沙门菌属
10-3沙门菌属
近有学者采用SPA协同凝集试验、对流免疫电泳、腔乳凝集试验和EI_1sA法等,来快速早期诊断粪便、血清或尿液中的沙门菌等可溶性抗原。
核酸杂交和PcR法等分子生物学技术也可用于沙门菌感染的快速诊断。
在流行病学调查和传染源追踪t}J.V1噬菌体分型也是一种常用方法。标准V?噬菌体有33个型,其特异性比血清学分型更为々一。
4无症状带菌者约有1%~5%伤寒或副伤寒患者,在症状消失后1年仍可在其粪便中检出有相应沙门菌,转变为无症状(健康)带菌者。无症状带菌者也可能是感染后唯一的临床表现。这些细菌留在胆囊中,有时也可在尿道中,成为人类伤寒和副伤寒病原菌的储存场所和重要传染源。年龄和性别与无症状带菌关系密切。20岁以下,无症状带菌率常小于l%,而50岁以上者,可达10。朋以上。女性转变为无症状带菌状态是男性的2倍。其他沙门菌感染,50%患者在5周内停止排菌,90%在感染后9周培养阴性,转变为无症状带菌者很少,不到1%,在人类的感染中不是主要的传染源。
3抗原构起沙门菌属细菌的抗原主要有。和H两种抗原,少数菌中尚有一种表面抗原,功能上与大肠埃希菌的K抗原类同。一般认为它与毒力(v—rul…e)有关,故称vi抗原(表lO 5)。
沙门菌0抗原为细菌细胞壁脂多糖中特异性多糖部分,以阿拉伯数字顺序排列。每个沙门菌血清型吉一种或多种。抗原。凡含有相同抗原组分的归为一个组,引起人类疾病的沙门苗大多数在A~E组。
沙门菌属中少数血清型如伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌是人的病原菌,对人类有直接的致病作用,引起肠热症,在非人类宿主不致病。绝大多数血清型宿主范围广泛,家畜、家禽、野生脊椎动物以及冷血动物、软体动物、环形动物、节肢动物(包括苍蝇)等均可带菌,其中部分沙门菌是人畜共患病的病原菌,可引起人类食物中毒或败血症。动物感染太多无症状或为自限性胃肠炎。
沙门菌属
MIU试验
• 为动力、吲哚及脲酶复合试验 • 原理:培养基为含尿素、蛋白胨的半固体
培养基,指示剂为酚红。具色氨酸酶的细 菌能分解色氨酸产生吲哚,加入吲哚试剂 后,培养基上层的吲哚会变红;具脲酶的 细菌能分解尿素产氨,使整个培养基变碱 呈红色;有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。 • 作用:常用于肠杆菌科细菌的鉴定。
.
IMVIC试验
• I:吲哚(indol)试验 • M:甲基红(methyl red)试验 • V:V.P(Voges-Proskauer)试验 • C:柠檬酸(citrate utilization)实验(枸橼酸
盐) • 作用:这4个试验主要是用来快速鉴别大肠
杆菌和产气肠杆菌,多用于水的细菌检查。
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• (四)抗原构造
• 沙门菌的抗原结构较复杂,主要包括菌体O 抗原,鞭毛H抗原,少数的菌种有表面Vi抗 原,均具有分类鉴定的意义。
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• 1.菌体抗原(O抗原) • 化学成分是脂多糖,耐热,它刺激机体产
生的抗体以IgM为主,与相应的抗体结合出 现颗粒状凝集。 • 是沙门菌分群的依据,每个沙门菌的血清 型可具有一种或树种O抗原,将具有共同O 抗原成分的归为一个群。临床上常见的是 A~F群。
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• 在SS平板上形成中心为黑褐色的菌落
.
