PPT基本色谱整理
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色谱分析总论PPT资料(正式版)
各种保留值预测理论
２、技术发展
1)超临界流体色谱
❖ 超临界流体：物质处于临界温度和临界压力以上，既不是液 体也不是通常的气体，而是单一相态的流体。
❖ 使用超临界流体作流动相的色谱法称为supercritical fluid chromatography, SFC
❖ 特点：具有气体的低黏度和高扩散系数，又具有液体的强溶 解能力，参与溶质的分配作用，同时具有气相色谱和液相色 谱的优点。
柱长 L u 死时间 t0
调整保留时间(adjusted retention time, tr’ )：某组 份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在 固定相中的滞留时间。即
由于保留时间为色谱定性依据。但同一组份的保留时 间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。
死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管 路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项 可得到：
液体 液体
固体 液体
液-固色谱 液-液色谱
液相色谱LC
气体 气体
固体 液体
气-固色谱 气相色谱GC 气-液色谱
2、按分离的原理分类
❖ 吸附色谱：吸附性能的差异
气固 液固
❖ 分配色谱：分配系数的不同
溶解度 液体
❖ 离子交换色谱：分离组分与固定相离子进行可逆交换
离子交换树脂
❖ 空间排阻色谱：分子筛
Vr' VrV0tr' •Fco
以上保留时间和保留体积又统称保留值。
色谱曲线的意义
✓ 色谱峰数=样品中单组份的最少个数； ✓ 色谱保留值——定性依据； ✓ 色谱峰高或面积——定量依据； ✓ 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； ✓ 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。
２、技术发展
1)超临界流体色谱
❖ 超临界流体：物质处于临界温度和临界压力以上，既不是液 体也不是通常的气体，而是单一相态的流体。
❖ 使用超临界流体作流动相的色谱法称为supercritical fluid chromatography, SFC
❖ 特点：具有气体的低黏度和高扩散系数，又具有液体的强溶 解能力，参与溶质的分配作用，同时具有气相色谱和液相色 谱的优点。
柱长 L u 死时间 t0
调整保留时间(adjusted retention time, tr’ )：某组 份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在 固定相中的滞留时间。即
由于保留时间为色谱定性依据。但同一组份的保留时 间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。
死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管 路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项 可得到：
液体 液体
固体 液体
液-固色谱 液-液色谱
液相色谱LC
气体 气体
固体 液体
气-固色谱 气相色谱GC 气-液色谱
2、按分离的原理分类
❖ 吸附色谱：吸附性能的差异
气固 液固
❖ 分配色谱：分配系数的不同
溶解度 液体
❖ 离子交换色谱：分离组分与固定相离子进行可逆交换
离子交换树脂
❖ 空间排阻色谱：分子筛
Vr' VrV0tr' •Fco
以上保留时间和保留体积又统称保留值。
色谱曲线的意义
✓ 色谱峰数=样品中单组份的最少个数； ✓ 色谱保留值——定性依据； ✓ 色谱峰高或面积——定量依据； ✓ 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； ✓ 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。
色谱法基本理论PPT课件
分离度（2）
响应信号
R=0.75 不能分离 R=1.0 互含4%
第28页/共47页
R=1.5 互含0.3% 完全分离之标准 保留时间 t/min
4-3 分离度及色谱分离方程（2）
R的定义并未反映影响分离度的各种因素，既未与影响 其大小的因素：柱效n、选择因子和保留因子k联系起 来.
