超高效液相色谱-串联质谱法测定凡纳滨对虾中的硝基呋喃代谢物残留
液相色谱-串联质谱法测定小龙虾中硝基呋喃类代谢物残留量的不确定度评定
0引言测量不确定度是指表征合理地赋予被测量之值的分散性与测量结果相联系的参数［1］。
《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》（RB/T214—2017）中要求检验检测机构应建立相应的数学模型，给出相应检测能力评定测量不确定度的案例［2］。
硝基呋喃类药物是一类广谱抗生素，广泛应用于水产养殖［3］。
硝基呋喃类药物具有遗传毒性，有可能导致基因变异，我国已于2002年颁布禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令。
硝基呋喃类药物原型药在动物体内虽代谢迅速，但代谢物会与蛋白质紧密结合，形成稳定的残留物。
一般判定动物源性食品中硝基呋喃类药物的残留状况都是以其硝基呋喃类代谢产物的含量作为检测依据，硝基呋喃类药物主要有呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林，其对应的代谢物分别为3-氨基-2-噁唑烷基酮（AOZ）、5-甲基-吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮（AMOZ）、1-氨基-2-内酰脲（AHD）和氨基脲（SEM）。
液相色谱-串联质谱法因其灵敏度高、定性定量准确，成为目前硝基呋喃类代谢物主要的检测方法。
陈茹等［4］、吕燕［5］、蒙丽琼等［6］、林功师［7］、郭丽娜等［8］、李绪鹏等［9］、邢丽红等［10］都对液相色谱-串联质谱法测定硝基呋喃类代谢物的不确定度进行评定，但在对内标物引入的不确定度的分量上，未充分考虑内标法的特点，即内标物引入不确定度来自内标添加量的重复性。
本文根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1—2012）对《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》（GB31656.13—2021）测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度进行评定，分析不确定度的主要来源，保证检测结果准确可靠。
1材料与方法1.1仪器与设备液相色谱-串联质谱联用仪（Xevo TQ-XS型号，配有电喷雾ESI离子源，美国Waters公司生产）；电子液相色谱-串联质谱法测定小龙虾中硝基呋喃类代谢物残留量的不确定度评定*吴祥庆，杨姝丽，吴明媛，黄鸾玉，谢宗升，蒙源，庞燕飞（广西壮族自治区水产科学研究院，广西南宁530021）摘要：文章根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1—2012），探讨采用《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱－串联质谱法》（GB31656.13—2021）测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度，建立相应数学模型，评估不确定度的测定结果。
超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃代谢物残留
超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃代谢物残留孙涛;胡开峰;乔昆云;刘圣红【摘要】采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测了水产品中硝基呋喃代谢物残留.样品经盐酸溶液水解和2-硝基苯甲醛衍生后,用乙酸乙酯萃取、浓缩后,以甲醇:水(20:80)溶液定容,经Acquity BEH C18超高压液相色谱柱分离,用电喷雾电离(ESI)串联四极杆质谱仪以多反应监测扫描模式(MRM)进行检测分析.实验中,对液-质分离条件和样品前处理条件进行了优化.结果表明,4种硝基呋喃代谢物在1.0～10μg/L浓度范围内呈良好线性关系(r≥0.9959),定量限范围为0.1～0.7μg/kg.该方法简便、快速、灵敏,测定结果能满足水产品硝基呋喃代谢物残留的检测要求.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2010(000)005【总页数】5页(P27-31)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱法;水产品;硝基呋喃代谢物;多反应监测扫描模式【作者】孙涛;胡开峰;乔昆云;刘圣红【作者单位】新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐,830091【正文语种】中文【中图分类】S91 前言硝基呋喃类(Nitrofurans)抗菌剂是一种广效性抗生素，因价格较低廉且疗效佳，常用于畜禽和水产品的养殖过程，一般采用在饲料中添加的方式进行喂食。
硝基呋喃类抗菌剂原型药在动物体内代谢迅速，但是其代谢物和蛋白质结合后相当稳定。
当人吃了含有硝基呋喃类抗生素残留的食品，这些代谢物可以在人胃液的酸性条件下从蛋白质中释放出来被人体吸收而对人类健康造成危害。
硝基呋喃类抗菌剂及其代谢产物的长期食入会对人体有“三致”威胁，是世界各国普遍禁止使用的兽用药物。
硝基呋喃类抗菌剂常见的有以下4种药物：呋喃唑酮(FZD)、呋喃它酮(FTD)、呋喃西林(NFZ)和呋喃妥因(NFT)，其对应的代谢物分别为： 3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、5-甲基-吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)和1-氨基-2-内酰脲(AHD)[1]。
液相色谱串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物的不确定度评定
由于硝 基呋 喃类药 物及其 代谢 物对人 体有致 癌 、致 畸 科学性 ，开展 检测工作 的实验 室应根 据相关认 可技术
胎 等 副作 用 ，中 国卫 生 部 于 ２ ０ １ ０年 ３月 ２ ２日将 其列 规范 要求进行 测量 不确定度 的评定 。本文介绍 了按 照 入 可能 违法 添加 的非食用 物质 黑名单 。多数 国家 已全 农业 部 ７ ８ ３号公 告 一 １ － ２ ０ ０ ６的方法 进行 前处理 ，分析
摘
要 ：本 文采 用液相 色谱 串联 质谱 法对水产 品 中硝 基呋喃 类代谢物 残留量进行测量 不确定度评 定。根 据
农业部 ７ ８ ３ 号公告 一 １ — ２ ０ ０ ６ 的方 法进行前 处理 ， 依 据Ｊ Ｊ Ｆ １ ０ ５ ９ ． １ － ２ ０ １ ２《 测量不确定度的评定与表 示 》 等相关理论 ， 通过建立数 学模型 ，分析 和量化各不确定度来源的测量结果 。
