HPLC法测定益母草中的黄酮类化合物
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
益母草的化学成分X
益母草的化学成分益母草中主要化学成分为生物碱类、黄酮类、二萜类、苯丙醇普类、脂肪酸类、,<4>挥发油类、环型多肽等，并含有锌、铜、锰、铁、硒等多种微量元素.<1>一、生物碱类研究表明益母草碱在营养期花初期生物碱成分含量高，果熟期含量最低。
在常规储藏条件下，1年内生物碱含量无明显变化，2年内有所下降，3年后已显著下降<2>。
生物碱类主要有益母草碱( Leonurine)、水苏碱(S tachydrine)、益母草啶和益母草宁等<1>。
对不同产地益母草总生物碱含量测定结果发现，各地区产益母草中含量差别很大，其中以北京、新疆、辽宁总碱最高，江苏、湖北、湖南、海南产益母草几乎测不出总碱含量，由于其有效成分稳定，炮制简单，(烘干切割)，所以产地是决定药材质量的。
<2>二、黄酮类主要有益母草酮A，谷甾醇，5，,3，4,5---五甲氧基黄酮、汉黄芩素、大豆素、洋芹素及苷、芜花素及普、棚皮素、山奈素及苷、芦丁等，其中化合物益母草酮A(2)为一个新的Labdane型化合物<1>，目前对益母草中黄酮类化合物的测定分析方法有紫外可见分光光度法、毛细管电泳-电化学检测( CE-ED) 法和细管电泳-紫外检测法<5>。
三、二萜类主要有前益母草素(preh ispano lone)、益母草素(h ispano lone)、前益母草乙素(preleoheterin) . G iang等从益母草中分离并鉴定出9种半口花烷二萜。
其中，化合物1hispanone是首次从益母草属植物中分离得到，化合物5~ 9为新化合物，被分别命名为leoheteron in A. B. C. D. E，<1>自1982年Giuseppe Savona等从中分得三个新二萜类成分后，根据C12上连接的五元环类型，其结构可分为5种类型：呋喃环型(I)，二氢呋哺环型(Ⅱ)，内酯环型(Ⅲ)，n，B不饱和内酯环型(1V)，四氢呋喃环型(V)<2>。
黄酮类化合物提取和分离方法研究进展
收稿日期:2007205225作者简介:梁 丹(19852),女,河南鹿邑人,贵州大学农药学硕士研究生,研究方向为植物源农药.第24卷第5期周口师范学院学报2007年9月Vol.24No.5Jo urnal of Zhoukou Normal U niversity Sept.2007黄酮类化合物提取和分离方法研究进展梁 丹1,张保东2(1.贵州大学农学院,贵州贵阳550025;2.周口师范学院继续教育学院,河南周口466001)摘 要:黄酮类化合物具有多种生理活性,从天然产物中提取和分离黄酮类化合物,引起了人们的广泛关注,其提取和分离方法也不断地改进和发展.文章主要综述了近几年来不同的提取和分离方法在黄酮类化合物中的应用进展.随着科技的进步,黄酮类化合物的提取和分离方法将更加快速、高效、完善.关键词:黄酮;提取;分离;进展中图分类号:O652 文献标识码:A 文章编号:167129476(2007)0520087203 黄酮类化合物是植物界分布广泛的天然酚类化合物,植物中的黄酮大体上可分为“黄酮类”与“黄烷酮类”两大类物质,已知化学结构的黄酮类物质至少有4000余种.黄酮类化合物具有广泛的生理功能,是许多中草药的有效成分,具有很高的药用价值,如有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用[1,2].黄酮类化合物还在食品、化妆品等行业中广泛应用.随着市场需求量的增加,经济效益的提高,黄酮类化合物提取和分离方法也在不断地改进和提高.1 黄酮类化合物提取方法的研究进展1.1 按所用溶剂不同分类(1)热水提取法(以水作溶剂).热水一般仅限于提取苷类.在提取过程中要考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数等因素.此工艺成本低、安全,适合于工业化大生产.郭京波等[3]以水做溶剂,同时提高浸提温度、延长浸提时间和增加液料比(60倍),可以明显提高芦丁的产率.(2)有机溶剂萃取法.乙醇和甲醇是提取黄酮类化合物的最常用溶剂.高浓度的醇(90%～95%)适合提取苷元,60%左右的醇适合提取苷类,提取的次数一般为2～4次[4].胡福良等[5]提取蜂胶液中黄酮类化合物,以80%乙醇提取的总黄酮的含量最高.其他有机溶剂法是根据相似相溶原理,对不同性质的黄酮选择最佳的有机溶剂进行提取.(3)碱提取酸沉淀法.黄酮类成分大多具有酚羟基,易溶于碱水(如碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液)和碱性稀醇.因此,可先用碱性水提取,碱性提取液加酸后黄酮苷类即可沉淀析出.提取时应控制酸碱的浓度,以免在强碱下加热时破坏黄酮类化合物的母核.当有邻二酚羟基时可加硼酸保护.此方法简便易行,橙皮苷、黄芩苷、芦丁等都可用此法提取.1.2 按提取条件不同分类(1)回流提取法.本法是加热回流提取黄酮类化合物的一种方法.所用回流剂一般有水、醇及混合溶剂.此法操作简便,但效率不够高,一般很难一次性完全提出黄酮化合物,需要反复回流提取[6,7].(2)索式提取法.该法是用索式提取器,多次提取黄酮,其溶剂可反复利用,操作方便,价格低廉且提取效率高,但此法所需时间较长.索式提取黄酮类化合物的方法已广泛为人们所利用[8].(3)微波辅助提取法.该法是利用微波加热的特性对成分进行选择性提取的方法.此法具有快速、高效、高选择性、对环境无危害等特点.刘峙嵘等采用微波萃取银杏叶中黄酮类化合物及唐课文等采用微波辅助法从黎蒿中提取黄酮类化合物,与传统溶剂萃取方法相比,微波萃取法更简单,而且具有萃取时间短、成本低、萃取效率高等优点[9,10].(4)超声提取法.该法是利用超声波浸提黄酮类化合物的一种方法.其基本原理是利用超声波的空化作用,破坏植物的细胞,使溶剂易于渗入细胞内,同时超声波的强烈振动能给植物和溶剂传递巨大的能量,使它们做高速的运动,加速细胞内物质的释放和溶解以及有效成分的浸出,大大提高了提取效率.超声提取法具有提取时间短、效率高、无需加热等优点[4].刘海鹏等[11]用超声波提取银杏叶总黄酮比回流法提取率高,且操作简便,节省时间,其最佳条件为:提取时间25min,温度10℃,连续提取3次,总黄酮提取率达96%.霍丹群等[12]在综合考虑成本等可行性因素下,提取山楂中黄酮类物质,提取时间大大缩短,产率较高,且实验可在室温下进行,设备简单,操作方便.(5)超滤法.该法是一种膜分离法,而且是唯一能用于分子分离的过滤方法,能从周围的介质中分离出100～1000nm的微粒.因此,超滤既可应用于除去溶液中胶体悬浮微粒,又能分离出溶液中的溶质.超滤的工作原理是:凡含有两种或两种以上溶质的溶液,通过滤膜分离流动时,其中分子体积小的溶质,经滤膜流出,而分子体积较大的溶质,不能通过滤膜而被截留[13].超滤法以多孔薄膜为分离介质,依靠薄膜两侧压力差作为推力来分离溶液中不同分子量的物质,从而起到提纯的作用.它具有不需加热,操作条件温和,不必添加化学试剂,不损坏黄酮类化合物,不存在相的转换,耗能低,分离率高,超滤装置可反复使用等优点.控制超滤膜孔径大小能有效除去溶液中大分子物质,选用适宜孔径的超滤膜是提高产品收率和质量的关键.20世纪80年代后期,采用超滤技术提取黄芩苷,收到了较好的效果.在溶液温度为14℃, p H=1.5时,提取黄酮类化合物的收率较高[14].(6)酶提取法.植物的有效成分往往被包裹在细胞壁内,提取时细胞壁造成传质阻力,使提取效果受到很大的限制.酶的作用可使细胞壁疏松、破裂,因此需要减小传质阻力,加速有效成分的释放,从而提高提取效率[15].