胆红素氧化酶法测定血清胆红素的方法学评价(1)

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接（结合）胆红素测定目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法（包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2，5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等）、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。

改良咖啡因（J-G）法：一、实验原理血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素；在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。

咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂，醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。

叠氮钠破坏剩余重氮试剂，终止结合胆红素测定管的偶氮反应。

最后加入碱性酒石酸钠，在碱性条件下，紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素，使最大吸光度由530nm转移到598nm，此时，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计，使测定的灵敏度和特异性增加。

最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。

二、实验方法（一）器材试管，刻度吸管，分光光度计，37℃水浴箱。

（二）试剂1．咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g，苯甲酸钠37.5g，乙二胺四乙酸二钠EDTANa2 0.5g，溶于约500mL 的蒸馏水中，再加入咖啡因25g，搅拌至完全溶解(不可加热)，然后加蒸馏水稀释至1000mL，混匀，过滤后放置棕色试剂瓶中，室温保存可稳定6个月。

2. 5g/L 亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠5.0g，加蒸馏水溶解并稀释至100mL，若发现溶液呈淡黄色时，应丢弃重配。

3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液：对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H20）5.0g，加于约800mL 蒸馏水中，加浓盐酸15mL，待完全溶解后，加蒸馏水至1000mL。

4. 重氮试剂临用前，取5g/L 亚硝酸钠溶液（试剂2）0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液（试剂3）20mL 混合。

5. 5g/L 叠氮钠溶液：叠氮钠0.5g，用蒸馏水溶解并稀释至100mL。

胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定胆固醇的干扰

胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定胆固醇的干扰汪玄文(江苏省姜堰市张甸中心卫生院,江苏姜堰225527)【摘要】　目的　探讨用胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定胆固醇的干扰。

方法　选择含有不同胆红素血清标本,应用A LBK法、未消除胆红素酶法、消除胆红素酶法3种方法分别进行血清胆固醇浓度测定,用配对t检验及相关、回归分析,比较3法结果差异及相关性。

结果　A LBK法与未消除胆红素酶法、未消除胆红素酶法与消除胆红素酶法,经配对t检验(t= 0.338、0.341,两者P>0.05);相关性良好(r=0.9789、0.9901)。

结论　此方法操作简单,结果可靠,能有效地消除胆红素对酶法测定胆固醇的负干扰。

目前总胆固醇(T C)测定利用T rinder反应,但此方法不能消除胆红素(Bil)的干扰。

因为胆红素在500n m处也有较强的光吸收,这样就掩盖了TC本身的显色反应,从而使测定结果偏低。

我们利用胆红素氧化酶(BOX)胆红素,使之转化成胆绿素,这种预处理能有效地消除胆红素对酶法T C测定的干扰,适合手工及自动分析。

1　材料与方法1.1　试剂　(1)胆固醇酶法测定试剂盒(上海长征公司产品)。

(2)A LBK法测定胆固醇试剂,按《全国临床检验操作规程》(第3版)[1]配制。

(3)胆红素氧化酶(2500U/L),购自卫生部临床检验中心。

(4)黄疸样本来自本院住院和门诊就诊者。

1.2　仪器　HIT ACHI-7600-020全自动生化分析仪。

1.3　方法　(1)A L B K法测定血清T C浓度:按《全国临床检验操作规程》(第3版)[1]方法进行血清T C浓度的测定。

(2)胆红素氧化酶法胆红素消除胆红素酶法T C浓度测定:取黄疸样品50μl,加入酶BOX(2500μ/L)50μl,混合保温90s ec后,取出后在HIT ACHI-7600-020全自动生化分析仪按常规酶法测定,所得结果乘2。