抗 菌效 果好 ，曾作为 饲料 添加剂 和治疗 药物被 广泛应 原药残 留量 。 用 于畜 牧业 生产 ，原 药在 动物体 内代谢 速度 快 、半衰 期 短 ，其 代谢 物与 蛋 白组 织结 合 紧密 、残 留时 间长。 测量 不确定 度是测 量结果 可 比性 和可靠性 的判定 指标 … ，为 保证 硝基 呋喃类 代谢物 残 留量检测 结果 的
关键词 ：液相 色谱 一串联 质谱 法 ；水产品 ；硝基呋喃类代谢物 ；不确定度评定
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔ ｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍａ ｔ ｈ ｅ ｍａ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｏ ｆ ｕ ｎ ｃ ｅ ｒ ｔ ａ ｉ ｎ ｔ ｙ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｎ ｉ ｔ ｒ ｏ ｆ ｕ ｒ ａ ｎ ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ｅ ｓ ｉ ｎ ａ ｑ ｕ ａ ｔ ｉ ｃ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｂ ｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ － ｔ ａ ｎ ｄ ｅ ｍ ｍａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ． Ｂ ａ ｓ ｅ ｄ ｏ ｎ Ｔｈ ｅ Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｎ ｏｕ ｎ ｃ ｅ ｍｅ ｎ ｔ Ｎｏ ． ７ ８ ３ －１ － ２ ０ ０ ６， Ｊ Ｊ Ｆ １ ０ ５ ９ ． １ － ２ ０１ ２ ａ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｏ ｒ ｉ ｅ ｓ ， ａ ｍａ ｔ ｈ ｅ ｍａ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｗａ ｓ ｃ ｏ ｎ ｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｅ ａ ｃ ｈ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｎ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｕ ｎ ｃ ｅ ｒ ｔ ａ ｉ ｎ ｔ ｙ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｗｈ ｏ ｌ ｅ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｉ ｎ ｇ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｗａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｑ ｕ ａ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ ． Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ： Ｌ Ｃ— ＭＳ； Ａｑ ｕ ａ ｔ ｉ ｃ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ； Ｎｉ ｔ ｒ ｏ ｆ ｕ ｒ ａ ｎ ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ｅ ｓ ； Ｕｎ ｃ ｅ ｒ ｔ ａ ｉ ｎ ｔ ｙ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
高效液相色谱-串联质谱法测定动物性食品中硝基呋喃类代谢物残留
［ 要］ 摘 采用 同位素 内标稀释技 术建立 了动 物性食 品中呋喃唑酮 、呋喃 它酮 、呋喃 西林 、呋 喃妥 英代 谢 物 的测 定 方法 ，在 酸 性条 件 下 水解 ，２ 邻硝 基 苯 甲醛 溶 液 （一 一 ２ ＮＡ Ｂ １进行衍 生化 ， 乙酸 乙酯提取 ， 固相萃取柱 Ｏ ｓ Ｌ ａ ｓ Ｂ富集净化 ，三级 四极 串联 电 ｉＨ 喷 雾质谱 正 离子模 式 测定 ，同位 素 内标 定量 。本 方 法检 出限 ０１ ｇ ｇ ． ／ ，加 标 回收 率 ｋ ６ ．％ ３７ ５３ ８ ．％，相对 标准偏 差 ３１ １ ． ．％ ２６ ％。该方 法灵敏度 高、重现 性好 、定性准确 可 靠 。通 过对 实际样 品 的检 测 ，证 明可 用于动 物 源性食 品 中四种 硝基呋 喃代谢 物残 留的
衍 生物 、 内标物 用 甲醇溶解 ，Ｓ Ｍ 及其相应衍 生 Ｅ
测定 。
［ 关健词］ 硝基 呋 喃 类 代 谢 物 ； 液质 联 用 ； 残 留
硝 基呋 喃类 药 物是 人工 合成 的具 有 ５ 硝 基 １ １ 仪 器和 试 剂 一 ．
｝ Ａ Ｉ０ ０三 级 四极杆 质 谱 仪 Ｐ４ ０
基本 结构 的广 谱抗 菌药 物ｌ １ ＇ 一类 具 有潜在致 ，是
品净 化 效率 又 得 到稳 定 回 收率 ，最低 检 测 限 为 用 盐 酸 调 节 ｐ 值 ６３并 定 容 １０ ０ｍ） Ｈ ． ０ １。
０１ ． ｋ ｇ。
标准储 备液 ：Ａ Ｚ Ｍ Ｚ ＨＤ及其 相应 Ｏ 、Ａ Ｏ 、Ａ
１ 试 验 方 法 与 过 程
液相色谱－串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量
液相色谱－串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量广东省珠海市斗门区动物卫生监督所 孟轩 梁可昌【摘 要】本文介绍液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类药物（呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林）代谢物残留方法。
试样中加入2-硝基苯甲醛溶液，在酸性条件下衍生，乙酸乙酯提取，涡旋离心提取，以乙酸胺和甲醇溶液进行梯度洗脱。
在浓度0.5～20.0纳克/毫升范围内，4种硝基呋喃类代谢物呈良好线性关系，相关系数均不小于0.995，检出限为0.5微克/千克。
