微生物检测领域中测量不确定度的研究进展
微生物检验中菌落总数的不确定度评定
微生物检验中菌落总数的不确定度评定2006年第1期徐灼均（江门市新会区CDC 广东江门529100）【摘要】目的评定菌落总数的不确定度。
方法采用合并样本标准差求检测结果的不确定度。
结果采用合并样本标准差求检测结果的不确定度适合于任何一次检测。
结论用合并样本标准差求检验结果的不确定度较方便，并且适合于每一个样本的检验结果，随着检验结果的不断增加，可随时加入到合并样本中，重新计算合并样本标准差，更新其不确定度的取值范围。
【关健词】微生物不确定度在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明，故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。
本文试对微生物检验中菌落总数检测项目的检测结果作不确定度评定。
1 检验方法依据GB/T4789.2-2003食品卫生检验方法微生物学部分以无菌操作取检样25 g（ml）剪碎放于含有225 ml灭菌生理盐水中，经振摇或研磨做成1︰10的均匀稀释样液。
根据食品卫生标准或对污染情况的估计，选择2～3个稀释度，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入培养基约15 ml，并转动培养皿使混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48 h±2 h。
计数后以同稀释度的各平板平均菌落总数报告。
2 数学模型设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X cfu/g（ml）3 计算不确定度[1]3.1 在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因，而B类不确定度分量对合成不确定度影响较少。
按GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验》中方法，同一样品每个稀释度作两个平衡样，因此可以采用合并样本标准差求检测结果的不确定度见表1。
3.2 从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样本标准差，由于数据的散发性较大，计算出的合并样本标准差很大，当样本均值较小时其不确定度则会过大，此时可以对上述数据取对数后，计算出样本检验结果对数值的均值和残差，将中间计算结果见表2。
关于饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度检验研究
在１ ． ７ ９ ６ ～ １ ． ９ ５ ２之 间 。
在 进 行 实验 的过 程 中 ， 需 要 借 助相 应 的 仪 器 来 完 成 实 验 ， 在 饮 用 纯 净 水 微 生 物 检 测 中 菌落 总数 的实 验 中 ，主 要 用 到 的 实 验 仪 器 有 高 压 灭 菌 锅 、 电热 干 燥 箱 、 恒 温 水浴 锅 以及 恒 温 培 养 箱 。 通 过 实 验 仪 器 与 实 验 试 剂 的 辅
（ 三） 实 验 仪 器
样 都形成两个检测结果 ， 并分别取对数值 ， 并计算 出两个 对数的平均值 ， 最 后在形成残差平方和 。检测完成之后 需要进 行相应 的计 算 ， 计算时所采用 的公式 为贝塞 尔公式 ， 首 先将 合并样 品 的标准差 计算出来 ， 随后再 将检测 结果的不确定度计算 出来 ， 并对不确定度进行扩 展， 在进行扩展 不确定度 计 算时， 需要根据相应的数值来 查询到 Ｔ分布 ， 最终才能确 定扩展不确定 度数值 。在表示检验结果时 ， 如果选择 ２次测量对数值的平均值 ， 那么不 确定度 的取值 区间就应该在减去平均值的数值到加上平均值 的数值之 间， 通 常来 说， 任何一次不确定度的测量取 值区间都适合采用此种方法 。比如 在选择 的 １ ５份水样 中的 ３号， 经过测量之后 ， 其对数平均值为 １ ． ８ ７ ４ ， 根据 贝塞尔公式计算 出来 的对数平均值为 ０ ． ０ ７ ８ ，那么不确定度 的取值 区间就
测量不确定度在食品检验检测中的应用及研究进展
过分析发现标准曲线拟合所导致的不 确定度较高的主要原因是选取的标准 溶液浓度范围过宽，样品测量值与标 准溶液浓度平均值相差较远。 2.2 超高效液相色谱 - 串联质谱法
超高效液相色谱 - 串联质谱法 （LC-MS 法）作为目前最重要的分离 和鉴定分析方法之一，其测量不确定 度的评定也理所应当受到充分重视。 分析评定液质联用法测量不确定度的 文献可得出：测量不确定度来源主要 为标准曲线和前处理。
1 测量不确定度的意义及重要性
《测量不确定度评定和表示指南》 GUM 给出的测量不确定度的定义是： 与测量结果相关联的参数，它表征了 可以合理地赋予被测量的量值分散程 度。测量不确定度是一个完整的定量 分析结果的重要组成部分，可用于评 估定量方法的可靠性和检测结果的可 信度 [2]。由于在实际测量中经常会出 现误差，测量不确定度能够表明结果 的可信赖程度，是衡量测量结果的重 要指标 [3]。在食品检验过程中，测量 不确定度是定量说明检测结果质量的 参数，检测结果的可靠性很大程度上 取决于测量不确定度大小，测量不确 定度越小，说明检测水平越高。
菌落总数测定不确定度分析
菌落总数测定不确定度分析作者：聂庆丽樊云霄来源：《中国食品》2021年第21期隨着经济的高速发展和GDP的不断增长以及人们生活水平的不断提高，人们对于饮食的安全性要求也在不断提高。
食品中微生物的检测已经得到了有关部门的高度重视，特别是食品中菌落总数的测定已经被国家列为食品检测的强制检测项目。
因此，菌落总数测定不确定度分析是很有必要的。
为了减少实验误差，提高检测结果准确性，检测实验室应具有并应用评定测量不确定度的程序。
微生物检验的性质决定其无法运用计量学和统计学正确评估测量的不确定度，但我们旨在找出影响不确定度的各个分量，并评估出它们对结果的影响程度，从而作出合适的质量控制。
微生物不确定度的评定主要针对定量测试。
测量的目的是为了得到测量结果是否准确或者有效。
如果报告中只表述测量结果而未给出其可信程度或者可信的范围，则测量结果是不准确的。
判断测量结果是否准确需要多次测量结果的重复性，也就是测量的质量和准确度，这就需要使用不确定度来表示。
文章主要介绍了测量不确定度的方法程序，分析了不确定度来源等。