• 在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色,大 部分菌落中央呈黑色。
• 在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色 • 在液体培养基中均匀混浊生长。
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• (三)生化特性
• 可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇,除伤寒 沙门菌产酸不产气外,其余沙门菌均产酸 产气;
• 不发酵乳糖和蔗糖(亚利桑那菌除外); • 不分解尿素; • 大多可产生H2S; • 动力阳性; • IMVIC试验结果为++--,MIU试验为+--。
沙门菌属
胆囊炎 或带菌 状态
发热、 肾和其 他器官 感染
胸导管 初次菌血症
菌血症
病菌
胃
小肠粘膜上皮,巨噬C吞噬
第 1周
淋 巴 管
肠壁、肠系膜淋巴结
胸 导 管
发热、全身不适 乏力,血培(+) 出现抗体
血流(第1次菌血症)
全身、器官和组织
第 2、 3周
肝脾肿大 皮肤玫瑰疹
菌-肾-尿(尿检菌)
菌-胆囊-粪便(粪检菌) 小肠肠壁Ⅳ变态反应 肠坏死、穿孔
• 玛丽当时反应激烈,因为在她那个年代,“健 康带菌者”还是一个闻所未闻的概念,她自己 身体棒棒的,说她把伤寒传染给了别人,简直 就是对她的侮辱。
后来,索柏试图通过地方卫生官员说服玛 丽,没想到,这更惹恼了这个倔脾气的爱尔兰 裔女人,她将他们骂出门外,宣布他们是“不 受欢迎的人”。 最后,当地的卫生官员带着一辆救护车和5 名警察找上门。这一次,玛丽又动用了大杈子。 在众人躲闪之际,玛丽突然跑了。警察后来在 壁橱里找到了她,5名警察把她抬进救护车送往 医院。一路上的情景就像“笼子里关了头愤怒 的狮子”。 医院检验结果证实了索柏的怀疑。玛丽被 送入纽约附近一个名为“北边兄弟”的小岛上 的传染病房。
• 房主深为焦虑,他想方设 法找到了有处理伤寒疫情 经验的工程专家索柏。
• 索柏将目标锁定在玛丽身 上。他详细调查了玛丽此 前7年的工作经历,发现7 年中玛丽换过7个工作地 点,而每个工作地点都暴 发过伤寒病,累计共有22 个病例,其中1例死亡。
• 索柏设法得到玛丽的血液、粪便样本,以验证 自己的推断。但这非常棘手,索柏对此有过精 彩的描述:他找到玛丽,“尽量使用外交语言, 但玛丽很快就作出了反应。她抓起一把大杈子, 朝我直戳过来。我飞快地跑过又长又窄的大厅, 从铁门里逃了出去”。
沙门菌属PPT课件
伤寒、副伤寒 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起
胃肠炎(食物中毒)
鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌
败血症
鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、 希氏沙门菌
无症状带菌者
15
16
17
胸导管
肠系膜淋巴结
胸导管
全身疼痛、不适发 热(前驱期)
菌血症
肠热症
孤立和集
合淋巴结 进入肠壁淋巴组织
抵抗力
较差 水中能存活2-3W 粪便中可活1-2个月 冰冻土壤中可过冬 耐受胆盐、煌绿及其他染料 对热耐力差
13
致病物质
侵袭力
菌毛、O和Vi抗原抗吞噬
内毒素
引起体温升高、白细胞数下降。大剂量可导致 中毒和休克
炎症
肠毒素
某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌
14
所致疾病-----人类沙门菌病
24
H与O抗体的性质及其消长意义
抗体 体内出现
类型
情况
O抗 IgM 出现较早,
体
维持时间短
H抗 IgG 出现较晚,
体
维持时间长
体内出现情况
高
高
低
高
低
高
患肠热症 可能性大
感染早期 、
其他沙门 菌引起的 交叉反应
预防接种 ;
非特异性 回忆反应
25
判定结果时,应着重考虑:
正常凝集价
伤寒沙门菌O抗体的凝集价1:80以上,H抗体 1:160以上
细胞免疫较重要
21
微生物学检查法
标本
胃肠炎取粪便呕吐物或可疑食物 肠热症在病程不同阶段采取不同标本分离培养
