各种分子遗传标记简介32页PPT
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分子遗传标记
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二、DNA分子遗传标记鉴别的依据
3.DNA分子作为遗传信息的载体具有较高的遗传稳定 性,较蛋白质、同功酶等还有较高的化学稳定性。在 陈旧标本中所保存下来的DNA仍能够用于DNA分子遗传 标记的研究,由于DNA分子所载信息量巨大,并且相 对稳定,PCR技术具有高速、高效和特异性高等特点, 因此用DNA分子遗传标记鉴别中药材品种和对中药复 方制剂中组分的检测具有快速、准确、专属性强、重 现性好等优点。
三、DNA分子遗传标记在生药鉴定中的应用
1.生药真伪鉴定是生药学的重要组成部分 对同属不同种药材鉴定及药材真伪鉴定,保证中医用 药的准确性,维护人们身体健康具有重要意义。传统 的中药鉴定主要依靠颜色、形状、气味、味道和质地 等感性特征,这种鉴定方法的不足之处在于不准确。 利用DNA分子遗传标记技术直接分析药材的DNA多态性, 找出真品特有的DNA片段,对此进行测序,进而制备 DNA探针,来检测相应的药材。是一种便捷、准确的 生药鉴定方法。
三、DNA分子遗传标记在生药鉴定中的应用
4.在药用植物道地性研究上的应用 药材道地性的原因就是植物的遗传物质DNA及初生和 次生代谢过程中的酶系统发生了“道地性”变化。道 地性药材与非道地性药材毕竟同种,甚至同一亚种。 二者在形态和生药性状等特征上,差别往往不明显, 给道地药材的鉴别带来了困难。采用DNA分子诊断技 术并辅以等位酶技术,可以从分子水平上来揭示药材 的“道地性”。对药材的“道地性”研究有重要意义。
重复序列为基础的DNA分子标记技术
卫星DNA(Satellite重复序列为几百~几千个碱 基对),微卫星DNA (Microsatellite,重复序 列单位为2~5个碱基对),小卫星DNA (Minisatellite,重复单位为大于5 个碱基对) 等。
分子生物学总结 PPT课件共32页
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第三章 复制
一、DNA复制概况
▪ 概念: Replicon、 replication bubbles、 Replication
fork、 semi-coservative replication、 semidiscontinuocos replication、 Okazaki fragment、 leading strand、 lagging strand
组成 • 端粒结合蛋白 • 端粒的功能(※) :保护染色体结构和功能的
完整性 • 端粒酶的作用机制 • 端粒、端粒酶与衰老、肿瘤的关系※
第四章 转录和转录后加工
转录
• 1.概念(※) :transcription、 promoter、 terminator、 read-through、 transcription factors、 Cis-acting elements、 Trans-acting factors、 ribozyme、 alternative splicing、
• 疾病: Thalassemia(地中海贫血)
3. discontinuous gene
• 概念※ :不连续基因(discontinuous gene ) 、
外显子(exon ) 、内含子(intron ) • 证据(理解):R环结构、限制性内切酶分析 • 外显子和内含子的连接区 • (※) … …的可变调控: 组成性剪接、选择性
• 2.概述:转录和DNA复制的区别、 Template(模板) • 3.E.coli RNA聚合酶:全酶 、核心酶 、功能
• 4.转录过程
• 模板的识别:启动子、 -10序列、-35序列
• 起始
• 延伸
• 终止:不依赖ρ因子的终止子、依赖于ρ因子的终止子
《分子标记技》PPT课件
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a. OPA08-280bp; b OPA08-310bp; c OPA08-400bp
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RAPD标记的特征 Characteristics of RAPD
❖ ① 引物很短(10 base) ② 只有1种引物参与反应 ③ 引物在染色体上随机结合 ④ 退火温度低一般为35-37℃ ⑤ 当两引物在互补的模板DNA链上的结合 位点距离小于2.0kb便可扩增出该区域
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21
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Examples of RFLP Analysis
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Examples of RFLP Analysis in Citrus
❖ By Cheng et al, 2003. (Published in PMBR) 华中农业大学柑橘课题组
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24
RAPD(随机扩增多态性DNA)
➢ 1986年,美国PE-Cetus公司 的Mullis等人发明了聚合酶链 反应(PCR)
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29
RAPD实验操作 Manipulation of RAPD
❖ 四、反应体系:在25ul反应体系中加入:
成分
体积(浓度)
模板DNA 随机引物
1ul (50ng) 1ul (约5pmol)
10xPCR Buffer
2.5ul
MgCl2
2ul
dNTP
1ul
Taq酶
1单位(U)
加ddH2O
至 25ul
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2
第一节 园艺植物遗传标记概述
一、遗传标记
➢遗传标记特点
1.多态性高,标记数目多,提供的信息量大; 2.共显性遗传,能区分纯合基因型和杂合基因型; 3.表现中性,不影响目标性状表达,与不良性状无 必然连锁;
遗传标记
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2、DNA指纹
将个体的染色体DNA用限制性内切酶消化,
分离得到不同大小的DNA片段,再以重复序列
中的共有序列作为核酸探针进行杂交,对所得
到不同生物个体相似DNA片段的带型图谱(即
DNA指纹图谱)进行分析的方法。该技术可有 效地应用于遗传分析、法医和亲子鉴定等。
DNA指纹图谱的特点
1、多位点性 2、高变异性 3、简单而稳定的遗传性
3、原位杂交
原位杂交就是利用放射性或非放射性标记 的已知核酸探针,通过放射自显影或非放射检 测系统在组织、细胞及染色体上检测特异 DNA或RNA序列的一种技术,是一种直接、 简便的研究基因定位和表达的方法。