(3)未消除胆红素溶液T C含量按常规酶法测定。

胆红素测定方法

胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解代谢产物，对人体健康有着重要的影响。

因此，准确测定胆红素的水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

在临床实践中，有多种方法可以用来测定胆红素的水平，本文将介绍几种常用的胆红素测定方法。

一、尿胆红素试验。

尿胆红素试验是一种简单、快速的方法，通常用于初步筛查患者是否存在胆红素增高的情况。

该方法适用于常规体检或临床初步诊断，但其准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。

二、血清胆红素测定。

血清胆红素测定是目前临床上常用的一种方法，通过采集患者的血清样本，利用化学方法或光度法测定其中胆红素的浓度。

这种方法准确性较高，可以精确测定胆红素水平，是临床诊断中常用的方法之一。

三、高效液相色谱法。

高效液相色谱法是一种高灵敏度、高分辨率的胆红素测定方法，通过将样本中的胆红素与色谱柱分离，再通过检测器测定其浓度。

该方法准确性高，适用于胆红素水平较低的情况。

四、光谱法。

光谱法是一种通过测定物质在特定波长下的吸光度来测定其浓度的方法。

对于胆红素的测定，可以利用其在特定波长下的吸光度特性来进行测定。

这种方法准确性较高，但需要专业的设备和操作技能。

五、尿胆红素比色法。

尿胆红素比色法是一种通过比色法测定尿液中胆红素的浓度的方法。

该方法简单易行，适用于临床初步筛查，但准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。

综上所述，胆红素的测定方法有多种，每种方法都有其适用的场合和特点。

在临床实践中，应根据实际情况选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。

同时，对于不同方法的操作要求和结果解读也需要进行充分的了解和培训，以避免误判和错误诊断的发生。

希望本文对胆红素测定方法有所帮助。

医学检验主管检验师资格考试复习资料生物化学(7)肝胆疾病的实验室检查

医学检验主管检验师资格考试复习资料生物化学（7）肝胆疾病的实验室检查《考纲要求》1.肝胆生化（1）肝脏的代谢了解（2）肝脏的生物转化功能熟练掌握（3）胆汁酸代谢紊乱与疾病熟练掌握（4）胆红素代谢与黄疸熟练掌握2.肝胆疾病的检查（1）酶学检查（ALT、AST、ALP、GGT、ChE）方法学评价、参考值及临床意义熟练掌握（2）胆红素代谢产物（血浆总胆红素、结合与未结合胆红素，尿胆红素及尿胆原）和胆汁酸测定的方法学评价及临床意义熟练掌握（3）肝纤维化标志物（Ⅲ、Ⅳ型胶原等）的测定及其临床意义熟悉（4）肝昏迷时的生化变化及血氨测定掌握3.肝细胞损伤时的其他有关检查及临床意义（1）蛋白质代谢异常的检查了解（2）糖代谢异常的检查了解（3）脂代谢异常的检查了解（4）各种急、慢性肝病时综合考虑应选择的试验及其临床意义熟练掌握肝是人体重要的代谢器官，对维持机体内外其环境的稳定起着十分重要的作用。

其主要功能有：1.代谢功能，参与糖、脂类、蛋白质、维生素的合成、分解和储存；核酸代谢；激素的生物转化；胆红素和胆酸的代谢。

2.排泄功能，如胆红素、胆酸、药物、某些阴离子染料等的运输和排泄。

3.解毒功能，参与对药物、毒物等化合物的氧化、还原、水解、结合等。

4.凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的清除等。

在正常情况下，肝脏各种功能有条不紊地进行，当肝脏受到各种致病因素侵袭时，其功能状态和组织结构必然受到影响。

肝的病理状态大致可分为肝细胞损伤，间质反应，胆汁淤积，局限性肝损害及肝血管系统损害五种。

以上病理改变往往合并存在，但有所侧重，从而出现各种肝病的实验室检查特征，导致有关的试验结果异常。

一、肝胆生化（一）肝脏的代谢功能1.糖代谢：肝脏是维持血糖浓度相对稳定的重要器官。

肝脏通过肝糖原的合成分解及糖异生作用维持血糖浓度的恒定。

进食之后自肠道吸收进入门静脉再进入肝脏，肝细胞迅速摄取葡萄糖，并合成肝糖原储存起来。

于是在肝静脉血液中保持着较低的血糖浓度。

KHC3法测定血清总胆红素的方法学评价

（ＴＧ） ≤５．０１ｍｏｌ／Ｉ和血红蛋白（Ｈｂ） ≤１．５ｇ／Ｉ时对ＫＨＣ３法无干扰；ＫＨＣ３法与改良Ｊ — Ｇ法相关性良好；ＫＨＣ３法测定ＴＢＩＬ
参考范围为：１．８４～１５．１０ｍｏｌ／Ｌ。结论ＫＨＣ３法测定ＴＢＩＬ具有准确度高、重复性好、线性范围宽、抗干扰能力强等特点，适
１材料与方法
１．１试剂ＫＨＣ３法ＴＢＩＬ测定试剂盒来自湖南永和阳光公司，改良Ｊ — Ｇ法试剂盒由上海申能一德赛诊断技术有限公司生产。ＴＢＩＩ校准品：Ｃ．Ｆ．Ａ．Ｓ由Ｒｏｃｈｅ公司生产，其含量为８６．５￣ｍｏｌ／Ｉ；１０脂肪乳注射液由广州侨光制药有限公司生产；２５０ｇ／Ｌ的维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）注射液由商丘市哈森有限公司
ＴＢＩＩ进行测定，其中改良Ｊ — Ｇ法是全国医学检验学会推荐的常规测定方法，但该方法易受到脂血和溶血影响且试剂无法长
期稳定。钒酸盐法易对环境造成潜在污染，甚至有报道可影响
及总不精密度（ｃｖＮ）。１．４．２ＫＨＣ３法测定ＴＢＩＬ的回收试验取低浓度血清样本
０．９ｍＩ加入０．１ｍＬ生理盐水混匀后其ＴＢＩＬ浓度为１８．４ｕｍｏｌ／Ｌ作为基线样本。取低浓度血清样本０．９ｍＬ分别加入浓度为８６．５／￣ｍｏｌ／Ｌ、４３．２５ｔｌｍｏｌ／Ｌ、２１．６３ｔＬｍｏｌ／Ｌ的ＴＢＩＬ校准品０．１ｍＩ混匀后作为回收样本。每份回收样本测定两次取均值计算回收率。１．４．３ＫＨＣ３法测定ＴＢＩＬ的线性分析参照ＣＬＳＩ颁布的

