中药山茱萸的高效液相色谱指纹图谱及其聚类分析
UPLC法测定山茱萸中的莫诺苷和马钱子苷
UPLC法测定山茱萸中的莫诺苷和马钱子苷李崇勇;孟怡璠;杜欢欢;江海【摘要】Objective To establish a UPLC method for simultaneous determination of morroniside and loganin in Cornus.Methods The analysis was performed on a Waters Acquity UPLC BEH C18 column (50 mm×2.5 mm,1.7 μm).The mobile phase was acetonitrile (A)-1 mL·L-1 methanoic acid (B) in a gradient elution mode at a flow rate of 0.3 mL·min-1 and detected at the wavelength of 240 nm.The column temperature was30 ℃.Results Under the chromatographic conditions, the separation of the components in Cornus met the requirements of analysis,the linear equation of morroniside was y=241.65x+27.59,r=0.999 66,and the linear equation of loganin was y=192.39x-31.96,r=0.999 89.The peak area and sample quantity of morroniside showed good linearity within the scope of 0.112 5-1.80 μg,and loganin within the scope of 0.087 5-1.40 μg.The contents of morroniside and loganinin Cornus of Foping in Shaanxi were 16.53±0.89 and 6.81±0.32 mg·g-1.Conclusion This method is rapid and efficient,which is quite suitable for determining and analyzing the contents of morroniside and loganin in Cornus.The Cornus of Shaanxi has much higher contents of active ingredients than that of required in Chinese Pharmacopeia.%目的建立一种同时测定山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的UPLC法.方法采用超高效液相色谱仪.色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(50mm×2.5 mm,1.7 μm);检测波长:240 nm;流动相:乙腈(A)-1 mL·L-1甲酸水溶液(B);采用梯度洗脱;流速:0.3 mL·min-1;柱温:30 ℃.结果该色谱条件下,山茱萸中各组分的分离满足分析要求,莫诺苷和马钱子苷的线性回归方程分别为y=241.65x+27.59,r=0.999 66和y=192.39x-31.96,r=0.999 89;莫诺苷和马钱子苷在0.112 5~1.80和0.087 5~1.40 μg范围内峰面积与进样量线性关系良好;测得陕西佛坪山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分别为16.53±0.89和6.81±0.32 mg·g-1.结论该方法高效、快速,适合山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分析;陕西山茱萸中有效成分的含量远高于《中国药典》规定,品质优异.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2017(032)004【总页数】4页(P407-410)【关键词】山茱萸;莫诺苷;马钱子苷;超高效液相色谱法;含量测定【作者】李崇勇;孟怡璠;杜欢欢;江海【作者单位】汉中市食品药品检验检测中心,汉中 723000;汉中市食品药品检验检测中心,汉中 723000;陕西理工大学生物科学与工程学院,汉中 723000;陕西理工大学生物科学与工程学院,汉中 723000;汉中市食品药品检验检测中心,汉中 723000;陕西理工大学生物科学与工程学院,汉中 723000;陕南秦巴山区生物资源综合开发协同创新中心,汉中 723000;陕西省天麻山茱萸工程中心,汉中 723000【正文语种】中文【中图分类】R284山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉，是我国传统中药材，又称枣皮、萸肉、药枣、蜀枣、山萸、山萸肉、实枣子、红皮树等。
高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展
高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用进展高效液相色谱一质谱联用（LC-MS）将高效液相色谱的高分离效能与质谱的强大结构测定功能组合起来，不仅实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析，而且简化了样品的前处理过程，样品分析更简便，为中药组分的分析及结构的鉴定提供了一个重要和全新的技术支撑。
