灌东盐场耐盐真菌的分离与初步鉴定

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一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定

一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定

一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定随着全球环境变化和土地盐碱化现象日益加剧,盐碱地的利用与开发成为当前生物技术领域的研究热点之一。

由于盐碱地上生长着各种耐盐植物,这些植物通常能够分泌出多种耐盐蛋白酶来适应高盐环境。

耐盐蛋白酶是一类具有较强抗盐性的酶,具有在高盐环境中稳定地保持生物体正常代谢的能力,因此对耐盐蛋白酶的研究对于开发盐碱地资源具有重要意义。

为了筛选出高产耐盐蛋白酶的菌株,本实验通过土壤微生物样本的采集和处理,利用培养基筛选、酶活性测定等方法对菌株进行筛选和初步鉴定。

下面将介绍一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定方法。

1. 土壤样品的采集与处理在盐碱地上采集表层土壤样品,将其放入密封袋中,并在4℃条件下运送至实验室。

将土壤样品经过筛选和加工处理后制备为土壤样品悬液。

2. 菌株的分离和筛选将土壤样品悬浊液进行稀释处理,将稀释液均匀的涂覆到含有不同盐浓度的LB琼脂平板上,然后分别在25℃和37℃条件下进行培养。

培养过程中观察并挑选出对盐浓度具有较强耐受能力并有较高细菌光带形成的菌落。

3. 耐盐菌菌落的增殖和纯化将所挑选出的耐盐菌菌落进行传代培养,增殖菌株。

然后将增殖好的菌株进行传代分离和纯化,选择菌落形态较好的细菌单体进行单菌分离。

最后进行双层琼脂平板法纯化和扩展培养。

4. 菌株的酶活性测定利用琼脂酶平板法对菌株进行酶活性测定。

将筛选到的菌株接种于含有抗生素和不同盐浓度的琼脂平板上,使用碘液染色观察菌落周围的透明圈的直径。

透明圈直径越大,表示菌株产生的蛋白酶活性越高。

5. 菌株的初步鉴定利用生化鉴定和16S rDNA序列分析方法对菌株进行初步鉴定。

根据菌落形态、生理生化特性和16S rDNA序列进行分析,确定菌株的属种和种属。

通过上述方法,成功筛选出了一株耐盐蛋白酶高产菌,并对其进行了初步的鉴定。

本实验为从盐碱地土壤中筛选出具有应用潜力的高产耐盐蛋白酶菌株奠定了基础,为盐碱地资源的开发与利用提供了科学依据。

一株极端耐盐曲霉的分离、鉴定及生物学特性分析

一株极端耐盐曲霉的分离、鉴定及生物学特性分析

2 colfBo g a nier g, inA r ut a c nea dTcnl yC lg , in12 0 , inPoi e C ia .Sho o ioi l gnen Ji gi l rl i c n eho g o ee J i 3 1 1 Jl rv , hn ) l c E i l c u Se o l l i c n
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海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的初步研究的开题报告

海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的初步研究的开题报告

海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的初步研究的开题报告
一、研究背景及意义
海洋中是一种独特的生态系统,藏有丰富的生物资源,其中包括很多具有耐(嗜)盐特性的真菌。

这些真菌能够在高盐环境下生长,具有较强的生存能力,因此在海洋
资源中具有很大的应用价值。

目前,人们已经从海洋中分离到了许多耐(嗜)盐真菌,并在这些真菌的代谢产物中发现了许多具有生物活性的物质,如温和毒素、天然抗生素和抗癌物质等。

因此,
对海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的研究,不仅可以深入了解其基础生物学特性,还有助于开发新型的药物和生物控制剂等。

本研究的主要目的是从海洋耐(嗜)盐真菌中分离出具有生物活性的成分,并对其进行初步的理化性质和生物活性评价,为进一步的研究打下基础。

二、研究内容和方法
本研究将从海洋样品中筛选出耐(嗜)盐真菌,利用基础生物学和微生物学实验方法对其生长规律、形态特征和种属进行鉴定和确认。

同时,采用传统和现代的化学分
离技术和方法,从耐(嗜)盐真菌中提取纯化次级代谢产物,并对其进行物理化学性质
和结构鉴定。

最后,采用生物学检测方法,对其进行初步的体外和体内生物活性评价。

三、预期结果
本研究将从海洋样品中成功分离出多株耐(嗜)盐真菌,并鉴定其物种、形态和基础生物学特性。

同时,也将从这些真菌中提取到有生物活性的成分,并对其进行初步
的化学鉴定和生物活性评价,为今后的进一步研究提供重要的科学依据。

盐碱湿地耐盐细菌的分离与鉴定

盐碱湿地耐盐细菌的分离与鉴定

中国科技期刊数据库 科研2015年22期 137盐碱湿地耐盐细菌的分离与鉴定慈雪伦国家林业局调查规划设计院,北京 100714摘要:从曹妃甸盐碱地大豆根部土壤中分离筛选耐盐菌株12株,其中9株为轻度耐盐微生物:生长需少量NaCI ,其生长最适Nacl 浓度为1%一3%;另外3株为中度耐盐微生物:其生长最适NaCI 浓度为5一8%。

