动物蛋白质的胃蛋白酶消化率 体外消化

动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化）

一、适用范围：

本方法适用于动物性原料品质的判定。

二、原理：

用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约16小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分率来表示。

三、设备：

1、恒温水浴振荡器：45±2℃。

2、测定粗蛋白质的全套设备。

3、过滤装置。

4、索氏脂肪浸提器。

四、试剂：

除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂：

1、%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释盐酸到1L。在使用前，现配%胃蛋白酶溶液。

2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。

3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在L盐酸中的%胃蛋白酶溶液。

五、测定步骤：

1、准确称取1g脱脂试样，放入300ml碘量瓶内，加入经过预热（42—45℃）的%胃蛋白酶溶液150ml，盖好塞子，在45℃下边搅拌边消化16小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定不消化物中的粗蛋白质含量。

2、另取1份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。

六、测定结果计算与分析：

1、计算：

动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）= A-B

×100 A

式中：A—试样中粗蛋白质的含量（%）。

B—试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%）。

2、分析：

合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。

植物油脂检验不皂化物测定法GB 5535-85

本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。

油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。

一、仪器和用具：

锥形瓶：250 ml

冷凝管

恒温水浴锅

电炉

分液漏斗：250 ml

量筒：50 ml

索氏抽提器

电热恒温烘箱

烧杯、试剂瓶等

天平：感量g

二、试剂：

氢氧化钾乙醇溶液

氢氧化钾水溶液

乙醇、乙醚

中性乙醚乙醇混合液(2：1)

三、操作方法：

称取混匀试样5g（W）注入锥形瓶中，加KOH乙醇溶液50 ml，连接冷凝管，在水浴锅上煮沸约30 min，煮到溶液清澈透明为止。用50 ml蒸馏水将皂化液转移入分液漏斗中，加入50 ml乙醚，趋温热时猛烈摇动1 min后，静止分层。将下层皂化液放入第二只分液漏斗中，每次用50 ml乙醚提取两次。合并乙醚提取液，加水20 ml轻轻旋摇，待分层后，放出水层，每次再加水20 ml猛烈振摇洗涤两次。

先后用KOH水溶液和水各20 ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止。

用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在105℃温度下烘1h，冷却称重，再烘30 min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于30 ml中性乙醚乙醇中，用氢氧化钾滴定至粉红色。

四、结果计算：

油脂中不皂化物含量按下列公式计算：

不皂化物（%）=

W VN

W)

28

.0

(

1001

式中：W1——残留物重量，g

W——试样重量，g

V——滴定所消耗的氢氧化钾溶液体积，ml

N——氢氧化钾溶液的当量浓度

——每毫克当量的油酸重量，g

双试验结果允许差不超过%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。

过氧化值的测定

一、适用范围：

本方法适用于油脂及动物性原料的测定。

二、原理：

油脂氧化过程中，产生的过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘；以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。

三、试剂：

1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。现用现配。

2、三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀。

3、L硫代硫酸钠标准溶液：称取5g硫代硫酸钠（Na

2S

2

O

3

·5H

2

O）（或3g无

水硫代硫酸钠），溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。

4、1% 淀粉指示剂：称取可溶性淀粉，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，现用现配。

四、测定步骤：

精确称取2—3g混匀的样品，置于250ml碘量瓶中，加30ml三氯甲烷冰乙酸混合液，使样品完全溶解；加入饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇，然后在暗处放置5min，取出加75ml水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至淡黄色时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点。同时作空白试验。

五、测定结果的计算与分析：

1、计算：

X=[（V-V0）×N×]/m

式中：X—样品的过氧化值，%。

V—样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。

V

—空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。

N—硫代硫酸钠标准溶液的麾尔浓度，mol/L。

—1N硫代硫酸钠1ml相当于碘的克数。

2、分析：

油脂新鲜，其过氧化值不应大于%。

附：L硫代硫酸钠标准溶液的标定

1、标定：

精确称取于120℃烘3小时至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml 水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min。加150m