Results HbA1c,Fib,D-基金项目:蚌埠市科技创新指导类项目(20180343)作者单位:安徽省蚌埠市第三人民医院(蚌埠市中心医院)肾内科(邮编233000)作者简介:曹磊(1976),男,副主任医师,主要从事糖尿病肾病及慢性肾脏病治疗方面研究。
血浆纤维蛋白原测定方法
血浆纤维蛋白原测定方法血浆纤维蛋白原是一种重要的凝血因子,它参与了机体的止血过程。
因此,准确测定血浆纤维蛋白原的含量对于诊断和评估血液病变具有重要意义。
本文将介绍一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
一、测定原理血浆纤维蛋白原的测定方法主要基于血浆纤维蛋白原与特定试剂的反应原理。
常用的测定方法包括免疫比浊法、免疫电泳法、免疫荧光法、酶联免疫吸附法等。
二、免疫比浊法免疫比浊法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合形成免疫复合物,进而使溶液的浊度增加。
通过测量溶液的光密度变化,可以计算出血浆纤维蛋白原的含量。
三、免疫电泳法免疫电泳法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用电泳的原理,将血浆中的纤维蛋白原与特异性抗体结合,然后通过电泳分离。
根据纤维蛋白原在电泳中的迁移距离,可以确定其含量。
四、免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记荧光物质。
通过荧光显微镜观察样品中荧光信号的强度,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。
五、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记酶类物质。
通过测量酶的活性或底物的反应产物,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。
六、测定结果的解读血浆纤维蛋白原的正常浓度范围在2-4 g/L之间。
如果测定结果低于正常范围,可能表示机体合成纤维蛋白原的能力减弱,或者存在纤维蛋白原消耗过多的情况。
而高于正常范围的测定结果,则可能意味着机体正在经历炎症、肿瘤、肝脏疾病等情况。
七、测定方法的优缺点不同的血浆纤维蛋白原测定方法具有不同的优缺点。
免疫比浊法操作简便、成本低廉,但对样品的干扰较大;免疫电泳法分离效果好,但操作复杂、耗时较长;免疫荧光法灵敏度高,但设备要求较高;酶联免疫吸附法操作简便,但对样品的处理要求较高。
八、总结血浆纤维蛋白原的测定方法有多种,每种方法都有其适用的场景和优缺点。
酶标仪比色法测定血清三酰甘油、总胆固醇方法探讨
酶标仪比色法测定血清三酰甘油、总胆固醇方法探讨李勇【摘要】目的尝试用酶标仪比色法测定血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平,同时用全自动生化分析仪作方法比较,探讨酶标仪比色法的可靠性.方法采用四川迈克TG GPO-PAP法试剂盒和TC COD-CE-PAP法试剂盒,用酶标仪比色测定血清中TG和TC,同时用深圳迈瑞TG和TC氧化酶法试剂盒,在迈瑞BS120全自动生化分析仪测定,比较两种方法的测定结果 .结果两种方法测定结果 :TG血清标本测定差值在0.07~0.38 mmol/L,RANDOX质控品测定差值在0.05~0.09mmol/L;TC血清标本测定差值在0.18~0.35 mmol/L,RANDOX质控品测定差在0.13~0.20 mmol/L.两种方法测定结果的差值均在CLIA′88推荐允许误差的最大误差允许范围之内,且质控品测定结果均在靶值允许的范围内.结论利用酶标仪比色法测定血清中TG和TC,其测定方法可靠,测定结果准确,且操作方法简便,检测成本低廉,可以作为TG和TC检测的替代方法 ,适合于基层实验室开展.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2010(007)016【总页数】3页(P1748-1750)【关键词】酶标仪比色;三酰甘油;总胆固醇【作者】李勇【作者单位】四川省平昌县疾病预防控制中心,636400【正文语种】中文【中图分类】R446.112目前血清中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)测定方法较多[1-2],有化学法、酶法和色谱法3大类,化学法操作步骤繁多、技术要求高而不适于常规工作应用;色谱法主要用作参考系统中决定性方法的建立及参考物质的制备与定值,此法费用昂贵,样品处理复杂,难以推广应用。