本实验重点对O .L 两株中度耐盐菌进行形态观察及生理生化鉴定,初步确定菌株L 为盐芽孢杆菌属(Halobacillus Spring et al ),O 为盐单胞菌属(Halomonas),并对这两种菌进行了耐盐性试验,两株菌株均耐盐至8%。

关键词:耐盐细菌;分离;鉴定;耐盐性 中图分类号:Q939.11 文献标识码:A 文章编号:1671-5780(2015)22-0137-03我国盐碱地面广量大,改造治理及合理开发利用这些资源是我国农业可持续发展的重要途径之一,也对改善生态环境,推动区域经济、社会和生态可持续发展具有特别重要意义[1]。

其中生物改良具有重要的现实意义,主要包括种植耐盐植物、使用微生物菌肥等[2]。

因此,本研究从曹妃甸盐碱地区的大豆根部土壤下分离筛选耐盐菌株,可为耐盐基因的克隆及转基因耐盐植物的构建奠定基础,更可以用于耐盐微生物菌剂的研究与开发。

耐盐微生物通常生活在盐湖、盐碱地、海水、晒盐池和盐渍食物等高盐环境中,属于极端环境微生物。

根据微生物的耐盐性不同,科学家们提出了不同的分类系统[3-9],然而其中是以arsen(1986)和vreeland(1987)的系统最常用[4.5]。

根据微生物对Nacl 的需求和最适生长的NaCI 浓度,他们将微生物分为4类:(l)非耐盐微生物:生长不需Nacl ,低浓度的Nacl 即会对其生长产生抑制作用;(2)轻度耐盐微生物:生长需少量NaCI ,其生长最适Nacl 浓度为1一3%;(3)中度耐盐微生物:生长需少量NaCI ,其生长最适NaCI 浓度为5一10%;(4)极端耐盐微生物:生长所需Nacl 浓度为9一32.5%,NaCI 浓度为20%。

盐蒿内生耐(嗜)盐真菌的分离及鉴定

盐蒿内生耐(嗜)盐真菌的分离及鉴定
e r i a ) 、 青 霉属 ( P e n i c i l l i u m) 、 木霉属 ( T r i c h o d e r m a ) 、 曲霉属 ( A s p e r g i l l u s ) 、 链 格 孢属 ( A l t e r n a r i a ) 和
镰 孢属 ( F u s a r i u m) 。 以小球 腔 霉属 ( L e p t o s p h a e r i a ) 为优 势属 , 其 次 为链 格 孢 属 , 其 分 离频 率 分
2 0 1 4年 8月
陕西理 工学院学报 ( 自然科 学版 )
J o u na r l o f S h a a n x i U n i v e r s i t y o f T e c h n o l o g y( N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n )
( 嗜) 盐真 菌 多样性 的理 想 区域之 一 。

饱和 N a 浓度 , 生长于湖岸 的盐蒿其组织 中 N a 含量 为普 通植物 6倍 多 , 该地 区无疑是发掘极 端耐 本文利用不同含盐培养基分离纯化花马盐湖区耐盐植物盐蒿的耐 ( 嗜) 盐真菌, 基 于形态学和 I T S 序列的系统发育关系认识 真菌物种多样性 , 丰富我 国盐湖真菌菌种资源 , 为耐( 嗜) 盐真菌的进一步开
Aug . 2 01 4 Vo 1 . 3 O NO . 4
第3 O卷第 4期
[ 文 章编 号 ] 1 6 7 3— 2 9 4 4 ( 2 0 1 4 ) 0 4— 0 0 5 5— 0 6
盐蒿 内生耐 ( 嗜) 盐真菌 的分离及鉴定
亍 小 维
( 陕西理工学院 生物科学与工程学 院 , 陕西 汉 中 7 2 3 0 0 0 )