该技术对中药化学成分的分析及鉴定，中药指纹图谱的研究，中药药代动力学的研究有应用价值。
论述了高效液相色谱-质谱联用（LC-MS）在中药领域的应用进展，阐述了各方法的特点、应用范围及研究现状，旨在为中药研究者提高参考依据。
促进中药研究向现代化的发展。
标签：高效液相色谱质谱联用；中药；指纹图谱；药代动力学作为一种新的现代技术分析手段，高效液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术在分离效能、灵敏度和专属性等方面都有着巨大的优势，展现出强大的定性、定量分析能力，从而在药物分析特别是中药分析得到广泛的运用。
本文就近年来HPLC-MS联用技术在中药成分分析及结构的鉴定、中药指纹图谱研究、中药药代动力学研究3个方面的应用作一论述。
1高效液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术有独到的优势和特点当用传统的高效液相色谱（HPLC）测定样品时，样品中的杂质对主成分有较大的干扰，主峰不易分离，峰型也不好，准确性有影响但却找不到好的办法时，高效液相色谱一质谱（LC-MS）可以排除其他杂质的干扰，即使主成分在色谱上没有完全分离开，但通过MS的特征离子质量色谱图也能给出它的色谱图来进行定性定量。
采用高效液相色谱-质谱（LC-MS）分析时其流动相主份相对于传统高效液相色谱（HPLC）法更少更简单，色谱柱更短更小（常用规格是2.1mm×50mm，1.8μm），出峰时间大大缩短，却可以得到很好的分离效果，短时间内可完成对一个样品的分析，操作简单、重复性好。
更适合于大批量样品的测定。
高效液相色谱一质谱（LC-MS）还可以用相对简单的色谱条件对中药中多种成分的定性、定量分析，比如分析西青果中的诃子酸、诃黎勒酸、鞣云实精、原诃子酸等化合物，方法简便，分析时间短。
中药材高效液相色谱指纹图谱研究概述
指 纹图谱 ： 色谱条件 ， 依利 特 Ｋ ｒ ｏ ｍ ａ ｓ ｉ ｌ Ｃ １ ８ 色谱 柱 （ ２ ０ ０ ｍ ｍ Ｘ ４ ． ６ ｍｍ， ５ ｍ） ； 柱 温 ４ ０ ℃； 流 动相 为 甲醇 （ Ａ相 ） 、 ６ ｍ ｍ ｏ ／ Ｌ— Ｎ ａ Ｈ Ｐ Ｏ （ Ｂ相 ， Ｈ Ｐ Ｏ 调 ｐ Ｈ ６ ． ５ ） ， 梯 度 洗脱 。流速 ０ ． ６ ｍ ｌ ／ 分； 检测 波 长 分段 用
科研人员对 指纹 图谱分 析技术 进行 了大
量研究 ， 取得 了可喜 的成绩 。中药指纹 图
谱 的研究 已经从早 期 只对单一 谱 图进行
简单评述 的阶段 ， 发展到利用计算机技术
雷海 民等 ｊ 报道， 不 同产地 牛 蒡 子
药材 Ｒ Ｐ—ＨＰ Ｌ Ｃ指 纹 图谱 研 究 ， 由于采 用梯度洗脱 的方式 ， 各批次供试 品指 纹图 谱 中色谱峰保 留时间可能不一致 ， 故 相似 度计算时未采用 自动校正方式 ， 而是使 用
获 取 的 色谱 条 件 ， 供 试 品 制备 方 法及 评 价
研 究等 ３个 方 面进 行 阐述 。结 果 ： 中药 指
数的一致性 ） ， 且稳定， 制 定 的指 纹 图谱
可对 白术药材组 分群体 特征 的一 致性作 出判断 。白术指 纹 图谱 有 自身化 学条码 的特征 ， 是其 内在化学成分种类与数量 的
色谱指纹图谱 ， 流速 ０ ． ５ ｍ ｌ ／ 分， 检 测波长 ２ ５ ０ ｎ ｍ， 其他色谱条件与 白术基本相 同。
李小 燕 等 报 道 ， 广 西 粉葛 药 材 高 效液相色谱指纹 图谱 的研究 ， 用 乙腈 一 ０ ．
山茱萸炮制前后的UPLC特征图谱研究
心内科老年病人的睡眠质量分析与心理干预摘要】目的分析心内科住院的老年患者睡眠障碍的原因，研究改善睡眠障碍的方法及措施。
方法87例病人面对面谈话，了解患者睡眠情况及睡眠障碍症状(涉及患者休息、入睡时间、夜醒、再次入睡、晨醒时间)。
分析影响睡眠原因(包括疾病、环境、心理等)，给予相对性护理，分别3天和7天，对患者睡眠质量进行分析。
结果心内科老年住院患者睡眠障碍主要为早醒(41.2％)、难入睡(37.0％)、夜醒、再次难入睡等。
主要因素为疾病、心理、环境及其它因素。
护理干预后均有不同提高。
结论影响心内科住院老年患者睡眠障碍主要原因是疾病和心理，给予相对性护理，可有效改善老年患者睡眠情况，使患者早日康复。
【关键词】心血管疾病老年患者睡眠质量心理干预心血管疾病最基本治疗方法是良好休息。
住院患者由于周围环境，疾病和心理原因可导致睡眠障碍。
严重可影响患者身心健康导致加速呼吸循环，诱发或加重心绞痛、心衰、血压升高、心律失常等[1]。
所以，制定严格有效地针对引起睡眠障碍原因的护理措施，对于提高患者睡眠质量及恢复病情极其重要。
1资料收集1.1 一般资料选择2011年我院心内科老年住院患者(年龄≥60岁)87例，男53例，女34例。
年龄60—85岁，平均72岁。
单纯冠心病33例，高血压病15例，慢性心力衰竭20例，冠心病合并糖尿病8例，合并心肌梗死6例，退行性瓣膜病5例。
1.2 方法以面对面谈话的方式，内容涉及患者年龄、性别、退休前职业、是否单独生活等。
患者睡眠状况包括：晚间休息及入睡时间、夜醒、再次入睡及晨醒时间、服用药物史等。
分析影响睡眠因素：疾病、心理、环境及其他因素。
以问卷方式由主管护士对入院后3～5天的患者进行调查，当场收回，收回率100%。
根据对患者调查结果制定严格有效护理措施，行护理干预，3天及7天对患者进行睡眠情况评价。
1.3 统计学分析采用一般描述性分析。
2结果睡眠障碍症状及原因：患者早醒29例，入睡困难30例，夜醒21例，醒后难睡19例(可同时具有2种及以上症状)。
中药指纹图谱综述