目前几乎所有的临床实验室都用酶法检测血清TG、TC水平,此法具有简便、快速、精密度高、特异性强的特点。
酶法中又有手工、半自动和全自动检测法,手工方法试剂消耗量大,试剂成本高,半自动、全自动需要专用的仪器,且仪器价格不菲,基层难于开展。
免疫比浊法和Clauss法检测纤维蛋白原的结果比较
免疫比浊法和Clauss法检测纤维蛋白原的结果比较黄海樱;陈波【期刊名称】《中国热带医学》【年(卷),期】2006(6)1【摘要】目的比较免疫比浊法和凝固法(Clauss法)对纤雏蛋白原检测的结果,以选择一种更为适合临床、快速和可靠的检测方法。
方法分别采用免疫比浊法和Clauss法进行纤维蛋白原的检测,对测定结果进行相关回归分析和配对t检验。
结果两种方法同时测定49例临床患者标本,标本的浓度范围(Clauss法)1.3,7.5g/L,免疫比浊法(3.73±1.56)g/L,Clauss法(3.18±1.34)g/L。
两组数据进行相关和回归分析,r=0.885、b;1.03、a=0.445。
配对t检验P〈0.01。
结论免疫浊度法的测定结果明显高于Clauss法,这可能与血浆中存在的纤维蛋白单体、纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)等物质与纤维蛋白原具有共同抗原决定簇有关。
凝固法检测纤雏蛋白原检测方法更为精确、可靠、快速。
【总页数】2页(P67-68)【关键词】血浆纤维蛋白原;Clauss法;免疫浊度法【作者】黄海樱;陈波【作者单位】广州医学院第二附属医院【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较 [J], 顾培科2.免疫透射比浊法与免疫散射比浊法检测特定蛋白的比较 [J], 张倩;周敬静;徐华3.免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较 [J], 彭凤;徐晓萍;王琳;应春妹4.PT-der法与von-clauss法检测纤维蛋白原结果比较 [J], 黄作群;覃桂芳;唐萍5.免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较 [J], 左秀华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
临床三基训练医技免疫检验_真题-无答案
临床三基训练医技免疫检验(总分230,考试时间600分钟)(一)选择题[A1/A2型题]1. 以下属于中枢免疫器官的是A. 胸腺B. 淋巴结C. 脾脏D. 扁桃体E. 肝脏2. 在胸腺发育成熟的细胞是A. B细胞B. T细胞C. NK细胞D. 树突状细胞E. 单核细胞3. 以下不属于免疫分子的是A. IgGB. C3C. HLAD. CRPE. IL-24. 以下细胞中具有抗原递呈功能的细胞是A. B细胞B. T细胞C. NK细胞D. 红细胞E. 中性粒细跑5. 接受抗原刺激后活化、增殖分化为浆细胞的淋巴细胞为A. 单核细胞B. T抑制细胞C. NK杀伤细胞D. B细胞E. 树突状细胞6. 免疫系统的组成是A. 中枢免疫器官、外周免疫器官B. 免疫细胞、免疫分子C. 中枢免疫器官、免疫细胞、免疫分子D. 免疫器官、免疫细胞、免疫分子E. 免疫器官、免疫细胞7. 无需抗原刺激,可非特异直接杀伤肿瘤细胞的是A. NK细胞B. T细胞C. B细胞D. 辅助性T细胞E. 杀伤性T细胞8. 沉淀反应中抗体过量的现象称为A. 带现象B. 后带C. 前带D. 等价带E. 钩状现象9. 抗原抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为A. 抗体略多于抗原B. 抗原显著多于抗体C. 抗原抗体比例合适D. 抗原略多于抗体E. 抗体显著多于抗原10. 抗原抗体结合力中作用最强的是A. 静电引力B. 范德华引力C. 氢键结合力D. 疏水作用力E. 分子间结合力11. 抗原抗体结合力中作用最具有特异性的是A. 静电引力B. 范德华引力C. 氢键结合力D. 疏水作用力E. 分子间结合力12. 以下抗原抗体反应的特点,正确的说法是A. 