一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定

一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定

一株耐盐蛋白酶高产菌的筛选与初步鉴定随着生物技术的不断发展,酶工程在生物技术领域中扮演着重要的角色。

蛋白酶是一类具有广泛应用价值的酶类,在生物工程、医药、食品加工等领域具有重要的应用价值。

目前市场上大多数的蛋白酶都是来源于微生物,因此寻找高产、耐盐蛋白酶的菌株成为了当前的研究热点之一。

本研究旨在筛选出一株耐盐蛋白酶高产菌,并对其进行初步鉴定和研究。

一、菌株的筛选1. 样品的采集样品是研究的基础,本研究选择了海水作为原料,海水中的微生物菌落丰富,是寻找耐盐菌株的理想来源。

在采集海水样品时,需要避免外界的污染,同时要选择距离海岸较远的地点进行采样。

2. 耐盐菌的筛选在采集得到的海水样品中,我们采用平板和液体培养的方法进行菌株的筛选。

首先将样品进行稀释,之后在含有不同盐浓度的琼脂平板上进行培养。

经过一段时间的培养后,观察并挑选出耐盐能力较强的细菌菌落进行复苗。

接着将耐盐菌菌液接种到含有不同盐浓度的液体培养基中,再次筛选出最适合耐盐性能力的菌株。

3. 蛋白酶产生菌株的筛选得到耐盐菌株后,我们将其进行蛋白酶产生能力的筛选。

将筛选得到的菌株分别接种到富含蛋白质的培养基中,之后进行培养和振荡,并使用凝胶电泳和光谱法检验菌株的蛋白酶产生能力。

二、菌株的初步鉴定1. 形态学鉴定接下来,我们对耐盐蛋白酶高产菌进行初步的形态学鉴定。

首先观察菌落的形态、颜色等特征,然后将其进行革兰氏染色和酸性染色等基本染色实验。

2. 生理生化特性鉴定在对菌株进行了形态学鉴定后,我们还需要对其进行生理生化特性鉴定。

菌株的氧气需求情况、产酶酶素的特性、温度和酸碱度的耐受能力等。

3. 分子生物学鉴定我们还将对该菌株进行分子生物学鉴定。

利用PCR扩增技术对其进行16S rDNA序列的测定和分析。

通过与NCBI数据库中已知菌株的16S rDNA序列进行比对,最终确定该菌株的属属和种属。

三、结论与展望经过以上几个步骤的研究和实验,我们筛选出了一株耐盐蛋白酶高产菌,并对其进行了初步的鉴定和研究。

盐碱土壤中耐盐细菌的分离与鉴定

盐碱土壤中耐盐细菌的分离与鉴定

生长 , 能水 解淀 粉 , 硫化 氢 阴性 , 能利用柠 檬酸盐 , 液化 明胶 , 硝酸 盐还原 、 过 氧化氢 酶 、 接触 酶 阳性 ,
能水解 酪素 。初步 鉴定 为 枯草 芽孢 杆 菌 ( B a c i l l u s s u b t i l i s ) 。
YI 1 菌 体杆状 , 革 兰 氏阳性 , 可形 成芽 孢 。接 触酶 、 V— P反应 阳性 , 葡萄糖、 阿拉伯 糖 、 木 糖 和 甘露 醇发 酵产酸 , 能水解 明胶 和淀粉 , 能利用柠檬
Y1 2。
酶、 V— P反应 阳性 , 葡 萄糖 、 阿拉伯 糖 、 木糖 和甘 露 醇发 酵 产 酸 , 能 水 解 明胶 , 不 能水解 淀粉 , 能 利 菌( B a c i l l u s p u mi l u s ) 。
2 . 2 耐 盐能 力
Y 3 、 Y 4 、 Y 5菌株菌 落 乳黄 色 或乳 白色 , 湿润 , 圆形突起 , 边缘整 齐 , 革 兰 氏阴性 , 细 胞弯杆 状 , 单
酸钠 3 . 0 g , 酵母浸粉 1 0 . 0 g , K C 1 2 . 0 g , 蛋 白胨
5 . 0 g, Mg S O4・7H2 0 2 0 g, Na C1 1 0 0 g, pH7 . 0。
土样采 自盐 场淤 泥和 盐碱 地 土壤 。
1 . 2 方法
Abs t r a c t 1 2 ha l o t o l e r a nt b a c t e r i a we r e i s o l a t e d f r o m s a l t— —s o d a s o i l a n d i d e n t i ie f d t o b e l o n g t o Ps e u do - - mo n a s ,Fl a v o b a c t e r i u m ,Ha l o mo n a s,Mi c r o c o c c u s a n d Bac i l l u s r e s pe c t i v e l y.Ev e r y s t r a i n h a d t h e t o l e r a n c e u p t o 1 0% Na CI a n d n o p o t e n t i a l p a t ho g e n i c i t y t o whe a t ,t o ma t o,h o t p e p p e r a n d c u c u mb e r .