一、测量方法程序实验室依照ISO《测量不确定度表示指南》2005版分析评估本实验室菌落总数测试的测量不确定度的评定方法与结果。
程序如下：（1）培养基及稀释液配制;（2）样品稀释;（3）样品培养;（4）菌落计数。
二、建立数学模型根据测量原理及计算公式，建立测定不确定度评定所需数学模型：三、不确定度分析来源菌落总数测定主要是称/吸取25g（mL）样品置于盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌袋中，均质，制成1∶10的样品匀液。
用1mL无菌吸管吸取1∶10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管内，混匀，制成1∶100的样品匀液。
以此类推梯度稀释。
选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平行。
同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
及时将15-20mL冷却到50℃的平板计数琼脂倾注平皿，并混合均匀。
微生物检验中菌落总数的不确定度评定
宜春 学院学报
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙｉｅｈｕｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ
Ｖｏ１．３２， Ｎｏ．８ Ａｕｇ．２０１０
微 生物 检 验 中菌 落 总数 的不 确 定 度 评 定
黄筠 喻 （庆 阳 市质 检 所 ，甘 肃 西峰 ７４５０００）
摘 要 ：为减 小 实验误差 ，提 高检验精确度 ，采 用合 并样本标 准偏差计 算检验 结果 的不确 定度 。 实验表 明， 采用合并样本标 准偏 差计算检验结 果的不确 定度 方便 且适 用。
水质菌落总数检验 中不 确定 度 的主要来 源有 ：重 复性 ， 包括检验环境 、培养 时 间、培养 温度 、样 品的 均匀 性 、取 样的重复性 、人 员计 数 、数值 修 约等 。培养 条 件 ，包 括 培 养时 间的允差 和培 养湿 度 的允差 ；取 样 ，包 括稀 释 体积 和 取样体积 ；仪 器与试 剂 ，包 括吸 管和 培养 基等 ；样 品保存 条件 ，包括保存温度和 保存 时 间等 。 由于在 微生 物检验 中，Ｂ类不确定度 分量 对合 成不 确 定度 贡献 较 小 ，重 复测 量带来的不确 定度 占主要部 分 ，所 以 ，主要 考 虑重 复测 量 带来 的不确定度 ，即采用 统计 的方法 （Ａ类 ） 评定 测量 不 确 定 度 。
恒 温培养 箱。 １．４ 试 验方法 ：依据 ＧＢ／Ｔ５７５０．１２—２００６《生活饮 用水 标 准检验方法微生物指 标》 的方 法进 行检 验 。以无菌 操作 方 法 吸 取 １ｍｌ充 分 混 匀 的 水 样 ，注 入 盛 有 ９ｍｌ无 菌 生 理 盐 水 的试 管中 ，混匀制成 １： １０的稀 释液 ；吸取 １：１０的稀 释 液 ｌｍｌ注入盛 有 ９ｍｌ灭菌 生理 盐 水 的试 管 中，混 匀成 １： １００稀释液 ；按 同法依 次稀 释成 １：１０００，１： １０００稀释 液 等备 用 ；用灭菌吸管取未稀释 的水样 和 ２～３个 适宜稀 释度 的水样 ｌｍｌ，分 别 注入 灭菌 平皿 内 ，每 个 稀 释度 做 两个 平 皿。然后在平皿 内注入 ４５℃左右 营养 琼脂约 １５ｍｌ，立 即旋 摇混匀。 同时做 营养 琼脂 空 白对照 ；待 琼脂 凝 固后 ，翻转 平皿 ，置 （３６±１）℃ 培 养箱 内培 养 ４８ｈ，进 行 菌 落 计 数 ； 选择菌落数在 ３０～３００稀释 度 的平均 菌落 数乘 以稀 释倍 数 作为检测结果 。数 学模 型 ：设 菌落 总 数为 Ａ，检测 结果 为 ｘ，则 ：Ａ＝Ｘｃｆｕ／ｍｌ。 ２ 不确定 度的来源分析
测量不确定度在食品检验中的应用及进展
测量不确定度在食品检验中的应用及进展摘要：随着经济水平的提高，食品安全成为了人们关心的重要问题，如何保持食品检测质量管理与控制的稳定持续发展成为大家关注的话题，因此应该通过测量不确定度的评定，有效提高食品检测质量管理与控制的管理水平，从而提高食品检测的水平，进而为食品安全提供保障。
食品检验实验室应具有并应用评定测量不确定度的程序。
测量不确定度是评定食品检验检测结果可信程度的最重要依据，有助于提升食品检验检测过程的准确性。
关键词：测量不确定度；食品检验；应用随着食品检验领域的不断发展，检测技术水平逐步提升，食品检测精确度大幅提高。
但是食品检验工作需要复杂的测量程序，实验过程中会受到诸多不确定因素的影响，使得检测结果与真值之间出现一定的误差。
由于在实际测量中经常会出现误差，测量不确定度能够表明结果的可信赖程度，是衡量测量结果的重要指标。
不确定度的数值可以直接体现检测质量的高低，影响检测结果的可靠性。
尤其是在实际工作中，当测量值出现在限定值附近时，为确保数据的可信度，对检测结果进行不确定度评价是不可或缺的。
一、食品检验中的不确定度不确定度能够为检测结果提供更加科学的保障，正逐步被应用到食品安全检测领域。
近年来，分析检测实验室及研究人员高度重视不确定度评定，针对食品检验中的不确定度进行了深入分析。
1、食品化学分析检测中的不确定度。
化学分析检测是食品检测的重要手段，主要利用高效液相/气相色谱法、高效液相/气相色谱串联质谱法、紫外扫描分光光度法及电感耦合等离子体质谱法，对食品中营养物质、重金属、非法添加等进行准确定量。
在实际食品检测中，高效液相色谱串联质谱法对于痕量残留分析有较为广泛的应用，其不确定度也得到许多研究人员的关注。
利用超高效液相色谱串联质谱法，[1]分析了水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的不确定度；测定了豆芽中植物生长调节剂残留量的不确定度；水产品中硝基呋喃类代谢物的不确定度；测定了鸡肉中乌洛托品残留量的不确定度，其均依据其特定检测方法建立了相应的数学模型，并对不确定度分量标准物质（包括标准物质的纯度、标准溶液的配制以及标准曲线的拟合）、样品处理过程（包括样品称量、提取）、重复性测定进行深入分析和量化，最终得出标准曲线拟合和溶液配制过程会产生较大不确定度的结论。
微生物检验中不确定的评定
பைடு நூலகம்
微 生物检 验 中不 确定 的评定
樊 明 霞
（ 河南省 内黄县疾病预防控制 中心 ，河南 内黄 ４ ５ ６ ３ ０ ０ ）
【 摘 要 】我们 国家 自 从加入ｗＴ ｏ 之后 ， 实验 室在 贸易、 科学技 术 、 卫 生、 工业等领域 的地位和作 用 日趋显著 ， 政府部 门以及 消 费者对