胆红素的检测的现实意义

成都中医药大学2011年秋季学期期末考试立题格式论据行文结论总分得分姓名：学号：班级：胆红素检测的前景概况摘要：近年来，健康问题逐渐成为人们最关注的问题之一。

健康保健，健康体检逐渐成为人们生活中不可缺少的一部分。

在这些检查中，也不断地反映出一些情况来。

为了方便找出更有效的各种疾病的诊断、治疗方法，了解胆红素与人体各种疾病的关系便变得势在必行。

而血清胆红素在各种疾病诊断、治疗、及预后工作中的就显得尤为重要了。

血清胆红素浓度的测定在疾病诊断中也扮演着极其重要的角色，无论是肝功检测还是心血管疾病的诊断检测，血清胆红素都可作为一个很有力的参考依据。

于是，提高检测的灵敏度和特异度便可通过分析比较各种检测方法，找出精准度相对较高的检测方法或者寻找到更好的检测方法。

关键字：胆红素;重氮法;化学氧化法;KHC3法正文：胆红素（英文：Bilirubin）是胆色素的一种，它是人胆汁中的主要色素，呈橙黄色，同时也是内源性抗氧化活性的生物还原剂，它是血红蛋白分解代谢的一种产物[1]，即它是体内铁卟啉化合物的主要代谢产物，有毒性，可对大脑和神经系统引起不可逆的损害，但也有抗氧化剂功能，可以抑制亚油酸和磷脂的氧化。

胆红素是临床上判定黄疸的重要依据，也是肝功能的重要指标。

胆红素有游离胆红素和结合胆红素两种形式，结合胆红素不存在分子内氢键，可以直接与重氮试剂结合，生成紫红色偶氮化合物，因此又称直接胆红素，游离胆红素存在分子内氢键[2]，不能直接与重氮试剂结合，必须先用乙醇或尿素破坏氢键，才能与重氮试剂反应，因此又称间接胆红素。

正常人每天产生250-350mg的胆红素，其中70%是衰老红细胞血红蛋白血红素的降解产物，即衰老细胞被单核吞噬细胞系统破坏，释放出血红蛋白，再被分解成珠蛋白和血红素。

胆红素裂解成胆绿素，胆绿素还原成胆红素，即游离胆红素。

肝脏可以有效地摄取血浆游离胆红素，并将其转化成结合胆红素，提高其极性和水溶性，使其易于随胆汁排入肠道。

新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制

本课题为江西省卫生厅科技计划项目作者单位：３３００２９１、江西省肿瘤医院；２、江西省人民医院；３、南昌百特生物技术公司作者简介：袁水斌，主任技师，毕业于上海医科大学医学检验专业。
胆红素氧化酶法特异性好，几乎不受溶血，脂浊等的干扰，但因酶的来源，纯度，稳定性及价格等原因难于推广。钒酸氧化法的钒酸盐对仪器和环境存在潜在的污染，甚至影响豆类作物的生长［１］，经过近三年使用各种化学氧化剂氧化胆红素的实验研究，我们采用多种化学氧化剂相结合，并添加相应的成份成功研制了新型化学氧化法测定总胆红素和结合
试剂Ｒ２：含亚硝酸钠，少量钒酸钠和碳酸钠等。１．２直接（结合）胆红素试剂
试剂Ｒ１：１００ｍｍｏｌ／Ｌ邻苯二甲酸氢钾缓冲液，ｐＨ５．０，聚乙烯吡咯烷酮、ＥＤＴＡ－Ｎａ２和有机防腐剂。
试剂Ｒ２：含亚硝酸钠，少量碳酸钠等。１．３对照试剂１．３．１总胆红素和直接胆红素钒酸氧化法试剂：日本和光公司生产。１．３．２重氮法试剂科华东凌公司生产。１．３．３直接胆红素酶法试剂卫生部上海生物制品研究所。１．４胆红素标准品总胆红素８５．３μｍｏｌ／Ｌ；直接胆红素４３．４μｍｏｌ／Ｌ。Ｒｏｃｈｅ公司产品。批号１７１６８３。１．５维生素Ｃ注射液０．５ｇ／２ｍｌ，上海现代哈森药业有限公司。１．６２０％医用脂肪乳；２５０ｍｌ／瓶，广州白云山侨光制药有限公司。１．７仪器康艺２０全自动生化分析仪；日立７６００全自动生化分析仪
江西医学检验２００７年６月第２５卷第３期
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不同方法的胆红素试剂比较

不同方法的胆红素试剂比较胆红素的测试一直困扰着检验界，目前市场上主要有重氮法、钒酸盐法、氧化法、KHC3法等，请各位就以上几种方法结合临床应用讨论一下他们的优缺点，供大家参考。

