流动注射化学发光法测定曲克芦丁
流动注射化学发光法测定芦丁
第００ ７年 ８月 ７ ２ ２ ， ８ 卷 第 期
光
谱
学
与
光
谱
分
析
Ｓ ｅ ｔ ｏ ｃ ｐ ｎ ｐ ｃ ｒ ｌＡｎ ｌ ｓｓ ｐ ｃ ｒ ｓ ｏ ｙ ａ ｄ Ｓ ｅ ｔａ ａ ｙ ｉ
Ｖ １２ ， ． ， ｐ ６ ５ １ ２ ｏ． ７ Ｎｏ ８ ｐ １ ２ — ６ ８ Ａｕ ｕ ｔ ０ ７ ｇ ｓ ，２ ０
４ Ｏ（ 头 市 光 华 化 学 厂 ） ．０ ，用 ０ ５ ｔｏ Ｈ２ 汕 ０６６４ｇ ． ｌ・Ｌ １ ｏ ＿
法 、电化学法Ｅ 红 外光 谱 法 、高效 液相 色谱法 嘲 、毛 、
细管电泳法 ［等 。化学发光分析法 由于其灵 敏度 高、线性 范 ６ ］
围宽、仪器设备简单 ， 越来越受 到人们 的青睐 ［ ］ ７ 。化学发光 法 测定 芦丁的文献也 曾有报道 ｌ ，它们分别采 用 的是鲁 米 １ ¨ 诺、 次氯酸钠 、 氰化 钾体 系 。本研究 发现 Ｒ ６ 铁 ｈ Ｇ在 酸性 介
收稿 日期 ：２ ０— ２１ ． 订 日期 ：２ ０ —３１ ０ ５１—６ 修 ０ ６０ —８
基 金项 目：广西 青年科学基金项 目（ 桂科青 ０ ３ ０ ３ 和广西 高校百名 中青年学科带头人资助计划项 目（ １５０） 桂教人［ ０ ２ ６ ） ２ ０ ￣４ ７ 资助 作者简介 ：李利军，１６ ９ ６年生 ，广西 大学工学 院教授 ｅｍａｌ ｉｊｎ ５ ２ ｉａ ｃｒ － ｉ ｌｕ ０ ６ ＠ｓ ．ｏ ：ｌｉ ｎ ｎ
建立 了流动 注射化学发光法测定芦 丁的新方法 。研究 了影响化学发光 强度 的各 种因素 ， 优化 了硫 酸、硫酸高
铈和 Ｒ ６ ｈ Ｇ等条件 ，对样 品中可能存在 的各种干 扰物质进行 了研究 ，并初 步探讨 了化学 发光反应 可能 的机 理 。该方法的线性范围为 １ ０ ０ ～１０ ０ ｍｏ ・ ． ×１ ． ×１ ｌ Ｌ ，方法 的检 出限 为 ８ １ ０ ｍｏ ・ ． ×１ ｌ Ｌ ， １０ 对 ．
荧光法研究曲克芦丁和
目的：研究曲克芦丁(Troxerutin)与人血清白蛋白 (HSA)的相互结合作用。 方法：以HSA为荧光剂,Trox-erutin为荧光猝灭剂,在 激发波长为220 nm,发射波长为345 nm下测定两者结 合后的荧光强度,推测其猝灭机理;分别测定相同浓度的 HSA的荧光发射光谱图和紫外可见吸收光谱图,来推断 两者结合的作用力类型。 结果：Troxerutin与HSA的相互作用为静态猝灭过程, 平衡常数K0(25℃)=6· 18×105L/mol、K0(37℃)= 3· 76×105L/mol,供体(HSA)与受体(Troxerutin)间的 作用距离r=4· 66 nm。Troxerutin和HSA的作用力类 型为疏水作用力。 结论：通过两种分析方法清楚的研究了曲克芦丁与血 清白蛋白的相互作用。
曲克芦丁(Troxerutin)是一种重要的黄酮类化合 物,它是羟基芦丁中最重要的有效成分,医药上用 于治疗静脉障碍血栓症及脑血管疾病。最近几 年国外把曲克芦丁应用于防治长途飞行引起的 微血管病，使曲克芦丁临床研究拓展到新的领 域。药物进入体内一般都需要通过血浆的储存 和运输来到达受体部位,发生药理作用。血清白 蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白,可与许多 内源及外源性化合物结合。因此,研究药物与白 蛋白的相互作用,具有重要的理论和现实意义。
讨论
随着我国社会经济的发展,人们的生活水平和营养知识 水平逐步提高,天然食品、绿色食品、无公害食品、营 养饮食等已成为人们日益关心的问题。但是,目前大学 生的营养知识还是相当贫乏,营养知识的宣传工作开展 得较少,有待加强。本次调查结果,某医学院学生营养知 识较缺乏,营养调查总分女生高于男生;营养知识评分不 及格率临床医学专业学生高于护理专业学生,护理和临 床医学专业学生的营养态度得分和饮食行为得分基本相 同;营养知识来源主要是报刊和书籍,这与有关报道相似。 护理专业学生的营养调查总评分与营养知识得分高于临 床医学专业学生,可能是护理专业学生毕业后主要从事 护理工作,接触和护理病人时将向病人宣传营养知识及 营养与疾病、营养与治疗疗效等,因此特别注意学习营 养知识。医学院校应加强营养教育,开设营养学或临床 营养学课程,为医学生毕业后在工作中向病人宣传、指 导营养知识及对病人进行营养治疗打下基础。
13曲克芦丁注射液工艺规程分则
主题内容与适用范围1. 本标准在小容量注射剂工艺规程通则的基础上，规定了曲克芦丁注射液的处方与依据、原辅材料、中间产品,成品质量标准、半成品的检验方法和控制、原辅材料的消耗定额等内容。
2. 本标准适用于曲克芦丁注射液的生产质量控制及检查。
产品名称、剂型、规格1. 产品名称：1.1. 中文名称：曲克芦丁注射液1.2. 汉语拼音：Qukeluding Zhusheye1.3. 英文名：Troxerutin Injection2. 规格：2ml：60mg 5ml:0.15g 10ml:0.3g3. 剂型：注射剂4. 性状：本品为黄色或棕黄色的澄明液体。
产品处方与依据1. 处方：曲克芦丁30g聚山梨酯-80 3g活性炭1g～3g注射用水加至1000ml2. 依据：国家标准地标升国标第八册3. 批准文号：2ml:60mg 国药准字H370232205ml:0.15g 国药准字H2004521610ml:0.3g 国药准字H200452174. 安瓿质量要求：玻璃安瓿应为中性安瓿。
外观、尺寸、折断力应符合小容量注射剂工艺规程通则要求。
4.1 安瓿精洗：注射用水终端经0.22μm聚砜滤器滤过。
4.2 滤器要求：除炭过滤（5μm钛棒）、粗滤（5μm钛棒）、保证过滤（0.45μm聚砜）精滤（0.22μm聚砜）。
5. 药液配制5.1. 根据配制量，向浓配罐内注入配制总量50%的注射用水，打开入料口盖向上反放稳妥。
5.2. 启动搅拌电源开关进行搅拌，边搅拌边将称好的曲克芦丁、吐温-80、活性炭加入浓配罐中。
把盛放原辅料的不锈钢桶用注射用水冲洗两遍，冲洗水倒入浓配罐内。
5.3. 投完料关闭机械搅拌，用洁净工具在浓配罐内手工搅拌5分钟（防止浓配罐底原料堆积结块）。
然后启动自动搅拌电源。
5.4. 盖好罐盖，打开夹层排气阀，微开进气阀待残水排出后适度开大进气阀，关小排气阀，加热煮沸30分钟。
5. 5. 关紧所需进料的稀配罐底出料口阀门，打开进料口阀门，打开浓配罐底出料口阀门。
注射用曲克芦丁有效成分含量测定方法研究
注射用曲克芦丁有效成分含量测定方法研究金荣富;陈静;张晖;梁丽丽;贺文欣;宫文武;林溪铖;薛洪宝【摘要】采用高效液相色谱法,建立药品生产企业检测中心快速、有效测定曲克芦丁注射液有效成分曲克芦丁含量的方法。
条件为色谱柱： Zorbax Eclipse XDB-C18250 mm×4.6 mm,5μm Column (P/N 993967-902/5063-6600)填料色谱柱；柱温：室温；流动相：磷酸盐缓冲液：乙腈=80：20为流动相；流速：1 mL/min；检测波长：252 nm。
该方法样品前处理简单、精密度高、准确可靠。
能够满足药品生产企业对曲克芦丁含量检测要求,操作简捷易行,适合于曲克芦丁注射液的质量控制。
%The effective rapid measurement method to detect the Troxerutin active ingredient in injection Troxerutin was established based on High Performance Liquid Chromatography ( HPLC) . The method can be used in Laboratory Centre of the pharmaceutical production enterprises. The optimum conditions were as follows:Zorbax Eclipse XDB-C18 250 ×4. 6 mm, 5 μm Column ( P/N 993967-902/5063-6600 ) packing column was used at room temperature, and phosphate buffer:acetonitrile=80:20 was applied as mobile phase in flow rate of 1 mL/min, and 252 nm detection wavelength were chosen by experiment. It provided a new, convenient, rapid, accurate and reliable method for the detection of Troxerutin active ingredient in injection Troxerutin. The method can be used on troxerutin quality control in the drug manufacturer.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2016(000)003【总页数】3页(P106-108)【关键词】曲克芦丁;高效液相色谱;含量【作者】金荣富;陈静;张晖;梁丽丽;贺文欣;宫文武;林溪铖;薛洪宝【作者单位】安徽宏业药业有限公司，安徽蚌埠233045;安徽宏业药业有限公司，安徽蚌埠 233045;蚌埠医学院化学教研室，安徽蚌埠 233030;蚌埠医学院化学教研室，安徽蚌埠 233030;蚌埠医学院化学教研室，安徽蚌埠 233030;安徽省蚌埠市食品药品监督管理局，安徽蚌埠233000;安徽省蚌埠市食品药品监督管理局，安徽蚌埠 233000;蚌埠医学院化学教研室，安徽蚌埠 233030【正文语种】中文【中图分类】R917曲克芦丁(Troxerutin)又名托克芦丁、三氧乙基芦丁、维脑路通、维生素P4、羟乙基芦丁等为芦丁经羟乙基化制成的半合成黄酮化合物[1]，其化学结构见图 1。