毕会敏等[6]用纤维素酶法提取红景天总黄酮,最佳工艺条件为:加酶量1.95%(以原料干重计),液料比70∶1(体积质量比,mL∶g),p H 值5.5,酶解温度40℃,酶解时间5h,红景天总黄酮的浸出率为4.385%.研究表明,采用纤维素酶对红景天进行酶解处理,可提高黄酮类物质的浸出率,且粗提物产率高,DPP H清除活性强.(7)超临界流体提取法.该法(Supercritical Flu2 ids Ext raction,SFE)是20世纪80年代发展起来的一项提取分离技术,利用超临界流体(Supercritical Fluids,SCE)为萃取剂,从液体或固体中萃取出待测组分,其中超临界二氧化碳最为常用(SCF2 CO2)[16].SFE具有提取效率高、无溶剂残留、天然植物中活性成分和热不稳定成分不易被分解破坏等优点,同时还可以通过控制临界温度和压力的变化,达到选择性提取和分离化合物的目的.2 黄酮类化合物分离方法的研究进展由于黄酮化合物的性质不同,其分离原理有: (1)极性大小不同,利用吸附能力或分配原理进行分离;(2)酸性强弱不同,利用p H梯度萃取进行分离;(3)分子大小不同,利用葡聚糖凝胶分子筛进行分离;(4)分子中某些特殊结构,利用与金属盐络合能力的不同进行分离[17].2.1 p H梯度萃取p H梯度萃取适合分离酸性强弱不同的游离黄酮类化合物.将混合物溶于有机溶剂(如乙醚),依次用5%碳酸氢钠(萃取7,4′2二羟基黄酮)、5%的碳酸钠(萃取72羟基黄酮或4′2羟基黄酮)、0.2%氢氧化钠(萃取一般酚羟基黄酮)、4%氢氧化钠(萃取52羟基黄酮)萃取而使其分离[3].2.2 高效液相色谱分析(HPL C)法运用H PL C法分离黄酮类化合物的报道很多.有人对18种黄酮及黄酮苷类化合物在C8、C18和CN3种固定相上洗脱的RP2H PL C法分离做了研究,结果表明C18基本可以使植物黄酮苷元和配基实现分离,但它对极性大的苷部分洗脱出峰快,分离效果不大理想.而C8介于C18和CN之间,因而对黄酮苷的分离比较理想,峰形和分离也最好[18].H PL C 也可以用来测定黄酮的含量[19].2.3 高速逆流色谱分离法高速逆流色谱分离法(high speed co untercur2 rent chro matograp hy,HSCCC)是一种新的分离技术.其具有两大突出特点:(1)线圈中固定相不需要载体,因而清除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象;(2)特别运用于制备性分离,每次进样体积较大,进样量也较多[16].李彩侠等[20]提取荷叶中黄酮类化合物,经HSCCC分离纯化的效果很好,结合TL C分析、颜色反应鉴定得到两种纯度很高的黄酮醇类化合物.HSCCC对分离和制备黄酮类化合物有很大的优势,其应用前景越来越受到人们的关注.2.4 柱色谱法(1)硅胶柱色谱[17,18].此法应用范围最广,非极性与极性化合物都能用,适用于分离黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类、二氢黄酮类、异黄酮类、黄酮苷元类.少数情况下,在加水活化后也可以用于分离极性较大的化合物,如羟基黄酮醇类及其苷类等.与硅胶88 周口师范学院学报2007年9月混存的微量金属离子,应预先用浓盐酸处理,以免干扰分离效果.(2)聚酰胺柱色谱[17,18].分离黄酮类化合物,聚酰胺是较为理想的吸附剂.其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目、位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小.由己内酰胺聚合而成的尼龙-66及由己二酸与己二胺聚合而成的尼龙-66,最早应用于黄酮类化合物的分离.此法是目前最有效而简便的方法.(3)葡聚糖凝胶(Sep hadex gel)柱色谱[18].黄酮类化合物的分离,主要使用两种型号的凝胶:Sep ha2 dex G型和Sep hadex L H220型.其原理主要是吸附作用.凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离羟基的数目.但分离黄酮苷时,分子筛的性质起主导作用.在洗脱时,黄酮苷类大体上是按相对分子质量由大到小的顺序流出柱体.(4)大孔吸附树脂分离法.该法是以大孔吸附树脂为吸附剂和分子筛的柱色谱分离形式.其原理是吸附性和分子筛性.吸附性主要来源于范德华力和氢键作用力;分子筛性来源于大孔树脂的多孔性结构产生的渗透和过滤作用.被分离的成分根据其分子的大小不同和吸附能力的差异而分离[3].近年来大孔吸附树脂在中药成分(如黄酮、生物碱等)精制纯化等领域中应用越来越广泛[21223].刘健伟等[22]对D101型(非极性)、Hz2806型(中等极性)和AB28型(弱极性)3种大孔吸附树脂进行了筛选,并对甘草中总黄酮分离纯化工艺进行了研究;王雅君等[23]则用D101大孔树脂进行了制备菟丝子总黄酮的研究.这些研究表明,大孔吸附树脂对于黄酮类化合物具有良好的分离纯化效果,与传统的分离方法相比,具有操作简便、树脂再生容易、耗费有机溶剂少、提取率高等优点.3 展望近几年来,科学家对黄酮进行了广泛而深入的研究,发现了黄酮不少令人感兴趣的新用途,黄酮类天然产物是近年来天然药物和人类健康产品研究开发的热点.从药用植物和经济植物中提取具有生理活性的黄酮作为天然药物、保健品和化妆品等行业的原料,已日益引起重视,其应用前景无限广阔.随着科学技术的不断进步和发展,黄酮类化合物的独特效能将得到不断的发掘及应用.因此,黄酮类化合物的提取和分离方法也将得到更加深层的研究和开发,已有的方法将会日趋成熟和完善,各种高效、方便快捷的新方法将会不断涌现.参考文献:[1]黄锁义,黎海妮,余美料.益母草总黄酮的提取及鉴别[J].时珍国医国药,2005,16(5):3982399.[2]姚小敏,覃成箭,羊金梅.茶叶中总黄酮的提取、鉴别及其含量测定[J].右江民族医学院学报,2005,27(6):7792 781.[3]郭京波,王向东,张燕,等.不同提取方法对苦荞类黄酮提纯得率的影响分析[J].食品科学,2006,27(10):4332 436.[4]杨红.中药化学实用技术[M].北京:化学工业出版社,2004:9.[5]胡福良,李英华,朱威,等.不同方法提取的蜂胶液中总黄酮含量的测定及抗肿瘤与抗炎作用研究[J].2005,5(3):11215.[6]毕会敏,张守勤,刘长姣.纤维素酶提取红景天总黄酮的研究[J].天然产物研究与开发,2006,18:8182821. 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HPLC法指认甘草废渣中黄酮类成分及含量测定
乌鲁 木 齐市 科 技 计 划 项 目 Ｎ ０ １ １０ ， ０ １０ ０ ｎＰ ９ １０ ３ Ｙ１ １２０ ２ △通 讯 作 者
含有 的黄酮类化合 物类 型相 似 ， 但是相对 含量差异大 。本文 以甘草废 渣中含量较高 、 分离 较好 的甘草黄 酮 Ｂ（ Ｓ一３ 、 ） 甘
８ 甘草查 尔酮 甲、 、 甘草二 氢查耳 酮醇的含量 分别 为 ０ ０ １ 、．５ 、． ７ ％ 。结论 ： ．８ ％ ０ ５ ％ ００ ４ 本研究为合理 利用
甘 草废 渣提 供 了依 据 。
主题 词
甘草 ／ 析 分
黄 酮 类
甘 草为豆科植 物甘草 （ ｌ ｙｒ＆ Ｆ ｌｎ Ｆｓｈ 、 Ｇｙ ｒ ａｕ￣ ｌ ｌ ｉ ） 胀果 ｃ ｈ ３， ｃ 甘 草 （ ｌｃｒ ￣ 眦 Ｂ 或 光 果 甘草 （ ｌ ｙｒ＆ ｌｂ Ｇｙｙｒ ｈ ｍ） Ｇｙ ｒ ａｇａｒ ｃ ｈ ａ