中药指纹图谱综述编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（中药指纹图谱综述）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
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中药指纹图谱摘要: 实现中药现代化首先要解决的是中药的现代化质量标准问题,其关键就要建立合乎现代科学要求的“中药指纹图谱”。
正如国家药品监督管理局任德权副局长指出，“中药指纹图谱的建立已是牵动行业全面进步的关键技术，其应用研究，对保证中成药功效,提高中药工业整体水平，带动中药产业现代化,推进中药走向世界，具有非常重要的意义。
"关键词：中药指纹图谱、测定、DNA、化学特征中药指纹图谱借用DNA指纹图谱发展而来,广义的中药指纹图谱包括中药材DNA指纹图谱和中药材化学（成分）指纹图谱，狭义的中药指纹图谱仅指后者，是表达中药代谢产物化学特征的指纹图,包括光谱、波谱和色谱指纹图.色谱指纹图谱发展最早，也是迄今为止最为重要的指纹图谱。
按谢培山先生的定义〔，中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。
整体性和模糊性是它的基本属性。
色谱指纹图谱应满足专一性(或称唯一性)、重现性和实用性的技术要求[1］。
中药生产的原材料,因土壤、气候等环境因素及采收加工的不同，实际使用时不能保证药材质量的稳定,经加工提取得到的中间体，每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能保持一致[2]。
因此对中药原材料、中间体及成方制剂的质量控制在中药的应用上占据着很主要的位置。
中药指纹图谱借用了法医学上指纹鉴定的概念，对中药的化学信息以现代分析技术给予表征并加以描述,全面反映中药内在化学成分的种类与数量，对判断中药真伪优劣,控制中药原材料、中间体及成品的质量，减少批间差异，并最终控制成品的质量起到了极其重要的作用。
高效液相色谱法制定中药材和中药注射剂特征指纹图谱的探讨
２０００年７月第２２卷第７期中成药ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＰａｔｅｎｔＭｅｄｉｅｉｎｅＪｕｌｙ，２０００Ｖ０１．２２Ｎｏ．７［中药指纹图谱］高效液相色谱法制定中药材和中药注射剂特征指纹图谱的探讨屠鹏飞（北京大学医学部药学院，北京１０００８３）中图分类号：Ｒ２８４．１文献标识码：Ｂ文章编号：１００１—１５２８（２０００）０７—０５１６—０１１建立特征指纹图谱的意义特征指纹图谱是指某种（或某产地）中药材或中成药中所共有的、具有特异性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。
其特点在于：（１）通过指纹图谱的特异性，能有效鉴别样品的真伪或产地；（２）通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保样品质量的相对稳定。
因此，在有效成分不完全明确的前提下，特定中药材或中成药的特征指纹图谱，对于有效地控制中药材或中成药的质量，具有重要的意义。
目前指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。
２用ＨＰＬＣ法建立特征指纹图谱的方法学考察特征指纹图谱必须具备特异性、重现性和再现性。
为此，必须进行严格的方法学考察。
２．１样品处理方法考察样品处理包括：样品提取方法、提取溶剂、纯化方法等考察。
应选择提取率高、操作简便的提取、纯化方法。
在选定提取、纯化方法后，必须考察１０份以上同一批号的样品，要求１０份样品的指纹图谱完全一致，特征色谱峰面积的ＲＳＤ％不得大于５％。
２．２特征指纹图谱确定对于所含成分类型相同或相似的中药材或注射剂，可以采用一张指纹图谱；对于所含成分类型较多的中药材或注射剂（尤其是复方中药注射剂），应根据所含成分类型，制作多张指纹图谱。
确定特征指纹图谱必须具有充分的代表性和特异性，至少对１０个产地以上不同等级的样品进行分析，或对同一产地不同规格的１０批以上的样品进行考察，从中归纳出各批合格样品所共有的、峰面积相对稳定的色谱峰作为指纹峰。
所选取色谱峰的组合必须具备特异性，对于原药材多来源的品种，必须考察种间的特异性。
高效液相色谱法在中药化学指纹图谱研究中的应用(6)
1-2色谱条件及系统适用性试验 Cromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm， 5µ m)；流动相乙腈50mmol· -1磷酸二氢钾 L 溶液(磷酸调pH 3.0) (50:50)，内含SDS 12.5mmol· -1；检测波长345nm；流速 L 1mL· -1；柱温为室温；进样量10µ min L； 盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱与 其他峰的分离度均大于1.5。
2方法与结果 2-1稳定性试验 取酒制黄连供试液，分别于0，2， 4，6，8，12，24，36，48h进样10µ L， 记录指纹图谱。 2-2精密度试验 取酒制黄连供试液，重复进样6次， 记录指纹图谱。
2-3重复性试验 取酒制黄连药材粉末6份，精密称定， 按1-1项下方法制备供试液，分别进样， 记录指纹图谱。结果表明，各主要色谱 峰相对保留时间和相对峰面积比值无明 显变化，RSD分别为0.02%~1.02%和 1.24%~ 1.93%，符合指纹图谱要求。
2-4指纹图谱的建立
2-5相似度计算与系统聚类分析
图2 黄连不同炮制样品聚类谱系图
1.5.3中药提取物或制剂中间体的质量 评价
示例一： 穿心莲提取物的HPLC指纹图谱研究 蒋珍藕，饶伟源，陈秋虹，等. 中成药, 2008,30(2):243.