在0.5微克/千克,1.0微克/千克,5.0 微克/千克添加水平下，目标分析物的加标回收率为82.0%～103%，相对标准偏差为0.996%～4.46%。
该方法具有操作简单、快捷、灵敏度高等特点，可用于水产品中硝基呋喃类等药物残留的批量检测。
【关键词】水产品；液相色谱-串联质谱法；硝基呋喃类硝基呋喃类药物是通过影响细菌体内的氧化还原酶体系，干扰细菌正常代谢的一类广谱抗生素，曾普遍应用于水产、畜牧业养殖等行业中疾病的预防和治疗。
后续学者陆续研究发现，该类药物对对人体具有致畸胎作用，可能诱发癌症等重大疾病。
为此，2019年12月农业农村部发布的第250号公告中将其归类为食品动物中禁止使用的药物。
硝基呋喃类常用的有４种：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林。
硝基呋喃类药物进入鱼体后的代谢产物分别为：3-氨基-2-恶唑烷基酮（AOZ）、5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮（AMOZ）、1-氨基-2-内酰脲（AHD）、氨基脲（SEM），由于这些代谢产物与蛋白质结合而相当稳定，所以目前主要通过检测代谢物的残留量，反映硝基呋喃类药物的残留状况。
目前检测兽药残留常见的方法主要有：高效液相色谱－串联质谱法、液相色谱法、常规理化检测法、酶联免疫法、毛细管电泳法等。
本研究基于《国家标准GB31656.13-2021食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》，结合实验室设备及当地检测需求，建立了准确、高效、快速的硝基呋喃代谢残留量检测方法。
高效液相色谱法检测虾肉中硝基呋喃类药物残留 毕业论文
1.7.1.2
高效液相色谱仪的主要部件有：贮液罐、高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪和数据处理装置。其基本的工作流程是：贮液罐中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来[15]。
2.3.4加标回收率和精密度9
3结果与分析9
3.1衍生温度的确定9
3.2提取方式的影响11
3.3提取时间的影响13
3.4线性关系、线性范围的确定14
3.5检测限的确定16
3.6加标回收率和精密度16
4讨论19
5小结与展望20
致谢21
参考文献22
1
1.1
我国是水产品生产与出口大国,自20世纪80年代以来,我国的水产品产量一直居世界首位，然而制约我国水产业发展的突出问题,其中之一便是水产品的质量安全问题，其中就包括药物残留超标。目前常见的因残留超标引起水产品质量安全事件的药物主要有氯霉素、孔雀石绿、硝基呋喃类代谢物和甲醛等,当人们食用了残留超标的水产品后,会出现不同程度的中毒反应,轻者影响健康,重者危及生命。而硝基呋喃类药物在水产品中的残留问题是近年来我国水产品出口中重点监控的项目[1]。
1.2
在我国，硝基呋喃类药物曾经得到广泛使用。呋喃唑酮在畜禽养殖、水产养殖上应用非常广泛，曾广泛用于防治畜禽肠道感染、防治水生动物疾病。作为医药，呋喃唑酮用于治疗细菌和原虫引起的腹泻、结肠炎和霍乱等[3]。呋喃西林一般用作外用消毒药物，也有拌饵投喂防治水生动物疾病的报道[4]。从藻类中提取的卡拉胶(食品增稠剂)中也存在呋喃西林[5]。此外，硝基呋喃类药物也有可能添加到化妆品种以实现某些功效。
液相色谱-串联质谱法快速测定水生动物药材中硝基呋喃类代谢物残留量
液相色谱-串联质谱法快速测定水生动物药材中硝基呋喃类代谢物残留量发布时间：2021-08-17T08:28:29.380Z 来源：《科技新时代》2021年5期作者：张朝云[导读] 随着我国中药现代化项目的实施，中药材的安全性越来越受到关注。
养生堂药业有限公司 570216摘要：建立水生动物药材样品中4 种硝基呋喃类代谢物残留快速检测的高效液相色谱-串联质谱法。
方法:硝基呋喃类代谢物经过二硝基苯甲醛衍生化（超声波辅助），用乙酸乙酯提取，经液相色谱分离，串联四极杆质谱多反应监测(MRM) 模式检测，内标法定量。
结果: 4种硝基呋喃类代谢物线性范围为0.0~20.0 ng/mL,相关系数均大于0.99，线性范围良好，方法检出限为0.5μg/kg，在不同质量浓度的添加水平下，4种代谢物的平均回收率在94.3%~115.3%之间，相对标准偏差<10%。
试验对比了快速衍生和恒温振荡衍生的效果，两种方法所测得的含量偏差<10%，本方法相较于恒温振荡衍生法更为简便、快速，显著缩短样品前处理时间，且灵敏度和准确度较高，适合对水生动物药材中硝基呋喃类代谢物残留量的检测。
关键词：高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS-MS）；超声辅助衍生；水生动物药材；硝基呋喃类代谢物。
引言随着我国中药现代化项目的实施，中药材的安全性越来越受到关注。
硝基呋喃类药物作为广谱抗菌药，曾在养殖业中被广泛应用于预防和治疗由沙门氏菌和埃希氏菌引起的胃肠道疾病。
但后来的研究发现，硝基呋喃类药物及其代谢物具有遗传毒性和致癌性，我国农业部于2002年颁布禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令。
但在实际生产实践中，该类药物以抗菌效果好、抗菌谱宽、价格低等特点，使得该类药物在畜禽养殖业和水产养殖业中仍然存在违法使用的可能性，给人类健康造成威胁。
硝基呋喃类药物进入动物体内后迅速代谢，无法直接检测动物组织中的原型药物，药物代谢后形成相应的代谢产物，分别为AMOZ、AOZ、SEM、AHD，代谢产物与动物机体蛋白质紧密结合形成稳定的化合物，因此，常以检测其代谢物作为残留标志物。
高效液相色谱-串联质谱联用测定蜂王浆中的四种硝基呋喃类药物的代谢物
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， 已经被欧 盟 严 令 禁 止 使 用
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。研究证明硝
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! ! 蜂王浆是一种 组 成 十 分 复 杂 的 蜂 产 品， 具有极 高的营养和保健 价 值。 但 是 抗 生 素 的 滥 用， 尤其是 硝基呋喃类药物的 使 用， 导致蜂王浆产品的质量受 到了质疑。硝基呋喃类药物由于其对人体潜在的危 害性