由抗原表位与抗体重链恒定区空间构型的互补性决定特异性B. 天然抗原分子只有一个表位C. 抗原和抗体结合形成的复合物是不可逆的D. 抗原过剩时出现前带现象E. 解离后的抗原或抗体仍然保持游离抗原、抗体的生物活性13. 抗原抗体反应的特异性是由以下哪项决定的A. 两者分子功能的相近性B. 两者之间空间构型的互补性C. 两者分子的电子云吸引力D. 两者分子大小的相近性E. 两者结构的相似性14. 在抗原抗体反应中,通常用作抗原抗体稀释液的是A. 0.70%NaCl溶液B. 0.60%NaCl溶液C. 0.75%NaCl溶液D. 0.85%NaCl溶液E. 0.95%NaCl溶液15. 抗原抗体反应的最适温度是A. 4℃B. 30℃C. 33℃D. 37℃E. 20℃16. 杂交瘤细胞含有A. 两亲本细胞各一半染色体B. 两亲本细胞全部染色体C. 2倍体DNAD. 3倍体DNAE. 亲代某些特性基因17. 以下可用于杂交瘤细胞融合的试剂是A. 次黄嘌呤B. 胸腺嘧啶核苷C. 叶酸D. 聚乙二醇E. 甲氨蝶呤18. 有关单克隆抗体的优点正确的是A. 杂交瘤不会发生基因突变B. 反应强度较多克隆抗体强C. 发生交叉反应机会少D. 易与抗原发生沉淀反应E. 对细胞的凝集作用较多克隆抗体强19. 肥达试验属于A. 直接凝集反应B. 正向间接凝集反应C. 反向间接凝集反应D. 间接凝集抑制反应E. 协同凝集反应20. 检测抗红细胞不完全抗体的方法是A. 交叉配血试验B. 间接血凝试验C. 乳胶凝集试验D. 抗球蛋白试验E. 明胶凝集试验21. 间接Coombs试验是检测A. 血清中游离的不完全抗体B. 抗溶血素OC. 类风湿因子D. 抗红细胞上血型抗原E. 抗红细胞表面结合抗体22. 直接Coombs试验是检测A. 血清中游离的不完全抗体B. 抗溶血素OC. 类风湿因子D. 抗血型抗体E. 抗红细胞表面结合抗体23. 关于不完全抗体,下列说法正确的是A. 多为IgG类抗体B. 与抗原结合并出现凝集C. 与抗原结合不牢固D. 常为IgM类抗体E. 分子量大24. 关于凝集反应,说法正确的是A. IgM类抗体的作用比IgG类抗体要强B. IgM类抗体常出现不完全反应C. IgG类抗体不易出现不完全反应D. 反应的发生可分为四个阶段E. 不出现肉眼可见的凝集现象25. 免疫比浊法的基本原则是A. 保持抗原过量B. 保持抗体过量C. 抗原抗体达到最适比D. 反应溶液PH为6.5~8.5E. 应用H型抗体26. 可用来进行定量测定的试验是A. 单向扩散试验B. 双向扩散试验C. 免疫电泳D. 对流免疫电泳E. 抗人球蛋白试验27. 双向扩散试验中当抗体含量大时A. 沉淀线靠近抗原孔B. 沉淀线靠近抗体孔C. 不出现沉淀线D. 出现多条沉淀线E. 沉淀线弯向抗体28. 单向扩散试验出现双环的沉淀线是因为A. 抗体相对过剩B. 抗原相对过剩C. 抗体为多克隆抗体D. 抗原为多态性抗原E. 存在不同扩散率但抗原性相同的两个组分29. 双向扩散试验中沉淀环弯向抗原一方是因为A. 抗原分子量大B. 抗体分子量大C. 抗原抗体分子大致相等D. 抗原含量较大E. 抗体含量较大30. 沉淀反应中的钩状效应是因为A. 免疫复合物的形成和解离相等B. 形成的免疫复合物分子大C. 抗体过量D. 抗原过量E. pH浓度过低31. 对流免疫电泳过程中,如果沉淀线出现在抗原和抗体之间且靠近抗原孔可以说明A. 抗原强阳性B. 抗原弱阳性C. 抗原阴性D. 抗体浓度低于抗原E. 以上都不是32. 鉴定多发性骨髓瘤最常用的免疫电泳技术是A. 对流免疫电泳B. 火箭免疫电泳C. 免疫电泳D. 免疫固定电泳E. 交叉免疫电泳33. 荧光素标记抗体时,荧光素与抗体间的结合通过A. 共价键B. 氢键C. 离子键D. 范德华力E. 静电引力34. 荧光抗体染色法中,一种荧光抗抗体可检测多种抗原或抗体的方法属于A. 直接法B. 间接法C. 补体结合法D. 双标记法E. 以上都不对35. 直接荧光抗体染色法与间接法相比,优点为A. 特异性强B. 敏感性高C. 检测不同的抗原,只需制备一种荧光抗体D. 可用于抗原的定位检测E. 可用于抗原定性检测36. 关于酶免疫技术的特点,正确的是A. 酶标记物催化抗原反应,使其结果放大,提高了检测的灵敏度B. 酶只能标记抗体,不能标记抗原C. 酶标记抗体后保留了酶对底物的催化活性D. 酶催化底物显色,伎酶标记免疫反应结果得以放大E. 酶标记抗体后改变抗体的免疫学活性37. ELISA双抗体夹心法是A. 