中生直接胆红素试剂盒使用说明书Direct Bilirubin Kit（D.Bili）重氮法通用型（液体）本试剂用于测定人血清中直接胆红素的浓度。

测定原理：对氨基苯磺酸+HCl+NaNO2氯化重氮苯磺酸+NaCl血清直接胆红素+氯化重氮苯磺酸偶氮胆红素（红紫色）试剂盒主要成分与浓度：试剂稳定性：原装试剂在2~8℃避光保存，有效期12个月。

工作液在2~8℃可稳定7天，室温下可保存24小时。

样品：新鲜无溶血血清，肝素或EDTA血浆。

操作步骤：波长：546nm（540~560nm）反应温度：37℃比色杯光径：1cm将R1与R2以40:1比例混合，即成工作液。

分别混合均匀，在37℃保温5分钟，分别读取吸光度A（在60分钟内吸光度保持不变）。

计算：直接胆红素浓度（μmol/L或mg/dl）C=[(A样品－A样品空白)－(A试剂－A试剂空白)] ×F*F*=C标准/[(A标准－A标准空白)－(A试剂－A试剂空白)]此F*值为用BM公司cafs.标准或中生直接胆红素标准（另购）定标所测。

参考值：0~5.1μmol/L (0~0.3mg/dl)参考文献：Thomas L (ed) Labor and Diagnose,4a ed.Marb-urg:Die Medizi-nische Verlagsgesellschaft, 1992:235各医院应根据本地区实际情况建立自己的正常值。

线性上限：直接胆红素浓度可达171μmol/L(10mg/dl）注意事项：1. 样品中直接胆红素含量高于171μmol/L （10mg/dl）时，用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。

2.由于胆红素遇光分解为胆绿素，因此采血后请尽快进行测定，如果不能及时测定，血清应避光冷冻保存。

临床检验方法学评价

03
还有一类委员会报告，则是尚未通过一致化过程的文件，编号为R。
04
评价临床方法的文件
美国的国家临床实验室标准委员会（NCCLS）多年来一直致力于制定一系列评价临床方法的文件。 NCCLS是一个全球性、多学科、非营利性的标准化和教育性的团体，旨在促进医疗卫生领域中的标准化进程和应用。它在发展相关的标准和指南时采取了特有的一致化过程（consensus process）。 NCCLS的自愿一致化过程是一个建立正式标准的过程，包括：方案的认可；建立和公开对有关文件的评论；根据使用者的意见修改文件。
EP15-A：精密度和准确度性能的应用核准指南（User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy ;Approved Guideline）。
1
2
方法学评价文件（5）
EP17-P：检测单位使用的质量管理提议指南（Quality Management for Unit – Use Testing; Proposed Guideline）。
02
方法学评价文件（2）
EP10-A：定量实验室方法的初步评价核准指南（Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods; Approved Guideline），提供了用于分析方法和设备操作的初步评价的实验设计和数据分析。
分析方法的选择
我国实验室中使用的分析仪器和试剂，应具有国家药品监督管理局核发的相应文号。
实验室制定的或采用的方法如能满足实验室的预期用途并经过验证，也可以使用。实验室应用自己制定的检测方法的过程应是有计划的活动，应指定足够的、有资格的人员进行。

其他主治系列-临床医学检验【代码：352】-临床检验基础(一)尿液化学检查

其他主治系列-临床医学检验【代码：352】-临床检验基础（一）尿液化学检查[单选题]1.尿蛋白质定量检测的经典方法是A.低铁氰化钾法B.双缩脲法C.考马斯亮蓝法D（江南博哥）.丽春红S法E.免疫测定法正确答案：B参考解析：双缩脲法由于具有显色稳定，对球蛋白、清蛋白具有相同的稳定性，是蛋白质定量测定的经典方法。

[单选题]2.不属于血糖正常性糖尿的疾病是A.家族性肾性糖尿B.甲状腺功能亢进C.慢性肾小球肾炎D.肾病综合征E.妊娠后期正确答案：B参考解析：血糖正常性糖尿是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低，肾糖阈减低所致的糖尿。

临床上常见的疾病有：①家族性肾性糖尿；②新生儿糖尿；③后天获得性肾性糖尿；④妊娠期或哺乳期妇女。

[单选题]3.妊娠试验测定的激素是A.雌激素B.胎盘催乳素C.胎盘专一性蛋白D.绒毛膜促性腺激素E.孕激素正确答案：D参考解析：一般妊娠后35～40天时，绒毛膜促性腺激素（HCG）为200ng/L以上；60～70天达高峰，HCG可达6.4～25.6μg/L，常用的HCG检查方法即能显示阳性结果，单克隆抗体二点酶免疫法在受精卵着床后5～7天即能检测出HCG。