一株黄河三角洲盐碱地耐盐菌的分离_鉴定及耐盐能力分析

一株黄河三角洲盐碱地耐盐菌的分离_鉴定及耐盐能力分析
称量5g土样加入盛有45mL 无菌水的烧杯中,搅拌,使土壤溶解,静 置 20 min,取 土 壤 浸 出 液 10 mL 加入盛有200mL 已灭菌的富集培养基中,恒 温 振 荡 培 养 6d(130r·min-1,30 ℃),取 3 mL 上 述 培 养 液 转 接 到 新 鲜 的 富 集 培 养 基 中 ,重 复 培 养 3 次 ,培 养 条 件 同 上 ,得 到 耐 盐 碱 细 菌 富 集 液 .
The isolation of a halotolerant bacteria from Yellow River Delta saline-alkali soil and the analysis of its salt tolerant capability
LU Hong-sheng,XU Ying-ying,YU Meng-meng,ZHANG Qing-ying, WANG Jian-yan,TAN Hao-chen
取20 !L 上述细菌富集液平板划线到分离固体培养基上,30 ℃静置培养,取单菌落重复划线 3 次, 直至菌落形态一致,将分离纯化后的菌落保存在半固体分离培养基中,4 ℃ 冰箱保存,暂 命 名 为 NM-1, 待用.
1.3 生 理 生 化 性 质 测 定 对上述纯化得到的单菌落用耐盐菌富集液体培养基进行富集培养 ,得到富集培养液,对其生理生化
即装入灭菌的密封袋中,土样带回实验室后立即对菌进行富集和分离.剩余样品储存于4 ℃冰箱中待用. 富集培养基成分:(NH4)2SO41g,K2HPO47g,KH2PO43g,MgSO4·7H2O 0.1g,葡 萄 糖 10
g,蒸馏水1 000mL.分离培养基成分:酵母膏 10g,蛋白胨7.5g,柠檬酸钠3.0g,KCl 2.0g,MgSO4· 7H2O 0.2g,FeSO4·7H2O 0.036g,NaCl 20.0g,Na2CO310.0g,蒸馏水1 000mL,pH 用盐酸或氢氧 化钠调节.富集培养基及分 离 培 养 基 均 在 121 ℃ 灭 菌 20 min 后 使 用,制 备 固 体 平 板 培 养 基 时 加 入 15 g·L-1琼 脂 ,制 备 半 固 体 培 养 基 时 加 入 2g·L-1琼 脂 . 1.2 耐 盐 细 菌 的 富 集 、分 离 和 筛 选

《2024年八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《2024年八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》篇一一、引言盐生植物是一类能在高盐度环境下生长的植物,具有极强的抗逆性。

其生存策略除了依靠自身基因型适应环境外,与其根部内生真菌的共生关系也有密切关系。

内生真菌不仅能够增强宿主植物的抗逆性,还能促进其生长。

本文针对八种盐生植物根部内生真菌进行分离、鉴定,并对其抗逆和促生作用进行研究。

二、材料与方法1. 材料本研究所用材料为八种盐生植物,包括碱蓬、碱地蓝、梭鱼草等。

实验中所需的培养基、试剂及其他化学药品均符合相关实验标准。

2. 方法(1)内生真菌的分离与鉴定采用组织分离法对盐生植物根部内生真菌进行分离,经纯化培养后,采用形态学和分子生物学方法进行鉴定。

(2)抗逆性研究通过在不同盐浓度、不同pH值及不同温度条件下培养内生真菌,观察其生长情况,评估其抗逆性。

(3)促生作用研究将内生真菌接种至盐生植物幼苗上,观察其对植物生长的影响,并采用生理生化指标进行评估。

三、结果与分析1. 内生真菌的分离与鉴定经过组织分离法,成功分离出八种盐生植物根部的内生真菌。

通过形态学观察和分子生物学鉴定,确定了各菌株的种类和特性。

2. 抗逆性研究实验结果显示,八种盐生植物根部的内生真菌均具有较强的抗逆性。

在较高盐浓度、较宽的pH值范围及不同温度条件下,均能保持良好的生长状态。

其中,某菌株在极端环境下的生长情况尤为突出。

3. 促生作用研究将内生真菌接种至盐生植物幼苗上后,发现其对植物的生长具有显著的促进作用。

具体表现为植株高度、叶片数、叶面积等指标均有明显增加。

此外,通过测定植物体内的生理生化指标,发现内生真菌能够提高植物的抗氧化能力、光合作用效率等,从而促进植物生长。

四、讨论本研究表明,八种盐生植物根部的内生真菌具有较高的抗逆性和促生作用。

这为进一步开发利用盐生植物资源、提高植物的抗逆性和产量提供了新的思路。

然而,本研究仅对八种盐生植物的内生真菌进行了初步研究,仍需进一步深入研究其作用机制及与其他微生物的互作关系。

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》篇一一、引言盐生植物是生长在盐碱环境中的一类特殊植物,它们在逆境中生存并发展出独特的生理生态特点。