和鉴定 粪、尿(沉渣)可直接接种选择培养基。
微生物-沙门氏菌
闽北职业技术学院食品与生物工程系
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
前增菌法 25g+BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h,干蛋品18h~24h
10mL +MM (或TTB )100mL
42 ℃ 18h~24h
无色半透明,产硫化 乳糖迟缓阳性或阴性的菌株,与沙门氏菌 氢菌株有的菌落中心带 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖阳性的菌
黑基色明闽,显北但. 职不如业以技上术培养学院株成食为时品粉与红大与色肠生,艾物中希心氏工黑菌程色不系,能但区中分心. 无黑色形
闽北职业技术学院食品与生物工程系
(三)五项生化试验
1、三糖铁琼脂试验 2、靛基质试验(吲哚试验) 3、尿素酶试验 4、氰化钾试验(KCN ) 5、赖氨酸脱羧酶试验
肠热症----是伤寒病和副伤寒病的总称,主要由伤寒杆 菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。
急性肠炎(食物中毒)----是最常见的沙门杆菌感染。 多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。
败血症----常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒 杆菌、肠炎杆菌等引起。
闽北职业技术学院食品与生物工程系
三、沙门氏菌检验
闽北职业技术学院食品与生物工程系
斜面红色, 底面黄色
制好的培 养基
培养基全黄色
斜面、 底部黄 色,并 产生H2S
对照管
斜面红色,底部黄
闽北色职,产业生技H术2S学院食品与底生面物黄工色程,系并产生CO2
(1)斜面碱性(红色-)底部酸性(黄色+)产气或不 产气(产气时会造成琼脂裂开):表示仅葡萄糖发酵。 因微生物优先分解葡萄糖产即氧化而呈碱 性反应,同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱, 培养基底部则因氧张力较小,且微生物生长较慢,故 仍维持酸性反应。 (2)斜面酸性(黄色+)底部酸性(黄色+)产气或不 产气:表示除了葡萄糖发酵外,乳糖与(或)蔗糖也 发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高,经继续发酵,可维持 培养基斜面与底部保持酸性反应。
肠杆菌科(沙门菌属)课件
餐饮服务环节
加强餐饮服务单位的卫生管理, 确保餐饮服务符合卫生标准,防 止肠杆菌科(沙门菌属)的污染和
传播。
加强医院感染控制与预防
1 2
医护人员培训
加强医护人员的感染控制培训,提高医护人员对 肠杆菌科(沙门菌属)的认识和防范意识。
患者管理
加强患者管理,对疑似感染肠杆菌科(沙门菌属) 的患者及时隔离治疗,防止疾病传播。
REPORTING
肠杆菌科(沙门菌属)的诊断方法
01
02
03
临床诊断
根据患者症状、体征及流 行病学资料进行初步诊断 。
实验室诊断
采集患者血液、粪便等标 本进行培养、分离、鉴定 ,以确诊沙门菌感染。
分子生物学诊断
利用基因检测技术,如 PCR、基因测序等,快速 准确地检测沙门菌。
肠杆菌科(沙门菌属)的治疗方法
肠杆菌科(沙门菌属)的感染还可能引发免疫反应,导致肠道炎症和肠道外 感染。
肠杆菌科(沙门菌属)引起的疾病类型
肠杆菌科(沙门菌属)是引起食物中毒和胃肠炎的主要病原体之一,其引发的症状包括 腹泻、腹痛、发热等。
肠杆菌科(沙门菌属)还可引起败血症、脑膜炎、心内膜炎等肠道外感染,严重时可导 致死亡。
肠杆菌科(沙门菌属)感染的高危人群包括儿童、老年人、身体虚弱和免疫缺陷者。
3
环境消毒
定期对医院环境进行消毒处理,消灭肠杆菌科( 沙门菌属)的传播途径,防止医院感染的发生。
THANKS
感谢观看
REPORTING
。
提高个人卫生意识
勤洗手、注意饮食卫生,避免摄入 被污染的食物和水。
疫苗接种
针对高风险人群,可考虑接种沙门 菌疫苗,提高免疫力。
沙门菌
肠壁、肠系膜淋巴结 肠壁、
管