药物分析中流动注射化学发光分析与微透析采样技术应用研究
药物分析中流动注射化学发光分析与微透析采样技术应用研究摘要】随着医学技术的发展，面临越来越多的疾病，药物的应用也越来越广泛，对药物的研究也越来越深入，所以对药物安全性的要求也越来越严格，每样药物必不可少的就是药物分析，分析其中含量及其浓度。
化学发光分析法(Chemiluminescence，CL)是通过化学反应过程中产生的辐射光的强弱得到物质含量的一种分析方法，具有灵敏度高、线性范围宽、操作简单等特点[1]。
而将化学发光分析发和流动注射结合形成化学发光-流动注射的分析方法，大大提高了化学发光分析法测定的精密度。
微透析现在已经广泛的运用到生化物质的分析中，比如实际的器官组织以及生物液等，经过研究，它的应用范围也逐渐扩大，现在也将其应用到药代动力学的研究中，而且微透析能够和流动注射化学发光的分析发联合，形成微透析-流动注射-化学发光联用系统，能够实现在线分析，有效的测定药物在血液中的血药浓度，为临床用药提供理论依据。
【关键词】药物分析；流动注射；化学发光；微透析采样【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）04-0342-021.引言1.1 化学发光的概述1.1.1化学发光的研究进程和基本原理从古至今，许多的发光反应被发现被研究，自然界中的萤火虫，还有一些海洋生物，都存在发光反应，随着研究的深入，在19世纪，有些研究人员发现某些有机化合物在被氧化时也会产生发光反应。
研究人员在不断的研究探索中提出了化学发光，并不断的将这一反应应用于物质的检测。
主要的机理为当某些物质在化学反应过程中，直接或间接的参与了反应的反应物、中间体及荧光物质，再通过吸收反应过程中的化学能，使其从基态变为激发态，而当该物质再从激发态回到基态时就会发出一定波长的光[2]。
所以在检测某物质时，便可以依据该物质在化学反应中发光的强度或这光的总量来分析该物质的含量。
1.1.2常见的化学发光体系常见的化学发光体系主要有鲁米诺化学发光体系、吖啶酯化合物化学发光体系、高锰酸钾化学发光体系和纳米粒子化学发光体系等。
曲克芦丁注射液无菌检查法方法学研究
151BIOTECHWORLD 生物技术世界曲克芦丁系芦丁经羟乙基化制成的半合成黄酮化合物,具有抑制红细胞和血小板凝聚作用, 有防止血栓形成的作用,同时能增加血中氧的含量,改善微循环,促进新血管生成以增进侧支循环。
它对内皮细胞有保护作用,同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤, 增加毛细血管抵抗力, 降低毛细血管通透性, 防止血管通透性升高引起的水肿。
曲克芦丁注射液具有治疗闭塞性综合征血栓性静脉炎毛细血管出血等症 按照中国药典规定注射类制剂需进行无菌检查[1]并要求进行无菌检查法验证, 因此,对曲克芦丁注射液无菌检查方法进行了研究。
1 材料与方法1.1 材料(1)培养基与试药。
曲克芦丁注射液,规格2ml:100mg,批号110101,110102,110103,由江苏康缘药业股份有限公司生产。
硫乙醇酸盐流体培养基,批号20100918;改良马丁培养基,批号20100601,营养肉汤培养基20100708,改良马丁琼脂培养基,批号20100602。
营养琼脂培养基,批号091220(由宜兴市永信生物有限公司生产)。
(2)仪器与设备仪器。
HTY-2000A型集菌仪(由杭州泰林生物技术设备有限公司生产)、一次性使用全封闭集菌培养器(由杭州泰林生物技术设备有限公司生产)。
双人净化工作台(型号:YJT,由靖江市磊鑫机械厂生产);生物安全柜(由苏州市华宇净化设备有限公司生产);脉动真空灭菌器(型号:DMG-0.28,由连云港千樱公司生产)。
(3)菌种。
枯草杆菌CMCC(B)63501、金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、大肠埃希菌CMCC(B)44102、生孢梭菌CMCC(B)64941、白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉CMCC(F)98003。
以上均来源于江苏省药品检验所。
6株工作用菌种代数均为第五代。
1.2 方法(1)菌液制备方法[2-3]。
①取经33.0℃培养18～24小时的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌与枯草芽孢杆菌肉汤新鲜的液体培养物1ml 加入9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中,10倍稀释至10-5～10-7,制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液,备用。
流动注射化学发光体系自动测定异烟肼的溶出度!
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结果与讨论
#"! 流路及参数的选择 异烟肼和铁氰化钾的化学发光反应的速率较快，从试剂的混合到最大峰的出现，大约只需 0:F H 左右 =
23 当 D3 #E （ "?） 7BC ’ $，?@A+ 浓度为 4:[ 7BC ’ $，异烟肼浓度为 04:4 7> ’ $ 时，分别以水、 1 浓度为 4:; X 04
收稿日期：!$$% $@ $! 基金项目：重庆市科委资助项目；渝西学院校级重点课题资助项目 * 作者简介：刘希东 （&LB@ K ） ，男，四川通江人，副教授，主要从事光谱分析和化学发光分析研究 *
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西南师范大学学报 （自然科学版）
第 ,; 卷
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实验部分
主要的仪器和试剂 （西安瑞迈电子科技有限公司） ；(##)%& 型多功能化学发 !"#$%& 型多功能化学发光 ’ 生物发光分析系统
果都反映出异烟肼片有快速溶出特性 + 同时每次取 - 片商品异烟肼药片，按照药典方法 （二法） 对照测定溶出度 + 每隔一定时间取样 " 4 7 03，
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异烟肼浓度：-./. 01 2 3；&()* 浓度：./7 056 2 3； 总泵速："/. 03 2 0;<+
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曲克芦丁药典标准
曲克芦丁是一种常用的药物，其药典标准详细描述如下：曲克芦丁是一种黄酮类化合物，具有多种药理作用，如抑制血小板聚集、降低毛细血管通透性、抗氧化等。
在药典标准中，曲克芦丁的含量要求不得少于80.0%（供口服用）或88.0%（供注射用），以保证药物的有效性和安全性。
曲克芦丁的外观应为黄色或黄绿色粉末，无臭，有引湿性。
在水中易溶，在甲醇中微溶，在乙醇中极微溶解，在三氯甲烷中不溶。
这些性质有助于药物的溶解和吸收，从而更好地发挥药效。
此外，曲克芦丁的鉴别方法包括红外光谱法、紫外光谱法等，可以准确地确定药物的成分和结构。
同时，曲克芦丁的杂质检查和含量测定方法也经过严格的验证和确认，以确保药物的质量和稳定性。
总之，曲克芦丁的药典标准详细描述了药物的成分、性质、鉴别方法、杂质检查和含量测定等方面的要求，为药物的研发、生产和质量控制提供了重要的依据。