1-1色谱条件和系统适用性试验 Waters C18色谱柱；以乙腈为流动 相(A)和0.1%磷酸溶液为流动相(B)进行 梯度洗脱，流速：1.0mL/min；检测波 长为254nm；柱温：25℃。记录60min 色谱图，35min以后没有出峰，说明 35min内穿心莲提取物成分出峰完全。
虽然无论是原药材、中间体还是成 品，都因组方已固定、生产工艺相对恒 定，而使药品的安全性不可能直接通过 指纹图谱来保障，但因为中药指纹图谱 可直接解决中间体、成品的批间一致性 及稳定性问题，从而可以间接并最终保 障成品的安全性和有效性。
高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用
几种特征成分（如色谱指纹图谱）以保证制剂和产品质量的一致”［２］。
我国国家药品监督管理局２０００年颁布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》，要求到２００２年末，所有申报的中药注射剂均应有相关的指纹图谱资料， 使中药指纹图谱的研究成为中药研究的热点。
为实现中药材、中成药质量标准现代化，使中药走向世界，研究建立指纹图谱对实现中药质量标准现代化具有重要的意义。
２ 高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用２．１ 高效液相色谱法构建中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价由于高效液相色谱仪的诸多优点并能对中药样品中含有的绝大多数成分进行分析检测及质量评价，故高效液相色谱技术已成为当前研究中药指纹图谱的主要手段。
欧洲国家现在普遍采用高效液相色谱法对植物药物中已知及未知组分进行控制，并形成相应的规范。
因此高效液相色谱法在构建中药指纹图谱对中药的定性鉴别与定量分析中得到广泛应用。
采用高效液相色谱法测定指纹图谱可对中药材的产地、采收时间、加工方法、工艺流程等多方面通过化学成分的差异来反映中药材的种属差异、真伪鉴别等，从而达到控制中药质量的目的。
刘梅［３］等采用ＨＰＬＣ色谱指纹图谱可以快速、准确对药材夏天无和延胡索进行定性鉴别。
张玉杰等［４］对不同产地正伪品沙苑子及伪品的主要有效成分黄酮类进行利用ＨＰＬＣ指纹图谱进行鉴别研究，研究显示不同来源的正品沙苑子ＨＰＬＣ指纹图谱十分相似，而２种伪品则显示出完全不同的指纹图谱特征，得出ＨＰＬＣ指纹图谱特征可以作为沙苑子质量评价和药材鉴别的依据。
李磊等［５］以不同产地正宗丹参和市场上充作丹参的其他鼠尾草属植物为分析对象，采用ＨＰＬＣ法构建丹参ＨＰＬＣ指纹图谱，可鉴别不同来源丹参与其他鼠尾草属丹参伪品。
高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用许一平１ 罗启恩２１．山东中医药高等专科学校 ２６５２００２．莱阳农学院 ２６５２００高效液相色谱法（Ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）是在经典液相色谱法的基础上发展起来的一种新的色谱技术。
中药指纹图谱相似度评价方法的比较
中药指纹图谱相似度评价方法的比较一、本文概述中药指纹图谱作为一种全面、综合地反映中药内在质量的技术手段，已经在中药质量控制、真伪鉴别以及新药研发等领域得到了广泛应用。
指纹图谱相似度评价则是评估中药指纹图谱质量、稳定性的重要指标，其评价方法的优劣直接关系到中药质量评价的准确性。
本文旨在对现有的中药指纹图谱相似度评价方法进行比较分析，探讨各种方法的优缺点，以期为提高中药质量控制水平提供理论支持和实践指导。
本文将首先介绍中药指纹图谱相似度评价的基本概念和研究意义，然后重点阐述几种常用的相似度评价方法，包括夹角余弦法、相关系数法、谱峰匹配法等。
在此基础上，本文将通过对比分析这些方法的计算原理、适用范围、优缺点等方面，为读者提供一个全面、深入的相似度评价方法比较视角。
本文将展望中药指纹图谱相似度评价方法的未来发展趋势，以期为推动中药现代化、国际化进程提供有益参考。
二、中药指纹图谱相似度评价方法概述中药指纹图谱相似度评价是中药质量控制领域的一个重要研究方向，旨在通过科学、客观的方法来评估中药的内在质量。
随着现代分析技术的不断发展，越来越多的相似度评价方法被应用于中药指纹图谱的研究中。
这些方法大致可以分为以下几类：谱图直观比较法：这是最简单直接的相似度评价方法，通过直接观察指纹图谱的峰形、峰位和峰强度等信息，对中药样品进行直观的比较和判断。
这种方法简单易行，但主观性较强，容易受到观察者的经验和技能影响。
相似度计算法：这类方法通过数学公式或算法，对中药指纹图谱进行量化分析，从而得出样品间的相似度。
常用的相似度计算法包括相关系数法、夹角余弦法、欧氏距离法等。
