实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验
分光光度法测铁条件实验
微量铁的测定实验报告
微量铁的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过分光光度法测定样品中的微量铁，掌握该方法的操作技术和数据处理方法，提高实验技能和实验分析能力。
同时，通过实验深入了解微量铁在环境、生物、医学等领域的重要性和应用价值。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，其原理基于朗伯-比尔定律。
该定律指出，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
在一定波长下，通过测量溶液的吸光度可以推算出溶液的浓度。
对于微量铁的测定，通常采用邻啡啰啉分光光度法。
邻啡啰啉是一种显色剂，可以与铁离子形成黄色的络合物。
在一定波长下，通过测量该络合物的吸光度可以计算出铁离子的浓度。
具体的实验操作流程如下：1.样品处理：将样品进行适当的预处理，如消解、萃取等，以释放出样品中的铁离子。
2.显色反应：在酸性条件下，加入适量的显色剂邻啡啰啉，与铁离子发生显色反应，形成黄色的络合物。
3.分光光度测量：在一定波长下，使用分光光度计测量络合物的吸光度。
4.数据处理：根据测得的吸光度和标准曲线，计算出铁离子的浓度。
三、实验过程1.实验准备（1）实验仪器：分光光度计、容量瓶、移液管、比色皿等。
（2）试剂：铁标准溶液、邻啡啰啉溶液、浓硝酸、过硫酸铵等。
2.样品处理：根据样品的性质选择适当的预处理方法，如消解、萃取等，以释放出样品中的铁离子。
3.显色反应：取适量处理后的样品溶液，加入适量的显色剂邻啡啰啉，摇匀后静置一定时间，使络合物充分形成。
4.分光光度测量：在波长为510nm处，使用分光光度计测量显色后样品溶液的吸光度。
5.数据处理：根据测得的吸光度和标准曲线，计算出铁离子的浓度。
四、实验结果与数据分析1.标准曲线的绘制：根据不同浓度的铁标准溶液进行显色反应后，在波长为510nm处测量其吸光度，绘制出标准曲线。
标准曲线的线性回归方程为y = 0.007x + 0.002，相关系数为0.999。
说明在该实验条件下，铁离子浓度与吸光度具有良好的线性关系。
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。
邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。
本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。
实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。
（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。
（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。
（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。
2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。
（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。
（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。
（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。
测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。
1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。
离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。
荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。
2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。
荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。
总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。
这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。
分光光度法测定微量铁的含量实验报告
分光光度法测定微量铁的含量实验报告
实验目的：
通过分光光度法测定微量铁的含量。
实验原理：
