鹿茸等动物生药鉴定方法的研究进展

鹿茸等动物生药鉴定方法的研究进展

摘要:鹿茸是传统名贵中药材。我国在2010年版《中华人民共和国药典》中规定了梅花鹿茸、马鹿茸为正品药材。由于鹿茸及产品需求量增加，使得伪品、混淆品和代用品在国内的中药源市场屡见不鲜，导致了中药材市场的混乱。这种现象也见于其它名贵中草药材，如人参、鹿鞭、龟甲以及貂心等，严重影响了中国传统药学的美誉，更制约着中国传统医药的规范化、标准化和国际化的发展。因此提供简捷、精准的鉴定方法为净化中药材市场、发扬光大我国的传统中药具有极其深远的意义。

关键词:鹿茸；鉴别；综述

鹿茸系脊索动物门哺乳纲鹿科动物中雄鹿未骨化的密生茸毛的幼角。梅花鹿茸（黄毛茸），主产于吉林、辽宁等省；马鹿茸（青毛茸），主产于黑龙江、吉林、内蒙古、新疆、云南、甘肃等省。可依据是否排血处理分类为排血茸片或者带血茸片。鹿茸之所以是名贵中药材主要是因为含有多种化学成分[1]，例如具有蛋白质属性的酶类：6-磷酸葡萄糖脱氢酶、磷酸葡萄糖异构酶、碱性磷酸酶以及琥珀酸脱氢酶等。多种单糖及其衍生物：如己糖，戊糖、己糖胺、糖醛酸、中性糖、氨基葡萄糖以及半乳糖胺等。气相色谱法已经确定梅花鹿茸中具有8种脂肪酸组分，其中油酸、亚油酸、亚麻酸含量较高，这是人体必需的脂肪酸。用高频电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-AES）测定后发现梅花鹿茸含有16种微量元素，其中钙含量最高，其次是磷元素。钠、钾、镁含量也比较丰富。锂、锌、铜、钴、镍、锰的含量相对较低。有文献报道鹿茸中也含有胆固醇、雌二醇-17β、雌酮、孕酮、睾酮以及雌二醇等。鹿角是哺乳动物中唯一能够再生的器官，因为鹿茸中不仅含有神经生长因子（Neuron growth factor ，NGF）[2]、也含有表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF)[3]。NGFmRNA在生长的鹿角尖端小动脉平滑肌细胞内表达比较旺盛。显然诸多的化学成分赋予鹿茸多种药理作用，并因此成为传统名贵中药：加速物质的代谢、产生能量，有利于损伤细胞的修复。NGF 以及丰富的钙离子尤其对于骨组织损伤修复具有重要的意义；能够提升机体的免

疫功能这是鹿茸的另一重要药理学作用。因为免疫球蛋白的形成需要糖类物质的参与，而鹿茸正是含有丰富糖类的物质；鹿茸中的琥珀酸脱氢酶(SDH),多糖(PSR)可参与细胞内的抗氧化代谢过程，因此鹿茸也具有延缓衰老的作用[3]。激素以及具有性激素样物质可以增强细胞内物质代谢的信号传递，以此调节细胞内糖、脂肪以及蛋白质代谢水平。由于鹿茸产源不足但是需求量增加，使得不同渠道来源的伪品、混淆品和代用品在国内的中药源市场屡见不鲜，鱼目混珠。但价格依旧昂贵却完全失去鹿茸的有效成份和药用效果。这不仅延误病人的救治、而且降低人们对中药的信任。2008年中医中药已被美国、加拿大等国家承认并接纳。如何在全世界弘扬光大我国传统的中医中药学？建立客观、标准、规范化的质量控制体系意义重大。本文就鹿茸的传统生药鉴定诸如基源鉴定、性状鉴定等以及现代分子生物学技术的应用做一综述。期待为动物生药的规范化质量控制提供新的思路。