表１ 实验 室技 术 档 案 的 检 测 结 果
４ 小 结
通过上述计算结果显示 ，因为检验结 果的散发性 比较大 ， 倘
若 直接使 用贝塞尔公 式进行计 算标准差 得 出的不确定 度并不 适 用于每一个 样 品， 检验结 果取其对 数之后 ， 使用合 并样 品标准 差 计算检验结果不确定度 的方式则更 为方便 ， 而且适用于每一个 样 品， 由于检验结果 的逐步提高 ， 可 以及 时的加入到合并 样品 中， 计
造成的不确定度属于影 响到检验结 果是否准确 的重要 因素 ， 然而 Ｂ 类不 确定度 的相关分量对 于合成不 确定度 的影响相对 比较少 。
按 照 颁 布 的食 品卫 生 微 生 物 检 验 中 指 出 的 方 法 ， 针 对 同一 个 样 品
的不 同稀释度分别作 出２ 个平衡样 品 ，所 以能够使用合并 样品的 方法 ， 取其差值进行计算检测结果的不确定度 ， 具体数值 见表 １ 。
算标准差 ， 不断更新不确定度的范围。 通过 检验 结果 显示 ， 如果 直接使用 贝塞尔公 式进行样 品标 准 参 考 文 献 ： ［ １ 】 徐 灼均． 微 生物检验 中茵落总数 的不确定度评定 Ｕ ］ ． 临床 和 实验 差 的计算 ， 因为 数据散发性 相对 比较 大 ， 计 算结果 的标 准差也相
食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定
52·FOOD INDUSTRY 田霞 重庆市黔江食品药品检验所食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定将采用无菌操作进行称量25g的样本，取含量为225ml的灭菌生理盐水三角瓶，将样本放入瓶内，随即进行振摇，当振摇充分后，将其制作成为均匀的稀释液，为1∶10。
（2）将样品进行稀释在稀释的过程中，将采用1ml的灭菌吸管吸取1:10的稀释液1ml，沿着管壁注入含量为9ml的灭菌生理盐水试管内，随即进行振摇，当振摇充分后，将其制作成1:100均匀的稀释液；取另外一根1ml的灭菌吸管，按照同样的操作顺序，以十倍的递增顺序进行稀释液的制作，在制作稀释液中，每一次稀释，将换一根灭菌吸管。
（3）稀释倍数的选择依照样品卫生的情况在1∶1000以及1∶100的稀释程度中选取，在做十倍递增的稀释同时,采取灭菌的平皿将经灭菌吸管吸取的稀释液进行注入，其稀释液的含量为1ml，每个稀释将做二个平皿，取45℃的平板计数琼脂培养基注入到含有稀释液平皿当中，其平板计数琼脂培养基含量为15ml，随即对其进行转动，将其混匀，于此同时进行空白对照的制作，琼脂凝固之后，将其放在孵箱内进行培养，其孵箱温度为36℃±1℃，培养时间为48h±2h。
（4）对菌落进行技术计数将每个平皿中菌落数进行计数，其计数方式为采用菌落计数器进行记录,菌落数则在30～300CFU之间稀释度中进行选择,乘以稀释倍数为报告菌落的总数。
评定奶粉菌落总数测定中的不确定度在本次实验中，由实验人员取20个奶粉的小样，在时间间隔较短的时间内，依照GB/4789.2-2010的方法进行重复的测试，将20个样品的总菌落数测试的结果进行得出，在本次实验的过程，在取样时依照GB/4789.2-2010的规定中严格的执行，可确保样品时稳定、均匀的。
以下为不确定度的因素来源分析，如下。
（1）在称量中，使用天平进行检定合格，基本没有影响；（2）样品的均匀性，对样本稀释后，为稀释液，大致均匀，基本没有影响；（3）在样品培养时的温度，经过校对以后，其波幅是处于正常的范围，没有影响；（4）其样品培养的时间，均在正常的范围，没有影响；（5）人员的不同，在这的：食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定。
测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用.doc
测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用［□的］对测量不确定度在ELISA检测屮的评定和应用作出探讨，提供一种表示EIJSA检测结果质量的方法，并寻找改进EUSA检测质量的途径。
［方法］分别使用GUM法和0上而卜*评定法对ELISA检测中的测量不确定度进行评定。
［结果］应用GUM法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）UIV抗原抗体反应吸光度与cutoff比值（B） =4. 335； U=1.3； A=2O 应用自上而下评定法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）HCV抗体反应吸光度与cutoff 比值=3. 747; U=32.8；k=20［结论］ELISA检测引入测量不确定度后，会更科学地判定检测结果，解决了“灰区”设定“难”的问题。
通过分析各分量的相对贡献，可有效改进检测工作质量，提升实验室检测水平。
通过设立目标不确定度，可严格控制检测结果质量，以达到预期的质量耍求。
关键词：不确定度ELISA评定Evaluation and application of measurement uncertainty in ELISA detectionf Abstract] Objective： To evaluate the role of measurement uncertainty in ELISA assay that provides a way of representation for the quality of results and improves the quality of the detection. Methods： Evaluate measurement uncertainty in ELISA test by using GUM and Top-down approach, respectively. Results： By GLM method, the absorbance value and cutoff value of the ratio in HIV antigen-antibody reaction of human plasma was 4.335，U=l. 3 (k=2). Relatively, Using Top-down approach absorbance value and cutoff value of the ratio in HCV antibody reaction of human plasma was 3.747, U=32. 