实验仪器和试剂：
仪器：分光光度计、移液枪。
试剂：铁标准溶液、硝酸铵和硝酸亚铁、硫酸亚铁。
实验步骤：
1.取适量的硝酸铵和硝酸亚铁混合溶液，稀释成适宜的浓度。
2.在分光光度计上选择适当的波长，进行仪器的初步调试。
3.取一系列含有不同浓度的铁标准溶液，每个浓度分别进行三次测定，并计算平均值。
4.将测量所得的吸光度与浓度制成标准曲线。
5.将待测溶液纳入曲线范围内进行测定，计算出溶液中铁的含量。
实验结果和数据处理：
根据实验所得的吸光度和浓度数据，我们制成了铁的标准曲线。
通过
测量待测溶液的吸光度，我们进一步计算出溶液中铁的浓度。
实验讨论：
1.实验中所用的试剂的纯度对实验结果有重要影响。
如果试剂的纯度
不高，将会引入误差。
2.在实验过程中，仪器的选择和操作也会对实验结果产生一定的影响。
准确操作仪器，进行仪器的校准和调试是保证实验结果准确性的关键。
3.在实际应用中，还需要考虑样品的前处理，例如稀释、过滤等步骤。
4.在进行标准曲线绘制时，至少应该有三个不同浓度的标准溶液，每
个溶液进行三次测定，可以得到相对准确的结果。
实验结论：
通过分光光度法，我们成功测定了待测溶液中铁的含量。
该方法简便、准确，适用于微量铁含量的测定。
在实际应用中，我们应注意仪器的选择
和操作，以及试剂纯度对实验结果的影响。
通过合理的实验操作和数据处理，可以获得准确可靠的分析结果。
实验 分光光度法测定微量铁
分光光度法测定微量铁
姓名###专业 化学工程与工艺 学号 2904090120 日期 2011 年 11 月 9 日 星期三
一、实验原理
吸光光度法是根据溶液中物质对光选择性的吸收而进行的分析方法。它具有较高的灵敏 度和一定的准确度，特别适宜于微量祖坟的测定。 吸光光度法测定微量铁的显色剂， 目前大多数采用邻二氮菲为显色剂。 在 pH=2~9 的挑件下， 二价铁离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，络合物的 lgK=21.3 ，摩尔吸光系数为 1.1*104。 显色前要用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子，测定是应控制溶液浓度在 pH=5 左右为宜。 分光光度法测定物质含量是应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色 反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物质的消除方 法等。 测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液。 本实验帮助学生研究邻二氮菲测铁摘入射光波长、 络合物肉 on 工业的稳定性、 显色剂浓度、 溶液 pH 值的影响等几个方面确定实验的最佳条件。
条件实验 显色剂用量的选择
取 7 个 50mL 的容量瓶， 各加入 1mL 铁标准溶液， 1mL 盐酸羟胺， 摇匀。 在分别加入 0.1、 0.3、0.5、0.8、1.0、2.0、4.0mL 邻二氮菲和 5mLNaAc 溶液，以水实施至刻度，摇匀，放置 10min。用 1cm 比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择波长系测定各溶液的吸光度。以邻二 氮菲溶液的体积 V 为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制 A 与 V 的关系的显色剂用量影响曲 线。得出测定铁是显色剂的最适宜用量。
没有干扰离子。 2、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为合适？为什么？ 答：应采用移液管或是滴定管，因为要准确量取物质的体积。 3、对所做的条件实验进行讨论并选择适宜的测量条件。 答：显色剂为 2mL 的邻二氮菲溶液，显色时间 10min 为宜。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁2009级医学检验3组吴茳铃2009221885实验目的和要求1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4、掌握标准曲线绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe2+形成红色配位离子Fe2++3NNNN3Fe2+在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。
实验仪器与试剂1. 752S型分光光度计2. 标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3. 邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4. 盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5. NaAC缓冲溶液6. 50ml容量瓶7个 8.1cm玻璃比色皿2个 9. 铁样品溶液实验步骤2、吸收曲线绘制用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收波长。