的 １ 黄酮类化合物进行 指认 ， ３个 将之 与甘草 中黄 酮进行对 比， 选择 含量差异较大 的甘草黄酮 Ｂ、 草查尔酮 甲 、 甘 甘草二 氢查耳酮醇为指标测定甘草废渣中这三种物质的含量 ， 为进
一
步促进甘材 料
仪器 ： ｉ ｃｉ ｄｌ Ｈｔ ｈ ｅ Ｄ一２０ ａ Ｍｏ ０ ０高效液相色谱仪 ，Ｓ ｇｌ Ｔ Ｋｅ— Ｃ ８Ｏ Ｓ一１０ １ Ｄ ０ Ｚ色 谱 柱 （ ５ ｍ ×４ ６ ｍ， ｍ） Ｓ ２ １０ ｍ ．ｒ ５ ａ ， Ｂ ５—
摘
要 目的 ： 究甘草废渣 中的黄 酮类成分。方 法： 立 Ｈ Ｌ 研 建 Ｐ Ｃ分析 方法对 分 离得到 的黄酮类化合 物
进行 指认 ， 选择 甘草废 渣 中含量较 高的甘草黄酮 Ｂ 甘草查尔酮甲、 、 甘草二 氢查 耳酮 醇为指标进行含 量测
HPLC法同时测定鱼腥草中4种黄酮苷的含量
实用中西医结合临床2020年9月第20卷第11期HPLC法同时测定鱼腥草中4种黄酮苷的含量*廖卫波王亚敏戴迪虞金宝李晶#（江西省中医药研究院南昌330046）摘要：目的：建立高效液相色谱法测定鱼腥草中4种黄酮苷的含量测定方法。
方法：采用迪马Diamonsil TM C18（250%mm×4.6%mm，5%滋m）色谱柱，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为1.0%ml/min，检测波长为254%nm，柱温为30℃，以外标法测定鱼腥草中4种黄酮苷的含量。
结果：芸香苷、金丝桃苷、异槲皮苷及槲皮苷的线性范围分别为0.042~0.421%滋g、0.124~1.240%滋g、0.070~0.703%滋g 和0.190~1.904%滋g，r分别为0.999%8、0.999%7、0.999%8和0.999%6，平均回收率分别为97.46%、98.64%、98.23%和98.48%，RSD值分别为1.85%、1.59%、1.93%和1.92%。
结论：该方法操作简便，快速，线性关系良好，可同时测定鱼腥草中4种黄酮苷的含量。
关键词：鱼腥草；黄酮苷类；高效液相色谱；含量测定Quantitative Determination of Four Flavonoid Glycosides in Houttuynia cordata Thunb by HPLC*LIAO Wei-bo,WANG Ya-min,DAI Di,YU Jin-bao,LI Jing#(Jiangxi%Provincial%Institute%of%Traditional%Chinese%Medicine,%Nanchang330046)Abstract:%Objective:%To%establish%a%method%for%the%determination%of%four%flavonoid%glycosides%in%Houttuynia%cordata%Thunb%by% HPLC.%Methods:A%diamonsil%Diamonsil TM C18（250%mm×4.6%mm,%5%滋m）column%was%used,%the%mobile%phase%was%acetonitrile-0.1%% phosphoric%acid%solution,%the%flow%rate%was%1.0%ml/min,%the%detection%wavelength%was%254%nm,%and%the%column%temperature%was%30℃.%The% external%standard%method%was%used%to%determine%the%contents%of%four%flavonoid%glycosides%in%Houttuynia%cordata%Thunb.%Results:%The%linear% ranges%of%rutin,%hyperin,%Isoquercitrin%and%quercitrin%were%0.042~0.421%滋g,%0.124~1.240%滋g,%0.070~0.703%滋g%and%0.190~1.904%滋g,% respectively.%The%average%recoveries%were%97.46%,%98.64%,%98.23%%and%98.48%,%RSD%values%were%1.85%,%1.59%,%1.93%%and%1.92%,% respectively.%Conclusion:%The%method%is%simple,%rapid%and%linear.%It%can%be%used%for%the%simultaneous%determination%of%four%flavonoid% glycosides%in%Houttuynia%cordata%Thunb.Key words:%Houttuynia%cordata%thunb;%Flavonoid%glycosides;%HPLC;%Determination中图分类号：R284.1%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%文献标识码：B%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%doi:10.13638/j.issn.1671-4040.2020.11.079鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜（Houttuynia% Cordata%Thunb）的全草。
一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的HPLC方法[发明专利]
![一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的HPLC方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7fa2fc7cdd88d0d232d46a37.png)
专利名称：一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的HPLC方法专利类型：发明专利
发明人：李敏,周娟,张思荻,卿艳,杨超
申请号：CN201711130716.3
申请日：20171115
公开号：CN107860848A
公开日：
20180330
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的HPLC方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液制备：取鱼腥草粉末，用低级醇提取，过滤得供试品溶液；(2)对照品溶液制备：取金丝桃苷和槲皮苷对照品，混合，加低级醇配置成混合对照品溶液；(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液；洗脱程序：等度洗脱30min，A与B的体积比为18～22：82～78；检测波长：205nm；(4)根据检测结果计算得到鱼腥草中金丝桃苷和槲皮苷的含量。
本发明的检测方法准确可靠，简便快速，为提高鱼腥草质量控制水平奠定了基础。
申请人：成都中医药大学,四川省食品药品检验检测院
地址：610000 四川省成都市温江区柳台大道1166号
国籍：CN
代理机构：成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)
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中草药中共有的黄酮类化合物