8 (k=2). Conclusion： Measurement uncertainty is introduced to ELISA what makes results more scientifically and Solves the problems of “gray zone” • Analyzing relative contribution of various components of uncertainty on measurement results can improve work quality and enhance the level of laboratory testing. Setting the target uncertainty is help to quality control to achieve the ideal requirements.Key words] Measurement uncertainty; ELISA; EvaluationELISA (酶联免疫吸附试验)是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法。
食品中菌落总数测定不确定度的评定的研究报告
食品中菌落总数测定不确定度的评定的研究报告食品中菌落总数测定不确定度的评定的研究报告摘要：随着食品安全的日益受到重视，对于食品中微生物的检测也变得越来越重要。
菌落总数是评价食品卫生鲜度和微生物质量的重要标准之一。
本文以食品中菌落总数的检测为研究对象，通过实验分析和计算，评估了测定菌落总数的不确定度。
关键词：食品安全、微生物检测、菌落总数、不确定度、实验分析一、背景食品中的微生物污染对人们的健康造成了严重的威胁，因此对于食品中微生物的检测变得越来越重要。
而菌落总数是评价食品卫生鲜度和微生物质量的重要标准之一。
测定菌落总数的精度直接影响到食品的质量评价和微生物污染风险的评估，因此评估测定菌落总数的不确定度非常重要。
二、实验目的本实验的主要目的是通过实验分析和计算，评估测定菌落总数的不确定度。
三、实验材料和仪器材料：牛奶、基因长育菌平板、搅拌器、无菌吸管、无菌滤纸。
仪器：无菌操作台、培养箱、显微镜、平行移液器。
四、实验方法1.制备样品取一份新鲜牛奶，搅拌均匀；取1ml牛奶，加入99ml蒸馏水，进行10倍稀释；将1ml的稀释液取出放入96孔板中，并在每一列的第一列做出1:10的稀释液。
2.菌落计数①取两个26号的无菌吸管，在火焰中灭菌后，取过量的1:10稀释液，将一支吸管从96孔格板中垂直地放入样品中，吸取适量的细菌。
②将吸管平均地横过去，对样品进行均匀充实，避免产生气泡和空白等。
③将吸管放到第一列中，将其沿对角线轻轻地划分成两半，分别用一支吸管为对应涂抹在两个均匀浓度的分光平板上。
④在室温下，将平板颠倒放置，约15分钟之后，在 36±1℃下孵育48h。
3.菌落总数统计采用不止一个培养皿生长的部分，并选出两个数量最接近并且范围尽可能为50～250的标准板的菌落总数，计算样品中的菌落总数。
五、实验结果在实验过程中，样品经过去除浮游菌、试管振荡和菌落的计数及统计后，得到菌落总数统计结果。
在样品采用上述方法测定得出的菌落总数为12，因此在该结果的基础上，通过不确定度的计算，对结果进行评估。
探讨测量不确定度在临床生化检验中的应用 周迎端
探讨测量不确定度在临床生化检验中的应用周迎端摘要】目的：探讨测量不确定度在临床生化检验中的应用效果。
方法：我院收治60例生化检验临床患者，分别抽取静脉血，进行各项生化检验，对不同检测指标的不确定度进行统计。
结果：统计60例患者的生化检验结果发现，γ-谷氨酰转移酶不确定度为12.68，Na+的不确定度为1.20，K+为2.23，各项生化检验指标中的不确定度存在明显差异。
结论：应用不确定度进行临床生化检验，可对检测结果的分散性和准确性进行充分反映，有效的降低了检测误差，值得推广。
【关键词】临床生化检验；测量不确定度；应用【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）28-0104-02在生化检验中，测量不确定度是一个较新的概念，由于其一定程度地赋予测量值适当的分散性，会对测量结果产生直接影响，可用于表征合理赋予被测量的值的分散性。
在临床生化检验的过程中，应用不确定度可以有效的降低检测中出现的误差。
我院收治60例生化检验临床患者，开展各项生化检测，并对检测结果中的不确定度进行统计，现整理报告如下。
1.资料与方法1.1 一般资料60例病例均为我院于2015年3月—2016年3月收治的生化检验临床患者，男36例，女24例，年龄为8～72岁，平均年龄为35.6±11.4岁。
1.2 检测方法1.2.1研究方法给予60例患者各项生化检测，计算并且评估各项检测结果的不确定度，对各项检测结果的不确定度测量值进行对比。
1.2.2检测方法在实验研究的过程中，应用的仪器均为日立7180全自动生化分析仪。
首先，应对患者静脉血进行抽取，之后进行各项生化检测。
检测过程中，总蛋白采取双缩脲的终点法；葡萄糖采取氧化酶法；天门冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰转移酶、丙氨酸氨基转移酶的检测采取速率法；Na+、K+检测采取间接选择电极法；尿酸检测采取尿酸酶比色法；葡萄糖采取氧化酶法；尿素氮、肌酐采取酶法；胆固醇采取胆固醇氧化酶的方法。
微生物测量不确定度评估报告
该被测样品细菌总数在2.1×104和7.3×104CFU之间。
2、一组样品的重复测量
分六次对六个不同时间获得样品进行检测，得到每个样品的细菌总数结果。每份样品重复检测两次，第j个样品两次测量结果分别为 和 。由于是六次不同时间的独立检测，因此采用合并样本方差进行计算。
1.1检测和计算结果如下
序号
测量结果
1
23000
4.362
-0.233
0.0543
2
90000
4.954
0.359
0.1289
3
53000
4.724
0.129
0.0166
4
42000
4.623
0.028
0.0008
5
29000
4.462
-0.133
0.0177
6
11000
4.041
-0.554
0.3069
7
9800
3.991
不确定度来源