曲克芦丁对Belousov-Zhabotinskii振荡体系的扰动及其含量测定
曲克芦丁对Belousov-Zhabotinskii振荡体系的扰动及其含量测定叶丹妮;蔡卓;蒋翠文;岳伟超【摘要】基于曲克芦丁对Belousov-Zhabotinskii振荡体系的扰动,建立了一种测定曲克芦丁的新方法.在优化条件下,振幅改变量AE与曲克芦丁的浓度在0.808 ～40.4 μmol/L范围内呈现良好的线性关系,检出限为2.14×10-7mol/L(S/N=3).对曲克芦丁注射液中的曲克芦丁进行了分析测定,回收率在98.8％～101％之间,测定结果与紫外法无显著性差异.采用循环伏安法和紫外分光光度法对可能的扰动机理进行了探讨.【期刊名称】《高等学校化学学报》【年(卷),期】2016(037)001【总页数】6页(P31-36)【关键词】Belousov-Zhabotinskii振荡;曲克芦丁;化学振荡【作者】叶丹妮;蔡卓;蒋翠文;岳伟超【作者单位】广西大学化学化工学院,南宁530004;广西大学化学化工学院,南宁530004;广西大学化学化工学院,南宁530004;广西大学化学化工学院,南宁530004【正文语种】中文【中图分类】O652;O615.4曲克芦丁(Troxerutin)是芦丁在碱性条件下与环氧乙烷进行醚化反应得到的羟乙基芦丁, 具有降低人体毛细血管的通透性和脆性、抑制血小板凝结及防止血栓形成的作用, 是临床上治疗闭塞性脑血管病的常用药物[1]. 目前已报道的曲克芦丁分析方法有色谱法[2], 紫外-可见分光光度法[3]、流动注射胶束化学发光法[4]和电化学伏安法[5], 而应用化学振荡法进行定量分析尚未见报道.Belousov-Zhabotinskii(B-Z)振荡反应是指在Ce(Ⅳ)和Mn(Ⅱ)等金属离子催化下, 溴酸盐在酸性介质中氧化具有活性亚甲基的多氧有机化合物的一类化学振荡反应[6]. 化学振荡法因其灵敏度高、仪器设备简单而受到人们的关注, 采用振荡反应对物质进行分析的报道也日益增多[7～12]. 以化学振荡反应进行测定的主要依据是振荡体系对于外来物质的扰动十分敏感, 当在振荡体系中加入某种特定的物质时, 振荡图谱的参数会发生一定的变化, 而这种参数的变化与外来物质的浓度有一定的线性关系, 由此可以对其进行定量测定. 赖红伟等[13]建立了B-Z振荡反应测定阿莫西林的新方法; 高锦章等[14]利用B-Z振荡体系周期和振幅的变化率与青霉素浓度负对数的线性关系, 实现了对青霉素的测定.本文基于曲克芦丁对B-Z振荡体系的扰动, 建立了测定曲克芦丁的新方法, 并应用于曲克芦丁注射液的分析. 采用紫外分光光度法和循环伏安法对曲克芦丁的扰动机理进行了探讨.1.1 试剂与仪器溴酸钾、硫酸铈和丙二酸(A.R.级, 国药集团化学试剂有限公司); 硫酸(A.R.级, 上海试一化学试剂有限公司); 曲克芦丁标准品(上海晶纯生化科技股份有限公司); 所用试剂均根据需要配制成相应浓度的水溶液; 实验用水为去离子水.科思特350型电化学工作站(武汉科思特仪器有限公司); AL104型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司); UV-2012PCS型紫外-可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司).1.2 实验过程实验装置如图1所示, 振荡反应在100 mL夹套烧杯中进行, 超级恒温水浴装置通过外循环恒温水维持体系温度恒定在(36±0.1) ℃, 在恒速搅拌下, 以铂电极为工作电极, 甘汞电极为参比电极, 用连接计算机的电化学工作站检测并记录振荡体系反应过程的电位信号.实验体系为CH2(COOH)2-H2SO4-Ce4+-KBrO3. 依次在100 mL夹套烧杯中加入5.0 mL 3.0 mol/L H2SO4溶液, 2.0 mL 0.02 mol/L Ce(SO4)2溶液和5.0 mL 0.2 mol/L CH2(COOH)2溶液, 恒温恒速搅拌5 min, 点击工作站数据采集键, 迅速注入8.0 mL 0.25 mol/L KBrO3溶液, 保持体系总体积为20 mL, 以KBrO3溶液的注入时间为开始时间, 经过一段诱导期后, 体系会发生规律而稳定的振荡, 如图2所示. 当振荡图谱稳定后, 在同一振荡峰峰谷处迅速注入0.1 mL已知浓度的曲克芦丁溶液, 同时记录, 待振荡图谱再次稳定时, 停止记录, 即得曲克芦丁对B-Z振荡体系的扰动图谱. 通过扰动图谱可考察各参数对振荡体系的影响.2.1 曲克芦丁对振荡体系的扰动如图3(A)所示, 曲克芦丁的加入会对振荡图谱产生一定的扰动, 表现为振荡图谱峰谷电位迅速下降, 振幅发生变化, 变化值记为ΔE. 如果加入的物质是去离子水, 振荡图谱不会产生扰动, 振幅也不会发生任何变化. 当加入的曲克芦丁浓度增加时, 峰谷电位下降的幅度增大[见图3(B)]. 为了保证实验的重现性及准确性, 每次都在同一峰谷处注入曲克芦丁溶液, 并保持试剂加入顺序不变.2.2 振荡体系条件的优化为了使振荡体系对于曲克芦丁的扰动响应最为灵敏, 考察了体系的催化剂种类、加样时机、温度、搅拌速度及各组分浓度等因素对振幅变化值ΔE的影响.2.2.1 催化剂的选择考察了振荡体系中不同的催化剂对曲克芦丁扰动情况的影响. 结果表明, 含Ce4+的振荡体系比含Mn2+的振荡体系对于曲克芦丁的扰动响应更灵敏, 振幅的变化更明显, 现象更稳定, 所以选择Ce4+作为振荡体系的催化剂.2.2.2 加样时机的选择实验分别考察了在振荡图谱峰谷处、峰尖处、振荡峰上升和下降途中等时机加样对体系的扰动情况. 结果表明, 在峰谷处加样现象最明显, 所以选择在振荡峰谷位置注入样品溶液.2.2.3 体系温度的影响体系温度对于振荡图谱的影响如图4(A)所示, 在27～39 ℃范围内, ΔE随温度的增加呈现先上升后下降的趋势, 当温度为36 ℃时, ΔE达到最大, 因此选择36 ℃作为振荡体系的温度.2.2.4 搅拌速度的影响搅拌速度直接影响体系组分的混合情况. 如图4(B)所示, 在200～1000 r/min范围内, 随着搅拌速度的增加, ΔE呈现先增大后减小的趋势. 搅拌速度较慢时, 体系组分不能及时混匀; 若搅拌速度过快, 会产生气泡或者引入空气造成影响, 因此选择600 r/min作为振荡体系的搅拌速度.2.2.5 KBrO3浓度的影响由图4(C)可知, KBrO3浓度在60.0～100.0 mmol/L 范围时, ΔE保持基本不变, 当KBrO3浓度大于100 mmol/L时, ΔE呈现减小的趋势, 可能是曲克芦丁与KBrO3发生了反应, 从而削弱了曲克芦丁对振荡体系的影响. 因此选择100.0 mmol/L作为振荡体系KBrO3的浓度.2.2.6 Ce4+浓度的影响Ce4+是体系中的催化剂. 如图4(D)所示, 当Ce4+浓度在0.5～3.0 mmol/L范围内时, ΔE随着Ce4+浓度的增加先升高后降低, 当Ce4+浓度为2.0 mmol/L时ΔE达到最大. 因此选择2.0 mmol/L作为振荡体系中Ce4+的浓度.2.2.7 CH2(COOH)2浓度的影响CH2(COOH)2是体系的有机底物. 如图4(E)所示, 当其浓度在25.0～125.0 mmol/L范围内时, ΔE随着CH2(COOH)2浓度的增加而减小, 可能是由于CH2(COOH)2浓度较高时, 体系更稳定, 对于外来物的抗干扰能力更强, 从而使得体系对于曲克芦丁的扰动响应值变小. 综合考虑体系的稳定程度及ΔE的变化, 选择50.0 mmol/L作为振荡体系中CH2(COOH)2的浓度.2.2.8 H2SO4浓度的影响H2SO4溶液为体系提供酸性环境. 由图4(F)可知, 在0.25～1.25 mol/L范围内, 随着H2SO4浓度逐渐增加, ΔE呈现先增大后减小的趋势, 而当H2SO4浓度为0.75 mol/L时, ΔE最大, 所以选择0.75 mol/L作为振荡体系H2SO4的浓度.综上所述, 振荡体系的最佳条件如下: H2SO4浓度为0.75 mol/L, Ce4+浓度为2.0 mmol/L, CH2(COOH)2浓度为50.0 mmol/L, KBrO3浓度为100.0 mmol/L, 测定温度为36 ℃, 转速为600 r/min.2.3 线性范围、检出限及精密度配制了一系列不同浓度的曲克芦丁溶液, 在最佳实验条件下进行测定, 考察不同浓度的曲克芦丁溶液对于B-Z振荡体系的扰动情况. 实验结果表明, 在0.808～40.4 μmol/L范围内, 曲克芦丁的浓度与ΔE呈良好线性关系, 回归方程为ΔE=1.7365c-1.3192(r=0.9989, N=9), 检出限为2.14×10-7 mol/L(n=11). 