发热、全身不适 发热、 乏力,血培( 乏力,血培(+) 出现抗体
血流( 血流(第①次菌血症bacteriomia) 次菌血症bacteriomia) bacteriomia
肝脾肿大 全身、 全身、器官和组织
第2、3周
皮肤玫瑰疹 菌-肾-尿(尿检菌) 肾 尿 尿检菌) 菌-胆囊-粪便(粪检菌) 胆囊-粪便(粪检菌)
血清型(抗原) 血清型(抗原) • 表示方法: 表示方法:
O抗原:第1相H抗原:第2相H抗原 抗原: 抗原: 抗原 相 抗原 相 抗原 如: 1,4,[5],12:i : 1,2 , , , :
抗原的, 有Vi抗原的,则表示为: 抗原的 则表示为:
O抗原: Vi抗原:第1相H抗原:第2相H抗原 抗原: 抗原: 相 抗原: 相 抗原 抗原 抗原 抗原
[抗原及血清型 抗原及血清型] 抗原及血清型
(一)抗原 1 .菌体抗原(O抗原):其成分为 菌体抗原( 抗原 抗原):其成分为LPS的多糖侧链。58种,耐 的多糖侧链。 种 菌体抗原 的多糖侧链
个菌株可含多种, 热,1个菌株可含多种,以阿拉伯数字表示。 个菌株可含多种 以阿拉伯数字表示。 2. 表面抗原:与毒力有关,又称Vi抗原。有的菌株有, 表面抗原:与毒力有关,又称 抗原 有的菌株有, 抗原。 有的菌株无。 有的菌株无。 3.鞭毛抗原(H抗原):其成分为蛋白质,不耐热,63种, 鞭毛抗原( 抗原 抗原):其成分为蛋白质,不耐热, 种 分为两相: 分为两相: ):小写英文字母表示 (1)第1相(特异相):小写英文字母表示 ) 相 特异相): (2)第2相(非特异相):阿拉伯数字表示 ) 相 非特异相):阿拉伯数字表示 ): 注:什么是双相菌、单相菌? 什么是双相菌、单相菌? 双相菌
沙门菌属
沙门菌属沙门菌属是怎样一类细菌,可引起人类疾病的有哪些?沙门菌属(Salmonella)是一大群形态、生化性状及抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。
沙门杆菌无芽胞,无荚膜,多数细菌有周身鞭毛和菌毛,有动力。
在普通培养基上呈中等大小、表面光滑的菌落,无色半透明。
不分解乳糖、蔗糖和水杨酸,能分解葡萄糖和甘露醇。
吲哚、尿素分解试验及V-P试验均为阴性。
沙门氏菌能在简单的培养基上生长,含有煌绿或亚硒酸盐的培养基可抑制大肠杆菌生长而起增菌作用。
沙门氏菌生长的最佳温度为35℃~37℃,最佳pH值为6.5~7.5。
本属细菌抵抗力不强,60℃30分钟、5%石炭酸溶液及70%酒精5分钟均可将其杀死。
在水中能生存2~3周,在粪便中可生存1~2个月,在冰中能生存3个月。
对氯霉素、氨苄青霉素和复方新诺明敏感。
其抗原结构是分类的重要依据。
其抗原可分为菌体抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)和表面抗原(Vi抗原)三种。
该类菌,按菌体抗原结构的不同,可分为A、B、C、D、E、F、G、H、I等血清群,再按鞭毛抗原的不同而鉴别组内的各血清型。
目前,已知沙门氏菌共有2000多种血清型,在我国已发现有161个血清型,但从人类和动物经常分离出的血清型却只有40~50种,其中仅有10种是主要血清型。
与人类有关的血清型主要隶属于A~E组,即伤寒杆菌、甲、乙、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌、鸭沙门氏菌、新港沙门氏菌等,仅少数几种对人致病,其中以鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌及猪霍乱沙门菌为最常见。
沙门氏菌是怎样感染人体的?因沙门氏菌病经粪口途径传播,故摄入污染了沙门氏菌的食物或饮料是唯一的感染方式。
沙门氏菌在自然界有广泛的宿主,少数沙门氏菌对宿主有选择性,绝大多数对人和动物均适应,可寄居在哺乳类、爬行类、鸟类、昆虫及人的胃肠道中,种类繁多的家养和野生动物的感染率在1%~20%以上。
故各种家禽、家畜在喂养、屠宰、运输、包装等加工处理过程中均有污染的机会。
临床微生物学检验:第五节 沙门菌属
▪ 破坏Vi抗原:100 ℃ 10min ▪ 含有Vi 抗原的沙门菌:
伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、都柏林沙门菌
变异性