[单选题]4.下列关于血红蛋白尿描述错误的是A.正常人尿中无游离血红蛋白B.大剂量维生素C可使试带法产生假阳性C.阳性可见于6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏患者D.试带法检测时也可与完整的红细胞反应E.甲醛可使反应呈假阴性正确答案：B参考解析：生理情况下，人血浆中有微量的血红蛋白，与结合珠蛋白形成复合物，在单核巨噬细胞系统代谢，尿中无游离血红蛋白。

当血浆中游离血红蛋白超过1000mg/L时，血红蛋白从尿中排出，潜血试验阳性。

阳性主要见于泌尿系统疾病和6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏所致的血管内溶血性疾病。

试带法混浊度检测时除与游离血红蛋白反应外，也可与完整的红细胞反应，但在高蛋白、高比密尿液中，RBC不溶解，敏感性降低。

维生素C具有还原性，可使试带法产生假阴性，甲醛可使反应呈假阴性。

血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释

血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述在文章的引言部分，我们将对血清总胆红素测定化学法进行概述。

血清总胆红素是评估肝功能和胆汁排泄功能的一个重要指标。

通过测定血清中胆红素的浓度，可以获得有关患者肝功能和胆红素代谢状态的信息。

血清总胆红素测定化学法是一种常用的测定方法，它基于血液中胆红素的化学反应原理。

这种方法的主要原理是利用特定的试剂与血清中的胆红素发生反应，形成带有颜色的化合物，并利用光谱法或比色法测定其吸光度，从而计算出血清中总胆红素的浓度。

在测定过程中，我们使用了一系列化学试剂，并根据反应原理和步骤进行相应的操作。

通常情况下，测定血清总胆红素的化学方法需要经过样本处理、试剂添加、反应、数据测量及结果计算等多个步骤。

这些步骤的设计和操作对于测定的准确性和可靠性至关重要。

化学法测定血清总胆红素具有许多优势。

首先，它是一种简单、快速、经济的测定方法，适用于大规模样本的处理。

其次，它对于血清中胆红素的测定范围较宽，可以满足不同浓度范围内的测定需求。

此外，该方法的可重复性和稳定性较高，能够提供较为准确的测定结果。

然而，化学法测定血清总胆红素也存在一些局限性。

首先，可能会受到其他血液成分的干扰，如血红蛋白和脂质等。

其次，该方法对于某些特殊类型的胆红素可能不够敏感，导致测定结果的偏差。

此外，部分化学试剂可能对环境和人体健康有一定的危害，需要注意操作的安全性。

尽管存在一些局限性，但血清总胆红素测定化学法在临床实验室中仍然得到广泛应用。

未来的研究和发展将致力于改进该方法的准确性和特异性，以满足临床医学对于胆红素测定的更高要求。

总的来说，血清总胆红素测定化学法在评估肝功能和胆红素代谢方面具有重要的应用价值。

1.2 文章结构文章结构部分的内容如下:文章结构部分旨在简要介绍整篇文章的结构和组织方式，为读者提供一个整体的概览。

本篇文章共分为引言、正文和结论三大部分。

在引言部分，我们将对本文的主题进行概述，并介绍文章的结构和目的。

总胆红素化学氧化法和重氮法-概述说明以及解释

总胆红素化学氧化法和重氮法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述总胆红素是一种重要的生化指标，其测定方法多种多样。