对1.62×10-5 mol/L的曲克芦丁溶液平行测定11次, 其相对偏差为2.6%, 可见重现性良好. 2.4 干扰实验在最佳实验条件下, 研究了一些常见的金属离子和药物辅料对8.08 μmol/L曲克芦丁测定的干扰情况. 当相对误差在±5%范围内时, 体系对共存干扰物的允许量如表1所示, 可见本方法具有较强的抗干扰能力.2.5 实际样品测定采用本文方法对同一厂家不同批次的曲克芦丁注射液进行了分析. 将10支市售同一批号的曲克芦丁注射液混合均匀后稀释至适当浓度, 在优化条件下测定曲克芦丁的含量, 同时进行加标回收实验. 样品辅料为注射用水, 无需预处理. 测定结果分别列于表2和表3, 并与紫外分光光度法测定的结果进行比较. 经过t检验可知, 本方法与紫外分光光度法在95%的置信水平上无显著差异.2.6 机理探讨当曲克芦丁加入到B-Z振荡体系后, 与体系中某种组分发生相互作用而产生扰动. 为了探讨曲克芦丁在振荡体系中的反应情况, 采用紫外分光光度法分别对曲克芦丁溶液、曲克芦丁与振荡体系中其它组分两两混合后的溶液进行了测定, 结果如图5所示.图5曲线a为曲克芦丁的紫外吸收曲线, 可见曲克芦丁在254 nm处有紫外吸收峰; 曲线b和c分别为曲克芦丁与硫酸及曲克芦丁与丙二酸混合溶液的紫外吸收曲线, 可见254 nm处的紫外吸收峰基本不变, 说明曲克芦丁不与体系中的硫酸、丙二酸发生反应; 曲线d和e分别是曲克芦丁与Ce4+及曲克芦丁与KBrO3混合后溶液的紫外吸收曲线, 曲线d的紫外吸强度比曲线a明显降低, 说明曲克芦丁与Ce4+发生了作用并消耗了部分曲克芦丁; 而曲线e表明, 当曲克芦丁与KBrO3混合后, 虽然在254 nm处仍有紫外吸收峰, 但峰形已有一些变化, 说明KBrO3对曲克芦丁有一定的作用, 只是这种作用不是很明显.曲克芦丁与Ce4+发生反应的现象也体现在溶液的外观上. 当曲克芦丁加入到Ce4+溶液中后, 溶液颜色由亮黄色变为橙黄色. 采用循环伏安法(CV) 进一步研究了曲克芦丁与Ce4+的相互作用. 以0.5 mol/L硫酸溶液作为支持电解质, 裸玻碳电极为工作电极, 甘汞电极为参比电极, 铂丝电极为辅助电极, 以20 mV/s的扫描速度, 在+0.6～+1.0 V电位范围内分别对Ce4+、曲克芦丁及其混合溶液进行伏安扫描, 结果如图6所示. 图6曲线a为支持电解质硫酸溶液的CV曲线, 曲线b为曲克芦丁的CV曲线, 曲线c为曲克芦丁与Ce4+混合溶液的CV曲线. 可见, 曲线b存在明显的氧化峰, 说明曲克芦丁在扫描的电位范围内能被氧化; 曲线a上无何氧化还原峰, 说明支持电解质溶液在此范围内未发生任何电化学反应; 曲线c上也没有任何氧化还原峰, 说明当曲克芦丁与Ce4+混合后, 曲克芦丁被Ce4+氧化, 从而使原有的氧化峰消失.曲克芦丁含有酚羟基, 具有还原性, 易与氧化剂发生反应. 在本振荡体系中只有Ce4+和KBrO3为氧化剂, 由于曲克芦丁更易被Ce4+所氧化, 因此推断曲克芦丁对于振荡体系的扰动主要是消耗了Ce4+. 而还原产物Ce3+又被体系中过量的KBrO3氧化成Ce4+, 继续参与振荡循环, 所以曲克芦丁对于振幅的影响持续时间有限, 最终体系会逐渐趋于稳定.根据FKN 机理[15], B-Z 振荡反应是包括20多个基元反应的复杂过程, 结合这些基元反应, 可将曲克芦丁参与的振荡反应概括为如下5个过程:曲克芦丁对Belousov-Zhabotinskii振荡体系可以产生扰动, 且曲克芦丁的浓度与振幅的改变值呈良好的线性关系, 据此建立了B-Z振荡反应测定曲克芦丁的新方法. 考察了催化剂种类、加样时机、温度、搅拌速度及各组分浓度等对扰动程度的影响; 在优化条件下对注射液样品中的曲克芦丁进行了测定. 实验结果表明, 利用B-Z 振荡反应进行曲克芦丁的测定具有操作简单、准确性高等特点, 可用于实际样品的测定.[1] Ren J. Q., Practical Medicine Handbook, Shandong Science and Technology Press, Jinan, 2003, 1055(任娟清. 实用药物手册, 济南: 山东科学技术出版社, 2003, 1055)[2] Shi J. M., Lin L., China Pharmacy, 2013, 24(21), 1994—1996(施洁明, 林玲. 中国药房, 2013, 24(21). 1994—1996)[3] Yu S. H., Gong A. Q., Ji Z. P., Ma Z. J., Zhu X. S., Journal of Yangzhou University(Natural Science), 2006, 9(7), 28—30(于素华, 龚爱琴, 嵇正平, 马正军, 朱霞石. 扬州大学学报(自然科学版), 2006, 9(7), 28—30)[4] Chen X. L., Ma H. Y., Zhang Y. F., Analysis Laboratory, 2005, 25(7), 109—111(陈小利, 马红燕, 张耀峰. 分析试验室, 2005, 25(7), 109—111)[5] Hao C. X., Zhang S. M., Laboratory Analysis, 2001, 20(2), 23—26(赫春香, 张淑敏. 分析实验室, 2001, 20(2), 23—26)[6] Hu G., Liu T. T., Journal of Anhui University(Natural Science), 2015,39(2), 97—108(胡刚, 刘婷婷. 安徽大学学报(自然科学版), 2015, 39(2), 97—108) [7] Li S. J., Huang J. B., Zou G. H., Lan H., Luo S. X., Yu L, Zong X. M., Wang X., Chin. Anal. Chem., 2010, 38(9), 1353—1356(李守君, 黄金宝, 邹桂华, 兰焕, 罗时旋, 于莲, 宗希明, 王旭. 分析化学, 2010, 38(9), 1353—1356)[8] Li S. J., Lan H., Li X. F., Chi Y. Y., Wang Z. X., Chemical Research and Application, 2011, 23(12), 1649—1653(李守君, 兰焕, 李晓凤, 迟云英, 王志祥. 化学研究与应用, 2011, 23(12), 1649—1653)[9] Gao J. Z., Liu Y. J., Zhang X. L., Li M., Yang W., Journal of Northwest Normal University(Natural Science), 2011, 47(3), 49—47(高锦章, 刘艳君, 张晓莉, 李铭, 杨武. 西北师范大学学报(自然科学版), 2011, 47(3), 49—47) [10] Wang E. D., Lu L. L., Zhang T. M., Dong W. B., Lu H. M., Liang Y. Z., Xu T. S., Zhang J., Chen C. N., Chem. J. Chinese Universities, 2015, 36(6), 1052—1060(王二丹, 鲁利利, 张泰铭, 董文宾, 卢红梅, 梁逸曾, 许天舒, 张娟, 陈春楠. 高等学校化学学报, 2015, 36(6), 1052—1060)[11] Zhou L., Tang J. N., Liu B., Wu Y. G., Chem. Res. Chinese Universities, 2009, 25(4), 522—525[12] Zhang J. , Zhong J. H. , Wang Z. P. , Luo X. L. , Fu T. F. , Zhang T. M. , Wang Y. N. , Guo S. S. , Wang E. D. , Chinese J. Anal. Chem., 2014, 42(4), 559—564(张娟, 钟俊辉, 王志沛, 骆学雷, 付廷发, 张泰铭, 王艳娜, 郭沙沙, 王二丹. 分析化学, 2014, 42(4), 559—564)[13] Lai H. W., Cao H. M., Dong S. F., Han L. Q., Lu Z., Dong S. G., Jia Q. Y., Chinese J. Appl. Chem., 2014, 31(3), 361—366(赖红伟, 曹宏梅, 董顺福, 韩丽琴, 陆钊, 董树国, 贾骐羽. 