• S-R变异: 光滑型-粗糙型 • H-O变异: 有鞭毛-无鞭毛 • 位相变异:双相型-单相型 • V-W变异: 失去Vi抗原
共有58种,已排到67。 O1 、O2 、O3、 O4 …… O67 (2)沙门菌的分群及表示方法 有共同抗原成分的血清型归为一个群。 A、B、C、D、E、F ……Z、 O51 ~O63、 O65~ O67 例如:O2(A)群; O6,7(C1)群 95%以上致病菌在A-F群
抗原成份
2. H抗原:
(S.enterica)
门
亚种Ⅲb 肠沙门菌diarizonae亚种
菌
亚种Ⅳ 肠沙门菌毫顿亚种
亚种Ⅵ 肠沙门菌indica亚种
属 邦戈沙门菌
(S.bongori)
沙门菌属分类
沙门菌属目前至少有2500种以上 血清型。
如:伤寒沙门菌的全名是“肠沙 门菌肠亚种伤寒血清型” (Salmonella enterica subspecies enterica serotype Typhi),可缩写 为伤寒血清型沙门菌(Salmonella Typhi)
抵抗力
• 对热抵抗力不强: 60℃ 1h 或 65℃15-20min
• 水:2-3周 • 粪便:1-2个月 • 耐胆盐、煌绿
培养特性
1、兼性厌氧,最适生长温度35-37℃,最适 pH6.8-7.8,营养要求不高。
2、肠道选择性培养基(MAC、EMB、SS、XLD): 小至中等、半透明、乳糖不发酵菌落, 产H2S菌株在SS、XLD上为黑色菌落。
沙门菌属的流行病学特点
沙门菌属的流行病学特点
沙门菌属是一类常见的细菌,在全球范围内都有广泛分布。
这些
细菌能够引起人体各种部位的感染,例如肠道、泌尿生殖系统、呼吸
系统等。
最常见的沙门菌属病原体是沙门氏菌,它是肠道菌群中的一
种常见的细菌。
沙门氏菌通过污染的食物、水、接触传染和口腔-肛门传播等途径
传播。
其中,食物污染是最主要的传播途径。
常见的食物源包括家禽、家畜、野生动物等肉类及其制品,蛋类和乳制品,以及一些生鲜蔬菜
和水果等。
此外,气溶胶传播也可能会引发疫情,例如利用沙门氏菌
制备食物的工业车间或实验室等。
沙门氏菌感染的表现形式多种多样。
典型的沙门氏菌感染表现为
急性胃肠炎,患者主要症状包括发热、恶心、呕吐、腹泻、腹痛等,
一般为自限性疾病,但重症和多发病则需及时治疗。
沙门氏菌也可以
引起败血症、肺炎、尿路感染等。
孕妇、老年人、免疫功能低下者和
婴幼儿是感染沙门氏菌后并发症的高危人群。
预防沙门氏菌感染的最有效方法就是饮食安全。
应选择新鲜而熟
透的肉类及其制品,尤其是禽肉,要妥善贮存和加工,防止交叉污染。
饮用无污染的水,做好卫生习惯,保持个人卫生和环境卫生是预防沙
门氏菌感染的关键。
提高公众对沙门氏菌的认识,加强食品卫生监管
和科学防控策略也是有效控制沙门氏菌感染暴发的重要手段。
沙门菌属知识点总结
沙门菌属知识点总结1. 发现历史沙门菌属最早由美国病理学家Theobald Smith在1885年发现,并以美国兽医学家Daniel Elmer Salmon的名字命名。
Salmonella的成千上万的菌种在不同的地理环境和生态系统中被发现。
其中包括了数十种已知对人类和动物具有致病性的沙门菌属细菌,也有一些菌种可能对其他生物产生危害。
2. 形态和结构特点沙门菌属细菌是革兰氏阴性菌,通常为短杆状细菌,大小约为0.7-1.5微米。
这些细菌依靠鞭毛运动,并在不同的环境中具有不同的形态和结构。
在不利的环境中,细菌可能形成孢子以求生存。
3. 生长环境沙门菌属细菌通常生长在温度范围为4-45摄氏度的环境中。
它们可以在各种不同的生态系统中找到,如土壤、水体、动物肠道等。
由于这些细菌可以在多种环境中生存,它们在引起食物中毒和其他传染性疾病中扮演着重要的角色。
4. 感染途径沙门菌属细菌可以通过食物、水和接触传播给人类和动物。
食用被污染的食物是最常见的感染途径,包括未煮熟的肉类、蛋类、奶制品和新鲜水果蔬菜。
此外,与被感染的动物接触也可能导致感染。
5. 疾病沙门菌属细菌引起的疾病包括沙门菌感染、沙门菌败血症和沙门菌引起的食物中毒。
感染者通常表现为腹泻、发热、呕吐等症状。
但在一些情况下,感染可能导致严重的并发症,如败血症、肺炎和关节炎等。
6. 防治预防沙门菌属细菌感染的最有效方式是通过消除食品和水源的污染,尤其是对于肉类、蛋类和奶制品。