绘图如下：选择的最大吸收波长为：λmax = 510nm3、标准曲线制作在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，平行测定3次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。
绘制标准曲线：实验数据处理1、样品中铁的计算Cx=C读取值×50.00/2.50=0.05×20=1×10-3(mol/L)2、摩尔吸光系数计算在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值，计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数：ε=(A2－A1)/(c2－c1)=(0.461—0.233)/(0.04×10-3—0.02×10-3)=1.14×104L/(mol·cm)实验讨论1、查资料红色配位物的摩尔吸光系数与实验计算一致，影响成败的关键可能有：标准液和样品液的配置不准、分光光度计使用不当。
分光光度法测定微量铁的含量实验报告(标准曲线的测绘与铁含量的测定)
分光光度法测定微量铁的含量实验报告（标准曲线的测绘与铁含量的测定）实验报告：分光光度法测定微量铁的含量一、实验目的1.学习分光光度法测定微量铁含量的原理和方法。
2.掌握标准曲线的测绘方法，了解线性回归方程及其应用。
3.学会利用分光光度计测定样品中微量铁的含量。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，其原理基于朗伯-比尔定律。
当一束单色光通过溶液时，光被吸收的程度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
在一定波长下，吸光度A与溶液浓度C和液层厚度L的乘积成正比，即A=εCL。
其中，ε为摩尔吸光系数，L为液层厚度，C为溶液浓度。
通过绘制标准曲线，可以求得铁的含量。
三、实验步骤1.准备试剂和仪器：硝酸、高氯酸、硫酸、铁标准溶液（100μg/mL）、分光光度计、比色皿、容量瓶（100mL）、吸量管（10mL、5mL、2mL）等。
2.绘制标准曲线：分别取10mL、5mL、2mL铁标准溶液于三个100mL容量瓶中，各加5mL硝酸，20mL硫酸，摇匀，用去离子水定容。
将各溶液分别移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
记录数据并绘制标准曲线。
3.测定样品中铁的含量：将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度，计算样品中铁的含量。
四、结果与分析1.标准曲线测绘结果在坐标纸上绘制标准曲线，横坐标为铁标准溶液的浓度（μg/mL），纵坐标为吸光度。
根据实验数据绘制标准曲线（图1）。
可以看出，随着铁浓度的增加，吸光度也逐渐增大。
表明铁浓度与吸光度之间存在线性关系。
可以得出线性回归方程为：y=kx+b（k为斜率，b为截距）。
根据实验数据可计算出斜率k和截距b的值。
图1 标准曲线（请在此处插入标准曲线图）2.铁含量测定结果将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度（μg/mL），计算样品中铁的含量（mg/L）。
结果如表1所示。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一． 实验名称：邻二氮菲分光光度法测定微量铁 二． 实验目的1. 通过分光光度法测定铁的条件实验，学会选择和确定分光光度分析的适宜条件。
2. 了解光栅分光光度计的构造和使用方法。
3. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
三． 实验原理邻二氮菲使铁的一种优良的显色剂，在pH2～9的溶液中，Fe 2+能与其生成1：3的橙红色配合物，3lg 21.3β= 最大吸收波长510nm 处的摩尔吸光系数为4111.110L mol cm --⨯•• 。
在一定浓度范围内，Fe 2+的浓度范围内，Fe 2+的浓度与配合物吸光系数的关系遵循朗伯-比尔定律。
有关反应如下：NNFe2+33Fe2++该显色反应选择性很高，形成的配合物较稳定，在还原剂的存在下，颜色可保持数月不变。
由于Fe 3+也可与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色配合物，3lg 14.1β=，所以，在显色反应前，需将Fe 3+全部还原成Fe 2+。