属于竞争结合测定B. 酶标记特异性抗原用于抗体的检测C. 先将待测抗原包被于固相载体上D. 适用于检测大分子蛋白质抗原E. 能用于半抗原物质的测定38. 捕获法主要用于何种物质的测定A. IgGB. IgAC. IgMD. IgDE. IgE39. 下列何种方法适用于单个抗原决定簇的小分子抗原检测A. ELISA双抗体夹心法B. ELISA竞争法C. ELISA双抗原夹心法D. ELISA捕获法E. ELISA间接法40. 下列何种方法检测抗原最易出现钩状效应A. ELISA双抗体夹心法一步法B. ELISA竞争法C. ELISA双抗原夹心法D. ELISA捕获法E. ELISA间接法41. 关于ELISA竞争法,下列叙述正确的是A. 只能用于检测抗原B. 被测物与酶标记物的免疫活性各不相同C. 样品中抗原的浓度与酶活性呈正比D. 反应体系中,固相抗体和酶标抗原是固定限量E. 临床上常用于人免疫缺陷病毒抗体检测42. ELISA间接法是用A. 酶标记抗原检测抗体B. 酶标记抗抗体检测抗体C. 酶标记抗抗体检测抗原D. 酶标记抗体用于检测抗原E. 抗体包被固相载体43. 下列何种方法用一种标记物可检测多种被测物A. ELISA双抗体夹心法B. ELISA竞争法C. ELISA间接法D. ELISA捕获法E. ELISA双抗原夹心法44. 大多数化学发光反应属于哪类反应A. 水解反应B. 分解反应C. 氧化还原反应D. 中和反应E. 置换反应45. 电化学发光反应的发光剂是A. 鲁米诺B. AMPPDC. 吖啶酯D. 三丙胺E. 三联吡啶钌46. 作为电化学发光反应的电子供体是A. 吖啶酯B. 碱性磷酸C. 鲁米诺D. 三丙胺E. 三联吡啶钌47. 化学发光反应的首要条件是A. 反应必须提供足够的电能B. 反应必须提供足够的化学能C. 反应必须提供足够的光能D. 反应必须提供足够的A TP能E. 反应必须是由酶催化的快速放能反应48. 以下化学发光与荧光的区别正确的是A. 化学发光时间长,荧光的发光时间短B. 形成激发态分子的激发能不同C. 化学发光需要酶进行催化,而荧光不需要D. 荧光物质能直接标记抗原或抗体,而化学发光剂不能E. 化学发光和荧光的波长不同49. 关于吖啶酯化学发光反应的特点以下描述正确的是A. 吖啶酯化学发光的氧化反应不需要催化剂B. 吖啶酯化学发光的氧化反应需在酸性条件下进行C. 吖啶酯不可直接标记抗原或抗体D. 吖啶酯发光持续时间长E. 吖啶酯发光背景噪音高50. 生物素-亲和素系统(BA5)放大作用的机制主要是A. 每个亲和素有四个生物素部位B. 生物素、亲和素可分别与酶、放射性核素等结合形成标记物C. 生物素-亲和素系统产物稳定性高D. 经化学修饰后,生物素成为活化生物素E. 生物素的噻吩环和咪唑环可分别结合四个亲和素51. AIDS的确诊试验是A. 病毒培养B. 直接红细胞凝集试验C. ELISAD. WesternblotE. PCR52. 免疫金标记物在相应的配体处大量聚集时,斑点为A. 红色或粉红色B. 黑褐色C. 蓝色D. 黄色E. 紫色53. 以下哪项技术可检测单细胞水平产生的细胞因子A. ELISAB. ELISPOTC. PCRD. 间接免疫荧光E. 免疫固定电泳54. 用抗人CD3单克隆抗体检测淋巴细胞,其结果代表A. T淋巴细胞总数B. Th细胞数C. Ts细胞数D. B淋巴细胞数E. NK淋巴细胞数55. 分离外周血单个核细胞,连续密度梯度离心法常用分层液是A. 明胶B. 右旋糖酐C. Ficoll-Hypaque分层液D. Percoll分层液E. 葡聚糖56. Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为A. 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B. 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C. 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞E. 血小板和血浆、红细胞、单个核细胞、粒细胞57. 细胞活力测定常用的简便方法是A. 台盼蓝染色B. 亚甲蓝染色C. 伊红染色D. 抗酸染色E. HE染色58. 下列细胞中的黏附能力最强的为A. 突细胞B. 单核或巨噬细胞C. B细胞D. T细胞E. 红细胞59. 