1、基源鉴定

基源鉴定是通过观察样品、标本、核对文献等对生药进行来源鉴定。基源鉴定为生药生产，资源开发和利用提供依据。这种鉴定对于近缘物种、易混淆品种，显示较大的局限性和片面性。

2、性状鉴别

性状鉴别是对生药的外观形态、气、味、色泽、质地以及断面的感观特征进行综合从而得出结论的一种方法。吴水根等应用这种经典的方法为鹿茸饮片的真伪鉴别提供了大量的信息。陈斌等应用性状鉴别的方法，揭露了鹿茸伪品的制作：鹿角切片后，胶以外皮，便冒充鹿茸饮片作为生药销售。显然性状鉴别简便，快捷。但主观性强，结果的准确性主要取决于鉴定者的经验。对极易混淆的近缘种以及破碎、粉末或腐烂等生药的鉴别往往难以适从。

3、显微鉴别

显微鉴别是利用显微镜观察药材的内部组织构造、细胞形态，从而进行品种和质量的鉴定方法。显微鉴别法适用于外形不易鉴定、药材破碎或呈粉末状的中

药。鞠春天等通过对花茸片、马茸片、驯鹿茸片的茸毛的中部直径、鳞片排列方式、髓质形状等的显微观察，提供了鹿茸片与驯鹿茸片鉴别要点。王海生等通过显微观察是否有植物组织的结构特征用以鉴别正品鹿茸和伪品鹿茸。宏惠田等详尽描述了鹿茸的表皮角质层、毛茸毛干中部直径、骨碎片、未骨化组织、角化梭形细胞等的显微特征。郭彩玉则应用光镜和扫描电镜对鹿茸制成的组织切片进行观察，提供了鹿茸的组织结构，特别是茸皮组织和茸骨组织两部分结构特征，这样从微细形态学领域补充了可用于生药鉴别的知识。但是这一方法不能揭示细胞内在的信息，因此无法完成近源物种的精准鉴别。

4、理化鉴别

理化鉴别是利用物理或化学的方法，对生药及其制剂所含主要化学成分或有效成分进行定性和定量分析，评定生药品质优良度的一种方法。一般应用于含不同化学成分的生药鉴定、生药同名异物或性状相似又无明显显微特征的生药鉴别。理化鉴别方法的原理是基于样品所含有的特征性成分从而进行化学反应显色、光谱吸收分析（荧光、紫外光谱）或者对样品薄层分离后再进行化学反应显色等。例如刘国强等[4,5]利用硅胶G薄层板，以正丁醇-冰醋酸-水(3∶1∶1)为展开剂对鹿茸的抽提物进行分离，经过茚三酮显色法或者硫酸铜显色法定位了某些氨基酸的分布及RF徝，为鹿茸氨基酸的分析提供了有价值的数据与鉴别标准。根据物质的结构会显示特定光谱的吸收原理，陈代贤对13种鹿茸片分别进行抽提，然后进行荧光光谱的吸收扫描，由此获得了13种鹿茸的荧光光谱。周仰青等利用紫外分光光谱法检测鹿茸提取物，由此在光谱学领域增添了鹿茸特征性的紫外吸收光谱。赵义等对花鹿茸、马鹿茸、市售鹿茸片、鹿茸粉按照一定的提取方法抽提后进行紫外光谱检测，发现200~350nm为主要吸收光谱域。张丽应用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法对3个马鹿茸和1个花鹿茸中药材进行分析鉴定，获得了马鹿茸X射线衍射Fourier指纹图谱及特征标记峰值。但是X射线衍射技术需要的仪器设备昂贵，不能做到即时监测，更不能普及应用。综上所述，光谱技术用于鹿茸成分的分析报道较多。由于鹿茸含有比较复杂的成分，特别对于极易混淆的近缘种，仅仅依赖光谱分析难以达到精准的判断。结果的重复性不理想也是光谱学技术仍未作为国家鉴定标准方法的主要原因。但是应用理化方法可以判断