四． 实验用品1．仪器 721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg ·L-1铁标准液 准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S04)2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S04溶液，溶解后，定量转移到1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)100 g ·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。
(3)1.5 g ·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(4)1.0 mol ·L-1 乙酸钠溶液。
(5)1 mol ·L-1氢氧化钠溶液。
五． 实验步骤1.准备工作。
打开分光光度计开关，预热。
2.确定最大吸收波长。
取50 mL容量瓶（1#），用吸量管加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀（参比溶液）。
分光光度法测定微量铁_实验报告
邻二氮杂菲分光光度法测定铁一、目的要求1. 了解分光光度计的基本结构及其使用方法。
2. 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的实验技术。
3. 了解分光光度分析与测量条件的关系及其依据。
二、基本原理1. 光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应该注意的条件主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液的温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包含应选择的入射光波长、吸光度范围和参比溶液等。
2. 邻二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好试剂。
在pH=2~9的条件下Fe 2+离子与邻二氮杂菲生成极稳定的橘红色络合物，反应式如下：N N+Fe 2+2+此络合物的lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数ε=1.1×104。
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+离子还原为Fe 3+离子，其反应式如下：32222222242Fe NH OH HCl Fe N H O H Cl +++-+→++++测定时，控制溶液酸度在pH5左右较为适宜。
酸度高时，反应进行较慢；酸度太低，则Fe 2+离子水解，影响显色。
Ba 2+、Cd 2+、Hg +、Ag +、Zn 2+等离子与显色剂生成沉淀，Ca 2+、Cu 2+、Ni 2+等离子则形成有色配合物。
当有这些离子共存时，应注意它们的干扰作用。
三、仪器和试剂1. 仪器：尤尼柯2000光度计；50 mL 容量瓶；1 mL ，2 mL ，5 mL 移液管。
2. 试剂：100μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.864g 分析纯4422()12NH Fe SO H O 置于一烧杯中，以30mL 2 moL/L HCl 溶解后移入1000mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
10μg/mL 铁标准溶液：由100μg/mL 铁标准溶液准确稀释10倍而成。
10%盐酸羟胺溶液（因其不稳定，需临时配制） 0.1%邻二氮杂菲溶液（新配制）1 moL/LNaAc溶液。
分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉（简写phen），是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。
= 21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻此配合物的lgK稳二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
分光光度计测定微量铁
分光光度计测定微量铁一、原理用抗坏血酸将试液中的三价铁离子还原成二价铁离子。
在pH为4～6时，二价铁离子与邻二氮菲生成橙红色配合物，在分光光度计最大吸收波长510nm处测定其吸光度。
大量的碱金属、钙、锶、钡、镁、锰、砷、铅、氯离子、溴离子、碘离子等等在试验溶液中，对测定无干扰。
部分干扰离子的消除方法，详见GB/T3049——2006附录A。