采用Ficoll密度梯度分离法分离得到的细胞主要为A. 单核细胞和淋巴细胞B. 单核细胞C. 淋巴细胞D. 单核细胞E. 淋巴细胞和粒细胞60. T细胞最具特性的表面标志为A. CD2B. CD3C. CD5D. CD4E. CD861. B细胞最具特性的表面标志为A. CD10B. BCRC. CD5D. CD21E. CD2062. NK细胞的表面标志为A. CD10B. CD3C. CD16和CD56D. CDl6E. CD2063. 下列哪种试验用于T细胞体内功能检测的特异性抗原皮肤试验A. 结核菌素皮肤试验B. PHA皮肤试验C. 白喉类毒素疫苗接种试验D. 破伤风类毒素疫苗接种试验E. 多价肺炎链球菌菌苗接种试验64. PHA皮肤试验常用于检测A. T细胞体内功能试验B. B细胞体内功能试验C. NK细胞体内功能试验D. 中性粒细胞体内功能试验E. 吞噬细胞体内功能试验65. 评价B细胞功能的试验是A. 结核菌素皮肤试验B. 细胞毒试验C. 迟发型皮肤过敏试验D. 血清中免疫球蛋白检测E. PHA皮肤试验66. 细胞因子的生物学检测方法A. 特异性高B. 是一种定量法C. 是一种定位法D. 能够测细胞因子的活性E. 敏感性较差67. 下列关于ELISPOT的说法正确的是A. 一个斑点代表一个细胞B. 是一种定量测定可溶性细胞因子的方法C. 通过应用酶标仪检测吸光度得出可溶性蛋白总量D. 捕获抗体为高亲和力多克隆抗体E. 以上都是68. 关于ELISA测定细胞因子的说法以下正确的是A. 测活性B. 敏感性高C. 简便、快速、可定量D. 进行单个细胞水平的细胞因子检测E. 可用于细胞内细胞因子的测定69. 关于流式细胞仪测细胞因子的说法下列正确的是A. 需要分离细胞B. 无需特殊设备C. 可判断不同细胞亚群的细胞因子D. 不可用于细胞内细胞因子的检测E. 能判断细胞因子的生物学活性70. 流式细胞仪采用发光源系统为A. 白光B. 激光C. γ射线D. 荧光E. 单色光71. 下列哪种疾病属于多克隆Ig增高A. 多发性骨髓瘤B. 巨球蛋白血病C. 重链病D. 活动性肝炎E. 恶性淋巴瘤72. 评估肾小球滤过膜受损程度,常测定A. 尿IgGB. 尿IgMC. 血IgGD. 血IgME. 选择性蛋白尿指数73. 血清中单一免疫球蛋白增高,主要见于A. 慢性肝病B. SLEC. 类风湿关节炎D. 肺结核E. 多发性骨髓瘤74. 抗中性粒细胞抗体(ANCA)胞浆型阳性对下列哪一种疾病的诊断有较高特异性A. 系统性红斑狼疮B. 显微镜下结节性多动脉炎C. 干燥综合征D. Wegener肉芽肿E. Takayasu动脉炎75. 关于NK细胞的描述不正确的是A. NK细胞在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中起重要作用B. 临床上将CD3-CD16CD56+的淋巴细胞认为是NK细胞C. NK细胞具有抗原递呈功能D. NK细胞对靶细胞的作用不受MHC的限制E. NK细胞主要具有免疫监视、免疫杀伤等效应作用76. 关于免疫球蛋白的描述不正确的是A. 免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后所产生的一种蛋白质B. 一个天然免疫球蛋白分子的两条轻链型别相同C. 依轻链抗原特异性不同可将免疫球蛋白分为五类D. 正常人血清Ig的κ:λ约为2:1E. 免疫球蛋白IgG亚型有IgG1、IgG2、IgG3和IgG477. 关于补体的描述不正确的是A. 补体是一组经活化后有酶活性的蛋白质B. 体内合成补体的主要细胞是肝细胞和巨噬细胞C. 补体是参与免疫反应过程中重要的效应系统和效应放大系统D. 补体的三条激活途径是经典途径、旁路途径和MBL途径E. 补体激活的旁路途径直接从C1开始激活78. 抗原抗体之间的结合力不涉及A. 静电引力B. 范德华引力C. 氢键D. 疏水作用力E. 共价键79. 抗原抗体特异性结合,不出现肉眼可见反应的条件是A. pH值接近颗粒性抗原的等电点B. 反应温度为37℃C. 使用聚乙二醇D. 适当的振荡E. 抗原抗体比例合适80. 有关单克隆抗体的特性不正确的是A. 单克隆抗体只针对一个表位B. 由单个细胞株产生C. 与抗原结合可发生沉淀反应D. 均一性抗体E. 对环境的pH值敏感81. 以下不属于基因工程抗体的优点的是A. 基因工程抗体的分子量较大B. 产量多C. 容易获得D. 可制备人源性抗体E. 