近期研究表明,植物与微生物之间存在复杂的相互作用关系,而盐生植物根部的内生真菌就是其中的一种重要关系。

本研究对八种盐生植物根部内生真菌进行分离、鉴定及其抗逆、促生作用进行研究,以期揭示盐生植物在盐碱环境中的生长机制,并为植物的抗逆和促生提供新的途径。

二、材料与方法1. 材料本研究所选用的八种盐生植物均来自我国不同地区的盐碱地。

2. 方法(1)内生真菌的分离与纯化采用组织分离法对盐生植物根部进行内生真菌的分离与纯化。

将根部样品进行表面消毒后,剪成小段,接种于含有不同碳源和氮源的培养基上,进行培养和纯化。

(2)内生真菌的鉴定采用形态学观察、分子生物学方法对分离得到的内生真菌进行鉴定。

包括菌落形态观察、显微镜观察、ITS序列测定等。

(3)抗逆性研究通过在不同浓度的盐溶液中培养内生真菌,观察其生长情况,评估其抗逆性。

(4)促生作用研究将内生真菌接种到盐碱地土壤中,观察其对植物生长的影响,包括株高、生物量、叶绿素含量等指标。

三、结果与分析1. 内生真菌的分离与鉴定通过组织分离法,成功分离出八种盐生植物根部的内生真菌。

经过形态学观察和分子生物学方法鉴定,共鉴定出八种不同的内生真菌种类。

2. 抗逆性研究在不同浓度的盐溶液中培养内生真菌,发现部分内生真菌具有较强的抗逆性,能够在高盐浓度下正常生长。

这可能与内生真菌的生理生化特性有关,如能产生某些抗逆物质或具有较高的渗透压调节能力。

3. 促生作用研究将内生真菌接种到盐碱地土壤中,发现部分内生真菌对植物生长具有显著的促进作用。

这些内生真菌可能通过分泌某些生长因子或改善土壤环境等方式促进植物生长。

同时,我们还观察到接种了内生真菌的植物在株高、生物量、叶绿素含量等指标上均有所提高。

四、讨论本研究成功分离出八种盐生植物根部的内生真菌,并对其抗逆性和促生作用进行了研究。

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》篇一一、引言盐生植物,作为一种能在高盐环境中生存的特殊植物类群,具有极高的生态价值和利用价值。

其生存能力与其根部内生真菌有着密切的关系。

内生真菌不仅对盐生植物的生长、发育及适应高盐环境有重要影响,还能通过生物技术的手段提取和利用其特殊代谢产物。

本文就八种盐生植物根部内生真菌的分离、鉴定及其抗逆、促生作用进行研究,以期为进一步了解盐生植物与内生真菌的共生关系提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料选取八种常见的盐生植物,包括碱蓬、碱茅、芨芨草等,采集其根部样品。

2. 方法(1)内生真菌的分离与纯化:采用常规的微生物学方法,对盐生植物根部样品进行内生真菌的分离与纯化。

(2)内生真菌的鉴定:通过形态学观察、生理生化测试及分子生物学手段对分离得到的内生真菌进行鉴定。

(3)抗逆性研究:通过培养基盐度梯度实验,观察内生真菌在不同盐度环境下的生长情况,评估其抗逆性。

(4)促生作用研究:采用盆栽实验,将内生真菌接种到盐生植物中,观察其对植物生长的影响,评估其促生作用。

三、结果与分析1. 内生真菌的分离与鉴定通过分离与纯化,共得到八种盐生植物根部的内生真菌。

经过形态学观察、生理生化测试及分子生物学手段的鉴定,确定了这些内生真菌的种类。

其中,有五种属于担子菌门,三种属于子囊菌门。

2. 抗逆性研究培养基盐度梯度实验结果显示,这些内生真菌在低盐到中盐的环境下均能良好生长。

然而,随着盐度的增加,部分真菌的生长受到抑制。

这说明这些内生真菌具有一定的抗逆性,但不同种类的抗逆性存在差异。

3. 促生作用研究盆栽实验结果显示,接种了内生真菌的盐生植物生长状况明显优于未接种的对照组。

这表明内生真菌对盐生植物的生长具有显著的促进作用。

进一步分析发现,这种促进作用可能与内生真菌能产生激素类物质、酶等有关。

四、讨论本研究成功分离并鉴定了八种盐生植物根部的内生真菌,并对其抗逆性和促生作用进行了研究。

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》篇一一、引言盐生植物作为特殊的生物群体,能够在高盐、干旱等极端环境中生存,其适应环境的机制一直是植物生态学研究的热点。