此外,注意个人卫生和食品加工卫生也是预防感染的重要措施。
对于已经感染的患者,抗菌药物治疗是主要的治疗方式。
7. 实验室检测方法沙门菌属的检测方法通常包括培养、PCR、ELISA等多种技术。
其中培养方法是最为常用的检测方法,可以将患者的样本在富含营养物的培养基上培养1-2天,然后进行细菌鉴定。
总的来说,沙门菌属是一类广泛分布的细菌,在人类和动物中都可能引起感染。
因此,对于食品、水源的安全性和个人卫生都要高度重视,以减少感染的风险。
《生物课件沙门菌属》课件
和实验技术。
3
沙门菌感染的防治方法
探讨预防和治疗沙门菌感染的策略、药 物和公共卫生措施。
四、沙门菌属的研究进展
沙门菌的耐药性
分析沙门菌属细菌的耐药性机制和抗生素耐药性 的研究进展。
沙门菌致病机制
探索沙门菌属细菌引发感染和疾病的分子机制和 致病途径。
五、结论
沙门菌属的重要性
总结沙门菌属在医学、食品安全和公共卫生领域的重要性和影响。
二、生物学特征
基因组
代谢特性
探讨沙门菌属细菌的基因组结构、 遗传特征和基因功能。
介绍沙门菌属细菌的代谢途径、 代谢产物和营养需求。
菌株毒力
讨论沙门菌属细菌的毒力特征、 致病机制和对宿主的影响。
三、临床意义
1
沙门菌感染症状
解释沙门菌感染的常见症状、传播途径
沙门菌的检测方法
2
和临床表现。
介绍沙门菌的常用检测方法、诊断流程
对未来的展望
展望沙门菌属细菌研究的未来发展方向和潜在应用领域。
《生物课件沙门菌属》PPT课 件
**注:本PPT仅供教育学习使用,请勿用于商业用途。**
《生物课件沙门菌属》 PPT课件
这是一个关于沙门菌属的生物课件,通过本PPT将向大家介绍沙门菌属的概述、 生物学特征、临床意义、研究进展和对未来的展望。
一、概述
沙门菌属的概念
介绍沙门菌属的定义和相关 背景信息。
沙门菌属的分类
详细解释沙门菌属的分类体 系和分类方法。
沙门菌属的形态特征
描述沙门菌属细菌的形态特 征、结构和生命周期。
沙门菌属和志贺菌属检验【范本模板】
以呈现2+凝集现象的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价.一般认为,伤寒沙门菌O抗体凝集价在1:80以上,H抗体在1:160以上,甲、乙、丙型副伤寒沙门菌凝集价在1:80以上才有诊断意义。
注意事项
1.加入诊断菌液时,由对照管开始往前,每管各加O.5ml。
2。
结果观察时不要振荡试管,先观察,必要时再轻摇试管使凝块从管底升起,最后按液体的清浊,凝块的大小进行记录,对照管(不凝集)与试验管同时对着光线往暗处看液体透明度和凝集块。
3。
“H”凝集呈絮状,以疏松之大团铺于管底,轻摇试管即能荡起,而且极易散开。
4.“O”凝集呈颗粒状,以坚实凝片沉于管底,轻摇试管不易荡起,且不易散开。
7-4第八章食品中沙门菌的检验技术
沙门氏菌属显色培养基 三糖铁(TSI)琼脂
蛋白胨水、靛基质试剂 氰化钾(KCN ) 培养 尿素琼脂 赖氨酸脱羧酶试验培养基 糖发酵管 邻硝基酚 β -D 半乳糖苷
(ONPG)培养基 半固体琼脂 丙二酸钠培养基 沙门氏菌O 和H 诊断血清。 生化鉴定试剂盒
• 最适培养温度为37℃,最适pH 7.2~7.6。
• 耐受胆盐,在粪便、土壤、食品、水中可生 存5个月至二年之久。
四、血清学特性
沙门氏菌具有复杂的抗原结构。虽然沙门氏菌具有O、 H、K和其它表面物质(如菌毛)四种抗原,但只有O抗原 是每个菌株均有的成分。 1.O抗原(菌体抗原) • *存在于菌体表面,为脂多糖,多糖部分决定其特异性, • *O抗原耐热(100℃、2.5h或121℃、2h加热均不破坏其 抗原性),其特异性不易丧失或变异。 • *一个菌体具有一种或多种不同的O抗原。
2. 增菌
2.1选择性增菌的目的
是最大可能的检出沙门氏菌,原则上必须使用两种选择性分离 增菌液。
2.2沙门氏菌的增菌液
• 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB):含有胆盐,抑制革兰氏阳性球菌 和部分大肠埃希氏菌的生长,而伤寒与副伤寒沙门氏菌仍能生 长。
• 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC):可对伤寒及其他沙门氏菌作选 择性增菌,亚硒酸与蛋白胨中的含硫氨基酸结合,形成亚硒酸 和硫的复合物,影响细菌硫代谢,从而抑制大肠埃希氏菌、肠 球菌和变形杆菌的增殖。