这些方法具有客观性强、结果可重复等优点，但也需要选择合适的计算参数和阈值。
模式识别法：模式识别技术，如人工神经网络、聚类分析、主成分分析等，也被广泛应用于中药指纹图谱的相似度评价中。
这些方法能够通过学习和训练，自动识别指纹图谱中的特征信息，并对中药样品进行分类和识别。
【国家自然科学基金】_高效液相色谱指纹图谱_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730
科研热词 指纹图谱 高效液相色谱 系统指纹定量法 高效液相色谱法 宏定量相似度 宏定性相似度 龙胆泻肝丸 肉苁蓉 宏定量相似度pm 宏定性相似度sm 黄酮 鲜无蹼壁虎 高效液相色谱指纹图谱 高效液相色谱-二极管阵列检测器 高压液相 骨碎补 饮片 阻滞参数β 银翘散 补阳还五汤 血清药理学 虎杖 菟丝子 药效差示血清色谱 色谱法 色谱指纹图分离量指数 肿瘤 聚类分析 综合指纹图谱 统一化hplc指纹图谱 络石藤 红花 竹节参 相对信息量指数 百合知母汤 白芷 电喷雾串联质谱 甘草 玄参 溶出速率常数k 溶出hplc指纹图谱 液相色谱指纹图谱 测定 柴胡舒肝丸 柚皮苷 朝鲜淫羊藿 新北美圣草苷 提取工艺 川芎 大黄 多药耐药性 多维色谱
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79
平行四波长高效液相色谱指纹图谱1 平行五波长hplc指纹图谱 1 干贝 1 工艺评价 1 山茱萸 1 宏定量相似度pm 1 宏定性相似度sm 1 宏定性相似度(sm) 1 大承气汤 1 复方斑蝥胶囊 1 基质辅助激光解吸电离质谱 1 均值法 1 双波长融合 1 原发性胆汁性肝硬化 1 十全大补丸 1 化学成分 1 共有峰 1 六味地黄丸 1 仿刺参 1 中草药 1 一枝蒿酮酸 1 rp-hplc 1 hplc数字化指纹图谱 1 hplc指纹图谱 1 hplc-elsd 1 hplc 1 hpic指纹图谱 1
山茱萸饮片的高效毛细管电泳指纹图谱研究
山茱萸饮片的高效毛细管电泳指纹图谱研究摘要：目的建立山茱萸饮片高效毛细管电泳指纹图谱分析方法。
方法应用未涂渍标准熔融石英毛细管（75 µm id×64.5cm，有效长度56cm），以50 mmol/L硼砂-40 mmol/L十二烷基硫酸钠-5%乙腈( pH 9.5)为缓冲液，检测波长：240 nm；运行电压：10 kv；柱温：18 ℃；以马钱苷为参照物（IS），测定指纹图谱，并作聚类分析和相似度评价。
结果初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的山茱萸饮片高效毛细管电泳指纹图谱，且方法学考察符合规定的标准。
结论该法准确简便，可作为控制山茱萸饮片内在质量的有效手段。
关键词 : 山茱萸；高效毛细管电泳；指纹图谱山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Siebl. et Zucc. 的干燥成熟果肉。
临床上多用酒制品。
山萸肉长于敛汗固脱，用于自汗或大汗不止，阴虚盗汗。
经酒蒸制后，补益肝肾作用增强，常用于眩晕耳鸣，阳痿遗精，遗尿，尿频，月经过多或崩漏，腰部酸痛等[1]。
现代研究表明，山茱萸具有免疫调节、强心、抗休克、降血糖、抗氧化、抗衰老等作用，其主要活性成分为环烯醚萜类成分、鞣质类、有机酸类与多糖类等成分[2、3、4、5]。
本实验运用高效毛细管电泳技术对采自陕西、安徽、河南、山西、浙江等不同厂家加工的10批制山茱萸饮片进行指纹图谱研究，为山茱萸饮片质量控制提供科学依据。
1 仪器与试药Agilent型高效毛细管电泳仪（型号：G1600 AX ），包括惠普化学工作站，DAD 检测器，自动进样器；BUCHI 旋转蒸发仪（型号：Rotavapor R-3）；AG 285电子天平；PHS-3C型pH计（上海康仪仪器有限公司）；KQ-500E 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
莫诺苷对照品（江苏省药物研究所制备，纯度98%）；马钱苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111640-200503）。
高效液相色谱法在中药指纹图谱中的应用现状及分析(一)
高效液相色谱法在中药指纹图谱中的应用现状及分析(一)【关键词】高效液相色谱法摘要：综述了高效液相色谱(HPLC)法指纹图谱在中药质量控制方面的应用，并通过供试品的制备、标准品的选择、结果分析方法来阐述中药指纹图谱的应用现状，指出高效液相色谱法应用于中药指纹图谱中现有不足之处和未来的发展方向。