应用化学, 2014, 31(3), 361—366)[14] Gao J. Z., Qu J., Wei X. X., Guo M., Ren J., Yang W., Anal. Chem., 2008, 36(6), 735—739(高锦章, 曲婕, 魏晓霞, 郭淼, 任杰, 杨武. 分析化学, 2008, 36(6), 735—739)[15] Field R. J., J. Am. Chem. Soc., 1972, 94(25), 8649—8664 Abstract A new method for the determination of troxerutin was developed based on the disturbance of troxerutin to Belousov-Zhabotinskii oscillation system. Under optimal conditions, the variation of ΔE had a linear relationship with troxerutin concentration in the range of 0.808—40.4 μmol/L, with detection limit of 2.14×10-7 mol/L(S/N=3). The established method was used to determination of troxerutin in injection, and the recovery was 98.8%—101%. The results showed that the data obtained by this method and the ones by UV method had no significant difference. The possible mechanism was studied using cyclic voltammetry and UV spectrophotometry.Keywords Belousov-Zhabotinskii oscillation; Troxerutin; Chemical oscillation† Supported by the Natural Science Foundation of Guangxi,China(No.2015GXNSFAA139239).。
流动注射-化学发光法测定药物制剂及生物流体中盐酸多巴胺
流动注射-化学发光法测定药物制剂及生物流体中盐酸多巴胺张韫;高苏亚【摘要】基于盐酸多巴胺对鲁米诺-牛血清白蛋白体系的化学发光具有显著的猝灭作用,建立了测定盐酸多巴胺的流动注射-化学发光法.试验发现鲁米诺-牛血清白蛋白体系化学发光强度的降低值与盐酸多巴胺质量浓度的对数值呈线性关系,线性范围为0.10～700 μg·L-1,检出限(3σ)为0.03 μg·L-1.方法应用于盐酸多巴胺注射液的测定,加标回收率在97.9％～103％之间,相对标准偏差(n=7)在1.0％～3.2％之间,样品测定值与药典法测定结果一致.本方法还应用于人体唾液、尿液及血清样品中盐酸多巴胺的测定.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)004【总页数】4页(P470-473)【关键词】盐酸多巴胺;鲁米诺;牛血清白蛋白;化学发光;流动注射【作者】张韫;高苏亚【作者单位】西安医学院药学院,西安710021;西安医学院药学院,西安710021【正文语种】中文【中图分类】O657.39盐酸多巴胺为儿茶酚胺类神经递质，具有扩张内脏血管，增强心肌收缩力并改善休克时脏器血液供应的作用。
目前已报道的测定盐酸多巴胺的方法主要有高效液相色谱法［1］、离子色谱法［2］、电化学分析法［3］、毛细管电泳法［4］、紫外－可见分光光度法［5］、荧光法［6］和化学发光法［7］等。
流动注射与化学发光联用技术具有灵敏度高、线性范围宽、分析速度快和试剂消耗少等优点，在化学、生命科学及药物分析等领域具有广阔的应用前景［8］。
鲁米诺是目前应用最广的化学发光剂，据报道牛血清白蛋白对鲁米诺化学发光具有增敏作用，并依此构建了鲁米诺－牛血清白蛋白化学发光体系［9］。
本工作以盐酸多巴胺对鲁米诺－牛血清白蛋白体系发光信号显著的猝灭作用为基础，建立了测定盐酸多巴胺的流动注射－化学发光方法，并用于药物制剂和生物流体中盐酸多巴胺的测定。
1 试验部分1.1 仪器与试剂IFFM－E型流动注射化学发光分析仪；Dionex P680型高效液相色谱仪；四元泵，Chromeleon色谱工作站；UDV 170U型紫外检测器；艾柯KLZ－UV型系列超纯水机。
芦丁药品含量的流动注射化学发光法测定
芦丁药品含量的流动注射化学发光法测定
吴珉;宋正华
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2009(37)A01
【摘要】芦丁（Rutin），又名云香苷、紫槲皮苷。
芦丁的药理研究表明，芦丁可保持血管弹性，减少血管脆性，降低毛细血管异常通透性，可防止高血压引起的脑溢血和视网膜出血等并发症。
目前，测定芦丁的方法有荧光法、电化学法、HPLC、电泳法等。
【总页数】1页(P208)
【作者】吴珉;宋正华
【作者单位】西北大学化学与材料科学学院,西安710069
【正文语种】中文
【中图分类】O657.3
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1.芦丁药品含量的流动注射化学发光法测定 [J], 吴珉;宋正华
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2010版药典标准提高-曲克芦丁氯化钠注射液
曲克芦丁氯化钠注射液Qukeluding Lühuana ZhusheyeTroxerutin and Sodium Chloride Injection本品为曲克芦丁与氯化钠的灭菌水溶液。
含曲克芦丁（C 33H 42O 19）应为标示量的90.0%~110.0%；含氯化钠（NaCl ）应为标示量的95.0%~105.0%。
【性状】本品为淡黄色至黄色或淡黄绿色至黄绿色的澄明液体。
【鉴别】（1）取本品适量，用水稀释制成每1ml 中约含曲克芦丁15μg 的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录Ⅳ A ）测定，在254nm 与347nm 的波长处有最大吸收，在283nm 的波长处有最小吸收。
（2）在曲克芦丁含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
（3）本品显钠盐的鉴别（1）与氯化物的鉴别（1）反应（中国药典2010年版二部附录Ⅲ）。
【检查】pH 值 应为5.5~7.0（中国药典2010年版二部附录Ⅵ H ）. 其他组分 取本品适量，用含量测定项下流动相稀释制成每1ml 中约含曲克芦丁1mg 的溶液，作为供试品溶液；照曲克芦丁其他组分项下的方法测定，按峰面积归一化法计算，除曲克芦丁峰外，一羟乙基芦丁峰、二羟乙基芦丁峰和四羟乙基芦丁峰面积均不得大于总峰面积的5.0%，其他单个未知组分峰面积不得大于总峰面积的1.0%，未知组分峰面积的和不得大于总峰面积的4.0%，各组分峰面积的和不得大于总峰面积的12.0%。
渗透压摩尔浓度 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录 Ⅸ G ），渗透压摩尔浓度应为285～310mOsmol/kg 。
异常毒性 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ C ），按静脉注射法给药，应符合规定。
细菌内毒素 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ E ），每1ml 中含内毒素的量应小于0.50EU 。
高效液相色谱法测定曲克芦丁氯化钠注射液中曲克芦丁的含量
高效液相色谱法测定曲克芦丁氯化钠注射液中曲克芦丁的含量岑志芳;林琼
【期刊名称】《中国医药导报》
【年(卷),期】2005(002)011
【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定曲克芦丁氯化钠注射液含量的方法.方法色谱柱为Hypersil ODS2 C18柱200mm×4.6mm,流动相为甲醇-水-磷酸(38:62:0.4),柱温:室温,流速为1mL/min,测定波长为254nm.结果曲克芦丁标准溶液浓度在0.2～4ug/mL范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.43%;高、中、低3种浓度曲克芦丁样品溶液日内精密度为1.98%,日间精密度为2.56%.结论该方法简便、结果准确,适用于曲克芦丁氯化钠注射液的质量控制.