原位杂交的杂交双方是待测核酸序列及探针,待 测核酸序列可以是克隆的基因片段,也可以是未 克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。 核酸探针是指用放射性同位素、非放射性荧 光染料直接或间接标记的,能与特定的核酸序列 发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。根据其来
3’ 端 标 记 时 : 用 未 端 转 移 酶 催 化 已 标 记 的 dNTP加到寡核苷酸的3’端,成为标记探针;
生物素光照法
光敏生物素在紫外线照射下与DNA或RNA的 碱基发生化学反应,与核酸形成牢固的共价 结构,再借助于酶的显色反应,即可显示杂 交的位置。
4、RAPD
Random amplified polymorphic DNA ,随机
原位杂交
2、基于PCR的DNA标记
单引物PCR标记:RAPD、ISSR
双引物选择性扩增的PCR标记:AFLP
通过克隆和测序来构建特殊双引物的PCR标记: SSR、SCAR、STS
3、基于PCR和限制性内切酶相结合的DNA标记
AFLP (Restriction fragment length polymorphisms)
遗传标记技术及应用资料
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对分子标记中共显性的理解
(二)基于PCR 技术的分子标记
PCR技术的特异性取决于引物与模板DNA的特异 性结合,按照引物类型可分为:
①单引物PCR标记,其多态性来源于单个随机引物作用 下扩增产物长度或序列的变异,如:随机扩增多态性 DNA标记(Random amplification polymorphism DNA, RAPD)等技术;
开发成本和使用成本尽量低廉;
二、分子遗传标记
(一)基于分子杂交的分子标记(如: RFLP:限制性片段长度多态性 等)
(二)基于PCR 技术的分子标记(如: 随机扩增多态性DNA标记(Random amplification polymorphism DNA, RAPD 等)
(三)基于基因芯片等的分子标记(如: SNP:单核苷酸多态性 等)
SSR标记的特点
(1)数量丰富,广泛分布于整个基因组;数量几 乎无限。
(2) SSR技术一般检测到的是一个单一的多等位 基因位点。
(3)共显性标记,可鉴别出杂合子和纯合子。 (4)实验重复性好,结果可靠。 (5)由于创建新的标记时需知道重复序列两端的
序列信息,因此其开发有一定困难,费用也较高。
(三)基于基因芯片等的分子标记
三、DNA分子标记在植物生 物技术中的应用
DNA分子标记是现代植物生物技术中应用的重要工具, 其应用主要包括以下几个方面:
1、构建高密度的遗传连锁图 :
在经典遗传学中由于遗传标记的数量较少,只 能建立稀疏且分布不均匀的遗传连锁图。DNA分 子标记数量丰富,为高密度遗传图谱的制作提供 了可能,促进DNA指纹的分析。
RAPD标记原理
A
B
C
primer
RAPD标记的特点
《遗传标记》课件
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02
遗传标记的检测技术
基因组DNA提取
03
提取步骤
从生物样本中提取基因组DNA是遗传标 记检测的第一步,通常包括细胞裂解、 DNA释放、洗涤和纯化等步骤。
提取方法
注意事项
有多种方法可用于基因组DNA的提取, 如硅质吸附法、氯化铯梯度离心法、磁珠 法等。
提取过程中需注意避免DNA的降解和污 染,保证DNA的完整性和纯度。
在动物育种与繁殖中,遗传标记的应 用也十分广泛。通过标记辅助选择技 术,可以有效地改善动物的生长性能 、繁殖性能和健康状况。
例如,利用遗传标记可以预测动物的 疾病易感性,从而制定针对性的饲养 管理措施,提高动物的健康水平。
基因组编辑与基因治疗
遗传标记在基因组编辑和基因治疗领域中具有重要应用价值。通过基因组编辑技 术,可以精确地修改人类和动物的基因组,从而达到治疗遗传性疾病和癌症等病 症的目的。
例如,CRISPR-Cas9系统是一种基于遗传标记的基因组编辑技术,可以通过对特 定基因进行敲除、插入或突变等操作,实现基因治疗和疾病治疗。
05
遗传标记的伦理与法律问 题
基因隐私权与基因歧视
基因隐私权
保护个人基因信息不被非法获取、泄露和利用,确保个人基 因隐私不受侵犯。
基因歧视
防止因个人基因信息而受到不公平待遇或歧视,保障个人权 益不受侵犯。
医学研究
用于疾病诊断、预防和治疗,通过 遗传标记的研究可以发现与疾病相 关的基因变异,为精准医疗提供依
据。
农业研究
用于作物育种、品种鉴定和遗传改 良,通过遗传标记的研究可以鉴别 作物的优良性状,提高农作物的产 量和品质。
个体识别与鉴定
用于个体识别和亲缘关系鉴定,通 过遗传标记的研究可以确定个体的 身份和亲缘关系,在法医学、人类 学等领域有广泛应用。
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60、人民的幸福是至高无个的法。— —西塞 罗
谢谢!
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ,而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸,生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业,需 要决心 ,能力 ,组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
各种分子遗传标记简介ห้องสมุดไป่ตู้
56、极端的法规,就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要,人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益, 而是为 了公共 的利益 ;一部 分靠有 害的强 制,一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ,那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
谢谢!
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ,而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸,生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业,需 要决心 ,能力 ,组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
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56、极端的法规,就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要,人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益, 而是为 了公共 的利益 ;一部 分靠有 害的强 制,一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ,那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
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