近年来,越来越多的研究表明,盐生植物与其根部内生真菌之间存在着密切的共生关系,这些内生真菌对盐生植物的抗逆性和促生作用具有重要影响。

因此,本文选取了八种盐生植物,对其根部内生真菌进行了分离、鉴定及抗逆、促生作用的研究。

二、材料与方法1. 材料本研究选取了八种常见的盐生植物,包括碱蓬、碱茅、沙棘等。

在采集植物样品时,我们主要选择了生长在盐碱地、沙漠等极端环境中的健康植株。

2. 方法(1)内生真菌的分离与纯化对采集的盐生植物样品进行根部内生真菌的分离与纯化,采用常规的微生物分离技术,如组织印迹法、稀释涂布法等。

(2)内生真菌的鉴定对分离得到的内生真菌进行形态学观察、生理生化特性分析以及分子生物学鉴定(如ITS序列分析等)。

(3)抗逆、促生作用研究通过培养实验,研究内生真菌对盐生植物的抗逆性(如耐盐性、抗旱性等)和促生作用(如提高生物量、改善植物生长环境等)的影响。

三、结果与分析1. 内生真菌的分离与鉴定经过对八种盐生植物根部的内生真菌进行分离与纯化,我们成功获得了多种内生真菌菌株。

通过形态学观察、生理生化特性分析和分子生物学鉴定,我们将这些菌株归属于不同的属种。

其中,某属内生真菌在多株盐生植物中均有发现,表明其可能具有广泛的宿主范围和共生关系。

2. 抗逆性研究通过培养实验,我们发现某些内生真菌能够显著提高盐生植物的耐盐性和抗旱性。

例如,某株内生真菌能够显著降低盐胁迫下植物的丙二醛含量和脯氨酸积累,提高植物的抗氧化酶活性,从而增强植物的耐盐性。

此外,我们还发现某些内生真菌能够促进植物在干旱条件下的气孔调节和水分利用效率,提高植物的抗旱性。

3. 促生作用研究研究还发现,某些内生真菌能够显著促进盐生植物的生物量增加和生长环境改善。

例如,某株内生真菌能够产生植物激素类物质,如赤霉素、细胞分裂素等,促进植物的生长和发育。

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》范文

《八种盐生植物根部内生真菌的分离鉴定及抗逆、促生作用研究》篇一一、引言盐生植物,作为一种能在高盐环境中生长的特殊植物,具有极高的生态价值和资源利用潜力。

近年来,随着对盐生植物研究的深入,其根部内生真菌逐渐成为研究的热点。

这些内生真菌不仅对盐生植物的生长和发育具有重要影响,还可能具有抗逆和促生等作用。

因此,本文选取了八种盐生植物,对其根部内生真菌进行了分离鉴定,并对其抗逆和促生作用进行了研究。

二、材料与方法1. 材料本研究所选用的八种盐生植物均采自我国不同盐碱地区。

2. 方法(1)内生真菌的分离与纯化对八种盐生植物的根部进行采样,采用常规的微生物分离方法进行内生真菌的分离与纯化。

(2)内生真菌的鉴定对纯化后的内生真菌进行形态学观察和分子生物学鉴定,确定其种类和特性。

(3)抗逆性研究通过将内生真菌接种到含有不同浓度盐分和不同pH值的培养基上,观察其生长情况,评估其抗逆性。

(4)促生作用研究采用盆栽实验,将内生真菌接种到盐生植物中,观察其对植物生长的影响,评估其促生作用。

三、结果与分析1. 内生真菌的分离与鉴定经过分离与纯化,我们成功获得了八种盐生植物根部的内生真菌。

通过形态学观察和分子生物学鉴定,我们确定了这些内生真菌的种类和特性。

其中,有五种为已知菌种,三种为新菌种。

2. 抗逆性研究我们将内生真菌接种到含有不同浓度盐分和不同pH值的培养基上,观察其生长情况。

结果显示,这些内生真菌具有较强的抗逆性,能够在高盐和极端pH值环境下生长。

其中,某些菌种在高盐环境下的生长情况明显优于其他菌种。

3. 促生作用研究我们采用盆栽实验,将内生真菌接种到盐生植物中。

结果显示,这些内生真菌对盐生植物的生长具有明显的促进作用。

其中,某些菌种能够显著提高植物的生物量和叶绿素含量,增强植物的抗逆能力。

四、讨论本研究成功分离鉴定了八种盐生植物根部的内生真菌,并对其抗逆和促生作用进行了研究。

结果显示,这些内生真菌具有较强的抗逆性和促生作用,对盐生植物的生长和发育具有重要影响。

耐盐乳酸菌的筛选、鉴定及应用研究

耐盐乳酸菌的筛选、鉴定及应用研究

华南理』=大学硕士学位论文
Abst ract
In resent years,high salt liquid fermentation is a common technique in the production of soy sauce.As soy sauce contains 18%NaCI.it is necessary to cultivate and sc reen a type of yeast and lactic bacterium applicable in that condition.No lactic bacterium yet exists in our country for the time being able to stand 1 8 percent of salinity.It re sulted in great significance of the separation of a salt·resistant lactic bacterium.
对筛选菌种进行酱油酿造过程中的应用研究。将其分别在添加20% 生长刺激因子和未添加生长刺激因子的灭菌酱油中培养,均能正常生长, 说明该菌种不仅耐受酱油18%的的高盐度,而且能在酱油中找到生长所需 的营养物质。将该菌种在未灭菌的酱油原油中培养,同样可正常生长繁 殖,并较快成为优势菌株。
结合不同的温度培养发现,相对于16℃的低温来说,25℃下菌体的 生长繁殖具有更高的速度,至第1 8天,菌体量(A。。。=2.704)远比16 oC 下(A。=1.月4

论文选题来源 白选项目
论文题目 耐盐乳酸菌的筛选鉴定及麻用研究
论文类 应用研究 型
论义主题词(用/隔开) 『乳陵菌/耐盐/筛选/鉴定/

极端嗜盐菌培养基的整理

极端嗜盐菌培养基的整理

嗜盐古生菌AJ6 的分离及系统发育分析菌种分离和富集培养采用RM 培养基(göL ) :N aCl 250. 0, 无水M gSO 4 9. 7, 柠檬酸钠3. 0,KCl 2. 0, 无水CaCl2 0. 2, 细菌蛋白胨(L 37) 10, pH7. 0,固体培养基加琼脂15L水样直接加到液体培养基中(水样∶液体培养基, 1∶10) , 37 ℃、120 röm in 光照振荡培养12 d, 此时培养基呈红色, 取培养基100~200 uL 涂布平板,37 ℃光照培养, 待菌落长出后, 挑取单菌落反复划线纯化3 至4 次, 将最后一次挑取的单菌落接入液体培养基, 光照振荡培养7 d 待用L巴里坤湖和玛纳斯湖嗜盐菌的分离及功能酶的筛选1.1.4 培养基①CM 培养基(P L) :Casaminoacids7.50g,Yeastextract10.00g ,Na3 -citrate3.00g,KCl2.00g,MgSO 4 ·7H 2O20.00g,FeSO4·7H 2O0.05g,NaCl200.00g,pH7.2 。