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’*+ ， 取上层乙酸乙酯溶液到 "* ’D 玻璃 试管中， 在 ’* K 水浴 中 用 氮 气 吹 干。 用 甲 醇 "* M ! ’’(5 C D 醋 定 容 到 "+ * ’D ， 过 酸铵水 溶 液 （ 体 积 比 为 ! . (! ） *+ ’! ! ’ 的滤膜到进样瓶中， 供液相 色谱 " 质谱 仪测 定。系列标准溶液按照样品前处理方法同时和样品 进行衍生化和提取。 ! ! $" 液质联用测定条件 ! ! 色 谱 条 件 ! 色 谱 柱： 6,*5%+3 <N3%+@%@ > ) （! 。 流 动 相： 6， *+ ! ! ’ ，"!* ’’ O #+ " ’’ *+ @+ ） ’’(5 C D 醋酸铵水 溶 液； 9， 甲 醇。 梯 度 洗 脱 程 序： * - &+ * ’*+ ， #* B 6 P &* B 6 ； &+ * - )+ * ’*+ ， &* B 6 P &* B 6 ； )+ * - (+ * ’*+ ， &* B 6 P )* B 6 ； (+ * - (+ " ’*+ ， )* B 6 P #* B 6 ； (+ " - "*+ ! ’*+ ， #* B 6 。流速： *+ #! ’D C ’*+ 。柱温： 室温。进样体积： #* ! D 。 ! ! 质谱条件 ! 采 用 电 喷 雾 离 子 源（ <.F ） ， 正离子 方式检测； 源内诱导解 离电压 （ .F? ） ："* Q 。 ’ 种 硝 基呋喃类药物的质谱条件见表 " 。
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留
酸乙酯提取 ， 用 正己烷脱脂 ， Ｈ Ｌ Ｂ固相萃取柱净化 ， 采用 Ｌ Ｃ ． Ｍ Ｓ ／ Ｍ Ｓ 选择反应监测 （ Ｓ Ｒ Ｍ） 正离子模式测定进 行定性
及定 量分析． 结果表 明 ： 硝基 呋喃类 代谢物检 测结 果的相对 标 准偏差为 １ ． ２ ％ 一１ ０ ． ３ ％ （ ＝６ ） ， 加 标 回收率 达到 ６ ８ ． ６ ％ 一１ ０ ６ ． ２ ％． 该 方法重 现性好 、 灵敏度 高 、 分 析时 间短、 确证 能力强 ， 适用 于水产 品中硝基呋 喃类 代谢物残 留
的确证检 测．
关键 词
高效液相色谱・ 串联质谱 法 ； 硝基 呋喃类代谢 物 ； 水产 品
Ｔ Ｓ ２ ５ ４ ． ７ 文献标识码 Ａ 文章编 号 １ ０ ０ ０ － ２ ５ ３ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ － ０ ０ ４ ５ － ０ ６
中图分类号
Ｓｉ ｍｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｎｉ ｔ ｒ ｏ ｆ ｕ ｒ ａ ｎ Ｒｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｃ ａ ｒ ｔ ｒ ｉ ｄ ｇ ｅ ｓ（ ＨＬ Ｂ） ．Ｔ ｈｅ ｍ ｓｓ ａ ｓ ｐ ｅ ｃ ｒ ｔ ｏ ｍ ｅ ｔ ｅ ｒ ｗ ａ ｓ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｉ ｏ ｎ ｍ ｏ ｄ ｅ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｒ ｅ －
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超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃代谢物残留
基 呋喃类 药物残 留状 况都 是通 过检 测其 中硝基 呋喃 类代谢 产 物含量 作 为依据 的 。 硝基 呋喃类 代谢 产物 残 留检 测手 段主要 有酶联 免疫法 （ Ｌ Ｓ 、 Ｅ Ｉ Ａ） 高效 液相 色 谱法 （ Ｌ ） 高 效液 ＨＰ Ｃ 、
物 可 以在 人 胃液 的酸性 条件 下从 蛋 白质 中释放 出来 被 人体 吸收 而对人 类健 康造 成危 害 。硝基 呋喃类 抗 菌剂 及其 代谢 产物 的长 期食 人会对 人 体有 “ 三致 ” 威
胁 ， 世界 各 国普 遍 禁 止 使用 的兽 用 药 物 。硝 基 呋 是 喃类 抗 菌 剂 常 见 的 有 以 下 ４种 药 物 ：呋 喃 唑 酮 （Ｚ 、 Ｆ Ｄ） 呋喃它 酮 （ Ｔ 、 Ｆ Ｄ） 呋喃西林 （ Ｚ 和 呋喃 妥 ＮＦ ） 因 （ Ｔ） 其对 应 的代谢 物 分 别 为 ： 一氨基 一 一嗯 ＮＦ ， ３ ２ 唑烷基 酮 （ Ｚ 、 一甲基 一吗啉 一３ 氨 基 一２ ＡＯ ） ５ 一 一嗯 唑 烷基酮 （ ＡＭＯ ） 氨基 脲 （ Ｅ 和 卜 氨基 一 一内酰 Ｚ 、 Ｓ Ｍ） ２
随着 经济 的发 展 和人 民生 活水 平 的不 断提 高 ， 人 们对水 产 品的 消 费量 也 在 不 断增 长 ， 产 品质 量 水
安 全 越 来 越 受 到 关 注 。欧 盟 和 美 国 分 别 在 １ ９ ９ ５年
由于 硝 基 呋 喃 类 药 物 特 异 性 抗 体 各 不 相 同 ， 且
高效液相色谱-质谱法检测水产品中硝基呋喃及其代谢物的研究
高效液相色谱-质谱法检测水产品中硝基呋喃及其代谢物的研究作者：刘薇尚勇来源：《食品安全导刊·中旬刊》2021年第10期摘要：采用超高压液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）检测了水产品中呋喃它酮（AMOZ）、呋喃西林（SEM）、呋喃妥因（AHD）和呋喃唑酮（AOZ）4种硝基呋喃代谢物的残留量。
样品用盐酸溶液水解，用2-硝基苯甲醛衍生化，采用乙酸乙酯液-液萃取净化，初始流动相复溶后，经C18液相色谱柱分离，ESI电离源串联三重四级杆质谱仪以多反应监测扫描模式（MRM）进行检测分析，内标法定量。
结果表明，平均回收率在97.77%～99.75%，相對标准偏差（RSD）在0.4%～7.3%，定量结果准确，精密度好，测定结果能够满足实验室对批量化水产品硝基呋喃代谢物残留的检测要求。
关键词：水产品;硝基呋喃类代谢物;超高压液相色谱-串联质谱自从1944年M.C.Dodd和W.B.Stillman发现5-硝基呋喃衍生物有抑菌作用后[1]，大量的硝基呋喃类药物被合成并广泛运用于医学和畜禽水产养殖等领域。
因为其价格低且效果好，曾在水产养殖中广泛用于预防和治疗由革兰氏细菌引起的水产动物胃肠道疾病[2]。
但研究表明，硝基呋喃类药物具有严重的致癌、致畸胎等毒副作用[3]。
我国农业部于2002年12月24日发布的第235号公告及2005年10月28日发布的第560号公告中，硝基呋喃类药物被列为饲养过程中的禁用药物，在动物性食品中不得检出[4]。
目前，全球大多数国家已将其列为禁用药物，水产品中硝基呋喃类药物的检测方法也很多，但因液相色谱-串联质谱法能够充分发挥超高效液相色谱的高分离度、高速以及串联质谱的高特异性和高灵敏度的作用，在水产品检测硝基呋喃时尤为常用[5]。
本试验采用内标法定量，回收率较高且结果稳定，适用于实验室批量处理水产品硝基呋喃类代谢物的检测。
1 材料与方法1.1 仪器与设备三重四级杆液相色谱质谱联用仪API 4000+（AB SCIEX 公司）;超高效液相色谱仪LC-30A（日本岛津公司）;pH计（美国奥豪斯上海公司）;空气摇床（上海喆图科学仪器）;电子天平（上海舜宇科学仪器有限公司）。