可通过基因工程技术改造82. 间接凝集反应不能检测A. 抗体B. AFP抗原C. 伤寒沙门菌菌体抗原D. 类风湿因子E. 抗O83. 关于直接Coombs试验,说法错误的是A. 检测血清中游离的不完全抗体B. 可定性检测C. 可作半定量分析D. 可用于新生儿溶血检测E. 可用于自身免疫性溶血性贫血的检测84. 关于间接Coombs试验,说法错误的是A. 检测血清中游离的不完全抗体B. 出现凝集为阳性C. 受检者红细胞与抗人球蛋白抗体结合D. 用于检测母体Rh抗体E. 可检测因红细胞不相容性输血而产生的血型抗体85. 以下不是对流免疫电泳中抗体向负极移动的原因是A. 等电点偏高B. 带负电荷较少C. 分子量较大D. 移动速度快E. 电渗作用86. 关于免疫比浊法中对抗体的要求,下列不正确的是A. 特异性强B. 效价高C. 亲和力强D. 使用R型抗体E. 使用H型抗体87. 根据海德堡曲线理论,下列说法不正确的是A. 抗原过量时浊度下降B. 抗体过量时,浊度随着抗原递增而递增C. 抗原抗体比例适当时,免疫复合物的形成和解离相等D. 抗原过量导致测定失败E. 抗体过量导致测定失败88. 对免疫比浊法测定无影响的因素是A. 抗原抗体比例B. 抗原的质量C. 抗体的质量D. 反应溶液的pHE. 增浊剂的使用89. 双向扩散试验不能分析A. 抗原或抗体存在与否B. 抗原或抗体的相对含量C. 抗原或抗体的相对分子量D. 抗原的性质E. 抗体的性质90. 下述抗原抗体反应中不属于沉淀反应的是A. 单向扩散试验B. 对流免疫电泳C. 免疫浊度测定D. 肥达反应E. 双向扩散试验91. 用于标记抗体的荧光素应符合下列要求,除外A. 与蛋白质分子形成氢键B. 与蛋白结合后仍能保持较高的荧光效率C. 荧光色泽与背景组织色泽对比鲜明D. 与蛋白质结合后不影响蛋白质的性质E. 与蛋白质的结合稳定92. 关于荧光抗体技术的应用,错误的是A. 可对组织细胞抗原进行定位检测B. 可对组织细胞抗原进行定性检测C. 对自身抗体进行定性检测D. 对自身抗体进行滴度检测E. 可检出病毒拷贝数93. 关于直接荧光抗体染色法的描述,不正确的是A. 荧光标记抗体直接与抗原结合B. 常用于抗核抗体的检测C. 非特异荧光染色弱D. 灵敏度较间接法低E. 每检查一种抗原需制备特异的荧光抗体94. 下列有关间接荧光抗体染色法的叙述,错误的是A. 以荧光素标记特异性抗体B. 易产生非特异荧光C. 既可检测抗原,也可检测抗体D. 一种荧光抗体可对多种抗原进行检测E. 敏感性高于直接荧光抗体染色法95. 下列关于ELISA法原理,不正确的是A. 结合到固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫活性B. 酶标记抗原或抗体既保留了免疫活性,又保留了酶的活性C. 结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例D. 通过洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开E. 底物被固相载体上的酶催化变成有色产物,其定量与样品中待测物质含量成正相关96. 下列关于双抗体夹心法原理,不正确的是A. 用于检测二价或二价以上的抗原B. 一种单克隆抗体作为固相抗体,另一种作为酶标抗体C. 可使标本和酶标抗体同时加入成为一步法D. 标本中有类风湿因子(RF)存在,则可出现假阴性反应E. 采用高亲和力的单克隆抗体可提高检测的灵敏度和特异性97. 不属于ELISA法试剂要求的是A. 酶作用专一性强B. 必须应用单克隆抗体C. 底物应颜色变化明显,反应终止后颜色稳定D. 载体要吸附性好,空白值低、透明度高E. 抗原要求纯度高,抗原性完整98. 下面不属于ELISA标记酶必须具备的特性是A. 易与抗原或抗体偶联B. 标记后酶活性保持稳定C. 抗体与酶标抗原结合后,酶活性可出现抑制或激活D. 酶催化底物反应一生成的信号易于测定、重复性好E. 标记抗原后,不影响抗原的免疫活性99. 关于吖啶酯化学发光反应的特点,叙述错误的是A. 发光迅速B. 氧化反应不需要酶进行催化C. 发光在酸性环境下进行D. 反应的本底低E. 试剂稳定性好100. 下列哪一项不符合化学发光反应的过程A. 化学反应生成中间体B. 化学能转化为电子激发能C. 电子激发能使中间体变成电子激发态D. 激发态分子返回基态时发射光子E. 吸收光也能使分子激发生成中间体101. 