②HM培养基(P L)( Ventosa,etal.,1982 ) :NaCl100.0g,KCl2.0g,MgSO 4 ·7H2O1.0g,CaCl 2 ·2H2O0.36g,NaHCO 3 0.06g,FeCl3 Tr,Protease-peptoneno.35.0g,Yeastextract10.0g,Glucose1.0g,pH7.2 ~7.4 。

③APA 培养基(P L) :NaCl20.0g,KH 2 PO4 2.0g,MgSO 4 ·7H2O1.0g,Protease-peptoneno.35.0g,Yeastextract,5.0g,Glu 2cose1.0g,Na 2CO3 10.00g, 其中,Na2CO3 与培养基分开灭菌,待温度降到55 ℃后混匀。

耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

耐盐乳酸菌的筛选和鉴定摘要:本实验从酱油厂提供的酱油原醅中分离筛选出耐盐乳酸菌,该菌在18%以上NaCl 浓度的条件下能够正常生长代谢,初步鉴定其为四联球菌属,可用于高盐稀醪酱油酿造目前国内尚无耐盐度达18%的乳酸菌种, 该菌种的成功选育为国内首创。

关键词乳酸菌耐盐筛选鉴定酱油采用高盐稀醪发酵工艺生产时能有更好的质量和香味。

其工艺上需要在酱醅发酵过程中添加酵母菌和乳酸菌。

然而酱油的含盐度高达18%,这就需要选育出耐盐菌种。

关于耐盐酵母的应用报道已有很多。

而乳酸菌方面,目前在国内菌种库内尚无耐盐度达18%的菌种。

我们作为酱油大国,筛选出耐盐度达18%的嗜盐乳酸菌的意义则显得十分重大。

本实验主要对高盐稀态发酵工艺酱醅中嗜盐乳酸菌进行分离筛选及鉴定。

1 材料与方法1.1 材料酱醅、草酸铵结晶紫液(革兰氏A液)、路哥尔氏碘液(革兰氏B液)、蕃红花红(沙黄)、生理盐水。

1.2 实验方法1.2.1 分离筛选流程(如图1)1.2.2 筛选方法十倍稀释法、平板涂布法、斜面之字划线法、平板四分法划线。

1.2.3 鉴定方法1.2.3.1 革兰氏染色法1.2.3.2 过氧化氢酶接触酶测定取一环琼脂斜面的培养物,涂于干净载玻片上,然后加1 滴3% -15% H2O2,若有气泡产生则为阳性反应,无气泡为阴性反应。

或将3%-15% H2O2加到斜面的菌苔上观察是否有气泡的产生。

1.2.3.3 生化鉴定管使用方法挑取待检菌革兰氏染色镜检,将新鲜菌苔接种于普通肉汤中,37摄氏度培养18-24h。

各吸取0.05-0.08ml(约1-2滴)的肉汤培养物或菌悬液加入每种微量生化管内,将已接种生化管套上无菌塑料帽直立于三折吸塑短架内,于35-37摄氏度培养箱中培养。

1.2.3.4 高效液相色谱HPLC 测量乳酸含量(图2)2 结果与讨论2.1 耐盐乳酸菌的筛选2.1.1 富集培养分离初筛(如图3)耐盐度能达10%以上的乳酸菌基本都在片球菌属和四联球菌属这二个属内。