细菌总数的测定不确定度主要来源于计数平板上的菌落数，计数平板所加样品稀释液的稀释倍数和所加样品稀释液的体积。但由于测量结果发散较大，与其相比其他不确定因素可以忽略，因此只考虑测量结果发散的不确定度。
数学
模型
不确定度评定
1单一样品的重复测量
1.1同一样品测量10次，取其平均值 作为测量结果
-0.604
0.3648
8
64000
4.806
0.211
0.0445
9
70000
4.845
0.250
0.0625
10
140000
5.146
0.551
0.3036
微生物分析测量不确定度评定
微生物分析测量不确定度评定一、概述与通常的测量相比较，微生物测量的特点是测量结果相差极大。
与平均值之偏差高达105。
因此用常规的直接根据平均值得到标准偏差的方法显得有些不合理。
通常的做法是取对数以后进行计算。
同样情况可能会出现在增益和衰减的测量不确定度评定中。
由于微生物分析测量结果散发极大，因此仅考虑由散发引起的测量不确定度，其它不确定度来源均可以忽略不计。
二、数学模型测量是直接数微生物菌落总数，所以数学模型为y=x三、单一样品重复测量1 测量结果对同一样品重复测量10次，测量结果列于表一，取10次测量的平均值作为最后测量结果。
2计算过程(1) 列出测量结果x i。
(2) 取对数logx i ，得到对数logx i 的平均值为log 4.72245x = (3) 求残差log log i x x -(i=1，2，…，10)。
(4) 求残差平方和1021(log log ) 3.35169i i x x =-=∑(5) 求平均值的实验标准差1021(log log )3.35169(log )0.193010(101)10(101)ii x x s x =-===--∑。
(6) 求平均值的标准不确定度平均值的标准不确定度等于一倍平均值的实验标准差，所以(log )(log )0.1930u x s x ==(7) 求扩展不确定度如前所述，全部测量过程只有一项不确定度，所以直接由平均值的标准不确定度给出测量结果的扩展不确定度。
取置信概率p=95%，根据自由度n=9，由t 分布表得到包含因子k=2.26。
于是得到扩展不确定度U 95＝k×u(x log )=2.26×0.193=0.4361(8) 取反对数，由logx 坐标换算回x 坐标由于logx 与x 之间的非线性关系，不能直接求扩展确定度U 95的反对数。
因此首先应确定logx 的取值范围为x log =4.7224±0.43614.2864≤x log ≤5.1536再取反对数后，得测量结果x 分布区间为1.9×104≤ x ≤1.4×105(9) 测量结果报告由于测量结果散发极大，不能准确报告测量结果和测量不确定度。
食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定
食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定依据JJF1059－1999《测量不确定度评定与表示》、CNAL/AG06《测量不确定度政策实施指南》和CNAL/AR11《测量不确定度政策》分析一、测量方法按照国家标准GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的检测程序进行。
检测过程为：1）以无菌操作将检样25g（mL）剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其它稀释液灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做出1：10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后，最好置均置器中以8000r/min～10000r/min的速度处理1min，做出1：10的均匀稀释液。
2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其它稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管，混合均匀，做出1：100的稀释液。
3）另取1mL灭菌吸管，按上条操作方法，做10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL灭菌吸管。
4）根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2个～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做两个培养皿。
5）稀释液移入培养皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基（可放置于46℃±1℃水浴保温）注入培养皿约15mL，并转动培养皿使混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液灭菌培养皿内作空白对照。
6）待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48h±2h。
7）作平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
8）选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
微生物检测领域中测量不确定度的研究进展
微生物检测领域中测量不确定度的研究进展综述测量不确定度在微生物检测领域的运用。
方法根据菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌定量检验分析不确定度方面发表的论文，阐述了测量不确定度作为科学的统计手段，合理地表征了被测量值的分散性，是定量说明测量结果质量的一个重要参数，已经逐渐在微生物检测领域开始应用。
结果与结论综述了近年来测量不确定度在微生物定量检测领域的菌落总数、a大肠菌群、金黄色葡萄球菌上的研究进展，阐述了测量不确定度的评定方法和意义，为更好不确定度应用于微生物定量检测领域提供理论参考。
标签：测量不确定度；定量检测；菌落总数；大肠菌群；金黄色葡萄球菌1 概述测量不确定度应用统计分析原理，以具体数值的形式科学评判检验结果的可信度[1]。
不确定越低则对应实验室的检测能力越高。
GB/T 27025-2008《检验和校准实验室能力的通用要求》中：当不确定度和测量结果的有效性或者应用有关CNAS-CL 07：2011《测量不确定度评估和报告通用要求》中规定实验室进行定量检验时，具备同时进行测量结果不确定度评估的能力。