本通用方法描述了试剂中铁含量的测定技术，适用于所取试液中铁含量为10～500ug。
在试液制备时，应参考与所分析产品有关的标准对本方法进行必要的修改使其适合产品的测定。
二、准确测定判据式此测定用到的是络合滴定剂，所以用到络合滴定判据式如下：M + Y → MY［MY］’≈CM(计)［M］’=［Y］’≤0.1％Lg（KMY ’CM(计)）≥6说明：判据式与误差要求有关三、所用溶液、溶剂的制作方法标准铁的制备称取0.7022g硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O],溶于70ml硫酸溶液中,滴加0.02mol/L的高锰酸钾溶液至出现微红色不变,用纯水定容至1000ml。
此贮备溶液1.00ml含0.100mg铁。
邻二氮菲标准溶液制取：取1.0g邻二氮菲溶于200ml乙醇（甲醇）中，转移到1L的烧杯中，以蒸馏水定容至1L。
即可得到0.1％邻二氮菲标准溶液。
四、测定步骤1、吸收曲线的绘制准确移取10 µg/mL 铁标准溶液 5mL于50mL容量瓶中，加入10%盐酸羟胺1mL，摇匀，稍冷，加入1mol/L NaAc溶液5mL和0.1%邻二氮杂菲3mL，以水稀释至刻度，在分光光度计上，用1cm 比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长从430 nm 开始到570nm为止，每隔10nm或20nm 测定一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。
2、铁含量的测定（1）标准曲线的绘制：取50 mL容量瓶（或比色管）6支，分别移取2mL、4mL、6mL、8mL，铁标准溶液于5支容量瓶中，另一容量瓶中不加铁标准溶液（配制空白溶液，作参比）。
分光光度法测定铁含量实验报告
分光光度法测定铁含量实验报告铁含量测定实验报告一、前言在我们的日常生活中，铁是一种非常重要的矿物质元素，它在人体健康、农业生产等方面都发挥着举足轻重的作用。
如何准确地测定铁的含量，对于我们了解人体健康状况、指导农业生产等方面具有重要意义。
本文将详细介绍分光光度法测定铁含量的实验过程和理论依据，以期为相关领域的研究者提供参考。
二、实验原理及方法1.1 实验原理分光光度法是一种基于物质对特定波长的光线吸收或发射的特性来定量分析物质的方法。
在本实验中，我们采用分光光度法测定铁含量，其原理如下：我们需要准备一系列不同浓度的铁标准溶液，如0、1、2、3、4、5等不同浓度的标准溶液。
然后，将这些标准溶液分别置于比色皿中，用分光光度计测量每个标准溶液的吸光度(A)。
接下来，我们需要准备待测样品，并将其溶解于适当的溶剂中，如水或乙醇等。
然后，用分光光度计测量待测样品溶液的吸光度(A0)。
由于不同浓度的标准溶液和待测样品溶液中的铁离子浓度不同，因此它们对可见光的吸收程度也不同。
具体来说，当可见光照射到铁离子溶液时，部分光线被吸收，而另一部分光线则透过溶液。
通过测量吸收前后的光线强度差(ΔA),我们可以计算出待测样品溶液中铁离子的浓度。
1.2 实验步骤(1) 准备不同浓度的铁标准溶液。
(2) 将铁标准溶液置于比色皿中。
(3) 用分光光度计测量每个标准溶液的吸光度。
(4) 准备待测样品。
(5) 将待测样品溶解于适当的溶剂中。
(6) 用分光光度计测量待测样品溶液的吸光度。
(7) 根据实验数据计算待测样品中铁离子的浓度。
二、实验结果与分析根据上述实验步骤，我们得到了不同浓度铁标准溶液和待测样品溶液的吸光度数据(表1)。
通过对比这些数据，我们可以发现：随着铁标准溶液浓度的增加，其吸光度也随之增加；而对于待测样品溶液，其吸光度则随着铁离子浓度的增加而增加。
这说明我们所采用的分光光度法测定铁含量的方法是可行的。
为了进一步验证这一结论，我们还进行了一些额外的实验。
实验3、分光光度法测定微量铁条件实验
实验三、分光光度法测定微量铁条件实验一、目的1、学习如何选择分光光度分析的实验条件。
2、熟悉掌握分光光度计的使用方法。
二、原理1、光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测定吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂的用量，介质的酸度、显色时温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包括入射光波长的选择、吸光度范围和参比溶液等。
2、二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好的试剂。
在pH=2～9的条件下Fe2+离子与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色络合物，此络合物=21.3, 摩尔吸光系数ε510=1.1×104的lgK稳在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3＋离子还原为Fe2＋离子，其反应式如下：2 Fe3＋+2NH2OH·HCl→2 Fe2＋+N2+2H2O+4H++2Cl-测定时，控制溶液酸度在pH=5左右较为适宜。