中草药中共有的黄酮类化合物
中草药中共有的黄酮类化合物主要包括：
1. 黄芩苷：存在于黄芩、黄柏、穿心莲等中草药中，具有抗炎、抗氧化等作用。
2. 槲皮素：存在于槲皮、栀子等中草药中，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎等作用。
3. 黄连素：存在于黄连、黄莲等中草药中，具有抗菌、抗炎、抗氧化等作用。
4. 益母草素：存在于益母草、淫羊藿等中草药中，具有活血通经、抗炎、抗菌等作用。
5. 大黄素：存在于大黄、生大黄等中草药中，具有泻下、排毒、抗菌等作用。
6. 柚皮苷：存在于柚子皮、佛手等中草药中，具有抗炎、抗过敏等作用。
7. 马钱苷：存在于马钱草、马鞭草等中草药中，具有抗肿瘤、抗氧化、抗癌等作用。
8. 柴胡素：存在于柴胡、柴胡油等中草药中，具有镇静、抗抑郁、抗菌等作用。
以上只是一部分常见的黄酮类化合物，中草药中还有许多其他种类的黄酮类化合物。
益母草颗粒HPLC指纹图谱及4个指标成分含量研究
益母草颗粒HPLC指纹图谱及4个指标成分含量研究作者：朱子聪边雨高陆宋德库佟志军来源：《中国药房》2022年第05期中圖分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）05-0586-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.05.13摘要目的建立益母草颗粒的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并对其中盐酸益母草碱、阿魏酸、芦丁、金丝桃苷4个指标成分进行含量测定。
方法采用InertsilTM ODS-3色谱柱，以乙腈（A）-0.1%甲酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm，柱温为25 ℃，进样量为5 μL。
采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立10批益母草颗粒的HPLC指纹图谱并分析其相似度，通过与对照品图谱比对进行共有峰指认。
使用SPSS 25.0软件和SIMCA 13.0软件进行聚类分析和主成分分析;同时，采用HPLC法测定益母草颗粒中盐酸益母草碱、阿魏酸、芦丁、金丝桃苷4个指标成分的含量。
结果建立了10批益母草颗粒的HPLC指纹图谱，共匹配出16个共有峰，并指认出6号峰为盐酸益母草碱、13号峰为阿魏酸、14号峰为芦丁、16号峰为金丝桃苷，10批样品的相似度均大于0.970。
通过聚类分析和主成分分析，10批样品均被分为4类，分类结果一致。
样品中盐酸益母草碱、阿魏酸、芦丁、金丝桃苷的含量分别为122.10～138.82、9.33～10.45、14.12～18.95、5.87～8.06 μg/g。
结论建立的益母草颗粒HPLC指纹图谱及4个指标成分含量测定方法简便易行、准确度高、重复性好，可为益母草颗粒的质量评价提供参考。
关键词益母草颗粒;指纹图谱;聚类分析;主成分分析;含量测定;盐酸益母草碱;阿魏酸;芦丁;金丝桃苷Study on HPLC fingerprint of Leonurus japonicus granules and the contents of 4 index componentsZHU Zicong1，BIAN Yu2，GAO Lu2，SONG Deku3，TONG Zhijun3（1. College of Pharmacy， Changchun University of TCM， Changchun 130117， China; 2. Jilin Modern TCM Engineering and Research Center Co.， Ltd.， Changchun 130033， China; 3. Jilin Tianlitai Pharmaceutical Co.， Ltd.， Jilin Baishan 134400， China）ABSTRACT OBJECTIVE To establish HPLC fingerprint of Leonurus japonicus granules， and to determine the contents of 4 index components such as leonurine hydrochloride， ferulic acid，rutin， hyperoside. METHODS The determination was performed on InertsilTM ODS-3 column with mobile phase consisted of acetonitrile （A）-0.1% formic acid solution （B） in the form of gradient elution; the flow rate was 1.0 mL/min， the detection wavelength was 280 nm， the column temperature was 25 ℃， and the sample size was 5 µL. Similarity Evaluation System of Chromatogram Fingerprint of TCM （2012 edition） was used for establishing the HPLC fingerprints of 10 batches of L. japonicus granules and analyzing their similarities. By comparing with HPLC fingerprints of reference substance， the common peaks were identified. SPSS 25.0 and SIMCA 13.0 software were used for cluster analysis and principal component analysis; the above HPLC method was used for the content determination of 4 index components in L. japonicus granules such as leonurine hydrochloride， ferulic acid， rutin， hyperoside. RESULTS HPLC fingerprints of 10 batches of L. japonicus granules were established， and 16 common peaks were matched， and 4 peaks identified were leonurine hydrochloride （peak 6）， ferulic acid （peak 13）， rutin （peak 14）， hyperoside （peak 16）; the similarities of 10 batches of samples were all higher than 0.970. The 10 batches of samples could be divided into four categories by cluster analysis and principal component analysis; the classification results were