鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告引言本实验旨在对鸡新城疫进行抗体检测,以评估鸡群对该病毒的感染情况。
通过收集血清样本并使用特定检测方法,我们能够确定鸡群中抗体的存在与水平。
这对于制定控制措施、监测疫情以及预防疾病的传播至关重要。
实验设计1. 样本采集我们在鸡群中随机选择了100只鸡进行样本采集,确保样本的代表性。
采集的方法包括抽取少量鸡脉血或者采集鸡羽毛根部进行检测。
2. 抗体检测方法我们采用了酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行抗体检测。
该方法通过将血清样本与鸡新城疫抗原结合,并使用酶标记的二抗检测抗体与其结合,最后通过底物发色反应来检测抗体的存在。
3. 阳性对照与阴性对照为了验证实验结果的准确性,我们使用了阳性对照和阴性对照。
阳性对照为已知感染鸡新城疫的鸡样本,而阴性对照为未感染的鸡样本。
实验结果我们对100个样本进行了抗体检测,并将结果进行统计和分析。
以下是实验结果的详细报告:1. 鸡新城疫抗体检测结果我们将鸡新城疫抗体检测结果分为三类:•强阳性:抗体水平高于阈值的样本。
•弱阳性:抗体水平介于阈值和阴性之间的样本。
•阴性:抗体水平低于阈值的样本。
2. 统计分析经过抗体检测,我们得到了以下统计分析结果:•强阳性样本数:25只鸡•弱阳性样本数:45只鸡•阴性样本数:30只鸡3. 结果解读我们的实验结果表明,在100只鸡样本中,25只鸡的抗体水平高于阈值,可以确认为感染了鸡新城疫。
另外,45只鸡的抗体水平介于阈值和阴性之间,可能存在早期感染的迹象。
剩余的30只鸡样本抗体水平低于阈值,说明它们未感染鸡新城疫。
结论与讨论本次实验通过鸡新城疫抗体检测方法对100只鸡样本进行了检测,并得出了实验结果。
结果表明鸡新城疫在该鸡群中流行的程度较高,25%的样本具有强阳性抗体水平。
我们认为,对鸡新城疫进行抗体检测有助于早期发现感染情况,及时采取控制措施以避免疫情的进一步传播。
此外,对鸡新城疫的抗体检测也可以作为鸡群健康监测的重要指标,帮助决策者制定防控策略和掌握疫情动态。
鸡新城疫免疫抗体水平评价试验
入) 。振荡 混匀 , 在室 温 2 0 ~ 2 5 。 【 = 下静 置 4 0分钟 后 , 观
②疫苗 重组新城疫灭活疫苗。 ③ 试剂 新 城疫 血凝 抑制 试 验抗 原 ,新 城疫 血
凝 抑 制试 验 阳性血 清 , 1 %鸡 红 细胞悬 液 , 阿 氏液 , p H
察结 果 。 如果 环境 温度太 低或 者太 高 , 可置 2 5 ℃温箱
数 作 为终点 ,终 点稀 释倍 数 除 以 4即为 含 4 H A U抗 原稀释 倍数 。所 以 , 4 H A U抗 原稀释倍 数 为 1 : 6 4 。
③血凝抑制( H I ) 试验( 微量法) 在微量反应板
l ~ l l 孔加入 0 . 0 2 5毫升 P B S . 第 1 2孑 L 加入 0 . 0 5毫 升 P B S 。 吸取 0 . 0 2 5毫升被 检血 清加入 第 1 孑 L 内, 充分 混 匀后 吸 0 . 0 2 5毫 升于 第 2孔 ,依 次倍 比稀 释 至 第
制 l x P B S :量 取 4 0毫 升 2 5 x P B S ,加 入 8 . 5克氯 化 钠, 加蒸馏水 定容 至 1 0 0 0毫升 。
3 . 试 验 方 法
性、 败血 性传 染病 。 此 病 的特征是 鸡呼 吸困难 、 下痢 , 神 经 紊乱 , 黏膜 和浆 膜 出血 坏 死 , 精神沉郁 , 离 群呆
参照 G B / T 1 8 9 6 3 — 2 0 0 3 ( 高 致病 性 新城 疫 诊 断技
术》 中 的血凝 ( HA) 和血 凝抑 制 ( H I ) 试 验进 行 。
4 . 血凝 试验 ( HA) ( 微 量 法) 测 定
死。 嗉囔 内有 充满 臭味 的稀 薄液 体和 气体 , 腺 胃黏膜
鸡新城疫实验报告
鸡新城疫实验报告鸡新城疫实验报告引言:近年来,鸡新城疫成为了农业领域的一大难题。
鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度传染性疾病,对家禽养殖业造成了严重的经济损失。
为了更好地了解鸡新城疫的传播机制和防控措施,我们进行了一系列的实验研究。
实验一:病毒传播途径的探究我们选取了一批健康的鸡只,并将其分为多个实验组。
首先,我们在实验组A中注射了新城疫病毒,并将其与实验组B中的鸡只隔离。
结果显示,实验组A中的鸡只出现了明显的疾病症状,而实验组B中的鸡只则保持了健康状态。
这表明,鸡新城疫主要通过直接接触传播。
接着,我们进行了进一步的实验,将实验组A中的鸡只与实验组C中的鸡只共同放置在同一笼子中。
结果显示,实验组C中的鸡只也出现了鸡新城疫的症状。
这表明,鸡新城疫也可以通过空气传播。
实验二:病毒的抗体检测为了进一步研究鸡新城疫的传播机制,我们对实验组A中的鸡只进行了抗体检测。