关键词：高效液相色谱；中药指纹图谱ApplicationandAnalysisofFingerprintinTraditionalChineseMedicinebyHPLCAbstract:ThispapersummarizedtheapplicationoffingerprintoftraditionalChinesemedicinebyHPLCto thequalitycontrol.ItalsoreviewedtheactualityoffingerprintintraditionalChinesemedicinethroughth epreparationforsample,thechoiceforstandardsample,andthemethodofresultanalysis.Thenpointed outthemainproblemsatpresentandtheprospectivefutureinapplicationoffingerprintoftraditionalChi nesemedicinebyHPLC.Keywords:HPLC;FingerprintofTraditionalChinesemedicine当前，中药指纹图谱技术在国内外已成为一种发展趋势。
首先是美国食品与药品管理局(FDA)允许草药保健品申报资料可以提供色谱指纹图。
世界卫生组织(WHO)在1996年草药评价指导原则中也规定：如果草药的活性成分不明，可以提供指纹图谱以证明产品质量的一致。
欧共体也将指纹图谱监控技术应用于植物药质量控制〔1〕。
山茱萸的研究进展
山茱萸的研究进展作者：张聪金德庄来源：《上海医药》2008年第10期中图分类号：R97 文献标识码：A 文章编号：1006-1533(2008)10-山茱萸，别名山萸肉、蜀枣、枣皮、萸肉等，原植物为山茱木属落叶小乔木。
主要分布在我国浙江、河南、山东、安徽等地。
临床上习惯以除去种子的成熟果实入药，其味酸、涩、微温，归肝肾经。
中医认为，山茱萸具有补益肝肾、涩精固脱的功效，临床上主治眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、崩漏带下、遗尿尿频、大汗虚脱、内热消渴等症。
本文作者查阅了近几年文献报道，对其化学成分、含量测定、指纹谱的质量控制、药理等研究进展作一综述。
1 山茱萸的化学成分研究山茱萸的化学成分研究始于20世纪30年代，Peter等进行治疗夜盲症生物化学试验时，发现了山茱萸果实中含有维生素A类物质，其含量为0.007 5%［1］，日本学者于20世纪80年代，系统地对山茱萸进行了一系列的研究［2～4］。
新鲜山茱萸果肉中有机化学物质主要有还原糖、多糖、有机酸、酚类、苷类、环烯醚萜类、皂苷、鞣质、蛋白质、氨基酸、黄酮、蒽醌、甾体、三萜、内酯、香豆素、挥发油、维生素、维生素E、脂肪酸及微量元素等，果肉及果核均含有十几种氨基酸和丰富的维生素、维生素C以及20多种矿物质。
果核中同样富含营养素：蛋白质、脂肪、糖、灰分及粗纤维、21种矿物元素，其中磷的含量比果肉内的高，提示果核也有综合利用的价值［1］。
从果肉中分离得到的主要成分可分为：1）糖类——葡萄糖、果糖、蔗糖和配糖体等。
2）有机酸类及酯类——没食子酸、苹果酸、酒石酸。
五环三萜酸及其酯类——2α-羟基熊果酸、齐墩果酸和熊果酸等。
环烯醚萜类——马鞭草苷即山茱萸苷、莫诺苷、马钱子苷、獐牙菜苷、7-氧-甲基莫诺苷、7-脱氧马钱子苷和脱水莫诺苷元。
山茱萸苷（该苷为双环烯醚萜类化合物，其中马钱子苷和莫诺苷两部分通过醚链相连接）。
3）鞣质——特里马里Ⅰ和Ⅱ，异诃子素，水杨梅素D，2，3-二氧-没食子酰-β-D-葡萄糖，来木鞣质A～G，喜树鞣质A、B，没食子酰盐单萜葡萄糖苷。
山茱萸醇提物HPLC指纹图谱及其聚类分析
。
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《中草药分析技术》课程标准
《中草药分析技术》课程标准1.课程说明《中草药分析技术》课程标准课程编码〔 38299 〕承担单位〔生物化学工程学院〕制定〔〕制定日期〔2022.10 〕审核〔专业指导委员会〕审核日期〔〕批准〔二级学院（部）〕批准日期〔〕（1）课程性质：本门课程是药品生物技术专业的核心课、必修课。
（2）课程任务：主要针对医药企业质量检验（QC）和质量控制（QA）等岗位开设，主要任务是培养学生在质检岗位从事中药分析与检验工作能力，要求学生掌握中草药分析与检验方面的基本技能。
（3）课程衔接：在课程设置上，前导课程有中医学基础、中药学、药用植物学、中药化学、中药药剂学，后续课程有药事管理与法规,药品营销等。
2.学习目标学生在对中医药理论的基础知识的了解的基础上，以国家药品标准为依据，应用现代分析的理论和方法，通过全面学习并掌握检验和控制质量的基础知识和应用技术。