超高效液相-串联质谱法测定动物组织中硝基呋喃类代谢物残留量
超高效液相-串联质谱法测定动物组织中硝基呋喃类代谢物残留量Determination of the nitrofuran metabolite residues in animal tissues by uplc-tandem massspectrometry龙顺荣1李炜正2王力清1LONG Shun-rong1LI Wei-zheng2WANG Li-qing1(1.广东省产品质量监督检测中心，广东佛山528300，2.广东省工商联鳗鱼业商会检测中心,广东佛山528300）(1.Guangdong Center of Product Quality Supervision,Foshang,Guangdong528300,China；2.Guangdong Industrial&Commercial Union Eel Chamber of Commerce Testing Centre, Foshang,Guangdong528300,China)摘要：用盐酸水解动物组织，酸性环境下用对硝基苯甲醛作衍生剂，离心过滤，SPE富集纯化，乙腈—乙酸铵、甲酸溶液为流动相，采用梯度洗脱，5min内完成一次分离测定；采用4个同位素内标法定量，定量限为0.1,0.5μg/kg加标回收试验8次，回收率为90%～110%。
关键词：硝基呋喃代谢物；超高效液相色谱；串联四极杆质谱Abstract:animal tissues is hydrolyze with hydrochloric acid,simultaneous derivatization with 2-nitrobenzaldehyde(2-NBA)in acid medium.Centrifuge samples,then Filter,the filtrate was cleaned up with SPE.The analytes were separated and analysed by gradient elution of acetonitrile-ammonium acetate and fomic acid in5minutes.,quantification of analyte was performed by using isotope as the internal standard.The limits of quantification were no more than0.1μg/kg,The recovery ratio ranged from90%to110%at the levels of0.5μg/kg. Keywords:Nitrofuran metabolite；UPLC；Tandem mass————————————作者简介：龙顺荣（1975-），男，广东省产品质量监督检测中心工程师E-mail:longshunrong@收稿日期：2007-07-11硝基呋喃类药物（Nitrofurans）主要是指呋喃唑酮（Furazolidone）、呋喃它酮（Furaltadone）、呋喃西林（Nitrofurazone）、呋喃妥因（Nitrofurantion）等引入硝基的人工合成抗菌药，用于治疗和预防埃希氏菌和沙门氏菌引起的动物消化道疾病，近年来，发现其具有慢性毒性，可引起消化反应，并且发现呋喃唑酮和其代谢物（AOZ）具有致突变和致癌作用；美国、欧盟等工业发达国家和地区已禁止使用，我国也于2002年颁布了禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令1。
液相色谱——串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的研究
研究与探讨Y 1962019年6月·下液相色谱——串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的研究孙玉飞（辽宁省检验检测认证中心 110000）摘 要 硝基呋喃类药物是一类合成的抗菌药物总称, 对多数革兰氏阳性、阴性细菌有抗菌作用，该药价格低廉，抗菌疗效好，曾被广泛应用于畜禽和水产养殖业，治疗由大肠杆菌或沙门氏菌所引发的疾病。
硝基呋喃类药物及其代谢物对人体危害较大有致畸、致突变和可疑致癌作用。
硝基呋喃类药物对光敏感，在动物体内代谢速度快，而代谢物以蛋白结合物的形式可以长期保持稳定状态，特别是水产品中硝基呋喃类代谢物残留会通过食物链进行富集，最终对人体健康产生危害，我国2002 年农业部第193 号公告禁止使用呋喃唑酮和呋喃他酮，2005 年农业部第560 号公告将呋喃妥因和呋喃西林列入首批《兽药地方标准废止目录》，硝基呋喃类药物及其代谢物的检测对保证食品安全具有重要意义。
关键词 液相色谱-串联质谱法 水产品 硝基呋喃类代谢物 研究由于硝基呋喃类药物代谢迅速，通常以硝基呋喃类药物代谢物为目标分析物。
液相色谱-质谱联用法具有检测限低、灵敏度高、抗干扰能力强、定性定量准确等特点，所以广泛应用于硝基呋喃代谢物的检测和确证。
我国已制定了很多相关标准如《兽药残留检测标准操作规程-2008 肌肉组织中硝基呋喃类代谢物残留检测方法——高效液相色谱-串联质谱法》、《农业部783号公告-1-2006 水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》、《GB/T 20752-2006 猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，使用液液萃取方法对硝基呋喃代谢物进行提取，内标法定量，该方法操作简便，回收率良好，检测速度较快，适合开展水产品中硝基呋喃类代谢物的检测工作。
样品的制备：样品中脂肪对检测影响较大，在样品制备时要尽量选取水产品的肌肉部分充分均质。
水解和衍生化：称取2g均质后样品于50ml离心管中进行衍生，衍生试剂选择0.2mol/L的盐酸和2-硝基苯甲醛的二甲亚砜溶液。
高效液相色谱—串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留-2019年文档资料