酸度过高，反应进行较慢；酸度太低，则Fe2+离子水解，影响显色。
Bi3+，Cd2+，Hg2+，Ag+，Zn2+等离子与显色剂生成沉淀，Ca2+，Cu2+，Ni2+等离子与显色剂形成有色络合物。
因此当这些离子共存时，应注意它们的干扰作用。
三、试剂1、100µg/mL的铁标准溶液：准确称取0.864g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O ，置于一烧杯中，以30mL 2mol/L HCl 溶液溶解后移入1000 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
2、10 µg/mL的铁标准液：由100µg/mL铁标准溶液准确移取稀释10倍而成。
3、盐酸羟胺固体及10%溶液（因其不稳定，需临时用时配）。
4、0.1%邻二氮杂菲（新配制）。
5、1mol/LNaAc溶液。
6、2mol/L盐酸7、0.4mol/L NaOH四、步骤1、显色剂浓度试验：取50mL比色管7个，编号，分别准确移取10µg/mL铁标准溶液10mL ，于比色管中，加入1mL10%盐酸羟胺溶液，再加入5mL1mol/LNaAc溶液，然后分别加入0.1%邻二氮杂菲溶液0.3，0.6，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0mL，用水稀释到刻度，摇匀。
分光光度法测定铁含量的方法汇总
6．标准曲线的测绘 以步骤 l 中试剂空白溶液(1 号)为参比，用 1 cm 吸收 池，在选定波长下测定 2～6 号各显色标准溶液的吸光度。在坐标纸上，以铁的 浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
称取 0.2500g 试料于 150ml 锥形瓶中，加 10ml 盐酸溶液，1-2ml 过氧化氢，低温溶解并煮 沸除去过量的过氧化氢，冷却。用水定容于 50ml 容量瓶中。称取两份 10ml 试液。分别置 于 50,ml 容量瓶中。一份加 2ml 酒石酸钾钠溶液，10mlEDTA 溶液，20ml 氨水溶液，2ml 过氧化氢，用水稀释至刻度，摇匀，以此做 显色液。另一份不加过氧化氢作参比液。用 1cm 比色皿，于 530nm 处测定吸光度。 4、标准曲线的绘制
以水为参比，在选定波长下，用 1 cm 吸收池测量各溶液的吸光度。绘制 A —pH 曲线，确定适宜的 pH 范围。
5．络合物稳定性的研究 移取 2.0 mL 10-3 mol·L-1 铁标准溶液于 50 mL 容 量瓶中，加入 1.0 mL 100 g·L-1 盐酸羟胺溶液混匀后放置 2 min。2.0 mL 1.5 g．L-1 邻二氮菲溶液和 5.0 mL 1.0 mol·L-1。乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。以 水为参比，在选定波长下，用 1 cm 吸收池，每放置一段时间测量一次溶液的吸 光度。
称取 0.0500g 纯铝 6 份，分别加入 0、0.25、0.5、1、2、3ml 铁标准溶液，同试料操作并 绘制工作曲线。 6、附注 1) 铁和锰较高时，在酸性溶液中滴加 3 滴过氧化氢使其煮沸分解过量的过氧化氢。 2) 可用于试料含铁量相近的标样同步操作并用系数换算。 3) 室温高时，显色液褪色较快。
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验一、目的要求1. 通过本实验学习确定实验条件的方法；2. 学习Vis-723G型分光光度计的使用方法。
二、基本原理在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。
显色反应的完全程度取决于介质的酸度，显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。
在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。
为此，可改变其中一个因素(例如介质的pH值)，暂时固定其它因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。
其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。
本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件。
三、仪器及试剂1. 仪器Vis-723G型分光光度计(上海分析仪器厂)；容量瓶50mL，250mL；吸量管5mL，10mL；吸量管25mL，10 mL，5 mL，2 mL；pH计；玻璃复合电极。