进行不确定度评定：第一，不确定度来源分析；第二，不确定度分量计算；第三，合成标准不确定度；第四计算扩展不确定度；最终以不确定度分析检验结果的可信度。
现如今，检验机构已经陆续通过或正在申请实验室国家认可，国家认可是第三方检验机构对外出具检验报告的资质证明。
其中，实验室认可途径：一，通过官方机构认可的能力验证；二，实验室的结果报告量值可追溯到国际单位制和出具结果的不确定度[2]。
随着微生物检测领域的发展，其检验方法和技术不断完善，所以为保证结果的科学有效，引进了对实验室数据不确定度评估。
对微生物检测领域的不同定量检测项目：菌落总数、大肠菌群计数、金黄色葡萄球菌计数；不同检验方法：平板计数法、MPN计数法的测量结果的不确定度评定的国内研究进展进行了综述。
2 微生物定量检验的不确定度评定的研究进展2.1 菌落计数菌落总数为待检样品10倍系列稀释后，取2～3个适宜稀释度的样品匀液进行接种，倾注平板计数琼脂培养后肉眼观察或者使用放大镜或者菌落计数器进行菌落计数，报告结果。
抗生素微生物检定法测定土霉素片含量的不确定度评定
抗生素微生物检定法测定土霉素片含量的不确定度评定李俨;孙立丽;王婉婷【摘要】目的分析抗生素微生物检定法测定土霉素片含量的系统误差.方法采用容量分析法操作.结果土霉素片的含量为(101.6±3.4)%.结论该方法条理清晰、简便、准确,可有效评价土霉素含量测定所带来的不确定度,并能较好地分析其中每一个检验步骤带来的误差,以便综合性考虑该药品的质量.%Objective To analyze the systematic errors in the determination of Terramycin Tablets by microbiological assay of antibiotics. Methods The volumetric analysis was adopted. Results The content of Terramycin Tablets was (101. 6 ± 3. 4)%. Conclusion The method is clear,simple and accurate,it can effectively evaluate the uncertainty caused by the content determination of terramycin,and can well analyze the errors caused by each inspection step in the determination of terramycin content,so as to comprehensively consider the quality of the drug.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2017(026)016【总页数】3页(P26-28)【关键词】抗生素微生物检定法;土霉素;含量测定;不确定度【作者】李俨;孙立丽;王婉婷【作者单位】吉林省吉林市食品药品检验所,吉林吉林 132001;吉林省吉林市食品药品检验所,吉林吉林 132001;吉林省吉林市食品药品检验所,吉林吉林 132001【正文语种】中文【中图分类】R927.1土霉素片的含量测定按2015年版《中国药典（四部）》通则1201[1]“抗生素微生物检定法”第一法(管碟法)测定，是根据量反应平行线原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）的方法。
关于微生物菌种纯度、活度、方法不确定度的问题说明
微生物问题汇总1、标准菌株纯度和活性作为实验室应该怎么验证？关于微生物菌种这类的标准还没有，每位专家、检验员都有自己的理解。
但是可以明确一下，对于定量试验中的对照菌种，比如总数、霉菌和酵母、乳酸菌、金葡等，必须进行活度的测定，而其他定性试验的菌种，只需进行纯度的验证即可。
首先，对于商品话的的菌种冻存管来说，纯度是没必要验证的，因为随菌附的菌种证明材料就是很好的证实。
而对于野生菌株来说，需要对纯度进行验证，建议采用平板分离纯化，挑取完全单菌落，进行生化试验确证，可保证菌种的纯度。
其次，对于活度的监控需要从菌株保存的一开始就要进行监控，最简单的是刚开始买回来的菌株，活化之后保存10管，一个月之后分别接种10管中的菌，若10管全部存活，则活度为100%。
活度一般应大于90%。
你下面说的这些均是对培养基的验证方法。
也可以侧面反映菌落活性的大小，采用复合验收程序的培养基，对菌种的活性进行验证，仅仅是针对特定的一管菌。
并不是计算活度的方法。
若要准确的计算活性，必须制备已知浓度的菌悬液，涂布平板，进行培养，计算真实浓度和理论浓度差异。
一般记录纯度和存活度就好了。
①目标菌纯度，先活化菌株，在进行平板计数法，选择菌落数最少的平板上的菌全部进行生化鉴定。
②目标菌活性，在做培养基验证时，根据G值来观察，G值越大，说明其活性越好。
③非目标菌纯度，需要验证吗？例如表皮葡萄球菌。
我认为非目标菌只是用来和目标菌进行菌落形态进行对比的，没有必要验证。
如果需要验证，是否可以在营养平板或者TSA平板上进行划线，观察菌落形态是否一致，或有无杂菌。
④非目标菌活性验证，是否可以用该菌的工作菌悬液在TSA 或者营养平板上划16条线，根据G值判断，G值越大，说明其活性越好？2、非常规项目质量控制计划如何做？此部分的控制，建议采用人为污染样品，对方法的灵敏性和稳定性进行验证，从而达到质控的目的。
①蜡样芽胞杆菌：对蜡样芽胞杆菌标准菌株活化，然后对菌悬液做平板计数（定量确定各个稀释度的菌浓度），选择适当浓度的菌悬液的稀释度作为工作菌悬液，然后吸取1ml污染阴性样品为阳性，在按照蜡样芽胞杆菌的国标方法检验，对添加量和检验结果进行比对。
微生物检定法测定红霉素原料效价的不确定度分析
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微生物检定法测定红霉素原料效价的不确定度分析
白青山 1 ,胡法娟 2
(1. 临沂市药品检验所 ,山东 临沂 276001; 2. 山东医专附属眼科医院 ,山东 临沂 276001)
关键词 :微生物检定法 ;红霉素原料 ;效价 ;不确定度分析 中图分类号 : R92711 文献标识码 : A 文章编号 : 1672 - 7738 (2011 ) 06 - 0337 - 03