关于电化学发光技术下列叙述错误的是A. 电化学发光在电极表面进行B. 发光为瞬间发光,持续时间短C. 以三丙胺(TPA)为电子供体D. 三联吡啶钌标记抗体或抗原E. 常用磁性微粒为固相载体102. 下面哪一项不属于BAS作用的特点A. 生物素、亲和素间结合具高度专一性和亲和力B. 适用于多种标记免疫分析技术C. 生物素、亲和素间的结合特性易受试剂稀释的影响D. 生物素、亲和素的结合不易受酸碱条件的干扰E. 每个亲和素分子可同时与四个生物素衍生物结合103. 下列哪项不是ELISPOT试验检测B细胞功能的优点A. 比ELISA实验灵敏B. 可检测抗体分泌细胞C. 可检测抗体的分泌量D. 可同时进行B细胞计数E. 可同时检测不同抗原诱导的不同抗体的分泌104. 免疫组织化学技术中,对固定剂的要求不包括A. 具有氧化活性B. 能快速固定抗原C. 能防止抗原物质扩散D. 固定后的抗原能被抗体识别E. 防止细胞自溶105. 免疫细胞分离中对分离介质的基本要求不包括A. 对细胞无毒B. 基本等渗C. 不溶于血浆等分离物质D. 有pH缓冲作用E. 有一定的比重106. 下列标志不属于B细胞的是A. 膜免疫球蛋白(SmIg)B. EB病毒受体C. BCRD. CD40E. 绵羊红细胞受体107. 关于脑脊液Ig叙述不正确的是A. 易透过血脑屏障的Ig是IgMB. 多发性硬化症患者脑脊液-IgG指数增高C. IgG较易通过血脑屏障D. 中枢神经系统疾病脑脊液IgA、IgM升高E. 脑脊液白蛋白商值可反映血脑屏障受损程度[A3/A4型题](1~6题共用题干) 淋巴细胞的表面抗原的检测可用于淋巴细胞的亚群分类、功能分析等。
纤维连接蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求jiuqiang
纤维连接蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)适用范围:用于体外定量测定人血清或血浆中纤维连接蛋白的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
表2主要组成成分注:不同批号的校准品、质控品赋值有差异,具体赋值详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品为黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≤ 0.5000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验:相关系数r≥0.975,在[20.0,100.0] mg/L区间内测定的绝对偏差应不超过±10 mg/L,在(100.0,600.0] mg/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为150 mg/L时,其吸光度变化在0.0200~0.1500之间。
2.6 线性区间在[20.0,600.0] mg/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[20.0,100.0] mg/L 区间内测定的绝对偏差应不超过±10 mg/L,在(100.0,600.0] mg/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于10%。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
2.9校准品溯源性按照《GB/T 21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度,试剂盒校准品溯源至上海北加公司的纤维结合蛋白测定试剂盒。
蛋白含量的测定
蛋白含量的测定
蛋白含量的测定是确定食品或其他物质中蛋白质含量的一种常见
方法。
常用的测定方式是生物素化酶联免疫吸附试验(Biotin-ELISA)和布拉特法(Bradford Assay)。
生物素化酶联免疫吸附试验是一种通过特定蛋白结构的抗体来检
测蛋白的方法。
在这种测定中,抗体被固定在试管壁上,然后将待测
样品加入。
如果样品中含有目标蛋白,则蛋白会与抗体结合。
加入生
物素标记的二抗后,选择酶标仪进行检测,根据生物素的发光强度可
以定量测定待测样品中的蛋白含量。
布拉特法是一种以染料结合蛋白为基础的测定方法。