2.试剂①铁盐标准溶液准确称取若干克(自行计算)优级纯的铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O于小烧杯中，加水溶解，加入6mo1·L－1 HCl溶液5mL，酸化后的溶液转移到250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0．100mg。
然后吸取上述溶液25．00mL置于250mL容量瓶中，加入6mo1·L－1 HCl 溶液5mL, 用蒸馏水稀释至刻度，描匀，所得溶液含铁0．0100mg·mL—1。
②0．1％邻二氮菲(又称邻菲咯啉)水溶液③1％盐酸羟胺水溶液④HAc－NaAc缓冲溶液(pH=4．6) 称取136g优级纯醋酸钠，加120mL 冰醋酸，加水溶解后，稀释至500mL。
⑤0．1mo1．L－1NaOH溶液⑥0．1mo1．L－1HCl溶液⑦广泛pH试纸和不同范围的精密pH试纸注：上述试剂中，有特殊说明的除外，其余均为分析纯试剂或由分析纯试剂所配制。
实验报告-物质的吸收光谱——分光光度法测定铁
实验报告-物质的吸收光谱——分光光度法测定铁实验报告⼀、实验名称：物质的吸收光谱——分光光度法测定铁⼆、实验⽬的：1.了解物质的分⼦吸收光谱及其测定⽅法。
初步了解⽐尔定理所反映的物质吸光度与浓度的关系。
2.学习分光光度计的使⽤和分光光度法测定的基本操作，测量溶液在不同波长处的吸光度。
3.学习实验数据的列表与绘图⽅法，绘制吸收曲线。
三、实验原理：1.各种物质分⼦各⾃对某些特定波长的光发⽣强的选择性吸收，形成各有特征的吸收光谱。
测量物质对不同波长光的选择性吸收，可以绘出其吸收程度随波长变化的关系曲线，称作吸收曲线或吸收光谱。
吸收光谱反映了被测物质的分⼦特性，可⽤以鉴别物质。
2.在特定波长下测量物质对光吸收的程度（吸光度A）与物质浓度之间的关系，可以进⾏定量测定。
这⼀吸光度与浓度的关系可⽤光的吸收定律即⽐尔（Beer）定律来表述：A=lg(1/T)=lg(I0 /I)=εbc式中A为吸光度，T为透光率，I0为⼊射光的强度，I为物质吸收后的透射光强度，ε为摩尔吸光系数，b为吸光光程（透光液层的厚度），c为溶液中物质的物质的量浓度。
当实验在同⼀条件下进⾏，⼊射光、吸光系数和液层厚度不变时，吸光度只随溶液的浓度变化，从⽽可以简单表达为A=KC。
3.邻⼆氮菲是测定微量铁的良好试剂，它与Fe2+ 反应，⽣成稳定的橙红⾊络合物铁—邻⼆氮菲配合物。
此反应很灵敏，反应平衡常数lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε为1.1*104 。
在Ph2-9范围内，颜⾊深度与酸度⽆关⽽且很稳定。
四、实验⽤品：U-5100分光光度计（1cm⽐⾊⽫⼀对）、50ml容量瓶4个、50ml烧杯2个、5ml移液管1⽀、10ml量杯3个、吸球1个、胶头滴管3⽀、塑料洗瓶1个、废液缸1个、铁标准溶液20µg/ml、盐酸羟胺10%、邻⼆氮菲0.15%、醋酸钠溶液1mol/L五、实验步骤及现象：1.将4个容量瓶分别标记为1、2、3、4号，然后⽤20µg/ml铁标准溶液润洗⼀个烧杯和移液管各3次，⽤移液管分别取1.00ml、2.00ml和4.00ml 20µg/ml的铁标准溶液于2、3、4号烧杯中。
实验5-10可见分光光度法测定微量铁(精)
3
4
5
6
7
移取溶液体积/ mL
0.00
1.00
标液
2.00
标液
3.00
标液
4.00
标液
5.00
标液
50.00
水样
50.00
水样
100mL溶液含铁量/mg
—
—
吸光度
(2)以100 mL溶液中铁含量(mg)为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制吸光度对铁含量的标准曲线，从标准曲线上查出试样水的铁含量。
(3)按下式计算试样水中铁的质量浓度：
用吸量管分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL铁标准溶液于6个100 mL容量瓶中，加入50 mL水，用盐酸溶液或氨水调节pH为2，在各容量瓶中分别加入2.5 mL抗坏血酸溶液，摇匀，再加入10 mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液、5 mL邻二氮菲溶液，用水稀释至铁
检查预习情况：
1．检查预习笔记
2．提问：
（1）朗伯-比耳定律的物理意义是什么?什么叫吸收曲线?什么叫标准曲线?
（2）邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验中，用（）作还原剂，其化学反应方程式为（）；（）作显色剂，其化学反应方程式为（）。
目的要求
(1)了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法；
思考题：
(1)实验中加入抗坏血酸和乙酸-乙酸钠缓冲溶液的作用如何?为什么要预先调节溶液的pH为2?