Uncerta in ty ana lysis in the determ ina tion of erythrom yc in ma ter ia l by m icrob iolog ica l m ethod BA I Q ing2shan1 , HU Fa2juan2
仪器 : AE240 电子天平 (梅特勒一托利多仪器 (上海 )有 限公司 , d = 0. 01 /0. 1 mg可调 ) ; ZY - 300Ⅳ微生物自动测定 仪 (北京先驱威峰技术开发公司 ) , GZX - 9030MBE电热恒温 培养箱 (上海博迅 ) 。
试药 :红霉素标准品 (中国药品生物制品检定所 ,含量 : 938 U ·mg- 1 ,批号 : 130307 - 200716) ;红霉素原料 (某药厂 生产 ;批号 : 101112) ;抗生素 I号培养基 (来源 :中国药品生 物制品检定所 ,批号 : 090902, pH: 7. 8 ～8. 0 ) ; 缓冲液 : pH:
水的体积膨胀系数为 2. 1 ×10 - 4 / ℃[3 ] ,因此产生的体积 变化为 :
±(100 ×5 ×2. 1 ×10 - 4 ) = ±0. 10 mL 计算相对标准不确定度时假设温度变化是矩形分布 100) = 0. 000 577
测量不确定度在食品检验中的应用及进展
测量不确定度在食品检验中的应用及进展摘要：食品安全问题一直备受人们关注，因此对于食品检测结果的精准度要求也在不断提高。
但是由于食品检测工作程序复杂，实验过程中容易受到各种因素的影响，导致检测结果与真实情况存在一定误差，影响工作人员对结果分析的公正性。
为了避免此类问题的发生，检验部门引入了测量不确定度，来增加检测结果和方法的可信度，从而更好的保证食品安全。
本文主要介绍了食品检验中不确定度的评定，对不确定度在食品检验中的具体应用进行了分析，并通过实际案例详细的讲述了不确定度方法的应用。
关键词：食品检验；测量不确定度；应用引言：为了更好的维护人们的生命健康，相关部门要采取一定的措施更好的保证食品安全，加大对食品检测机构资质的检查力度，使其在现有的基础上提高检测质量。
因此检测机构要根据我国食品检测目前的实际情况，不断完善检验体系，确定检验标准，为我国食品安全保障方面做出更多贡献。
1食品检验中不确定度的评定1.1不确定度的分类不确定度主要分为标准不确定度和扩展不确定度，其中标准不确定度又包括三类，第一类是A类级别的不确定度，是指通过统计方法对多次测量结果进行计算分析后所得到的不确定度。
第二类是B类级别的不确定度，是指通过非统计方法所得到的不确定度，例如从移液枪中引入的不确定度。
第三类是合成标准的不确定度，是指主要通过其他值计算而得出的检测结果，再利用方差和协方差来计算出不确定度。
在不确定度的测量和分类过程中，需要明确不确定度与测量误差的误差的差别，才能更好的完成食品安全分析工作[1]。
1.2食品检验中不确定度的评定食品检验中的不确定度评定主要有六个步骤，第一步明确食品中需要检测项目的原理和方法；第二步根据原理和检测过程制定科学的数学模型；第三步是根据测定方法与数学模型找出不确定度的来源；第四步根据不确定度计算出不确定度分量，然后得到合成的不确定度；第五步确定包含因子，计算出扩展不确定度；第六步给出不确定度的报告。
微生物不确定度评定
微生物分析之量测不确定度评估1、引言：由于微生物检测的特殊性，因此该例只讨论了单一样品重复测定菌落总数不确定度的评估。
2、技术说明：该技术说明简单描述了菌落总数测定过程以及单一样品重复测试与其他所依赖的参数的关系。
测定过程；检样做成几个适当倍数的稀释液选择2—3个适宜稀释度，各以1ml分别加入灭菌平皿内每皿内加入适量营养琼脂（36±1°C、48±2h）菌落计数报告计算；做平板菌落计数时，用肉眼观察，在记下平板的菌落数后，求出稀释度的各平板平均菌落总数。
3、不确定度来源和量化；校准（1ml移液管）：根据标准查到A级1ml±0.007 ml移液管的不确定度(假设三角形分布)0.007 ml/√6=0.0028 ml由于该例是同一样品单一重复测试的结果，而由于培养引起的不确定度因素在此忽略。
由于微生物的称量是粗称，故由称量引起的不确定度在此也忽略。
由稀释起的不确定度分量与计数相比在此贡献较小故也忽略。
稀释和培养称量一个样品经过微生物测试后得到下列结果：3.3×1049.8×10³3.0×105 2.0×105 6.5×1049.6×10³5.0×1048.8×1049.0×10³3.5×105由微生物学的角度来看，这些结果的差异性并不大。
然而将这些数值平均后发现会产生以105为单位之不合理偏差。
算术平均值及log平均值所表示出的不同结果如表1所列：表 1由以上数值可得到开log后的平均值等于4.7225 具体计算如表2所列；表 2n (xi-x)2使用公式S=[ ∑]1/2 (1)i=1 (n-1)3.35166S=√ =0.610310-1查表得知于95%信赖区间时t=2.26。
此微生物测试以log的方式表示，2.26×0.6其结果= 4.7225±= 4.7225±0.4361√10这说此结果分布于4.2864及5.1586之间。
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微生物检测领域中测量不确定度的研究进展
综述测量不确定度在微生物检测领域的运用。
方法根据菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌定量检验分析不确定度方面发表的论文，阐述了测量不确定度作为科学的统计手段，合理地表征了被测量值的分散性，是定量说明测量结果质量的一个重要参数，已经逐渐在微生物检测领域开始应用。
结果与结论综述了近年来测量不确定度在微生物定量检测领域的菌落总数、a大肠菌群、金黄色葡萄球菌上的研究进展，阐述了测量不确定度的评定方法和意义，为更好不确定度应用于微生物定量检测领域提供理论参考。
标签：测量不确定度；定量检测；菌落总数；大肠菌群；金黄色葡萄球菌
1 概述
测量不确定度应用统计分析原理，以具体数值的形式科学评判检验结果的可信度[1]。
不确定越低则对应实验室的检测能力越高。
GB/T 27025-2008《检验和校准实验室能力的通用要求》中：当不确定度和测量结果的有效性或者应用有关CNAS-CL 07：2011《测量不确定度评估和报告通用要求》中规定实验室进行定量检验时，具备同时进行测量结果不确定度评估的能力。
进行不确定度评定：第一，不确定度来源分析；第二，不确定度分量计算；第三，合成标准不确定度；第四计算扩展不确定度；最终以不确定度分析检验结果的可信度。