最终使学生具备分析的基本知识和基本技能，学会从事医药企业质量检验（QC）和质量控制（QA）岗位所需的工作方法和学习方法，具备在质检岗位上与同事相处、合作、交流及协商的能力，并养成认真、细致、诚实、可靠的品格，为从事中药分析及相关工作奠定基础和储备技能。
学生通过本门课程的学习，应达到具体学习目标如下：1）知识目标（1）了解分析的含义、分类、任务及发展概况及制药企业质量管理的情况，理解分析的特点及影响中草药及其剂质量的因素。
（2）了解药品标准的定义、分类及特性，了解《中国药典》的沿革及现行版特点，掌握现行版《中国药典》的基本结构和重要名词术语。
（3）理解分析的依据，掌握分析的程序及数据处理方法。
（4）理解鉴别技术的作用和分类，掌握性状、显微、理化鉴别的内容和方法。
（5）理解常规检查技术的作用和分类，掌握水分、相对密度、pH、乙醇量测定法和崩解时限、重（装）量差异、外观均匀度和粒度、溶解性和不溶性物质检查法的内容和方法。
（6）了解杂质的含义、来源、分类，理解杂质检查的意义和方法，掌握杂质限量的计算方法，掌握灰分、重金属、砷盐、注射剂有关物质、农药残留量、甲醇量、可见异物、特殊杂质检查法的内容和方法。
山茱萸药材指纹图谱的研究
西北植物学报2004,24(10):1922—1928A ctaB ot.B orea l.-O cciden t.S in.文章编号:100024025(2004)1021922207山茱萸药材指纹图谱的研究Ξ王花红1,郭五保2,顾 莹2,王吉吉之13(1陕西师范大学生命科学学院,西安710062;2陕西中医药研究院实验中心,西安710003)摘 要:以乙腈2磷酸梯度洗脱,用高效液相色谱法建立山茱萸药材的指纹图谱。
用方法学考察,表明其精密度高,重现性好。
实验测定多批样品图谱,共确定10个共有指纹峰,采用相关系数法计算不同样品指纹图谱之间相似度,结果表明指纹图谱相似度大小与药材品质有关。
关键词:山茱萸;指纹图谱;高效液相色谱中图分类号:Q946.91;R917 文献标识码:AStud ies on f i ngerpr i n ts of M acroca rp ium of f icina leW AN G H ua2hong1,GUO W u2bao2,GU Y ing2,W AN G Zhe2zh i13(1Co llege of L ife Sciences,ShaanxiN o r m al U niversity,Shaanxi X i’an710062,Ch ina;2Center of Experi m ent,ShaanxiA cade2 m y of T raditi onal Ch inese M edicine,X i’an710003,Ch ina)Abstract:F ingerp rin ts of M acroca rp ium of f icina le w as estab lished by h igh perfo r m ance liqu id ch rom atogra2 p hy(H PL C)in the study.Gradien t m ob ile system w as app lied w ith aceton itrile2pho spho ric acid and the m ethodo logical exp eri m en ts show ed h igh p recisi on and good rep eatab ility.T here are10comm on finger2 p rin t p eak s w ere iden tified after m any sam p les w ere deter m ined.T he si m ilarity am ong differen t sam p les w as com p ared by calcu lating co rrelati on coeffcien ts,w h ich w as co rrelated w ith the quality of the herb. Key words:M acroca rp ium of f icina le(Sieb.et Zucc.)N akai;fingerp rin ts;H PL C 中药山茱萸(FRU CTU S CORN I)是山茱萸科(Co rnaceae)山茱萸属(M acroca rp ium)植物山茱萸(M acroca rp ium of f icina le(Sieb.et Zucc.)N akai)的成熟干燥果肉,主产于我国陕西、浙江、河南等省,四川、安徽、山东、山西亦有栽培。
山茱萸饮片指纹图谱及血清化学的初步研究的开题报告
山茱萸饮片指纹图谱及血清化学的初步研究的开题报告题目：山茱萸饮片指纹图谱及血清化学的初步研究一、研究背景和意义山茱萸为多年生灌木植物，具有多种药用功效，被广泛应用于中药及保健品制造中。