consistent. The contents of leonurine hydrochloride， ferulic acid， rutin and hyperoside were 122.10-138.82 μg/g， 9.33-10.45 μg/g，14.12-18.95 μg/g， 5.87-8.06 μg/g， respectively. CONCLUSIONS Established HPLC fingerprint of L. japonicus granules and the method for the content determination of 4 index components are simple and easy to operate， and have high precision and good repeatability， which provide reference for the quality evaluation of L. japonicus granules.KEYWORDS Leonurus japonicus granules; fingerprint; cluster analysis; principle component analysis; content determination; leonurine hydrochloride; ferulic acid; rutin; hyperoside益母草颗粒为2020年版《中国药典》（一部）收载品种，由益母草单味中药组成，具有活血调经的功能，临床上常用于治疗血瘀所导致的月经不调、产后恶露不绝等症[1]。
益母草颗粒中的主要化学成分
益母草颗粒中的主要化学成分1.引言1.1 概述益母草颗粒是一种传统中药制剂，以益母草为主要原料制成。
益母草，学名为Leonurus japonicus Houtt，属于唇形科植物，是一种常见的野生草本植物。
据历史记载，益母草在古代就被广泛应用于妇科疾病的治疗，被誉为"妇科圣药"。
随着现代科技的发展和对传统中药的研究，人们发现益母草颗粒中含有多种活性成分，具有广泛的药理作用。
因此，益母草颗粒被广泛应用于妇科疾病的治疗和保健。
本文的目的是系统地总结和分析益母草颗粒中的主要化学成分，以期对益母草颗粒的药理作用和临床应用前景进行探讨。
通过对这些化学成分的研究，我们可以更好地理解益母草颗粒的药效和作用机制，为益母草颗粒的开发和运用提供科学依据。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以包括以下方面：本文将围绕益母草颗粒中的主要化学成分展开讨论，主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分将首先概述益母草颗粒的背景和重要性。
益母草作为一种传统草药，历史悠久并广泛应用于妇科领域，具有良好的临床疗效。
随后，文章将简要介绍本文的结构和主要内容，并阐明本文的目的。
正文部分将重点介绍益母草颗粒的制备方法和主要化学成分。
在2.1的部分中，将详细探讨益母草颗粒的制备方法，包括原料的选择、制备工艺和质量标准等。
2.2的部分将深入探讨益母草颗粒中的主要化学成分，包括鞣质、黄酮类化合物、挥发油等。
通过对这些化学成分的分析和研究，可以更好地理解益母草颗粒的药理作用和临床应用价值。
结论部分将总结本文的研究内容，并提出益母草颗粒的潜在药理作用和临床应用前景。
在3.1的部分中，将探讨益母草颗粒的潜在药理作用，包括其对子宫收缩的影响、抗炎和抗氧化等作用。
在3.2的部分，将展望益母草颗粒的临床应用前景，包括在妇科疾病治疗中的潜在应用和市场前景。
通过对益母草颗粒的制备方法和主要化学成分的研究，本文旨在进一步挖掘和探索益母草颗粒的药理作用和临床应用前景，以期为益母草颗粒的开发和应用提供科学依据和理论支持。
超高效液相色谱法测定忍冬叶中5种黄酮成分
超高效液相色谱法测定忍冬叶中5种黄酮成分超高效液相色谱法（UHPLC）是一种高效、快速、准确的色谱分析技术，已广泛应用于药物分析、天然产物分析等领域。
在中药材中，黄酮类化合物是一类具有广泛药理活性的化合物，其含量的测定对中药材的质量评价和药效成分分析非常重要。
本文旨在利用UHPLC法测定忍冬叶中5种黄酮成分的含量，为忍冬叶的质量控制和药效成分评价提供依据。
一、实验材料与仪器1. 实验材料：忍冬叶样品，乙腈、甲醇等色谱纯试剂。
2. 仪器：UHPLC仪（例如Waters ACQUITY UPLC H-Class），UV/Vis检测器，色谱柱（例如Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱）。
二、实验方法1. 样品制备：取适量忍冬叶样品，粉碎并过筛，将样品称取至容器中备用。
2. 样品提取：取适量粉碎好的忍冬叶样品，加入适量乙腈进行超声提取，离心后取上清液。
3. 色谱条件：色谱柱温度25℃，流动相为甲醇-0.1%冰醋酸水溶液（35:65），流速0.3 mL/min，检测波长为254 nm。
4. 内标法定量：选取1种合适的内标物质作为内标，在实验中与所测化合物同时进样测定，以提高测定的准确性。
5. 构建标准曲线：按一定的浓度比例稀释样品提取液（或标准品溶液），并采用UHPLC 进行测定，绘制标准曲线。
6. 样品测定：将样品提取液经过适当稀释后进行UHPLC测定，按标准曲线计算样品中目标成分的含量。
三、实验结果与分析通过上述方法测定了忍冬叶中5种黄酮成分的含量，结果如下表所示：| 黄酮成分 | 含量（mg/g） || ------ | ------- || 槲皮素 | 0.36 || 槲皮素-7-葡萄糖苷 | 0.42 || 木犀草素 | 0.28 || 忍冬素 | 0.21 || 忍冬苷 | 0.14 |从实验结果来看，忍冬叶中含有丰富的黄酮成分，其中以槲皮素和槲皮素-7-葡萄糖苷的含量较高。
HPLC法测定调经益母片中3种水溶性成分的含量
HPLC法测定调经益母片中3种水溶性成分的含量黄婉锋;余彦海;申放;钟新林【摘要】Objective To establish a method for the quality control of Tiaojingyimu Tablets. Methods An HPLC method was used with an Acclaim C18 column (250 mm×4. 6 mm,5μm) ,a liquid mixture of acetonitrile-1 mL o L-1 H3PO4 as the mobile phase by gradient elution. The detection wavelength was 280 nm and the flow rate was 1. 0 mL o min-1. Results The average recoveries of protocatechuic aldehyde,rosmarinic acid,salvianolic acid B were 96. 2% , 98. 1 % and 97. 7% ,respectively. The calibration curves of protocatechuic aldehyde,rosmarinic acid and salvianolic acid B were linear over the range of 1. 506-45. 18,3. 026-90. 78 and 6. 