第29页/共47页
2g
8g
塔1板2g序号 8g
2g
第13页/共47页
k=0.33and3.00的二组经多次分配后的结果
K 3.00
K 0.33
17次基本分离
5次
9次
第14页/共47页
17次
塔板数n
理论塔板数
H板高
n 5.54 t R
2
16
tR
2
W1/ 2
W
H L / n 理论板高
L
有效塔板数
n ef f
k=1.0的样品经数次平衡后的结果
溶质/µg 阶段1
小室1
32g 32g
16g
阶段2
16g
小室2
16g 16g
小室3 小室4 小室5
n m
n V 2
c
exp 1
2 Vr
2 Vr
8g
16g
8g
阶段3
8g
16g
8g
4g
12g
12g
4g
阶段4
4g
12g
12g
4g
阶段5
0 12g2 3 4 85g 6 7 8 129g 10 11 182g13 14 1521g6 17
15.4
43.1min
第36页/共47页
《色谱分析基础 》课件
缺点
分离效果相对较差，灵敏度较低。
04 色谱分析实验技术
实验设计
实验目的
明确实验的目标和意义，确保实验具有 实际应用价值。
实验步骤
详细列出实验操作步骤，包括样品处 理、色谱柱选择、进样、洗脱等，确
保实验过程规范、准确。
实验原理
阐述色谱分析的基本原理和实验操作 流程，确保实验的合理性和科学性。
实验安全
数据处理与分析
数据采集
记录实验过程中的各项数据，包 括色谱图、峰高、峰面积等，确 保数据的完整性和准确性。
数据处理
采用适当的数学方法对原始数据 进行处理，如平滑、基线校正、 归一化等，以提高数据的可靠性 和可比性。
结果分析
根据处理后的数据，进行结果分 析和解释，得出实验结论，为实 际应用提供科学依据。
优点
分离效果好、分析速度快、灵 敏度高。
缺点
对于高分子量和热稳定性差的 化合物不太适用。
液相色谱法
原理
利用液体作为流动相，将样品中的各 组分在固定相和流动相之间进行分离 ，再通过检测器进行检测。
应用范围
主要用于分析高分子量、热稳定性差 、不易挥发的有机化合物，如蛋白质 、核酸等生物大分子。
优点
分离效果好、分析速度快、灵敏度高 ，适用于复杂样品的分析。
色谱分析具有高效、高分辨率和高灵敏度等特点，广泛应用于化学、生物、医学 和环境等领域。
色谱分析的原理
分离原理
色谱分析基于不同组分在两相之间的吸附或溶解性能差异进行分离。在流动相 的带动下，各组分在固定相和流动相之间反复分配，最终达到分离。
检测原理
通过检测器对分离后的组分进行检测，将组分的浓度或质量转化为电信号，以 便进行定量和定性分析。常见的检测器有紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、质谱 等。
分离效果相对较差，灵敏度较低。
04 色谱分析实验技术
实验设计
实验目的
明确实验的目标和意义，确保实验具有 实际应用价值。
实验步骤
详细列出实验操作步骤，包括样品处 理、色谱柱选择、进样、洗脱等，确
保实验过程规范、准确。
实验原理
阐述色谱分析的基本原理和实验操作 流程，确保实验的合理性和科学性。
实验安全
数据处理与分析
数据采集
记录实验过程中的各项数据，包 括色谱图、峰高、峰面积等，确 保数据的完整性和准确性。
数据处理
采用适当的数学方法对原始数据 进行处理，如平滑、基线校正、 归一化等，以提高数据的可靠性 和可比性。
结果分析
根据处理后的数据，进行结果分 析和解释，得出实验结论，为实 际应用提供科学依据。
优点
分离效果好、分析速度快、灵 敏度高。
缺点
对于高分子量和热稳定性差的 化合物不太适用。
液相色谱法
原理
利用液体作为流动相，将样品中的各 组分在固定相和流动相之间进行分离 ，再通过检测器进行检测。
应用范围
主要用于分析高分子量、热稳定性差 、不易挥发的有机化合物，如蛋白质 、核酸等生物大分子。
优点
分离效果好、分析速度快、灵敏度高 ，适用于复杂样品的分析。
色谱分析具有高效、高分辨率和高灵敏度等特点，广泛应用于化学、生物、医学 和环境等领域。
色谱分析的原理
分离原理
色谱分析基于不同组分在两相之间的吸附或溶解性能差异进行分离。在流动相 的带动下，各组分在固定相和流动相之间反复分配，最终达到分离。
检测原理
通过检测器对分离后的组分进行检测，将组分的浓度或质量转化为电信号，以 便进行定量和定性分析。常见的检测器有紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、质谱 等。
演示文稿色谱课件
敏度高，而对不含碳物质无响应。
第24页，共78页。
7.2.3 色谱理论基础
1、气相色谱流出曲线
流动相带着组分通过色谱柱到达监测器时，由记录仪 得到的信号－时间曲线。
第25页，共78页。
2、色谱术语
基线：无试样通过检测器时，检测到的信 号即为基线。 基线漂移：基线随时间定向缓慢地变化。
基线
基线漂移
净化器:主要用来提高载气纯度。
稳压恒流装置:稳定载气流速。
第17页，共78页。
进样系统
包括进样装置和气化室
Dissolved in an organic solvent.