其中，总胆红素化学氧化法和重氮法是常用的两种方法。

总胆红素化学氧化法通过将总胆红素氧化为胆红素氧化物，再进行光度测定来确定总胆红素含量。

相比之下，重氮法则是通过将总胆红素转化为双重氮化合物，然后进行比色测量来确定总胆红素的含量。

总胆红素化学氧化法在医学、生物化学和临床诊断中有着广泛的应用。

它具有操作简单、结果准确、灵敏度高等优点。

通过这种方法可以快速、准确地检测出总胆红素含量，为疾病的早期诊断和治疗提供重要依据。

然而，总胆红素化学氧化法也存在一些缺点，例如对样品准备要求高、耗时较长、需要使用特定的试剂等。

重氮法是另一种常用的测定总胆红素含量的方法。

它具有操作简单、结果可靠、灵敏度高等特点。

重氮法适用于各种类型的样品，包括血液、尿液和胆汁等。

与总胆红素化学氧化法相比，重氮法更加灵敏，并且可以检测出低浓度的总胆红素。

然而，重氮法也存在一些不足，例如对pH值和温度的要求较高，以及有一定的毒性和危险性。

通过比较总胆红素化学氧化法和重氮法，可以发现它们各自具有一定的优点和局限性。

总的来说，总胆红素化学氧化法在操作简单、结果准确方面具有一定优势；而重氮法则在灵敏度高、适用范围广方面具有一定优势。

根据具体的需求和实际情况，选择不同的方法进行总胆红素的测定，能够更好地满足实验要求和研究需要。

综上所述，总胆红素化学氧化法和重氮法是两种常用的测定总胆红素含量的方法。

它们各自具有一定的优缺点，适用于不同的实验需求。

通过综合评估和比较，可以选择合适的方法进行总胆红素的测定，为相关领域的研究和应用提供可靠的数据支持。

随着科学技术的不断发展，这两种方法仍有进一步改进和完善的空间，有望在未来取得更加广泛的应用。

文章结构部分的内容如下：1.2 文章结构本文将分为5个主要部分来论述总胆红素化学氧化法和重氮法这两种方法。

临床生化实验方法的选择和评价

比例误差：相对于被测物浓度有相同的百分比误差，误差的绝对值与被测物浓度成正比。
引起原因：
方法误差：最严重、最难避免的误差，是方法的分析性能所固有的缺陷所致。可通过方法的选择和评价来减少。
仪器和试剂误差：常见仪器波长未校准，量器不准，试剂质量差等。
2）随机误差（random error，RE）：
试验形式与方法 (1)批内重复性试验：用同一份标本在短时间内用候选方法作多次(一般20次)重复测定。 (2)日内重复性试验：在一天内对一个或数个标本作数批重复测定。 ( 3)日间重复性试验：将同一标本分成数份，按方法每
3）灵敏度：化学反应中能检出的最小量。
4）特异性：分析测定中只对某一成分起反应，其他物质对反应毫无影响或基本无影响。
5）线性范围：实验方法所能检测标本中某物质的浓度范围。
（二）方法评价实验 1、重复性实验：实验的目的是检测候选方法的随机误差。方法是对同一材料(标准液、质控液、标本等)分成数份试验标本进行多次分析测定
2、实验误差实验误差：测定值与真值之差 1）系统误差（systematic error， SE）：一系列分析测定的结果对真值或靶值存在有同一倾向的偏差。一般由恒定因素引起，重复测定，重复出现，消除系统误差可提高测定的准确度。分为：
恒定误差：由干扰物引起的使测定值与真值存在的误差，与干扰物浓度相关，与被测物浓度无关。
火焰光度法火焰光度法免疫化学法双缩脲法离子交换层析法尿素酶法尿酸酶法（紫外法）重氮反应法己糖激酶法
Abell-Kendall法，胆固醇氧化酶法
酶法 MDH-NADH法 LDH-NADH法连续监测产物生成法 NAD+偶联法
2、标准品的分级

Thio-NADH酶法检测血清总胆汁酸的方法评价

Thio-NADH酶法检测血清总胆汁酸的方法评价摘要】目的通过对方法学评价试验，选择一种检测血清总胆汁酸的方法。

方法 Thio-NADH黄色发光系统酶循环法检测血清总胆汁酸。

结果本法线性达150mol/L，精密度，批内CV0.98％,0.85％,批间CV4.58％，4.13％，本法与普通酶显示法比较Y=0.903x-1.45 r=0.9955,n=50，配对t检验P＞0.05，胆红素＜830umol/L，血红蛋白＜50g/L,肝素钠＜100mmol/L，枸橼酸钠＜120mmol/L,乳酸＜30mmol/L,抗坏血酸＜280mmol/L,对测定结果无显著干扰。

结论本法线性好，精密度高，结果无明显干扰，对仪器管道、比色杯基本无色素沉着污染，是测定血清总胆汁酸的一种理想方法，值得推广应用。

【关键词】酶循环法血清总胆汁酸（TBA） Thio-NAD本文采用无色素污染的Thio-NADH黄色发光系统酶循环法测定血清总胆汁酸，现将方法评价报导如下。

1 测定原理血清中的胆汁酸（3α-羟类固醇）被3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型(Thio-NAD)特异性地氧化，生成3-酮类固醇及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。

而生成的3-酮类固醇在3α-HSD及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH）作用下，生成胆汁酸及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（NAD）。

如此，血清中微量的胆汁酸在多次酶循环过程中被放大，同时可使生成的Thio-NADH扩增。

在405nm测定Thio-NADH吸光度变化值，即得血清中胆汁酸的含量。

2 材料和方法2.1仪器日立7170-A全自动生化分析仪。

2.2试剂四川迈克生物科技总胆汁酸检测试剂盒。

2.3方法根据试验说明书编制测试参数，反应类型，速率法，反应温度37℃，波长405nm(主波)/660nm（次波）样品5ul，试剂Ⅰ215ul，试剂Ⅱ50ul，延迟时间1min，读数时间4min。

氧化酶法和钒酸盐法测定血清胆红素的方法比较

氧化酶法和钒酸盐法测定血清胆红素的方法比较郝树彬;孙洪厚;孙秀会;刘兴翠;王志全;孙爱国【摘要】目的：通过对测定结果进行比对，研究胆红素钒酸盐氧化法和胆红素氧化酶法的反应方法原理，探讨两种方法之间异同点及结果是否具有可比性。