(2)根据实验数据计算邻二氮菲-亚铁配合物的摩尔吸光系数。
在选定波长下，用3cm玻璃吸收池分别取配制的标准系列显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定各溶液的吸光度。
用移液管移取试样水50.00 mL，置于100 mL容量瓶中，按配制标准系列同样的操作，顺序加入各种试剂进行还原和显色，并在同样条件下以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定试样溶液的吸光度。平行测定两份。
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实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验
一、目的要求
1. 通过本实验学习确定实验条件的方法；
2. 学习Vis-723G型分光光度计的使用方法。
二、基本原理
在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。
显色反应的完全程度取决于介质的酸度，显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。
在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。
为此，可改变其中一个因素(例如介质的pH值)，暂时固定其它因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。
其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。
本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件。
三、仪器及试剂
1. 仪器
Vis-723G型分光光度计(上海分析仪器厂)；
容量瓶50mL，250mL；
吸量管5mL，10mL；
吸量管25mL，10 mL，5 mL，2 mL；
pH计；
玻璃复合电极。
2.试剂
①铁盐标准溶液
准确称取若干克(自行计算)优级纯的铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O于小烧杯中，加水溶解，加入6mo1·L－1 HCl溶液5mL，酸化后的溶液转移到250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0．100mg。
然后吸取上述溶液25．00mL置于250mL容量瓶中，加入6mo1·L－1 HCl 溶液5mL, 用蒸馏水稀释至刻度，描匀，所得溶液含铁0．0100mg·mL—1。
②0．1％邻二氮菲(又称邻菲咯啉)水溶液
③1％盐酸羟胺水溶液
④HAc－NaAc缓冲溶液(pH=4．6) 称取136g优级纯醋酸钠，加120mL 冰醋酸，加水溶解后，稀释至500mL。
⑤0．1mo1．L－1NaOH溶液
⑥0．1mo1．L－1HCl溶液
⑦广泛pH试纸和不同范围的精密pH试纸
注：上述试剂中，有特殊说明的除外，其余均为分析纯试剂或由分析纯试剂所配制。
四、实验步骤
1．吸收曲线的绘制
用吸量管吸取0.0，5.0 mL的0．0100mg·mL—1的铁标准溶液分别注入三个50mL的容量瓶中，各加入1mL盐酸羟胺溶液、2mL邻二氮菲、5mL NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。
放置10分钟后，用1cm比色皿、以试剂空白（即0.0mL 铁标液）为参比溶液，在440~560nm之间，每隔5nm测定一次吸光度。
2．酸度影响
于9只50mL容量瓶中，用吸量管各加入5.0mL 0.0100mg/mL的铁标准溶液，2.5mL盐酸羟胺溶液和5.0mL邻二氮菲溶液，然后按下表1分别加入HCl或NaOH 溶液。
表1 HCl、NaOH溶液加入量
再分别用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，放置10min，用1cm比色皿并以蒸馏水作参比，在波长510nm处测定各溶液的吸光度。
并先用广泛pH试纸粗略测定所配制各溶液的pH值，再用精密pH试纸、pH 计准确测定各溶液的pH值。
3．显色剂用量的影响
用吸量管分别加入5.0mL 0．0100mg·mL－1铁标准溶液于8只50mL容量瓶中，并分别依次加入2.5mL盐酸羟胺，5．0mLHAc－NaAc缓冲溶液和各为0．5、1．0、1．5、3．0、5．0、8．0、9．0和10．0mL的邻二氮菲溶液，用蒸馏水
分别稀释至刻度，摇匀，放置10min，用1cm比色皿并以蒸馏水为参比溶液，在波长510nm处测量各溶液的吸光度。
五、数据及处理
1．测量数据记录
(1) 吸收曲线
2．根据上面三组数据分别绘制：
(1) 吸光度－波长吸收曲线(吸光度为纵坐标)；
(2) 吸光度－pH曲线(吸光度为纵坐标) ；
(3) 吸光度－显色剂用量曲线(吸光度为纵坐标) ；
3．从所得三条曲线上确定测定Fe的适宜波长——最大吸收波长λmax、显色反应适宜的pH值范围、合适的显色剂用量范围。
七、思考题
1．吸收曲线和标准曲线各有何实用意义？
2．测绘吸收曲线时，为何在510nm附近，测量点间隔要密些？
3．本条件实验中分别选用什么作参比溶液？为什么？
4．根据什么原则从吸光度－pH曲线确定显色的适宜pH值范围?如果选择不当，其后果怎样?
5．测pH值有哪些方法？各有何优缺点？。