沙门氏菌检验程序
25g样品
分别从BS和HE琼脂 上挑选可以菌落进 行TSI初步生化鉴定
36℃ 8~18h 培养
225ml BPW
1ml BPW增菌液
+10ml SC
1ml BPW增菌液
第10章3沙门菌属
二、主要生物学特性
• (一)形态染色
– 多具有周身鞭毛, 能运动,有时也会 出现无鞭毛的突变 型。
2020/9/18
(二)培养
2020/9/18
猪霍乱沙门菌SS
2020/9/18
伤寒沙门菌菌落特征(SS)
2020/9/18
伤寒沙门菌菌落特征(血平板)
伤寒、副伤寒沙门氏菌与 大肠杆菌菌落形态鉴别
• 分离菌株可排除沙门菌:
– 乳糖+ 、吲哚+ :可排除沙门菌 – 脲酶+:可排除沙门菌
• 属间鉴别
2020/9/18
• 2、最后鉴定(属内鉴定)
– (1)生化鉴定: – (2)血清学分型:
2020/9/18
位相诱导
• 1. Gard氏半固体琼脂平板传代法 • 2. Gard氏位相诱导法 • 3.软琼脂斜面位相诱导法 • 4.毛细管法
• 对动物致病
– 如鸡沙门菌、都柏林沙门菌(牛)。
• 对人和动物都能致病
– 如鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和肠炎沙门菌等。
• 沙门菌可致多种感染
– 轻者为自愈性胃肠炎,重可引起致死性伤寒等。
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所致疾病
• 伤寒和副伤寒 • 急性胃肠炎或食物中毒 • 菌血症(或败血症)
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沙门菌属
大肠杆菌
MAC平板 不发酵乳糖(无色)的光 发酵乳糖(粉色)的光滑
滑型菌落
型菌落
SS平板
不发酵乳糖、产H2S (中 心黑色的无色菌落) 或不 产H2S
发酵乳糖(粉色)菌落
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(三)生化反应
• 具有肠杆菌一般特征
– 如氧化酶-,触酶+,还原硝酸盐
• 不发酵乳糖和蔗糖 • 发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇发酵,产酸、产
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1,2
c
1,5
c
1,5
d
-
g.m
-
变异性
• S-R变异: • H-O变异: • V-W变异: • 相位变异: • 耐药性变异:
抵抗力
• 对理化因素抵抗力弱 • 尤其对酸敏感 • 对消毒剂敏感 • 易产生耐药性
临床意义
• 致病物质:菌毛、内毒素、Vi抗原 • 所致疾病: ◆肠热症 ◆食物中毒 ◆败血症 ◆慢性肠炎 • 免疫性:病后免疫力牢固,以细胞免疫为主
几种沙门菌的抗原组分
组(群) A组 B组
C组 D组
型
PA PB
S.typhimuriun PC
S.cholerae S.typhi
S.enteritidis
O抗原
1,2,12 1,4,5,
12 1,4,5,
12 6,7,Vi 6,7, 9,12,Vi 1,9,12
H抗原
第1相 第2相
a
-
b
1,2
i
肠热症发病过程
随粪便排出
带菌者
潜伏在胆囊中
伤
寒 杆 菌 和 副
经口
小 肠 黏 膜
伤
寒
杆
菌
肠 壁 淋 巴 组 织
被 吞
进
骨髓
噬入 脾
细 血 肝 胆囊 小
胞 吞
液
肾
噬 菌血症
随 尿 液
肠
排
出
随粪便 排出
再次侵入 肠壁,引 起并发症
沙门菌感染的预防
• 加强饮食卫生,切断 传播途径
• 发现并及时隔离病人 • 接种伤寒和副伤寒沙
抗原结构
• O抗原:化学成分为脂多糖;耐热;与相应抗体结合出现颗 粒状凝集;沙门菌分群依据。
• H抗原:化学成分为蛋白质;不耐热;与相应抗体结合出现 絮状凝集;沙门菌分型依据。
• Vi抗原:位于菌体外层;抗原性强,相应抗体可作为筛选带 菌者指标;不耐热;能阻止O抗原与相应抗体结合;伤寒沙 门菌和丙型副伤寒沙门菌有Vi抗原,有V-W变异。
• 再用H因子第2相血清辅助鉴定型;