方法以两种方法分别检测310例血清，计算回归方程，评估两种方法的相关性。

对异常样本进一步实验以研究方法之间的异同。

结果总胆红素测定结果的回归方程为Y＝1.0651X＋1.1972，相关系数r＝0.9970。

成年人及＞30天儿童直接胆红素测定结果回归方程为Y＝0.9459X＋0.5995，相关系数r＝0.9944；新生儿测定结果的回归方程为Y＝0.4104X＋2.7563，相关系数r＝0.8835；结果异常新生儿血清梯度稀释后钒酸盐氧化法结果不可接受。

结论总胆红素和成人及＞30天儿童的直接胆红素两种方法测定结果的相关性在可接受范围内；新生儿直接胆红素测定两种方法的相关性不可接受；钒酸盐氧化法不可用于新生儿直接胆红素测定。

%Objective To study reaction principle of bilirubin vanadate oxidation method and bilirubin oxidase method through comparison of the determination results,and discuss similarities and difference between the two methods .Methods 310 ca-ses were measured and analyzed with each method.Abnormal samples were further investigated.Results Fortotal bilirubin, the regression equation obtained wasY=1.065 1X+1.197 2,the correlation coefficientr=0.997 0.For direct bilirubin of a-dults and children greater than 30 days,the regression equation wasY=0.945 9X+0.599 5 and the correlation coefficient r=0.994 4.For neonatal direct bilirubin,the regression equation wasY=0.410 4X+2.756 3 and the correlation coefficient r=0.883 5.The results from vanadate oxidation method wereunacceptable for abnormal neonatal serum measurement after serial dilution.Conclusion The overall conclusions were that for the measurement of total bilirubin,and direct bilirubin for adults and children older than 30 days.The correlation between these two methods is in an acceptable range,for measure-ment of neonatal direct bilirubin,the correlation between thesetwo methods was not acceptable.It is not recommended to measure neonatal direct bilirubin by vanadate oxidation method.【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2017(032)001【总页数】5页(P113-116,120)【关键词】总胆红素;直接胆红素;胆红素氧化酶法;钒酸盐氧化法;新生儿直接胆红素【作者】郝树彬;孙洪厚;孙秀会;刘兴翠;王志全;孙爱国【作者单位】山东省医疗器械产品质量检验中心/山东省医疗器械生物学评价重点实验室，济南 250101;莘县中日友好医院，山东聊城 252400;潍坊泽城生物技术有限公司，山东潍坊 261100;山东省恒信检测技术开发中心，济南 250101;莘县中日友好医院，山东聊城 252400;青州荣军医院，山东潍坊 262500【正文语种】中文【中图分类】R446.112血清中胆红素有3种存在形式：未结合胆红素、结合胆红素和共价结合于清蛋白的胆红素(δ-胆红素，Bδ)[1]。

三种常规方法检测血清胆红素结果的可比性和偏倚评估

三种常规方法检测血清胆红素结果的可比性和偏倚评估王杨;谷冬梅;陈京山;胡志东【摘要】Objective To investigate the comparability of three routine methods(Diazo,vanadic acid oxidation meth-od,dry chemical method)to determine serum bilirubin.Methods According to the profile NCCLS-EP9A,vanadic acid oxidation method and dry chemical method were compared with the Diazo method.Forty test results were anylysed.Re-sults The linear regression equations for total bilirubin were:y=0.913 4x+1.367 3,r2=0.998 7;y=0.975x+10.234,r2=0.996 5,respectively.The bias in each medical decison level(25,50 and 340 μmol/L)was-0.80,-2.96 and-28.08;-2.39、-6.70 and-56.76,respectively.The linear regression equation for direct bilirubin was y=0.827 4x+1.925 2,r2=0.997 8.The bias in each medical decison level(1、6 and 35.5 μmol/L)was 1.75,0.98 and-4.21.Conclu-sion Both vanadic acid oxidation method and dry chemical method were closely correlated to the Diazo method.When the concentration increase,the correspondent prospective biase also pared with the test result of Diazo method,correspondent prospective biase of the vanadic acid oxidation method was accepted,while the dry chemical method was not.%目的本研究对三种常规方法(重氮法、钒酸盐法和干化学法)检测血清胆红素进行检测结果的可比性及偏倚评估分析,为实验室检测结果一致性及标准化提供实验数据支持.方法按照美国国家临床实验室标准委员会EP9-A文件方案,以重氮法为比对方法,钒酸盐法和干化学法为待评方法,分别对40例新鲜血清样本进行平行检测,并对检测结果进行线性回归分析、计算医学决定水平处的方法间预期偏倚,以临床化学检验常规项目分析质量指标(WS/T403-2012)允许总误差范围的1/2为判断标准,判断偏倚的临床可接受性.结果总胆红素检测钒酸盐法和干化学法与重氮法的回归方程分别为:y=0.9134x+1.3673,r2=0.9987;y=0.975x+10.234,r2=0.9965;该两种方法在医学决定值水平处(25、50和340μmol/L)与重氮法的预期偏倚分别为:-0.80、-2.96和-28.08以及-2.39、-6.70和-56.76.直接胆红素检测钒酸盐法与重氮法检测结果回归方程为:y=0.8274x+1.9252,r2=0.9978;两种方法在医学决定值水平处(6、35.5μmol/L)的预期偏倚分别为:0.98和-4.21.结论总胆红素与直接胆红素不同方法间均具有良好的相关性(r2均大于0.95),但不同方法间的预期偏倚随医学决定值水平的增高显著增加.与重氮法检测结果相比,钒酸盐法检测总胆红素预期偏倚可接受;干化学法检测总胆红素与钒酸盐法检测直接胆红素结果则仅有较低医学决定值水平预期偏倚可接受.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2017(021)010【总页数】4页(P1744-1747)【关键词】方法比对;偏倚评估;总胆红素;直接胆红素【作者】王杨;谷冬梅;陈京山;胡志东【作者单位】天津医科大学总医院医学检验科,天津300052;天津医科大学总医院医学检验科,天津300052;天津医科大学总医院健康事业部,天津300052;天津医科大学总医院医学检验科,天津300052【正文语种】中文【中图分类】R446.11临床实验室常用两种以上不同检测系统对相同检测项目进行分析，如何保障其检测结果具有可比性和一致性，已成为重要课题[1，2]。