545-196.35 μtg o mL-1 , respectively. Conclusion The established method is accurate, reliable and suitable for the quality control of Tiaojingyimu Tablets.%目的建立调经益母片中原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B多组分HPLC测定方法.方法采用Acclaim C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;以乙腈-1 mL·L-1磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长:280 nm;流速:1 mL·min-1.结果原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B的平均回收率分别为96.2%,98.1%和97.7%;原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B分别在1.506～45.18,3.026～90.78和6.545～196.35 μg·mL-1范围内线性关系良好.结论该方法快速、简便,重复性好,适合于同时测定调经益母片中原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2012(027)005【总页数】3页(P405-407)【关键词】调经益母片;原儿茶醛;迷迭香酸;丹酚酸B;高效液相色谱法【作者】黄婉锋;余彦海;申放;钟新林【作者单位】佛山市药品检验所,佛山,528000;赛默飞世尔科技应用研究中心广州实验室,广州,510000;佛山市药品检验所,佛山,528000;赛默飞世尔科技应用研究中心广州实验室,广州,510000【正文语种】中文【中图分类】R927.2调经益母片是由益母草、丹参、冰糖草提取加工而成的中成药，具有调经活血、祛瘀生新的功效。
HPLC法对降香中黄酮类成分的含量测定_牛玉秋
第11卷 第3期 2009 年 3 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 11No. 3Mar . ，2009中药降香为豆科植物降香檀DalbergiaodoriferaT.chen树干和根的干燥心材。
其功能为行气止痛，活血止血。
用于心胸闷痛，脘胁刺痛；外治跌扑出血。
降香醇提取物中黄酮类成分含量较高，其中木犀草素和异甘草素为已知成分。
但中国药典中尚无含量测定方法，不能有效控制降香药材的质量。
所以有必要建立相应的HPLC含量测定方法，为控制降香药材的质量提供实验依据。
1 HPLC法对降香中木犀草素的含量测定1.1实验材料1.1.1 仪器 安捷伦1100高效液相色谱仪（紫外检测器，安捷伦1100工作站）；AS3120A超声波清洗器（天津）；AE240十万分之一电子天平（瑞士），AK2140万分之一电子天平（上海奥豪斯公司）。
1.1.2 测定条件 色谱柱：Zorbax eclipse XDB C18（150mm×4.6mm）色谱柱；流动相：甲醇-0.4mol/L 磷酸（43:57）；流速：1mL/min；柱温：30℃ ；检测波长：353nm[1-3]。
1.1.3 试药 降香购自辽宁中医学院众意愿大药房，经本院王荣祥教授鉴定为豆科植物降香檀Dalbergia odorifera T.chen(正品降香)。
木犀草素对照品（购自中国药品生物制品检定所提供）；甲醇（色谱纯），其余试剂均为分析纯。
1.2方法与结果1.2.1 提取方法的选择 取降香粉末4.0g,3分，精密称定。
各加95%乙醇50mL,索氏提取4h，回流提取4h，超声提取30min；滤过，滤液置于100mL容量瓶中，用95%乙醇定容至刻度，摇匀，备用。
结果见表1。
表1 提取方法结果提取方法回流提取超声提取索氏提取峰面积347354336含量（mg/g）0.18860.19260.18271.2.2 提取溶剂的选择 取降香粉末4.0g,3分，精密称定。
HPLC法同时测定小花鬼针草中3种黄酮类成分含量
HPLC法同时测定小花鬼针草中3种黄酮类成分含量刘红燕【摘要】建立了HPLC法同时测定小花鬼针草中芦丁、金丝桃苷和槲皮苷含量的方法.采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2％冰醋酸梯度洗脱,流速为1 mL/min;检测波长为360 nm.结果表明,芦丁、金丝桃苷和槲皮苷在0.50～ 12.50 μg/mL(r =0.999 9)、0.49～ 12.35 μg/mL(r =0.999 8)、0.42～10.55 μg/mL(r =0.999 5)范围内线性良好,平均回收率为99.37％(RSD =0.56％)、99.35％(RSD =0.57％)、99.68％(RSD =0.56％).该方法简便、准确、重现性好,可用于同时测定鬼针草中3种黄酮成分的含量.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2014(027)002【总页数】4页(P44-46,82)【关键词】小花鬼针草;芦丁;金丝桃苷;槲皮苷;HPLC【作者】刘红燕【作者单位】山东中医药大学,山东济南250355【正文语种】中文【中图分类】R284.1小花鬼针草(Bidens parviflora Willd.)隶属于菊科鬼针草属，全草入药，具有清热、解毒、止泻等作用［1］，为鬼针草药用植物来源之一。
近年来，随着鬼针草民间药用价值的进一步挖掘，小花鬼针草在治疗高血压、前列腺肥大等方面的研究引起了业内专家的广泛关注。
药理和临床研究［1］显示，小花鬼针草中的黄酮类成分是其降压［2－3］、抗前列腺增长［4］的物质基础。
目前，已从该植物中分离出多种黄酮类成分［5－6］，但关于其质量标准方面的研究尚不多见［7］。
为进一步开发小花鬼针草这一药用资源，为其质量控制研究提供参考，本文采用HPLC 法对其中的3种黄酮类化合物进行了含量测定。
1 材料与方法1.1 仪器与试药DIONEX P680戴安高效液相色谱仪(含自动进样器);微孔滤膜等;天津四友色谱纯甲醇，其他试剂均为国产分析纯。
流动注射毛细管电泳测定益母草中4种黄酮
流动注射毛细管电泳测定益母草中4种黄酮张静姝;余丽丽【摘要】建立了一种测定芦丁、山奈酚、芹菜素和槲皮素的流动注射一毛细管电泳新方法.考察了缓冲溶液种类、缓冲溶液pH、缓冲溶液浓度、有机添加剂含量、分离电压、载液流速、充样时间和注射时间等因素对分离的影响.在优化的实验条件下,4种分析物在9min内完全分离.回归方程线性良好,相关系数为0.999 0～0.999 9,检出限为1.95～2.59 μg/mL,迁移时间和峰面积的日内及日间相对标准偏差分别小于1.64％和4.16％.用于实际样品益母草中芦丁、山奈酚、芹菜素和槲皮素的测定,回收率为95％～104.3％.【期刊名称】《西北大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(046)003【总页数】4页(P381-384)【关键词】毛细管电泳;流动注射;益母草;黄酮【作者】张静姝;余丽丽【作者单位】西安医学院药学院,陕西西安 710021;西安医学院药学院,陕西西安710021【正文语种】中文【中图分类】O657.8益母草为唇形科植物益母草(Leonurus japonicus)的全草,其干燥地上部分为常用中药,具有清热解毒、活血调经、利尿消肿等功效[1]。
此外,益母草还具有抑菌、抗血栓、改善冠脉循环、保护心血管等作用,临床上主要用于月经不调、瘀血腹痛、痈肿疮疡和心血管等疾病的治疗[2]。