【总页数】1页(P83)
【作者】岑志芳;林琼
【作者单位】广东省佛山职工医学院,528000;广东省佛山职工医学院,528000【正文语种】中文
【中图分类】R9
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流动注射化学发光法测定抗坏血酸及机理
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济 南 大 学 学 报 ( 自然科学版 )
第 25卷
用来测定其他物质等 ; ( 4) 仪器研制工作已迅速发 展。化学发光的最新发展主要是在原有发光试验剂 及体系的基础上 , 研究合成新的发光试剂 , 建立新的 发光体系, 与其它技术如流动注射技术 ( FA I) 、 高效 液相色谱技术 ( H PLC )、 固定化试剂技术、 传感器技 术以及生化免疫技术的联用等方面
- 5
图 2 体系的化学发光强度变化
在加入 V c 前, KM nO 4 与 HC l不产生化学发光 信号。加入 V c 后产生了少量 的发光体, 产 生微弱 的化学发光 ; 而 4NPRASP 溶液与 KM nO 4 和 H C l溶 液混合后产生大量的发光体, 产生很强的化学发光 信号 , 加入 Vc 后, 发光信号显著减小 , 且随着 V c 量 的增加, 发光信号 继续减弱, 原因可能是 4NPRASP 和 V c之间发生了作用。 2 . 2 氧化剂及反应试剂用量的影响 以 H C l和 H 2 SO4 为 介质测 定氧化 剂 KM nO 4、 C e( SO 4 ) 2、 H 2 O2 和 K 2 C r2O 7 对体 系发光 强度 的影 响。 KM nO4 作氧化剂时体系的化学发光强度最大; 体系在 H C l介质中比 在 H 2 SO 4 介 质中的化学发光 强度大 , 灵 敏度 高。故 选 择 KM nO4 作 氧化 剂, 在
2 结果与讨论
2 . 1 发光强度的变化 在 KM nO4 和 H C l的浓度分别为 2 . 5 10 和
- 4
1 . 0 m ol /L, 主副泵流速均为 2 . 4 mL /m in 条件下, 采 用流动注射化学发光分析仪测定体系的化学发光强 度, 结果见图 2 。
流动注射_化学发光法测定阿昔洛韦和更昔洛韦_木尼热_阿布都克热木
10- 5 g/ L - 7. 0
- 2
10 - 2 g / L 范 围 内 呈 线 性 关 系 , 检 出 限 为 10- 5 g/ L。 通过对
g/ L - 7. 0
10
g/ L 范围 内呈线性关 系 , 检 出限为 2. 35
质量浓度为 1. 0 10- 3 g / L 的阿昔洛韦和更昔洛韦分 别进行的 11 次平行测定 , 其相对标准偏差 ( RSD) 分别 为 2. 08% 该方法线性范围宽、 灵敏度 高 , 简便快 速 , 也是目前 首次采 用流动 注射 - 化学 发光法 对更昔 洛韦含
硫酸介质中 Ce( IV ) 与阿昔洛韦 / 更昔洛韦发生氧化 - 还原反应而产生化学发光 , 罗丹明 B 可显著增强 其发光信 阿 昔 洛 韦 在 3. 0 10
- 5
号 , 且增敏效果与阿昔洛韦 / 更昔洛韦浓度呈一定的线性关系。据此 , 建立了 测定注射 剂中阿昔洛 韦和更昔 洛韦的流 动注射 - 化学 发 光 新 方 法。 结 果 1. 56 10 g / L ; 更昔洛韦在 5. 0 和 2. 83% 。 结论 量的测定。 关键词 : 流动注射 ; 化学发光 ; Ce ( IV ) ; 罗丹明 B; 阿昔洛韦 ; 更昔洛韦 中图分类号 : R927. 2 文献标识码 : A 文章编号 : 1671 - 8259( 2007) 06 - 0707 - 04
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西 安 交 通 大 学 学 报 ( 医 学 版 )
第 28 卷
疹病毒与巨细胞病毒的 DNA 聚合酶, 抑制病毒 DNA 合成 。目前, 测定更昔洛韦含量的方法主要有: 高效 液相 色 谱 法
[ 11] [2 - 4] [ 1]
动注射化学发光仪设定。选择负高压为 - 600 V, 流 速为 1. 80 mL / m in。工作站记录发光响应信号 , 以相 对峰高进行定量。
流动注射-化学发光法测定阿昔洛韦和更昔洛韦
ｇＬ ｎｉｏｉ Ｃ ｎｌ ｉ ｈ ｍ ｔ ｄ ｓ ａ ｌｅｒ ｇ， ｈ ｓｉｔ， ｃｎｅｉ ｃ ａｄ ／ ｇ ｃｌ ｒ ｏｃ ｓ ｎ Ｔ ｉ ｅ ｏ ｈ ｂｏｄ ａ ｒ ｅ ｈ ｓ ｉ ｉ ａｄ ｖｎ ｎｅ ａ ｃ ｖ ． ｕ ｏ ｓ ｈ ａ ｒ ｉ ｎ ａ ｎ ｉ ｅ ｔ ｙ ｎ ｏ ｅ ｇ ｎ ｖ ｎ
Ｒ ｓｌ Ｆｒ ｃ ｖ ， ｄｔｍｎｔｎ ｇ ｗｓ Ｘ ５ 一７０ １一ｇＬ ｗｔ １５Ｘ ５ ａ ｉ ｅｕｓ ｏ ａ ｌ ｉ ｔ ｅ ｒ ｉ ｉ ｒ ｅ ３０ 一ｇＬ ．Ｘ ０２ ， ． １一ｇＬ ｔ ｔ ｃ ｏ ｒ ｈ ｅ ａｏ ａ ｙ ｅ ｎ ａ ． ０ ／ １ ／ ｉ ｈ ６ ０ ／ ｓ ｓ
重蒸水 。
图１ 样品测定流路图
Ｆ ． ｅ ａｃ ｒ ｆ ｆｗ ｔ ｆ ｄｔ ｍｎ ｉ Ｓｈｍ ｔ ｄ ｇａ ｏ ｔｅ ｓｓ ｍ ｒ ｅ ｉ ｔｎ ｉ １ ｇ ｃ ｉ ｉ ｍ ｈ ｌ ｙ ｅ ｏ ｅ ｒ ａｏ ａ ｏ
ａ Ｃ （Ｖ ｓｌｔ ｎ ｂ ａ ｐｅ ｕｉ ； ｈｄｍｉｅ ｏｕｉ ； ｅＩ ） ｕｉ ； ｓｍ ｌ ｓｌｔ ｎ ｃ ｒｏａ ｎ Ｂ ｌｔ ｎ ； ｏ ｏ ： ｏ ｏ ： ｓ ｏ Ｖ： － ａ ｖ ｕｓ Ｐ Ｐ ： ｉａ ｉ ｐ ； ｌ －ｅ ； ｉ ｗ ｙ ｌｅ； ， ２ ｐｒ ｔｌｃ ｍｐ Ｆ ｆ ｗ ｃｌ ＨＶ： ｓ ｘ ａ １ ｅｓ ｔ ｕ ： ｏ ｌ ｈｇ ｏｔ ｅ Ｐ ｖｌ ｇ ； ｉ ｈ ａ ＭＴ： ｌｐ ｅ ｐ ｏｏｕ ｅ Ｃ Ｍ： ｐ ｔｒ Ｗ： ｍｕｔ ｌｒ ｔｔｂ ； ｉｉ ｈ Ｏ ｃｍ ｕｅ； ｏ
阿昔洛韦是 目前国内外广泛使用的具有高度选择 性和较低毒性的抗病毒药物 。它对工ｎ 、 型单纯疤疹病
收稿 日期：０ ７ １１ ２０－ －１ 修回日期 ：０ ７０－８ ０ ２０－４２ 荟金项目： 新疆维吾尔自 治区高等学校基金资助项目（ｏＹＥ Ｕ ０６ ４ Ｎ ． Ｄ ２０１ ） Ｊ ５
超声萃取-流动注射液滴荧光增敏法测定苦荞中芦丁
超声萃取－流动注射液滴荧光增敏法 测定苦荞中芦丁
李 小 梅 ，秦 君 ，翟 红 ，王 玉 珍 ，冯 锋 ，谷 明 ，王 海 要：基于 Ａｌ ３＋ －芦丁形成络合物的荧光增敏 特 性，建 立 了 超 声 萃 取－流 动 注 射 液 滴 荧 光 增 敏 法测定苦荞中芦丁含量的方法。称取２．０００ ０ｇ样品，加入１０ ｍＬ 甲醇并 搅拌 均 匀，超声 振 荡 萃取 １５ ｍｉｎ，以６ ０００ｒ·ｍｉｎ－１转速离心５ ｍｉｎ后移 出 上 层 清 液，重 复 此 操 作 ２ 次 后 合 并 ３ 份 上 清 液， 旋转蒸发除去甲醇 溶 剂，用 ９０％（体 积 分 数）乙 醇 溶 液 溶 解，过 滤，加 入 ０．１ ｍｏｌ·Ｌ－１ Ａｌ（ＮＯ３）３溶 液５μＬ 后定容至１０．０ｍＬ，静置６０～７０ｍｉｎ。流动注射速率保持４～５ｍＬ·ｈ－１，激发和发射波长 分别为２３９，５０７ｎｍ 时测定荧光强度。Ａｌ ３＋ 与芦丁的络合比为１∶２，Ａｌ ３＋ －芦丁络合 物 的 质 量 浓 度 与其荧光强 度 在 ０．１０～５．００ ｍｇ·Ｌ－１ 内 呈 线 性 关 系，检 出 限 （３ｓ）为 ０．０２ ｍｇ·Ｌ－１，回 收 率 在 ８６．０％～１０４％之间，测定值的相对标准偏差（ｎ＝５）在３．１％～６．１％之 间。 方法适合于苦荞中芦丁 的常规检测。
黄酮类化合物的检测方法主要有紫外分光光度 法 和 ［７］ 高效 液 相 色 谱 法 等 ［８－１０］ ，由 于 紫 外 分 光 光 度 法灵敏度较低，高效 液 相 色 谱 法 仪 器 及 测 定 费 用 较 高 、操 作 繁 琐 ，难 以 将 其 普 及 用 于 苦 荞 黄 酮 含 量 的 常 规 检 测。 而 荧 光 法［１１－１２］ 与 流 动 注 射 化 学 发 光 法 ，因 ［１３－１４］ 具 有 前 处 理 操 作 简 便、成 本 低、进 样 量 少 、精 密 度 高 的 特 点 ，近 年 来 在 黄 酮 等 化 合 物 检 测 方 面受到广泛关注。且有研究表明黄酮类化合物能与
偏最小二乘法结合流动注射化学发光法同时测定芦丁和维生素C
偏最小二乘法结合流动注射化学发光法同时测定芦丁和维生素C曾华金;梁会丽;游静;李世君;睢国慧;屈凌波【摘要】在碱性条件下,芦丁和维生素C对鲁米诺-铁氰化钾化学发光体系具有显著的抑制作用,但两者峰值出现的时间存在明显差异.基于这一特点,本文将偏最小二乘法与流动注射化学发光法结合,建立了偏最小二乘法-流动注射化学发光同时检测芦丁和维生素C的新方法.在优化实验条件下,发光强度△I与芦丁浓度和维生素C质量浓度在0.02 ～0.6 mg·L-1和0.1～20 mg·L-1范围内呈线性关系,检出限分别为4.5 μg·mL-1和8.9ng·mL-1(信噪比为3).经实际测定复方芦丁片和人体尿液中芦丁和维生素C的含量表明,该方法具有灵敏度高、分析速度快及操作简便等优点,适合用于药品及生物样品等复杂样品中芦丁和维生素C的测定.【期刊名称】《发光学报》【年(卷),期】2013(034)003【总页数】6页(P369-374)【关键词】偏最小二乘法;流动注射化学发光;芦丁;维生素C【作者】曾华金;梁会丽;游静;李世君;睢国慧;屈凌波【作者单位】郑州大学药学院,河南郑州 450001;郑州大学药学院,河南郑州450001;郑州大学药学院,河南郑州 450001;郑州大学化学分子工程学院,河南郑州450001;郑州大学化学分子工程学院,河南郑州 450001;郑州大学化学分子工程学院,河南郑州 450001;河南工业大学化学化工学院,河南郑州 450001【正文语种】中文【中图分类】O657.31 引言复方芦丁片为卫生部药品标准收载的品种，由芦丁(Rutin，RT)和维生素C(Ascorbic acid，AA)两味药组成，具有降低毛细管的异常通透性和脆性的作用，主要用于防治高血压病的辅助治疗。