酶法测定结合胆红素的方法学评价

酶法测定结合胆红素的方法学评价刘小玲;杨丽;马莉雪;靳文莉【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2006(021)006【摘要】目的评价胆红素酶法测定血清结合胆红素(CBil),并与干化学法作比较.方法在pH值5.5、120mmol/L苯二甲酸氢钾缓冲液中,胆红素氧化酶(BOD)选择性地氧化CBil,引起450 nm处吸光度(A)值下降,求得CBil浓度.加入氟化钠(NaF)和N-乙酰半胱氨酸(NAC),抑制BOD对未结合胆红素(UBil)和δ-胆红素(δBil)的氧化,消除其干扰.结果 BOD法测定的线性范围达230 μmol/L,批内变异系数(CV)为4.1%(低值)、1.4%(高值),批间CV为11.65%(低值)、10.26%(高值),平均回收率为97.8%.BOD法与干化学法比较,Y干化学法=1.016 0 X酶法+1.603 1,r=0.990 7.结论该法能有效地抑制BOD对UBil和δBil的氧化,特异性的检测CBil,并可用于自动生化分析仪.【总页数】5页(P654-658)【作者】刘小玲;杨丽;马莉雪;靳文莉【作者单位】重庆市急救中心检验科,重庆,400014;重庆市急救中心检验科,重庆,400014;重庆市急救中心检验科,重庆,400014;重庆医科大学检验系2001级,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定胆固醇的干扰 [J], 汪玄文2.钒酸氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法学评价 [J], 吴敏良;张正良3.血清结合胆红素酶法测定在自动生化分析仪上的应用 [J], 赵建华;蒋胜高;罗浔阳;王毓三4.血清结合胆红素的酶法测定 [J], 许国荣;赵建华;王毓三5.胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定甘油三酯的干扰探讨 [J], 杨剑虹;王金湖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肝功能检查综合性实验报告(原版)

广东医学院实验报告实验题目肝功能检查（十一项）Liver Function Tests专业：医学检验组别：13 姓名：邓秋妹学号：07203090283实验日期：2010年5月27日—2010年6月10日实验类型：综合性摘要目的: 检测肝功能检查十一项指标，并对检测结果进行评价。

方法: 改良J-G法测血清总胆红素和结合胆红素。

双缩脲法测定血清总蛋白，溴甲酚绿法测定血清清蛋白。

改良赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶。

结果：测得的血清TB为5.244μmol/L，血清Bc为0.912μmol/L。

测得的血清总蛋白为48.98g/L,血清清蛋白为23.79g/L 。

测得的血清ALT为33.5卡门氏单位，血清AST为87.99卡门氏单位。

结论：患者胆红素代谢功能紊乱，蛋白质合成功能障碍，肝实质细胞损害很严重，可初步诊断为肝硬化。

AbstractObjective:Test the 11 indicators of liver function,and evaluate the results.Methods:The determination of serum TB and Bc by mod. Jendrassik and Graf’s method.The determination of serum TP by Biure and Alb by bromocresol green method.The determination of ALT and AST by Reitman - Frankel modified method.Results:The serum TB is 5.244μmol/L,and the serum Bc is 0.912μmol/L.The serum TP is 48.98g/L,and the serum Alb is 23.79g/L.The serum ALT is 33.5Carmen's unit and the AST is 87.99 Carmen's unit.Conclusion:The patient has bilirubin metabolic disorders, protein synthesis dysfunction and severe liver cell damage. And the initial diagnosis is cirrhosis.1 材料与方法1.1 材料主要试剂：血清胆红素测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；蛋白定量（双缩脲法）试剂盒（南京建成科技有限公司）；白蛋白（溴甲酚绿法）测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；谷丙转氨酶测定试剂盒（南京建成科技有限公司）；谷草转氨酶测定试剂盒（南京建成科技有限公司）。