高效液相色谱—串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留硝基呋喃类代谢物属于一种人工合成的广谱抗菌药物，它主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮等.硝基呋喃类由于具有杀菌性而被广泛应用于畜禽和水产等动物传染病预防与治疗[13].该类药物半衰期短，在动物体内代谢速度快，与蛋白结合的代谢物产生稳定的残留，形成的代谢产物3氨基2噁唑烷酮（AOZ）、3氨基5吗咻代甲基2噁唑烷酮（AMOZ）、氨基脲（SEM）、1氨基乙内酰脲（AHD）均可使动物发生癌变和基因突变，人类长期使用可对其健康产生危害[46]. 欧盟在1995年已全面禁止呋喃类抗菌药物作为生长剂和杀菌剂用在饲料中，我国也于2002年颁布了禁止使用硝基呋喃类药物的公告.由于硝基呋喃在动物体内代谢速度快，不容易在动物组织中被检测到，通过14C标记表明[7]，硝基呋喃代谢物在动物体内以蛋白结合物的形式存在，在体内能残留数周，这些结合残留物可通过在适当的酸性条件下释放出来，以达到检测硝基呋喃残留的目的[8].由于液相色谱串联质谱方法灵敏度高，前处理方法简单快速，可同时用于产品的检测和确证，农业部颁布了相关的标准采用液质法应用于食品当中硝基呋喃类代谢物的残留检测[910].该方法操作简单，成本较低，回收率满足要求，但是由于水产品成分比较复杂，基质中含有大量的脂肪、蛋白质等杂质，前处理过程中没有采取进一步的净化，流动相溶解后会有乳化现象产生，容易产生基质效应，而且会对仪器造成污染影响结果的准确性，导致假阳性的情况出现.本文建立了水产品中硝基呋喃类代谢物的液相色谱串联质谱检测方法，通过在前处理过程中采取固相萃取柱进行净化，减少样品带来的基质效应，提高了色谱分析的功效，简单快速，灵敏度高，而且节约成本，能够实现药物残留的快速检测，可以满足水产品质检以及相关基础研究的要求.1实验部分1.1仪器与试剂Thermo TSQ Quantum液相色谱高分辨串联四级杆质谱联用仪（配用电喷雾离子ESI源）；旋转蒸发仪（瑞士布奇公司）；高速冷冻离心机（日本日立公司）；超声波清洗器（昆山超声波仪器厂）；精密电子天平（梅特勒—托利多称重设备系统XX公司）；微型漩涡混合仪（上海沪西分析仪器厂）.标准储备液的配置：分别称取硝基呋喃类标准品各10.0 mg，用甲醇溶解后转移至100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容配置成100 mg/L的标准储备液，在-18℃下避光保存.使用时将上述标准储备液混合，用甲醇稀释成0.5、1.0、5.0、10.0、25.0、50.0 mg/L不同浓度的标准工作液.内标储备液及使用液的配置：分别称取10.0 mg各内标标准品，用甲醇溶解并定容，配成100 mg/L的标准储备液，在-18 ℃下避光保存.准确吸取各内标储备液，用甲醇逐级稀释配成0.01 mg/L的混合内标使用液，在-18 ℃下避光保存.1.2色谱质谱条件采用电喷雾离子源（ESI）；喷雾电压：41 kV；离子传输毛细管温度：350 ℃；碰撞气氩气压力：0.1 Pa；鞘气流量：40 arb；辅助气流量：30 arb；扫描模式：多反应监测（SRM）；硝基呋喃类代谢物的母离子、子离子和碰撞能量见表2.1.3样品前处理称取2 g样品至于50 mL离心管中（精确至0.01 g），加入200 μL 0.01 mg/L的混合内标溶液，再加入5 mL 0.2 mol/L 盐酸溶液和0.2 mL 0.5 mol/L 2硝基苯甲醛溶液，在漩涡混合仪上充分混合1 min.置于恒温水浴振荡器中（37 ℃）避光振荡16 h，取出离心管冷至室温，加入5 mL 1.0 mol/L磷酸氢二钾溶液，调节pH至7.0～7.5，加入8 mL正己烷漩涡混匀后放入离心机离心10 min（6 000 r/min），分层后取下层水相待过柱，固相萃取柱（HLB，3 mL，60 mg）依次用3 mL甲醇，6 mL水活化，取备用液过柱，采用在大气压力下自然过柱.过完样品后，加入3 mL水淋洗并抽干.用4 mL乙酸乙酯分2次洗脱，洗脱液于40 ℃氮气吹干后，加入1.0 mL流动相溶解残渣，再加入2.0 mL正己烷放入离心机离心5 min（5 000 r/min），取下层液体过0.22 μm滤膜，滤液供液相色谱质联用仪测定.2结果与讨论2.1前处理条件的选择及优化考察了甲醇与2 mmol/L的乙酸铵溶液不同体积比例（5∶95、10∶90、15∶85、20∶80）的混合液作为流动相时对目标物分析的影响，综合考虑目标物的响应值和出峰的时间、峰形的尖锐性，本文选择2 mmol/L的乙酸铵溶液：甲醇（V∶V=80∶20）为本实验的最佳流动相.由于水产品成分比较复杂，基质中含有大量的脂肪、蛋白质、碳水化合物以及色素等杂质.本文比较了在调节pH后加入8 mL正己烷离心和加入流动相后再加入2 mL正己烷离心2种不同的净化方式，这2种方式去脂的效果均不错，溶液也较澄清，但是第二种净化方式，回收率较低，在60%以下，第一种净化方式的回收率满足试验要求.2.2固相萃取实验固相萃取是一种色谱分离的前处理方法，主要依靠固相萃取柱来进行净化，不同的基质选择不同材料的固相萃取柱，填料的类型决定了吸附能力的大小以及回收率的高低，本文比较了4种不同的固相萃取柱（C18 500 mg/3 mL，HLB 60 mg/3 mL，MCX 150 mg/6 mL，AluminaN 60 mg/ 3 mL）对硝基呋喃类代谢物的净化效果，其回收率的结果见图1，本实验选用HLB柱作为硝基呋喃类代谢物的固相萃取柱，回收率均满足要求.固相萃取过程中的洗脱液一般选择甲醇、乙腈或者乙酸乙酯，本实验采用乙酸乙酯作为洗脱液，得到良好的洗脱效果.洗脱方式主要考察了一次4 mL、4 mL分2次以及9 mL分3次的3种洗脱方式，从实验结果（表3）来看，当用4 mL乙酸乙酯溶液进行洗脱时，目标物洗脱不完全，还有部分目标物在组合SPE 柱上没有被洗脱下来；当用分2次洗脱时（2×2.0 mL），目标物被完全洗脱，回收率良好；当用洗脱液分3次洗脱时（3×3.0 mL），回收率与2次洗脱淋洗时差不多，因此本实验选择操作简单、节约试剂的2×2.0 mL分2次洗脱的方式.2.3色谱条件的选择及优化流动相的pH值会影响目标物在色谱柱中的分离.本实验考虑采用挥发性电解质乙酸铵来做为流动相，同时加入0.1%甲酸控制流动相pH值，采用合适的梯度洗脱程序，不但很好地实现了各种目标物的分离，并且得到了比较理想的色谱峰，峰形尖锐且对称性好，增大了分子离子峰的峰强度.在8 min内，各种硝基呋喃类代谢物均得到了较好的分离.色谱图见图2.2.4质谱条件的选择及优化根据硝基呋喃类代谢物的结构特征，采用ESI正离子电离模式，以流动注射泵连续进样对1.0 mg/L的标液进行Q1全扫描，扫描范围为200～400 m/z之间，得到每种组份的分子离子，分别向其分子离子施以碰撞能量形成子离子，接着进行子离子全扫描，找出丰度最强的碎片离子为定量离子，丰度次强的碎片离子为定性离子.同时优化锥孔电压、碰撞能量、鞘气与辅助气流量等质谱条件，使母离子和子离子组成的特征离子的丰度和比例达到最佳.得到1.2中最佳质谱条件.2.5线性范围和灵敏度配置0.5、1.0、5.0、20.0、50.0 μg/L的系列标准工作溶液，采用内标法定量，以待测物的质量浓度X（μg/L）为横坐标，待测物与内标物的峰面积比值Y为纵坐标制作标准曲线，得到硝基呋喃类代谢物的回归方程和相关系数（见表2）.由表2可知，硝基呋喃类代谢物在0.5～50.0 μg/L在范围内其标准曲线的线性关系良好，相关性系数R2在0.997以上.