• 若生化反应符合沙门菌,A-F诊断血清不凝集, 应考虑是否有Vi抗原,将待检菌液加热后,再 进行A-F多价O血清凝集试验。
A-F多价O诊断血清 凝集试验
初步鉴定
凝集
O因子诊断血清 凝集试验
鉴定血清群
凝集
H因子诊断血清 凝集试验
鉴定血清型
沙门菌鉴定需注意的问题
• 玻片凝集试验需注意菌液浓度、反应温度 • 生化反应符合,玻片凝集试验阴性,应考虑是否有Vi抗原
检验方法--生化反应初步鉴定
• 触酶+、氧化酶-、硝酸盐还原+ • 苯丙氨酸-、葡萄糖酸盐- • KIA:K A +/- +/• MIU:+-- • 赖氨酸脱羧+、鸟氨酸脱羧+
检验方法--血清学鉴定
• 首先用A-F多价O诊断血清进行初步鉴定;
• 再用O因子血清鉴定到群(A、B、C、D、E、 F群);
的存在 • 抗原结构相同,生化反应不同,应加做生化反应 • 生化反应符合,玻片凝集试验阴性,无Vi抗原,应:重新
观察生化反应;传代以恢复原有抗原性。
肠热症不同标本细菌培养情况
100 血标本 90
阳 80
性 70
检 除 率
60 50
40
30
20
10
粪便标本 尿标本
12345678
发病周数
血清学诊断--肥达反应
肠道杆菌
沙门菌属
沙门菌属
• 是寄生于人类和动物肠道中,生物学性状相似的革兰 阴性杆菌
沙门菌属
肠道沙门菌 邦戈沙门菌
肠道亚种
致病沙门菌多为
萨拉姆亚种
肠道亚种
双亚利桑那亚种
亚利桑那亚种
豪顿亚种
英迪加亚种
形态染色
• 革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜、有周 鞭毛,多数菌株有菌毛
沙门菌
培养特性
• 兼性厌氧、营养要求不高 • 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落菌落,与志贺菌
菌落相似。 SS平板--无色菌落,产H2S菌株,菌落中心呈黑色 Mac平板--无色菌落 EMB平板--无色菌落
生化反应
• 氧化酶试验(-) • 分解葡萄糖、不分解乳糖 • KIA:KA++(伤寒沙门菌产酸不产气KA-+) • MIU:+ - - • IMViC:-+ - + • 赖氨酸脱羧、鸟氨酸脱羧:+
伤 伤 甲 肖伤伤甲肖寒 寒 型 沙寒寒型沙副门OH副门OH效效伤菌效效伤菌价价寒H价价寒H效H效H11效 价1<::效 价31:18价62:价02000<<<111:1::122:620000
伤寒O 伤寒H 甲型副伤寒H 肖沙门菌H
1:诊20断意1:诊4义0 断:1意:感80义染1::甲16感0型染1副:32伤伤0 寒寒1:沙6沙40门门菌菌
• 原理:用已知伤寒沙门菌O、H抗原和甲型副 伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒 沙门菌H抗原与病人血清作半定量凝集试验, 以测定受检血清中有无相应抗体及其效价。
• 意义:协助诊断肠热症(伤寒与副伤寒)
肠热症病人血清抗体出现情况
100
90
阳 80
性 70
检 除 率
60 50
40
30
20
10
12345678 发病周数
生理盐水 + 待检血清 +诊断抗原 45℃
观察结果
反应6小时
沙门菌鉴定依据
• 沙门菌鉴定主要依靠生化反应和血清学诊断 • 肠道选择平板上无色半透明菌落 • KIA:KA- +/• MIU:- +/- - • 与A-F多价O诊断血清和相应O因子血清、H因子血清凝集 • 注意Vi抗原的存在;注意抗原结构相同的菌株,应加做生
增菌 (GN、SF)
初步鉴定 最终鉴定 报告结果
因子血清凝集 系统生化反应
检验方法--培养
• 血液、骨髓:将待检标本接种胆盐葡萄糖肉汤增菌培养, 每日观察,出现浑浊等现象,及时转种 血平板和肠道选 择平板。
• 粪便:接种SS、Mac或EMB分离培养,若标本含菌量少 ,可先增菌。
• 尿液:尿液离心后,取沉淀物接种血平板和肠道选择平板 。
门菌疫苗进行特异性 预防
微生物学检验
• 标本采集:根据不同疾病采集不同标本 • 肠热症的标本采集
※发病第1~2周:血液 ※发病第2~3周:粪便、尿液 ※肠热症全程:骨髓
检验程序
血液、骨髓
增菌 (胆盐葡萄糖肉汤)
KIA MIU、IMViC
A-F多价血清 玻片凝集
菌落涂片染色
粪便、尿、残余食物 SS、Mac、血平板 可疑菌落