现如今，检验机构已经陆续通过或正在申请实验室国家认可，国家认可是第三方检验机构对外出具检验报告的资质证明。
其中，实验室认可途径：一，通过官方机构认可的能力验证；二，实验室的结果报告量值可追溯到国际单位制和出具结果的不确定度[2]。
随着微生物检测领域的发展，其检验方法和技术不断完善，所以为保证结果的科学有效，引进了对实验室数据不确定度评估。
对微生物检测领域的不同定量检测项目：菌落总数、大肠菌群计数、金黄色葡萄球菌计数；不同检验方法：平板计数法、MPN计数法的测量结果的不确定度评定的国内研究进展进行了综述。
2 微生物定量检验的不确定度评定的研究进展
2.1 菌落计数
菌落总数为待检样品10倍系列稀释后，取2～3个适宜稀释度的样品匀液进行接种，倾注平板计数琼脂培养后肉眼观察或者使用放大镜或者菌落计数器进行菌落计数，报告结果。
黄筠喻[4]分析菌落中不确定度因素为：周围的检测大环境、孵育时间长短、
样品均匀程度、称取样品的重复性、仪器与试剂、检验人员结果计数、最后报告数值修约。
检验环境包括环境的温度、压力、湿度的允差；取样重复性，包括稀释体积、取样体积；仪器和试剂为移液管、稀释管、培养基、培养箱之后进行相关试验，所得数据结果进行统计分析，得出不确定分量对合成不确定度影响低，应重点考虑重复测量带来的不确定度，所以采用统计学法进行菌落计数的不确定评估。
并提出在常规的实验室工作中应包含对检测结果的不确定度评定以实验数据统计分析得出，当检验结果的发散性较高时，对合并样本的标准差来检验结果的不确定度是最佳选择，对每一个样本同样适用。
徐灼均也采用合并样本标准差的统计分析法进行菌落计数。
同时，指出合并样本标准差随着检验持续进行，不断增加检验结果的数据，继续合并样本标准差，可以得出相应的检测结果的不确定度。
2.2 大肠菌群计数
依据GB4789.3-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法大肠菌群平板计数法进行检验，检验程序：待检样品10倍系列稀释--取2～3个适宜稀释度的样品匀液进行接种--倾注VRBA 培养基--对典型和可疑菌落进行--BGLB肉汤证实试验--报告结果。
凌云统计分析不确定度分量：取样0.013，样品稀释0.005808，样品加样体积0.00577，平板菌落数的相对标准不确定0.09165，BGLB肉汤管产气比例产生的不确定度0.04188，其中样品平板大肠菌群数量产生的不确定度和BGLB肉汤管产气比例产生的不确定度所占比重最大。
通过规范检验操作，就可以减小此步骤的不确定度分量值，提高检验结果的准确性。
何晓玲[9]采用大肠菌群平板计数法进行试验，建立数学模型，分析检验结果不确定度的来源，对食品中大肠菌群平板计数法检测结果的不确定度进行评定，得出扩展不确定度为0.05，适用于食品中大肠菌群平板计数法检验的不确定度评定。
其中合成不确定度为0.02404，不确定分量重复操作0.01224、电子天平0.0023、玻璃器皿0.0051、样品接种0.0087、样品稀释0.0097，所以对合成不确定度影响最大的为重复操作。
分析重复性检测带来的不确定度需要对检测数据进行数理统计分析，当检测结果发散不大时，数据可按照正态分布处理，当测试结果发散较大时，数据分布属于偏态分布，应将测试结果先进行对数处理后分析。
2.3 金黄色葡萄球菌计数
依照GB4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》待检样品10倍系列稀释--取2～3个适宜稀释度的样品匀液进行接种--每个稀释度分别吸取1mL后以0.3mL、0.3mL、0.4mL的接种量分别加入3块Baird-Parker 平板，然后无菌L棒涂布整个平板后培养--计数及血浆凝固酶试验--报告结果。
徐丽萍质控金黄色葡萄球菌计数结果不确定度评定中得出：连续稀释产生的相对标准不确定度0.006756，加样体积产生的相对不确定度0.004619。
重复检测引起的不确定度0.01038。
不确定度主要是由样本的重复检测产生的，应该严格
控制实验环境、培养条件、以及提高操作人员的技能，来降低这方面的不确定度。
王李宝水产品金黄色葡萄球菌检验结果不确定度的评定中检验结果的不确定度来源：样品称量过程产生的不确定度0.01155，样品稀释过程中仪器所产生的不确定度0.0066，样品重复性检验的不确定度0.00796，培养基储存条件产生的不确定度0.0333，肉眼读数的偏差产生的不确定度0.0172，主要来源是：肉眼读数的偏差、培养基贮存条件、样品称量过程、稀释过程等因素。
结果得出，检验人员读取结果时不确定度分量最大，其次是培养基培养过程，再次是血浆凝固酶验证实验、待检样品称量，而样品稀释、检验操作步骤重复性产生的不确定度极小。
因此，以后对于样品金黄色葡萄球菌的检验，尽量采用逐个点数可疑菌落，并在尽可能短的时间内使用所配制的Barid-Parker培养基，确保检测数据准确、可靠的有效手段。
张洪军食品中金黄色葡萄球菌平板计数不确定度的评定是根据检测过程和检测结果对不确定度的贡献，探讨金黄色葡萄球菌计数的不确定度评。
本次实验不确定度主要来源：样品取样0.0056、样品稀释0.0133、样品加样体积0.0245、培养基培养0.01118。
3 结论
测量不确定度是对微生物定量检测结果质量的定量表征，定量检测所得数据准确性需要引入测量不确定度的大小进行评估；而且《检测和校准实验室能力的通用要求》规定：①当不确定度与检测结果的有效性或应用有关；②客户有要求；
③不确定度影响到对结果符合性的判定；以上必須引入不确定度。
所以测量结果应该引入不确定度说明才更为精准有参考意义。
菌落计数，大肠菌群计数，金黄色葡萄球菌计数中不确定度评定文献中大多都考虑到待检样品称量，取样、稀释，重复检测，阳性认证以及实验室温度波动引入的不确定。
充分考虑到设备、培养基、试剂等都可能会影响微生物定量检测中不确定度，实验数据充分论证对样品分别进行不确定度评定能进一步保证试验数据的客观准确性，降低试验误差，提高检验结果准确性，提高微生物实验检验的质量，有效规避试验结果判定的客观风险。
参考文献：
[1]胡巅，李素芳，丁武.MPN法检测结果的不确定度及其评定[J].现代预防医学.2013.40（10）：1939-1941.
[2]陆明，范国荣，汪杨，等.测量不确定度在药品检测领域的研究进展[J].中国药事.2013（5）：485-492.
陈礼玲（1975- ），女，汉族，工程师，从事食品检验工作，为并列第一作者。