在方法规定的取样质量条件下，在阴性样品中添加2种混合标准溶液（添加水平为0.25 μg/kg）经测定信噪比（S/N）均大于3，表明这4种物质的检测下限（LOD）为0.25 μg/kg，在阴性样品中添加2种混合标准溶液（添加水平为0.5 μg/kg）经测定信噪比（S/N）均大于10，表明其定量下限（LOQ）可为0.5 μg/kg.2.6回收率与精密度向草鱼、中华鳖和对虾阴性样品中分别添加5、20、100 ng/g 3个水平的添加实验，每个添加水平进行3次实验，每次平行测定6次，按1.2节所述条件进行加标回收率实验，所得结果为回收率为68.6%～106.2%，相对标准偏差为1.2%～10.3%，符合国内外有关标准和法规的要求，结果见表4.3小结通过对前处理条件、色谱条件以及质谱条件的优化，建立了水产品中硝基呋喃类代谢物残留的检测方法.结果表明，该方法在0.5～50.0 μg/L范围内，硝基呋喃类代谢物检测下限（LOD）为0.25 μg/kg，其定量下限（LOQ）可为0.5 μg/kg；在3个不同的添加水平下，其回收率为68.6%～106.2%，相对标准偏差为12%～10.3%.本方法前处理步骤简单、回收率稳定、精密度好，满足我国以及欧盟等国家的限量要求，可以作为水产品中硝基呋喃类代谢物的检测方法，并可为该类药物在水产品中的消除规律及毒理评价提供灵敏、准确的分析手段，对水产品中硝基呋喃类代谢物的溯源和卫生监督提供了技术支撑.。
超高效液相色谱—同位素稀释串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留
超高效液相色谱—同位素稀释串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留作者：杨惠宇张惠峰来源：《河北渔业》2017年第11期摘要：建立了采用Oasia PRiME HLB固相萃取柱净化-超高效液相色谱-同位素稀释串联质谱法（UPLC-MS/MS）快速测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留的方法。
样品加入同位素内标，超声衍生化后用乙酸乙酯超声提取，经Oasia PRiME HLB固相萃取柱一次性净化后上机检测，电喷雾-正离子多反应监测模式，内标法定量。
该方法将测试时间缩短至4小时。
结果显示，4种硝基呋喃类代谢物的检测限为0.01 μg/kg，定量限为0.03 μg/kg，在0.05～10 ng/mL 质量浓度范围内线性良好，4种硝基呋喃类代谢物相关系数r均大于0.999，5个添加浓度水平的平均回收率为88.5%～115.2%，相对标准偏差均小于8，说明该方法快速、准确并且重复性好。
关键词：硝基呋喃类代谢物；高效液相色谱-串联质谱；水产品；超声衍生化近年来，药物残留已成为影响中国水产品质量安全的重要因素，而硝基呋喃类药物因其价格便宜、抗菌效果好等特点，被广泛应用于水产养殖中[1-2]，同样也是检出率最高的违禁药物之一[3-4]，因此，为确保水产品质量安全和渔业经济的可持续发展，建立准确可靠、灵敏度高的硝基呋喃类药物及其代谢物的定量定性方法具有深远意义。
由于硝基呋喃类药物在动物体内可迅速代谢，通过测定母体化合物的含量是不合适的，因此在水产品质量监测中主要检测硝基呋喃类代谢物[5]。
目前国内外文献报道测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的检测方法除质谱分析法还有免疫分析法、光谱分析等[6-7]。
硝基呋喃类代谢物一般经衍生化后，采用液液萃取、固相萃取、凝胶渗透色谱、免疫亲和色谱、超临界流体萃取、分子印迹、平行蒸发等方法提取净化后，用液相色谱法或质谱联用法进行检测[8-10]。
此外，还有一些新兴的方法应用于水产品中硝基呋喃类代谢物的检测，如原子吸收法[11]、流动注射-化学发光分析技术（FI-CL）[12]、液相色谱电化学检测器（LC-ECD）[13]，太赫兹时域光谱（THz-TDS）[14]等，但是使用最为普遍的是液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法[15-18]。
液相色谱-串联质谱联用法测定干海参中硝基呋喃代谢物残留量
液相色谱-串联质谱联用法测定干海参中硝基呋喃代谢物残留
量
郭无瑕;李肖斐
【期刊名称】《大连海洋大学学报》
【年(卷),期】2013(028)006
【摘要】建立了检测干海参中4种硝基呋喃代谢物的高效液相色谱-串联质谱方法.将干海参样品经过盐酸水解,以2-硝基苯甲醛(2-NBA)为衍生剂,经HLB固相萃取净化后,用高效液相色谱-串联质谱(ESI+) MRM检测,同位素内标定量.结果表明:4种硝基呋喃代谢物的线性范围均为0.5～10.0 μg/L,检出限均为0.5μg/kg,3个水平的加标回收率为76.4％～ 88.4％.该方法稳定性强、重现性好,能满足干海参中4种硝基呋喃代谢物残留检测的要求.
【总页数】3页(P614-616)
【作者】郭无瑕;李肖斐
【作者单位】大连标准检测技术研究中心,辽宁大连116021;大连标准检测技术研究中心,辽宁大连116021
【正文语种】中文
【中图分类】TS254.7
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液相色谱-串联质谱法检测黄鱼鲞中硝基呋喃代谢物残留量王兴进【摘要】The samples were derived with 2-nitrobenzaldehyde in hydrochloric acid solution. After extracted with ethyl acetate and concentrated with rotary evaporator,the analytes were dissolved with acetonitrile solution (CH 3 CN:H 2 O = 20:80 ),defatted with n-hexane and determined by LC-MS/MS. The results showed that the calibration curves for the analytes exhibited good linearity over the concentration range from 1 to 50 μg/L with the LOQ of 0.5μg/kg. Average recoveries for t he spiked sam-ples at 4 levels (1μg/kg,2μg/kg,5μg/kg,10μg/kg)ranged from 89.3% to 106%,with a RSD less than 7.03%. The method is suitable for the determination of nitrofurans metabolites in dried salted yellow croakers.%样品在酸性条件下通过加入邻硝基苯甲醛实现衍生化,乙酸乙酯萃取,浓缩,以乙腈∶水(20∶80)定容和正己烷除脂后,采用液相色谱-串联质谱法检测黄鱼鲞中硝基呋喃代谢物残留量。