对复方芦丁片的质量标准，部颁标准是先经萃取分离，再用比色法和碘量法分别测定芦丁和维生素C的含量，方法繁杂费时[1]。
流动注射化学发光联用技术讲义
实验 2、流动注射-化学发光联用技术用于药片中的盐 酸环丙沙星含量的研究[实验目的] 1 掌握流动注射技术的基本原理以及化学发光分析法的基本原理 2 熟悉流动注射-化学发光分析系统的工作原理及仪器使用方法 3. 掌握流动注射化学发光法测量盐酸药片中盐酸环丙沙星含量的方法。
[实验原理] 化学发光(chemiluminescence)是指某些化学反应中发出可见光的现象。
其发光机理是：反应体系中的某些物质分子，如反应物，中间体或者荧光物质吸收了 反应释放的能量而由基态跃迁至激发态，然后从激发态回到基态，同时将能量以 光辐射的形式释放出来，产生化学发光。
图 1 化学发光发生的反应过程直接化学发光间接化学发光流动注射技术（Flow Injection）：原始的手工操作和现代化的检测仪器共存，严重阻碍了先进检测仪器更好的发挥作用；同时分析过程中的试验处理往往占去 整个分析时间的 90%，这种状况自然不能满足现代分析化学的要求。
流动注射法 是为解决这一矛盾在 70 年代中期出现的溶液处理技术的新观念。
其主要特点包 括：①广泛的适应性：可与多种检测手段联用；②高效率：100-300 样/h，复杂 的分析过程也能达到 40-60 样/h; ③低消耗：10-100µL/测定；④高精度：0.5% 1 %RSD,复杂的在线处理，测定精度可达 1.5%-3%RSD；⑤设备简单、价廉。
流动注射分析装置包括：液体传输设备；注样器；反应器；流通式检测器和 信号读出装置。
液体传输设备主要指蠕动泵；注样器是十六通注样阀；化学发光 检测的反应器和流通式检测器合并为流通式盘管。
盐酸环丙沙星属于第三代喹诺酮类药物，抗菌能力强，临床广泛用于革兰氏 阳性菌和革兰氏阴菌引起的感染，对 内酰胺抗生素、氨基糖苷类以及四环素等 多重耐药菌具有较好的抗菌活性。
测定盐酸环丙沙星的分析方法主要有高效液相 色谱法、毛细管电泳法、分光光度法 、电位法嘲、极谱法等。
RP-HPLC测定人血浆中曲克芦丁的浓度
RP-HPLC测定人血浆中曲克芦丁的浓度张辉;周静;杨俊毅;兰轲;陈卓【期刊名称】《华西药学杂志》【年(卷),期】2004(19)6【摘要】目的建立曲克芦丁的血药浓度测定方法。
方法采用RP -HPLC法 ,以苯甲酸为内标 ,甲醇 -水 -冰乙酸(40∶6 0∶5 )为流动相 ,柱温30℃ ,流速0 .8ml·min-1,检测波长 2 5 4nm。
结果血药浓度在 1～5 0 μg·ml-1间线性关系良好 (r=0 .9996 ) ;最低检测限为5 0ng·ml-1;高、中、低 3种浓度平均回收率为 97.6 1%～ 10 0 .6 8%。
日内和日间RSD分别小于 3.38%和 4 .94 %。
结论所用方法准确、简便、重复性好。
【总页数】2页(P439-440)【关键词】曲克芦丁;人血浆;RP-HPLC测定;血药浓度;RP-HPLC法;RSD;检测限;平均回收率;线性关系;测定方法【作者】张辉;周静;杨俊毅;兰轲;陈卓【作者单位】四川省皮肤病医院;四川大学华西药学院【正文语种】中文【中图分类】R284;R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法测定人血浆中卡马西平浓度 [J], 王丽霞;陈清霞;杨红梅;梁小丽;刘伟忠2.RP－HPLC法同时测定人血浆中劳拉西泮与帕罗西汀浓度 [J], 梁金凤;王思鸿;陈清霞;谢文渊;陈月琪;杨红梅3.RP-HPLC法同时测定人血浆中奥卡西平及利卡西平浓度 [J], 谢朋飞;崔宏娣;徐世希;黄晓亮;陶紫薇;王安发4.RP-HPLC法同时测定人血浆中丙戊酸钠及其代谢产物的浓度 [J], 张玲敏;谢娟;李龙宽;廖荣华;邱钟燕5.RP-HPLC法同时测定人血浆中多种抗癫痫药物浓度 [J], 肖昌琼; 陈锐因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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收稿日期:2009 12 24 修回日期:2010 03 29基金项目:陕西省教育厅专项科研基金(N o.09JK 815,09JK 826)*通讯作者:陈小利,女,博士,副教授,从事化学发光分析和功能配合物的研究.**延安大学2006届毕业生.第27卷第1期V ol.27 N o.1分析科学学报JO U RN AL O F A N AL Y T ICA L SCIEN CE 2011年2月F eb.2011文章编号:1006 6144(2011)01 0119 03流动注射化学发光法测定曲克芦丁陈小利*,马红燕,杜乙磊**(1.延安大学化学与化工学院,陕西延安716000)摘 要:基于曲克芦丁对Lumino l K 2S 2O 8化学发光体系的强烈抑制作用,结合流动注射技术,建立了流动注射化学发光法测定曲克芦丁的新方法。
在优化的实验条件下,该法的线性范围为1.0 10-7~6.7 10-5mol/L,检出限为8.0 10-8mo l/L,对4.010-7mo l/L 曲克芦丁进行11次平行测定,相对标准偏差为1.3%。
该法用于曲克芦丁片剂和注射液中曲克芦丁的含量测定,结果满意。
关键词:鲁米诺;曲克芦丁;流动注射分析;化学发光中图分类号:O657.3 文献标识码:A曲克芦丁(Tr oxerutin)商品名为维脑路通,化学名称是3,4,7 三[O (2 羟乙基) 5羟基黄酮] 芸香苷,有抑制血小板的聚集和防止血栓的形成,对抗5 羟色胺的作用,是临床上治疗闭塞性脑血管病的常用药物[1 2]。
文献报道测定曲克芦丁的方法有紫外分光光度法[3]、薄层色谱法[4]、荧光法[5]、电化学伏安法[6]和高效液相色谱法[7]。
化学发光分析法以其灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单而越来越受到人们的青睐。
我们曾基于在KIO 4 H Cl M nSO 4 吐温 80体系中,不加任何发光试剂,建立了胶束化学发光法测定曲克芦丁的方法[8]。
近期我们研究发现,曲克芦丁对Lum inol K 2S 2O 8化学发光体系有强烈的抑制作用,基于此,结合流动注射技术,建立了流动注射化学发光法测定曲克芦丁含量的新方法。
该法灵敏度高,线性范围宽,而且操作简单快速,节省试剂。
方法用于曲克芦丁片剂和注射液中曲克芦丁的含量测定,结果满意。
图1 流动注射化学发光分析示意图Fig.1 Schematic diagram of the flow injection chemiluminescens sfstem a:Lum inol;b:sample;c:car rier;d:K 2S 2O 8;P:peristaltic pu mp;V:six way valves;W :w as te s olu tion;F:flow cell;D:detector;PC:per sonal computer.1 实验部分1.1 仪器与试剂BPCL 微弱发光测量仪(中国科学院生物物理研究所);兰格蠕动泵(保定兰格恒流泵有限公司);六通注射阀;BPCL数据获取和处理软件,实验数据的采集、处理在Window s XP界面下的BPCL 软件来完成。
整个分析系统如图1所示。
曲克芦丁(中国生化药物检测所)储备液:准确称取7.42mg 曲克芦丁,加入适量水溶解,待溶解完全后,转入100mL棕色容量瓶,摇匀,用水定容,配成1.0 10-4mo l/L 曲克芦丁溶液,用时逐级稀释;NaOH (天津市化学试剂三厂);Luminol 1.0 10-2mo l/L Lum inol(Sig ma 公司)储备液:准确称取1.722g Luminol 和4.0g NaOH ,用水溶解后转入1L 容量瓶中,摇匀,定容,配成1.0 10-2mol/L 溶,放置3d 后使119第1期陈小利等:流动注射化学发光法测定曲克芦丁第27卷用,用0.1mol/L NaOH逐级稀释到所需浓度;K2S2O8标准溶液:0.1mol/L,使用时逐级稀释;所用试剂均为分析纯,水为二次去离子水。
1.2 实验方法按图1所示流路,将各输液管插入相应溶液,开启蠕动泵,将K2S2O8溶液和载流(水)以稳定的流速通过相应的管道进入分析系统,待基线平稳后,通过注射阀分别将水和Lumino l(或样品和Lum inol)混合溶液注入载流水中,与K2S2O8溶液汇流后进入流通池中产生化学发光信号,分别记录空白I0和试样I S,以其差值 I( I=I0-I S)进行分析。