这种方法的
基本原理是,在弱酸环境中,染料(科姆西亚染料)与蛋白质结合,
使染料从橙色变为蓝色。
根据颜色深浅程度可定量测定待测样品中的
蛋白含量。
该方法优点是反应简便、快速,准确度较高,但受其他化
合物的干扰影响较大。
总而言之,蛋白含量的测定对于精确定量特定物质中的蛋白含量
非常重要,因此这种技术在生物研究和食品工业等领域都得到了广泛
应用。
全自动生化仪免疫比浊法检测血清白蛋白的方法学评价
全自动生化仪免疫比浊法检测血清白蛋白的方法学评价目的使用免疫比浊法对血清白蛋白(ALB)测定的方法学进行评价。
方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,对免疫比浊法测定血清白蛋白的精密度、线性范围、回收率及准确性等指标进行测试,同时与溴甲酚绿法进行相关性的比较。
结果精密度批内CV55 g/L)进行比较。
不同水平血清白蛋白的检测结果比较见表3。
结果表明两法差异无统计学意义(P > 0.05),直线回归方程Y =1.05X +5.56(Y:免疫比浊法;X:溴甲酚绿法),F = 103.3,r = 0.926,提示两法有良好的相关性。
2.6 干扰试验取一份混合血清(血清白蛋白为50.7 g/L)分别加入不同浓度血红蛋白、胆红素和脂肪乳剂(以TG浓度表示),分别测定血清白蛋白值。
结果显示,TG≤23.0 mmol/L,Hb≤50 g/L,TBIL≤400 μmol/L时对本法无显著干扰。
3 讨论ALB是血浆中含量最多、功能最重要的一种蛋白质。
它广泛地存在于人体的血液、淋巴、肌肉组织中,属于非专一性的运输蛋白,其含量的测定对临床疾病的诊断、治疗、预后判断都具有非常重要的意义,其测定结果的准确性也因此而受到广泛的重视[5]。
长期以来,溴甲酚绿(bromcresol green,BCG)染料结合法测定ALB广泛应用于临床,目前国内大多数医院仍然沿用这一方法,但该法会因BCG与非ALB类蛋白质非特异性结合,使得其检测特异性一直以来不是很理想。
因此,近年来外国某些公司开发出来的白蛋白高特异性免疫比浊法就受到了高度关注[6-7]。
免疫比浊法也称浊度法,属于散射光谱分析,是在比色的基础上发展起来的,其测定理论、方法、计算等许多方面和比色法相似,但本质上又有区别[8]。
最近几年免疫比浊开始应用于临床体液中白蛋白含量检测的领域。
再由于配合全自动生化分析仪的优势,白蛋白的检测基本能够实现高速、灵敏和自动化。
纤维蛋白原测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求wantaiderui
纤维蛋白原测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求wantaiderui纤维蛋白原测定试剂盒(免疫比浊法)适用范围:用于体外定量测定人血浆中纤维蛋白原(FIB)的含量。
1.1包装规格1) 试剂1:50mL×1、试剂2:50mL×1;2) 试剂1:50mL×2、试剂2:50mL×2;3) 试剂1:50mL×1、试剂2:25mL×1;4) 试剂1:50mL×2、试剂2:25mL×2;5) 试剂1:45mL×1、试剂2:15mL×1;6) 试剂1:45mL×3、试剂2:15mL×3;7) 试剂1:48mL×1、试剂2:12mL×1;8) 试剂1:48mL×3、试剂2:12mL×3;9) 试剂1:50mL×1、试剂2:10mL×1;10)试剂1:50mL×3、试剂2:10mL×3;11)试剂1:60mL×1、试剂2:20mL×1;12)试剂1:96mL×1、试剂2:24mL×1;13)试剂1:100mL×1、试剂2:20mL×1。
1.2组成成分试剂1:Tris-HCl缓冲液(pH7.5) 20mmol/L聚乙二醇-6000 2%试剂2:Tris-HCl缓冲液(pH7.5) 20mmol/L抗人纤维蛋白原抗体适量2.1试剂装量应不低于试剂瓶签标示装量。
2.2外观试剂1:无色澄清液体;试剂2:无色或黄色澄清液体。
2.3试剂空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于1.5。
2.4准确性测试纤维蛋白原的参考物质NIBSC Lot#4,SSC,测试结果的均值与参考物质标示值的偏差应不超过±15%。
2.5重复性测定不同浓度样本(高、中、低三个浓度),其结果的变异系数应不超过10%。