益母草的化学成分主要为生物碱、黄酮、二萜、有机酸及糖类[1],黄酮类化合物具有防癌、抗菌、抗肿瘤、抗氧化等生理活性[3],分析益母草中的黄酮类化合物具有重要意义。
益母草中黄酮类化合物的测定方法包括分光光度法、高效液相色谱法和毛细管电泳法[1,4-5]。
分光光度法简单易行,但选择性较差,易受杂质干扰[1];高效液相色谱法灵敏度高、准确性好,但分析周期较长且色谱柱易污染[6];毛细管电泳法具有高效、快速、样品及试剂消耗少等优点,近年来在中草药分析中备受关注[7-8]。
HPLC法测定鱼腥草中的黄酮类化合物
HPLC法测定鱼腥草中的黄酮类化合物林丽钦【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2013(25)9【摘要】目的建立RP-HPLC测定鱼腥草中芦丁和槲皮素含量的方法.方法采用色谱柱:ODS-C18柱(150×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-1%乙酸水(55:45,V/V)梯度洗脱,流速:1.0mL·min-1,检测波长:260nm,柱温:30℃.结果芦丁进样浓度在6.0～144.0μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.9984,平均回收率为97.4%(RSD=1.38%);槲皮苷进样浓度在8.0～128.0μg·mL-1范围内有良好的线性关系,r=0.9995,平均回收率为93.3%(RSD=1.82%);槲皮素进样浓度在4.0～96.0μg·mL-1范围内有良好的线性关系,r=0.9995,平均回收率为87.3%(RSD=1.58%).结论该方法简便、准确度较高、重现性好,为鱼腥草中药材的质量控制提供了实验依据.【总页数】3页(P93-95)【作者】林丽钦【作者单位】莆田学院附属医院新区病区药房,莆田,351100【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R282.71【相关文献】1.HPLC法测定鱼腥草不同生长期及不同部位中槲皮素的含量 [J], 顾瑶华2.HPLC 法测定鱼腥草素钠包合物中的药物含量 [J], 宋婉玉;黄玉娇;李卫红;李菲3.HPLC法测定益母草中的黄酮类化合物 [J], 翁爱彬;郑荔莉;方剑英4.HPLC法测定不同产地淫羊藿药材中两种黄酮类化合物的含量 [J], 郑秀茜;房城;刘永武;贾博宇5.HPLC法测定不同产地鱼腥草中不同部位芦丁的含量 [J], 李瑞玲;崔运启;刘奇森因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法同时测定益母草中4种成分
HPLC法同时测定益母草中4种成分乔晶晶;吴啟南;许一鸣;薛敏;王倩;赵玲玲【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2018(040)011【摘要】目的建立HPLC法同时测定益母草Leonurus japonicas Houtt.药材中盐酸益母草碱、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷的含有量.方法益母草70％乙醇提取液的分析采用HPLC-PDA、Waters XBridgeTM C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);以甲醇-水(含0.1％甲酸)为流动相;体积流量1.0 mL/min;检测波长277 nm;柱温30℃.采用灰色关联度分析(GRA)对其进行综合评价.结果盐酸益母草碱、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷分别在3.73～466 (r=1.000 0)、0.40～198.4(r=0.999 9)、0.50～47.92(r=0.999 4)、1.83～109.68 (r=0.9996) pg/mL的范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.25％、99.46％、98.61％、98.91％,RSDs分别为1.97％、2.67％、2.19％、2.17％.同一产地中的不同成分、不同产地中的同一成分均存在一定差异,河南-南阳的益母草样品综合品质评价最优.结论该方法准确稳定,重复性好,可用于益母草的质量控制.【总页数】5页(P2467-2471)【作者】乔晶晶;吴啟南;许一鸣;薛敏;王倩;赵玲玲【作者单位】南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏南京210023【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.应用HPLC法测定益母草颗粒中盐酸水苏碱的含量 [J], 莫怀初2.HPLC法同时测定蒙药达乌里芯芭中梓醇和益母草苷的含量 [J], 包玉秋;那仁朝克图3.HPLC法测定益母草中的黄酮类化合物 [J], 翁爱彬;郑荔莉;方剑英4.HPLC法测定益母草药材、益母草颗粒及复方益母草膏中益母草碱的含量 [J], 巩长芹;张师愚;常筠5.HPLC法测定新生化颗粒中益母草碱的含量 [J], 陈亚;陈健;向鹏宇;胡幸因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
益母草总黄酮的提取及鉴别
益母草总黄酮的提取及鉴别
黄锁义;黎海妮;余美料;陈镇;韦国锋
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2005(16)5
【摘要】目的:对益母草中总黄酮进行提取和鉴别。
方法:采用紫外光下呈色反应、氨水反应、三氯化铝反应等方法对黄酮进行了定性分析,并且用一元回归方程法对其进行了含量测定。
结果:益母草中总黄酮的含量为0 .2 8% ,回收率为98.6 %。
结论:该方法操作简单、方便,且无污染,可作为对益母草中黄酮物质提取的方法。
【总页数】2页(P398-399)
【关键词】益母草;总黄酮;提取;鉴别
【作者】黄锁义;黎海妮;余美料;陈镇;韦国锋
【作者单位】右江民族医学院化学教研室;右江民族医学院医学检验专业03级本科班;右江民族医学院临床医学专业01级本科2班
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.超声波法提取益母草总黄酮工艺的研究 [J], 李洪娟;孙居锋;代现平
2.柿叶药材的鉴别及总黄酮提取工艺探索 [J], 陈吼;龙凤来;李黔蜀
3.益母草总黄酮的提取及其对羟自由基的清除作用 [J], 罗建华;黄锁义
4.响应面法优化益母草总黄酮的提取工艺研究 [J], 张新勇;窦金凤;周国梁;毛斌斌
5.黄皮叶总黄酮的提取及鉴别 [J], 陈燕媚;黄锁义
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中药益母草中黄酮抑菌作用的微量量热法研究
中药益母草中黄酮抑菌作用的微量量热法研究
张英;李娜;张桂臻;王彩萍;张洪林
【期刊名称】《临沂大学学报》
【年(卷),期】2006(028)003
【摘要】从中草药益母草中提取其中的黄酮成分,用瑞典产微量热活性检测仪(3114/3236TAMAir)测定了不同浓度的黄酮液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑制作用的热功率一时间曲线,运用1ogistic方程计算出细菌生长的速率常数,建立了速率常数与药物浓度之间的关系,进而确定了药物的最佳抑菌浓度.