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源 , 中最典 型 的是 位 于响 水县 的灌东 盐场 。 其 我们 从 灌东 盐
场 采 集 土样 , 其 富集 培 养 后 , 选得 到 2株 耐 盐霉 菌 , 对 筛 并
对 其 进 行 了初 步 鉴 定 。 过 对 这 2株 嗜 盐 霉 菌 的 分 离 与 初 通
粉 . 接 后倒 置 于 2  ̄ 温 箱 培 养 3 , L g !S 点 7( 2 d 用 u o’ 碘液 检 测透
明圈。
2 结 果 与 分 析 21 形 态 特 征 .
步鉴 定 , 了解 了 嗜 盐霉 菌 的形态 以及部 分 生理 生化 特 性 , 为 进 一步 理 论和 应 用 研 究提 供 了 材 料 。 果 是新 种 也 丰富 了 如
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现 代农 业科 技} 0 7年第 2 20 4期
工作 研究
灌东盐场耐盐真菌的分离与初步鉴定
杨 建
( 城 生物 工 程 高 等 职 业技 术 学 校 生物 系 . 苏盐 城 2 4 3 ) 盐 江 2 7 1
摘 要 用 不同浓 度 Na 的马 丁 氏培养 基 富集培 养 , 灌 东盐场 的结 晶池 中分 离得 到 2株 耐 盐霉 茵 , 记 为 A、 经过初 步鉴 定发现 . C1 从 标 B A 茵株 茵 落形 态 比较 大 , 径 约 8 直 mm , 地 疏松 , 质 呈绒 毛 状 , 熟 茵 落呈 现 蓝绿 色 , 面粗 糙 , 缘 不 整 齐 , 长 的 Na 浓度 范 围 为 1 ~ 成 表 边 生 cl O 3 0 / 最 适 盐 浓 度 为 10 / 生 长 的 温 度 范 围 为 2  ̄ 5C, 适 温 度 为 2 ℃ 。 茵 株 茵 落 形 态 比 较 小 , 径 约 3m/ 质 地 疏 松 . 绒 毛 状 。 0 g L, 0 gL, 2 4o 最 8 B 直 n, 呈 成 熟 茵 落 呈 现 棕 色 , 面 粗 糙 , 缘 不 整 齐 , 生 长 的 Na 浓 度 范 围 为 2  ̄ 0 / 最 适 盐 浓 度 为 10 / B 茵 株 生 长 的 温 度 范 围 为 2 ~ 表 边 其 Cl 0 3 gL, 5g L. 2 4℃ , 5 最适 温度 为 3 ℃ 。 茵株 茵体 与青 霉 茵体 相似 , O A B茵株 茵体 是具 有 分枝 的 茵丝体 , 曲霉体 相似 。 与 关 键 词 嗜 盐 真 茵 ; 离 ; 定 ; 茵 ; 东 盐 场 分 鉴 霉 灌
致。
尤其 感 兴 趣 。 外 。 盐 菌 的细 胞 膜 、 此 嗜 细胞 壁 结 构 性成 分 和 功 能 性成 分 的稳 定性 、 反应 动 力 学 、 系 的性 质 、 酶 代谢 途 径
及 信 息传 递 、 白质核酸 成 分及 构 象等 方面 , 了适 应 高 盐 蛋 为
134 耐 Na 1 . . C 浓度 。 制查 氏培 养 基 1 0 , 装 8个 三 配 6 mL 分 角 瓶 , 瓶 2 mL 将 上述 培养 好 的 A、 株 分别 接 入对 应 每 0 。 B菌 浓 度 的试 管 中 , 个 菌接 3只 试 管 , 且 设 置 3个 空 白对 每 并 照 , 2  ̄ 恒温培 养 箱 中振 荡 培 养 3 于 8( 2 d后 . 菌 液进 行离 心 , 将
查 氏培 养基 中 , 置于 温度 为 2 ~ 5(的水 浴锅 中培 养 3 55 ̄ 2 d后 ,
将 菌液进 行 离心 。 其湿 重 。 称 1 6 淀粉 水 解 试验 。 J. 在查 氏培 养基 中 加入 1 %的可 溶性 淀
的滩 涂 , 盐场 众 多 , 史悠 久 , 着 丰富 的嗜 盐 微 生物 资 且 历 有
具 有 特 殊性 质 的生 物 活性 物 质 , 它 的研 究 既 具 有理 论 意 对
5 g L、0 gL和 2 0 / 0 / 10 / 0 g L不 同盐浓 度 的马 丁 氏液体 培养基 , 于 2  ̄ 恒温 培 养箱 振荡 富 集培 养 3 。 择最 适 生长 浓 度培 7( 2 d选
嗜 盐 菌能在 高 浓度 Na 浓度 下 生 长 , C1 这对 于 工业 生 产 抗生 素 、 有机 酸 、 乙醇 、 工业 酶 制剂 等产 品 有 重要 意 义 。 为 因 发 酵 培 养基 中高 浓度 的 Na 1 抑 制 大 多 数微 生 物 的 生 长 C可 繁 殖 , 可 以防 止 杂 菌污 染 。 盐 菌 作 为一 类 新 型 的 、 具 故 嗜 极 应用 前景 的微 生物 资 源 , 年来 受 到人 们 的广 泛关 注 , 近 它们 具 有极 为特 殊 的 生理 结构 和 代谢 机 制 , 同时 还 产 生 了许 多
133 嗜 盐 菌 的纯 化 。 取初 步 分 离 的嗜 盐 菌 单 菌 落进 行 .. 挑 多次 划 线 分离 、 化 培 养 , 纯 直至 在 显微镜 下镜 检 的菌 体 形态

义。 又有 应 用价 值 。 在极 端环 境 中 的微 生物 通 常 是通 过特 存
殊 的代谢 作 用 适 应 其所 处 生 境 , 们对 嗜 盐 菌 的 嗜 盐机 理 人
称 其湿 重 。
环 境 也极 具特 殊 性 。 应 用方 面 更 引 人注 意 的是 嗜 盐 菌 的 在 紫 膜和 耐 盐酶 的开 发利 用 。
盐 城市 位 于苏 北平 原 东部 . 临 黄 海 , 全 国面 积最 大 濒 有
1 . 生 长温 度 。 A、 .5 3 将 B2株菌 接 种在 N C 浓度 为 1%的 a! 0
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