然而，目前市场上山茱萸产品质量参差不齐，存在着品种混杂、含量不足等问题。
因此，开展山茱萸饮片指纹图谱及血清化学的初步研究，可为保障其产品质量提供依据。
二、研究内容和方法1.建立山茱萸饮片的指纹图谱采用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)技术，建立山茱萸饮片的指纹图谱，并进行质量评价。
在此基础上，对不同来源、不同产地的山茱萸饮片进行对比分析，探究其品种鉴别及质量控制问题。
2.测定山茱萸饮片对大鼠的影响将不同剂量的山茱萸饮片溶液灌胃给大鼠，观察其对大鼠的生理指标及行为的影响，并分析其潜在的毒副作用。
3.研究山茱萸饮片对血清化学指标的影响采用血清生化分析技术，测定不同剂量的山茱萸饮片对血清化学指标的影响，探究其药效及安全性。
三、研究预期成果通过建立山茱萸饮片的指纹图谱及血清化学评价体系，对其品种鉴别和质量控制提供科学依据。
同时，对山茱萸饮片的药效及安全性进行了初步的检测，为今后更深入的研究奠定基础。
四、研究进度安排1.前期调查及建库：1个月2.指纹图谱的建立及质量评价：2个月3.山茱萸饮片对大鼠的影响研究：1个月4.山茱萸饮片对血清化学指标的影响研究：2个月5.数据分析及论文撰写：1个月六、参考文献1. 景新芳, 王启明, 梁聪, 等. 近20年山茱萸药用价值研究综述[J]. 中国中药杂志, 2018, 43(6): 1133-1141.2. 康美芹, 苏慧军, 冯玉香, 等. 建立中药指纹图谱的研究进展[J]. 中国医院药学杂志, 2016, 36(15): 1409-1413.3. 邢卫民, 曾静, 岳月娥. 山茱萸饮片HPLC指纹图谱的建立[J]. 中国中药杂志, 2014, 39(3): 445-448.。
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中药山茱萸的高效液相色谱指纹 图谱及其聚类分析
赵永席!马国营!梁!恒
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收稿日期$#""G!"G!=#8!作者简介$赵永席"=><F"#!男!博 士 生%梁 ! 恒 "联 系 人#!男!教 授!博 士 生 导 师8! 基 金 项 目$ 国 家 自 然 科 学 基 金 重 大 研 究 计 划 资 助 项 目 ">"#">"=$#! 交 ! 通 ! 大 ! 学 ! 学 ! 报 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! 第 !" 卷 !
本文通过优化 山 茱 萸 醇 提 物 的 ‘B+U!建 立 了 柱 效 高&分 析 时 间 短!且 重 现 性 和 精 密 度 良 好 的 ‘B+U 方法8应用该方法对="个不同山茱萸样品进 行 0UE, 分析!在 0UE, 数据化 处 理 的 基 础 上!采 用色谱峰 重 叠 率 和 模 糊 聚 类 中 的 几 何 平 均 最 小 法 $EE1E%对山茱萸样品进行相似性评价!将模糊 聚 类分析应用于测定山茱萸 0UE, 的研 究!即 研 究图 谱之间相似性的相 关 系 数!进 而 评 价 图 谱 间 的 相 似 和差异程度8
实验使用 的 甲 醇 $美 国 ,DSI:C公 司 %为 ‘B+U 级!水为超纯水!其 余 试 剂 均 为 分 析 纯8山 茱 萸 药 材 的 产 地 和 采 收 时 间 见 表 =8
表 =! 山 茱 萸 药 材 样 品
样品编号 = # H ! G $ < F > =" 河南 陕西 陕西 河南 河南 陕西 陕西 陕西 陕西 陕西
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!!中药指纹图谱"0UE,#作为中药及 其制 剂 质 量 控 制 的 有 效 手 段 !已 受 到 了 中 药 界 的 广 泛 关 注 !高 效 液相色谱&=’(气 相 色 谱 和 &#’ 毛 细 管 电 泳 等 &H’ 方 法 已
经用于 0UE, 的研究8色谱 0UE, 因 其 具 有 宏 观( 综合(模糊和非线性等特性&!’!须借助计算机对 其 进 行 数 据 分 析 8聚 类 分 析 和 &G’ 人 工 神 经 网 络 等 &$’ 数 据
时 间(MD@
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甲醇的体积分数(e G G =G H" GG FG >G >G
#!相关数据分析原理
>8@! 峰 重 叠 率 峰重叠率是指通过比较两个不同来源样品的共
有峰数和各样品的 总 峰 数!反 映 两 者 的 相 关 性 和 相