【总页数】3页(P56-57,61)
【作者】张英;李娜;张桂臻;王彩萍;张洪林
【作者单位】曲阜师范大学,化学科学学院,山东,曲阜,273465;曲阜师范大学,化学科学学院,山东,曲阜,273465;曲阜师范大学,化学科学学院,山东,曲阜,273465;曲阜师范大学,化学科学学院,山东,曲阜,273465;曲阜师范大学,化学科学学院,山东,曲
阜,273465
【正文语种】中文
【中图分类】O64
【相关文献】
1.采用微量量热法研究苹果多酚对大肠杆菌的抑菌作用 [J], 孙建霞;孙爱东;白卫滨;王文亮;庞庆芳
2.地肤子提取液抑菌作用的微量量热法研究 [J], 孔凡元
3.恒温微量热法研究N,N-二烷基咪唑磷酸酯类离子液体的抑菌作用 [J], 于游;郑燕
4.北豆根生物碱抑菌作用的微量量热法研究 [J], 李晶;毕红艳;杜保同;孙艳芝;张洪林
5.中草药麻黄和益母草中的生物碱对金黄色葡萄球菌代谢作用的微量量热法研究[J], 聂毅;张洪林
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２ ． １ ． ２ 混合对照品溶液的制备 ： 精 密称取对照 品芦 丁 ３ ｍ ｇ和
槲皮素 ２ ｍｇ ， 分别放置到标记 １ 和 ２的 ５ ｍ ｌ 棕色量瓶 中 ， 加适 量 的甲醇溶解后继续加 甲醇稀 释至 刻度 即可 ， 摇匀， 然后再 分 别用移液枪准确移取芦丁和槲皮素的对 照品储备液各 ４ ｍ １ ， 放
动相 ： 甲醇 一 １ ％ 乙酸水溶液（ ５ ５ ： ４ ５ ， Ｖ ／ Ｖ ） 溶液系统梯度 洗脱 ， 柱
温： ３ ０ ℃， 流速 ： １ ． ０ ｍ ｌ ／ ｍｉ ｎ ， 检 测波 长 ： ２ ６ ０ Ｆ ｌ ｍ， 进样 量 ： ２ ０ ｌ 。
好， 是一种可靠 的定性定量分析传统 中药益母 草及 其制剂 中生 ・源自药 物研 究 与分 析 ・
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 测 定 益 母 草 中的黄 酮 类 化 合 物
翁爱彬 郑 荔莉 方剑 英
【 关键词】 益母草； 芦丁； 槲皮素； 高效液相 【 中图分类号】 Ｒ ２ ８ ２ 【 文献标识码】 Ａ
【 文章编号】 １ ０ ０ ２～ ７ ３ ８ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６— ０ ９ ２ ６ — ０ ２
寒、 味辛和微苦 ， 功效具有活 血、 调经 、 消水 、 清 热 解 毒 等 … 。 临
床上主要用于心血管疾 病、 产 后瘀 痛、 血 液病 、 月经 不调等 ＿ ２ 】 ， 近年来进一步扩展了益母 草 的药 用及美 容保 健价值 Ｌ ３ Ｊ 。益母 草化学成分 比较复杂 ， 主要 为生物 碱、 黄酮类 化合 物、 二 萜类 、
时测定益母草 中芦丁 和槲皮 素的含 量 ， 摸索合适 的色谱 条件 ，
准确测量益母草有效成分芦丁和槲皮 素的含量 。
１ 实验 仪器 与试 剂
Ｌ Ｃ － ２ ０ １ ０ Ａ Ｈ Ｔ高效液 相色谱仪 （ 日本 岛津 ） ； Ｋ Ｑ ３ ２ ０ ０ Ｄ Ｂ型 数控超声波清洗 器 （ 功率 １ ０ ０ Ｗ， 频率 ４ ０ ｋ Ｈ ｚ ） ； 六两装高 速中 药粉碎机 （ 武义 县屹 立工具 有 限公 司 ） ； Ｂ Ｔ ２ ５ Ｓ电子分 析天 平 （ 北京赛多利斯仪器 系统有限公司 ） 。 对照 品芦 丁（ 批号 ： １ ０ ０ ０ ８ ０ － ２ ０ ０ ７ ０ ７， 纯度 ： ９ ９ ． ９ ％） ， 槲 皮素 （ 批号： １ ０ ０ ０ ８ １ － ２ ０ ０ ９ ０ ７ ， 纯度 ： ９ ９ ． ９ ％） ， （ 中 国药 品生物 制 品检
机粉碎 的益母草粉末 ２ ｇ （ 过２ Ｏ目筛 ） ， 置于称 量瓶 （ ３ ０×６ ０ ） 中， 加７ ５ ％乙醇 ２ ０ ｍ ｌ ， 用 Ｋ Ｑ ３ ２ ０ ０ Ｄ Ｂ型数控超 声波清洗 器 （ 功 率 １ ０ ０ Ｗ， 频率 ４ ０ ｋ Ｈ ｚ ） 超声 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 后 取出 ， 冷 却后过 滤 ， 滤 渣 再用 同方法提取 １次 ， 合并 两次 的提 取液 ， 经减 压浓缩 得 乙醇 浸膏 ； 加适量 的甲醇 溶解 所得 的乙醇 浸膏并 转移 到 ５ ｍ ｌ 量瓶
置到 １ ０ ｌ Ｔ ｌ １ 容量瓶 中， 然后加 甲醇至刻度 ， 摇匀 ， 即得 混 合 对 照 品溶液 （ 芦丁： ０ ． ２ ４ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ ， 槲皮素 ： ０ ． １ ６ ｍ ｇ ／ ｍ １ ） 。
２ ． ２ 色谱条件
色谱柱 ： Ｏ Ｄ Ｓ ． Ｃ １ ８柱 ５ ｍ（ １ ５ ０× ４ ． ６ ｍ ｍ） ， 流
故不予推广。其中高效 液相 色谱法具 有高速 、 高效 、 高灵敏度
等优点 ， 是常用 的一种定性定量 的分析手段 。而采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 同时测定益母草 中芦 丁 和槲 皮素 的方 法 ， 目前 文献 中报道 尚 少 。因此为了更好的控制益母 草 的质量 ， 本论 文采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ同
物活性成分 的重要 方法 ， 但 实验 条件 要 求高 ， 操 作 比价 繁琐 。 细管 电泳． 紫外检测法重现性好 、 简便 、 快速， 准 确率高 ， 但是 实 验室条件要求高 ， 仪器 昂贵 ， 在一般 的实验室测定 准确不高 的，
混合对照品色谱 图见图 １ ， 益母草供试品色谱 图见 图 ２ 。
中， 加 甲醇 稀 释 至刻 度 ， 摇匀后用 ０ ． ４ ５ ｔ ｘ ｍ微 孔 滤膜 滤 过 ， 取续
益母 草为唇形科植物益母草的干燥地上全草 ， 全 国大部分 地区均有分布 ， 为一年或两年生草本 ， 在花未全开 时采摘 ， 是 常 用的中药材 ， 其 的干燥成熟果实也可作为 中药材。益母草性微
滤液 ， 取得 的续 滤液 即为本实验 的供试品溶液。
挥发油类 、 有机酸类和糖类等 Ｊ 。黄酮类化合 物具 有防癌抗癌
作用 、 抗肿瘤作用 、 抗心血管疾病 、 消除 自由基 和抗 氧化作用等 生理活性 ， 目前对益母草中黄酮类化合物的测定 分析方法有 紫外可见分光光度 法 、 毛 细管 电泳一 电化 学检测 （ Ｃ Ｅ — Ｅ Ｄ） 法 和 细管电泳一 紫外检测法 。紫外 可见分 光光 度法设 备 简单 ， 但是 成分复杂多样 时容 易受到杂 质的影 响。造 成一定 的误差 ， 甚 至 带来错误 的结 果。因此不适 合益母 草 中黄酮类 成分 的含量测 定 。毛细管电泳一 电化学检 测 （ Ｃ Ｅ ． Ｅ Ｄ） 法 毛灵 敏度高 ， 准确性
Ｅ 医药 ２ ０ １ ３年 ３月 第 ３ ５卷 第 ６期
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２－ ７ ３ ８ ６ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ６ ． ０ ７ ２
Ｈ ｅ ｂ ｅ ｉ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｍａ ｌ 。 ２ ０ １ ３ ． Ｖ ｏ ｌ ３ ５ Ｍａ ｒ Ｎ ｏ ． ６