Injected into the carrier gas flow by syringe or valve.
第18页，共78页。
高效毛细管电泳法等。
第6页，共78页。
第二节 气相色谱法(GC)
Gas Chromatography
第7页，共78页。
7.2.1 概述
1、气相色谱法的特点
（1）分离效率高： 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
（2） 灵敏度高： 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量.
分离系统
气相色谱的分离系统是色谱柱，常 用的色谱柱有填充柱和毛细管柱两 种：填充柱是以固体吸附剂或涂渍 了固定液的载体颗粒填充到柱管内形成的柱子；毛细管柱内没
有填充颗粒，是将固定相涂渍或者以化学键合方式附着到管 内壁上。由于混合物各组分的分离在这里完成，所以它是色 谱仪中最重要的部件之一。
第19页，共78页。
调整保留时间（tR ＇）：tR＇= tR－tM
第28页，共78页。
B、用体积表示的保留值 保留体积（VR）：VR = tR×F0
知识点色谱课件.
3000对——100对超单位
基本单位 色谱 蓝－白 桔－白 绿－白 棕－白 … … 色 白 谱 红 及 线 黑 对 编 黄 号 紫
1-100 601-700
12011300 … …
17011800
18011900 … …
23012400
24012500 … …
29013000
… …
501600
… …
1 2 3 白 白 白 色谱 红 黑 黄
5 红 黑
600对——25对基本单位
线对编号 单位号 基本单位色谱 线对编号 单位号 基本单位色谱 1-25 1 蓝－白 301-325 13 绿－黑 26-50 2 桔－白 326-350 14 棕－黑 51-75 3 绿－白 351-375 15 灰－黑 76-100 4 棕－白 375-400 16 蓝－黄 100-125 126-150 151-175 176-200 201-225 226-250 251-275 276-300 5 6 7 8 9 1 11 12 灰－白 蓝－红 桔－红 绿－红 棕－红 灰－红 蓝－黑 桔－黑 401-425 426-450 451-475 476-500 501-525 526-550 551-575 576-600 17 18 19 20 21 22 23 24 桔－黄 绿－黄 棕－黄 灰－黄 蓝－紫 桔－紫 绿－紫 棕－紫
11011200
蓝－紫 桔－紫 绿－紫 棕－紫
1800对——50对超单位
基本单位色谱 蓝－白 桔－白 绿－白 棕－白 灰－白 蓝－白 桔－红 绿－红 棕－红 灰－红 … … 蓝－紫 桔－紫 绿－紫 棕－紫 白 1-50 51-100 101-150 151-200 201-250 … … 501-550 551-600 色谱及线对编号 红 601-650 651-700 701-750 751-800 801-850 … … 1101-1150 1151-1200 黑 1201-1250 1251-1300 1301-1350 1351-1400 1401-1450 … … 1701-1750 1751-1800
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目录
• 黄色系基本色谱—
• a 浅黄色基本色谱— • b 中黄色基本色谱— • c 土黄色基本色谱— • d 咖色基本色谱— • e 肉色基本色谱— • f 卡其色基本色谱— • g 深棕色基本色谱—
• 蓝色系基本色谱—
• a 湖蓝色基本色谱— • b 深蓝色基本色谱—
• 红色系基本色谱—
• a 橙色基本色谱 — • b 红色基本色谱— • c 浅粉色基本色谱— • d 粉色基本色谱—
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