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定稻虾中多类兽药残留
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定稻虾中多类兽药残留发布时间：2022-09-21T01:36:59.964Z 来源：《中国科技信息》2022年5月第10期作者：张辰辰1，张琳1，冯凯1，周一冉1，孟娟2，孔小华1[导读] 建立稻虾中11种兽药（氯霉素类、喹诺酮类、四环素类）同时测定的超高效液相色谱-串联质谱法。
张辰辰1，张琳1，冯凯1，周一冉1，孟娟2，孔小华1 (1济宁市食品药品检验检测研究院山东济宁272071；2济宁市渔业发展和资源养护中心山东济宁 272071）摘要：建立稻虾中11种兽药（氯霉素类、喹诺酮类、四环素类）同时测定的超高效液相色谱-串联质谱法。
样品以0.2%甲酸乙腈溶液提取，经OasisPRiME HLB柱净化后用Waters HSS T3柱分离，在ESI+/-多反应监测模式下采集，外标法定量。
11种兽药在各自范围内线性关系良好，相关系数r>0.996，方法定量限低于5μg/kg，在5、10、20μg/kg加标水平下回收率为72.5～114.5%，RSD为1.9～7.0%。
该方法简便、灵敏，适用于稻虾中多类兽药的快速测定和筛查。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；兽药；稻虾引言稻虾综合种养是为适应新时期农业农村发展要求、稳定水稻生产、促进渔业增效，在原稻田种植的基础上发展的综合种养技术。
在济宁市鱼台周边县区得到大力推广。
在稻虾种养过程中由于疾病防控和饲料带入的兽药，对产品质量造成潜在风险，已受到广泛关注[1]。
当前兽残检测标准中常用的固相萃取等技术存在前处理过程繁琐、试验周期时间长[2]等问题，检测效率低；而近年来兴起的多残留通过式净化前处理技术在兽药残留分析中获得了良好的应用。
本文针对龙虾中食品安全风险较高的氯霉素类、喹诺酮类、四环素类残留，采用同步通过式净化技术，建立可靠的稻虾中高风险药物同时快速筛查的方法，为稻虾产品药物残留风险监测、质量安全监管及隐患排查提供技术支撑。
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超 高效 液相 色 谱 一 串联质 谱 法测 定 凡 纳滨 对 虾
中 的 硝 基 呋 喃 代 谢 物 残 留
赵 艳 ，张凤 枰 ，刘耀敏
（ 威 股 份 有 限公 司 ，四 川 成 都 ６ ０ ４ ） 通 １０ １
摘 要 ：采 用超高效 液相 色 谱一 串联 质 谱 （ Ｐ Ｃ Ｍ ／ ） ，测 定 了 凡纳 滨 对 虾 （ ｉｐｎｅｓ Ｕ Ｌ — Ｓ ＭＳ 法 Ｌｔ ｅａｕ ａ船眦 中氨 基 脲 ｏ ） （ Ｅ 、１氨基 －一 Ｓ Ｍ） 一 ２ 内酰脲 （ Ｈ 、３氨基 －一 Ａ Ｄ） － ２唑烷基 酮（ Ｏ 和 ５ 甲基 吗啉一一 Ａ Ｚ） 一 ３氨基一一 ２唑烷基 酮 （ ＭＯ ４种硝基 Ａ Ｚ） 呋喃类代谢 物。采用 ２硝基 苯甲醛作为衍生 化试剂 ，氘 、碳一３ 一 １ 、氮一５同位素标 记 的 Ｓ Ｍ． 一 Ｈ Ｃ 、 １ Ｅ Ｃ Ｎ 、Ａ Ｄ ” Ａ ＺＤ Ｏ — 和 Ａ ＺＤ 为 内标物 ，样 品经衍 生 、乙酸乙酯提 取 、正 己烷净 化 ，以甲醇 ０５ ｍ ｏ ・ 乙酸铵 水溶液 ｔ ｅ ｉ ｌｄｎ ． ％ ｆ ｃａ ｉ ，ａ ｄｔｅ ａｅｇ ｏ ｎ ａ ｌ ｉ ｉ ｉ ． ２ ． ｇ ｍ （ ０ ９ ９ ， ｈ ｍｉｏ ｏ ｉｍ ａ ｅ ｔ ｎ ｕ ｉ ０ １ ｏ ｃ ａ ｃ ｇ ｍｉ ｄ ｎ ｙｈ ｖ ｏ ｄ ｌ ｅ ｒ ｅ ｔ ｎｗ ｔ ｎ０ ４～ ０ ０ ｎ 。 Ｌ Ｒ＞ ． ９ ） ｔ ｌ ｔ ｆ ｈ ｉ ｒａｏ ｈ ｅｉ
（ ０ １ 甲酸 ） 含 ．％ 为流动相进行梯度洗脱 ，８ｍｎ可将 ４种 目标化 合物完 全分 离并测 定。结果 表明 ，４种待 测物在 ｉ
０ ４— ０ ０ｎ 。 范围内线性关系 良好 （ ． ２ ． ｇｍＬ Ｒ＞０９ ９ ，检出限为 ０ ０ ０ １ ｇｋ 。在 ０５ ｇｋ 、１０ ｇ ．９ ） ． ３～ ． ５ ・ｇ ． ・ｇ ． ・ ｋ 和 ２ ０ ｖ ・ｇ ３个水平上进行 加标 回收试验 ，平 均 回收率为 ９ ． ％ ～１７３ ，Ｒ Ｄ为 ３ １ 一８７ 。采 ｇ ． ｇｋ ２０ ０．％ Ｓ ．％ ．％ 用该法参加 Ｆ Ｐ Ｓ国际水平测试 ，获得 了满意的结果 。 ＡＡ 关键词 ：硝基 呋喃类 代谢 物 ；残 留；凡纳滨对虾 ；超高效液 相色谱一 串联质谱法 中图分 类号 ：Ｔ ５ ． Ｓ２ ４ ７ 文 献标 志码 ：Ａ 文章编号 ：２ ９ ０ ８ ０ ５— ７ ０一（０ １０ — ０ ５— ６ ２１ ） ４ ０ ５ ０
ｈ ｘ ｎ ． Ｆｏ ｒｔ ｒ ｅｅ ｏ ｐ ｕ ｓ ｗｅ ｅ ｃ ｍｐｌｔｌ ｅ ｒ ｔ ｄ ｗｉ ｎ ８ ｍ ｉ ｔｓ ｂ ｒ ｄｉｎ ｌｔｏ ｆｍ ｅｈ ｎｏ ｎｄ ０． ｅａｅ ｕ ａ ｇ ｔ ｄ ｃ ｍ ｏ ｎｄ ｒ ｏ ｅｅ ｙ ｓ ｐａ ａｅ ｔ ｎｕｅ ｙ ｇ ａ ｅ ｔｅｕ ｉｎ ｏ ｔａ ｌａ ５ ｍｍｏ ・ — ａｍ— ｈｉ ｌＬ
ａ ｎ ｅ ｎ ｌ ｔｎ ａ ｄ ｓ ｂ ｔｎ ｅ ； ｔ ｅ ｓ ｍｐ ｅ ｒ ｅ ｉｅ ｙ２－ ｉ ｏ ｅ ｚ ｌ ｅ ｙ ｅ ｘ ｒｃ ｅ ｉ ｔ ｙ ｃ ｔｔ ｎ ｌ ａ ｅ ｐ ｗ ｔ — ｓｉ ｔ ｒ ａ ａ ｄ ｒ ｕ ｓａ ｃ ｓ ｈ ａ ｌｓｗｅ ｅ ｄ ｒ ｄ ｂ ｎ ｔ ｂ ｎ ａｄ ｈ ｄ ，ｅ ｔ ｔ ｄ ｗ ｔ ｅｈ ｌａ ｅ ａｅ ａ ｄ ｃｅ ｎ ｄ ｕ ｉ ｎ ｓ ｖ ｒ ａ ｈ ｈ
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（ ｏｇ ｅ Ｃ ． Ｌｄ ，Ｃ ｅｇ ｕ６ ０４ ，Ｃ ｉａ Ｔ ｎｗ ｉ ｏ ， ｔ． ｈｎｄ １０ １ ｈｎ ）
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Ｌｉ ｐｅ ａ ｕ ａ ｎ ｍ ｅ ｙ ＵＰＬＣ－ Ｓ ｔ ｎ ｅ ｓ ｖ ｎ ａ ｉｂ ｏ Ｍ ／Ｍ Ｓ
第 ７卷第 ４期 ２ １１年 ８月 ０
ｄｉ ０ ３６ ／．ｓ ．０ ５—０８ ． ０ ０ ．０ ｏ：１． ９ ９ｊｉ ｎ ２ ９ ｓ ７ ０２ １． ４ ０９ １
南 方 水 产 科 学
Ｓ ｕｔ ｏ ｈ Ｃｈｉ ｓ ｒｅ ｃｅ ｃｅ ｎａ Ｆｉｈｅ ｉｓ Ｓ ｉｎ
Ｖｏ＿ ｌ７． Ｎｏ ４ ． Ａｕ ｇ．， ２ １ ０１