2 结果与讨论2.1 体系流路参数的选择考察了K2S2O8、Lum ino l、样品和载流的不同混合方式对化学发光强度的影响,发现将样品通过载流注入K2S2O8和Lum ino l的混合溶液,其基线不稳,重现性差,且较浪费Luminol溶液。
而将Lumino l和样品溶液注入载流水中,与K2S2O8溶液混合,基线稳定,空白值低,信号值高,重现性好,节省试剂。
故采用图1所示的流路。
实验表明,当输液管内径为0.8mm,采样管50 L,阀池距25cm,流速为10mL/m in 时,发光信号有较好信噪比。
2.2 K2S2O8浓度对化学发光强度的影响K2S2O8是该化学发光体系的氧化剂,其浓度对体系的化学发光强度影响比较大。
在固定NaOH浓度为0.1m ol/L,Luminol浓度为1.0 10-4m ol/L,曲克芦丁浓度为6.7 10-6mo l/L的条件下,考察了K2S2O8的浓度对化学发光强度的影响。
结果表明,随着K2S2O8浓度的增加,发光强度增加,当K2S2O8浓度为5.0 10-3m ol/L时,化学发光分析信号最大。
实验中选用K2S2O8浓度为5.0 10-3mo l/L。
2.3 NaOH浓度对化学发光强度的影响在碱性条件下,曲克芦丁对K2S2O8 Luminol化学发光体系才能产生较强的抑制作用。
在曲克芦丁浓度为6.7 10-6mol/L的条件下,试验了NaOH的浓度对化学发光强度的影响,当NaOH浓度为0.125 mol/L时,化学发光分析信号最大。
实验中选用NaOH浓度为0.125mo l/L。
2.4 Luminol的浓度对化学发光强度的影响Luminol的浓度是影响曲克芦丁测定的重要因素,其值太大时空白与信号的差值太小,反之测定曲克芦丁的灵敏度低。
当曲克芦丁浓度为6.7 10-6m ol/L,试验了Luminol的浓度对化学发光强度的影响。
发现Lumino l浓度增加,发光强度随之增加,基线也随之升高,但当浓度大于1.0 10-4mol/L时,分析信号趋于平稳。
考虑到试剂消耗,实验中选用Lumino l浓度为1.0 10-4mo l/L。
2.5 标准曲线和精密度在选择的最佳条件下,曲克芦丁的浓度在1.0 10-7~6.7 10-5m ol/L范围内时与体系的化学发光强度有良好的线性关系。
为提高测定的精密度和准确度,标准曲线按不同数量级分段绘制,见表1。
方法的相对标准偏差为1.3%(n=11,c= 4.0 10-7m ol/L),按IUPAC规定,计算得曲克芦丁的检出限为8.0 10-8m ol/L。
表1 测定曲克芦丁的标准曲线和回归方程Table1 Linear range and regressive equation of the TroxerutinL inear r ang e(mo l/L)Reg ression equatio n(c=1.3 10-7mo l/L)R21.0 10-7~1.3 10-6 I=9.3c+14.30.99911.3 10-6~1.3 10-5 I=16.7c+91.50.99941.3 10-5~6.7 10-5 I=24.75c+252.420.99922.6 干扰试验试验了曲克芦丁中可能存在的无机离子与有机物对本方法的干扰情况。
结果表明,对6.7 10-6 mol/L的曲克芦丁,以测定相对误差不超过 5%计,以下物质的允许存在量为:1000倍的K+、Na+、Cl-、NO-3,100倍量的Ca2+、CO2-3、SO2-4,10倍的Zn2+等常见无机离子对测定不干扰;100倍的淀粉,50120第1期分析科学学报第27卷倍的柠檬酸,50倍的C2O2-4,20倍的葡萄糖、蔗糖均不干扰测定。
2.7 样品分析取曲克芦丁片剂10片,研细,准确称取曲克芦丁粉末60m g,用适量水溶解,定容于100m L容量瓶,配制成6.0 10-4g/mL的曲克芦丁储备液,逐级稀释配成一定浓度的测试液。
取市售曲克芦丁针剂10支混合,准确移取2mL(相当于一支曲克芦丁针剂60mg)于100m L容量瓶,配成6.0 10-4g/m L的储备液,逐级稀释成一定浓度的测试液。
用标准曲线法对曲克芦丁片剂中曲克芦丁的含量进行测定,结果如表2所示。
表2 曲克芦丁的药物分析结果Table2 Determination results of TroxerutinSample L abeled(mg)T his method(mg)RSD(%)A dded(mg)F ound(mg)Recover y(%) T ablet6062.8 1.7460122.0898.8 Inject ion6059.6 2.4860120.64102参考文献:[1] T he Phar maco po eia Commissio n o f P.R.China(中华人民共和国国家药典委员会).Chinese Phar maco po eia,Vo l.2(中国药典二部)[M].Beijing(北京):Chemistry Indust ry Press(化学工业出版社),2000:190.[2] REN Juan qing(任娟清),M A H ong bin(马鸿宾),ZH A N G Jian(张 鉴).A H andbo ok o f Pr actical Drugs(实用药物手册)[M].Jinan(济南):Shandong T echnolo g y and Science P ublishing H ouse(山东科学技术出版社),1999:939. [3] W A NG Shu xiang(王淑香),SU N Hua(孙 华),DU AN M u Xiang tao(端木祥涛).Chinese P har maceutical Jour nal(中国药学杂志)[J],1991,26(9):538.[4] H E Li yi(何丽一),L I Bao ming(李宝明).Chinese Jour nal o f P harmaceut ical Analysis(药物分析杂志)[J],1987,7(4):251.[5] M A H ong y an(马红燕),ZH A N G She zheng(张社争),CH EN X iao li(陈小利),Q I Guang cai(齐广才),G U O Y ing(郭 瑛).Spectro sco py and Spectr alA naly sis(光谱学与光谱分析)[J],2007,27(8):1622.[6] H E Chun x iang(赫春香),ZH A NG Shu min(张淑敏).Chinese Journal of A nalysis L abo rato ry(分析试验室)[J],2001,30(2):23.[7] W ilhelm K.Kar l Z.J.Chromato g r.[J],1983,272:333.[8] W AN G Y ang(王 洋),FA N Shi hua(范世华).Jo ur nal of A naly tical Science(分析科学学报)[J],2005,21(2):205.[9] CHEN Xiao li(陈小利),ZH A N G Y ao feng(张耀峰).Chinese Jo ur nal of A naly sis Labor ator y(分析试验室)[J],2006,25(7):109.Flow Injection Chemiluminescence Methodfor Determination of TroxerutinCHEN Xiao li*1,M A Hong yan1,DU Yi lei2(School of Chemistr y and Chem ical Engineer ing,Yan an Univ er sity,Yan an716000)Abstract:A flow injection(FI)chemiluminescence metho d for direct deter mination of Tro xerutin w as established based on the ex perimental results that the chemiluminescence reaction of luminol w ith K2S2O8in alkaline medium w as stro ng ly inhibited by T rox er utin.T he linear r ange for T rox er utin is fro m1.0 10-7to6.6 10-5mo l/L w ith a detection limit o f8.0 10-8mo l/L,and the relative standard deviation w as1.3%(Tro xerutin concentration:4.0 10-7m ol/L,n=11).This metho d w as sensitive, simple,r apid and w as successfully applied to the determ ination of T rox erutin in tablets and injection. Keywords:Luminol;Tr ox erutin;Flow injection analysis;Chemiluminescence121。