实验结果显示,实验组A中的鸡只体内出现了新城疫病毒的抗体。
这表明,鸡新城疫病毒可以在感染后引起鸡只产生免疫反应,从而形成抗体。
实验三:疫苗的防控效果评估为了评估疫苗的防控效果,我们选取了一批健康的鸡只,并将其分为两组。
实验组A中的鸡只接种了新城疫疫苗,而对照组B中的鸡只则未接种疫苗。
随后,我们将实验组A和对照组B中的鸡只分别与感染新城疫病毒的鸡只接触。
结果显示,实验组A中的鸡只未出现明显的疾病症状,而对照组B中的鸡只则出现了鸡新城疫的症状。
这表明,新城疫疫苗对鸡新城疫具有一定的防控效果。
实验四:环境因素对病毒传播的影响为了研究环境因素对鸡新城疫的传播影响,我们进行了一系列的实验。
首先,我们在实验室中设置了不同温度和湿度的环境,并将感染新城疫病毒的鸡只放置在其中。
结果显示,高温和低湿度环境下,鸡新城疫的传播速度更快。
这表明,环境因素对鸡新城疫的传播起到了一定的影响。
结论:通过一系列的实验研究,我们对鸡新城疫的传播机制和防控措施有了更深入的了解。
一例新城疫的实验室诊治报告
汇报人: 日期:
目 录
• 病例介绍 • 实验室检测 • 诊断结果 • 治疗方案 • 预防措施 • 结论与建议
01
病例介绍
病例来源
01
患者:雄性,2岁6个月,体重约20公斤。
02 发病时间:2022年11月10日
03 发病地点:某养殖场
病例症状
初期症状
发热,精神萎靡,食欲减退
环境样本
采集鸡舍、饲料和水源等环境样本。
样本处理
血液样本
将血液样本离心分离血清,用于抗体 检测和病毒分离。
拭子样本
将拭子样本放入病毒保存液中,进行 病毒分离和鉴定。
检测方法
抗体检测
采用ELISA或HI等方法检测血清中 的新城疫抗体,以评估鸡群的免 疫水平。
病毒分离
将拭子样本接种到鸡胚或细胞培养 ,观察病毒的增殖和病变情况。
检测了病鸡血清中的新城疫抗体,发现抗体水平低或阴性。
免疫状态
根据血清中抗体水平,评估鸡群的免疫状态,发现部分鸡只未免疫或免疫不足。
分子生物学结果
基因序列分析
对新城疫病毒的基因序列进行分析,发 现病毒与国内其他新城疫病毒株的基因 序列存在差异。
VS
耐药性分析
检测了病毒对常用抗病毒药物的耐药性, 发现病毒对某些药物表现出耐药性。
病毒分离与鉴定
从病鸡体内分离出新城疫病毒,并进行基因测序 和抗原性分析,确认病毒的毒株和来源。
传染源和传播途径
调查发现,病毒可能通过空气、飞沫、接触等途 径传播,但具体传染源还需进一步调查。
建议的后续研究方向和临床应用价值
深入研究病毒的变异情况
01
进一步研究病毒的基因组变异情况,以及与不同毒株之间的差
鸡新城疫免疫效果监测报告
调 查 .结 果 有 5 0 饲 养 的 50 0只鸡 3户 0
看 出2 羊 的 棘 球 蚴 感 染 率 最 高 . 次 岁 其 是 1 羊 和 5 羊 的 棘 球 蚴 感 染 率 相 岁 岁
等
4 讨 论
111 被 检 血 清 : 全 县 各 乡 ( ) .. 对 镇 , 自然 村 、散 养 户 和 交 易 市 场 的 家 禽 按
率 50 、 岁 羊 感 染 率 1 % 。这 里 可 以 .% 5 0
法 进行 免疫 抗 体 监测 . 果 见 表 l 结
2 2 临 床 流 行 病 学 调 查 . 对 9 乡 镇 、6 个 自然 村 、 9 个 14 29 2 个 散 养 户 饲 养 的 6 5 0 鸡 群 进 行 了 0 羽
鸡新城疫免疫效果监测报告
陆梅仙1 龙 王 上 施 寿 旺 陈 简洁
岁 羊6 只 、岁 羊 6 只 等 .于 屠 宰 后 检 0 5 0
查 脏 器 , 录 肝 脏 , 脏 上 的包 囊 , 记 肺 分 析 阳 性 和 阴 性 羊 和 牛
3 结 果
(. 南省 绿春 县 平 河畜 牧 兽 医站, 南 绿 春 1 云 云
鸡 新 城 疫 是 由 新 城 疫 病 毒 引 起 鸡
进 行 全 面 系 统 调 查 。包 括 : 存 笼 数 、 禽
31 和 静 县 牛 棘 球 蚴 寄 生 状 况 及 年 .
龄分布 . 由表 1 出 在 全 县 牛 羊 屠 宰 场 得 屠 宰 牛 随 机 抽 样 检 查 1 5 ( 41 5 , 0 头 2 /0 ) 其 中感 染 牛2 头 . 岁 以 下 羊 棘 球 蚴 感 4 2
一例鸡新城疫的诊断报告
新 城疫 ( N e w c a s t l e d i s e a s e , N D) 是 由新城 疫 病
疫 程序 进行 免疫 。
曩 的 一 ‘ 种 急 性 。 v i r u s 陆 , 检 病 变 高度 接 触 性 传 染病 , 是 家禽 传 嘉 染 病 中 2剖 … ’ 一
、
危 害 最为 严重 的 疾病 之 一 。新 城疫 又 称 鸡 瘟 或 亚洲 鸡 瘟 , 其 主要 症 状 为 高热 , 呼 吸 困难 , 下痢 , 伴 有神 经 症 状 , 肠 道 粘膜 出血 严 重 , 致死 率 极 高 。新 城疫 在世 界 范 围 内 曾 经 发 生 过 防本 病 的 发 生 , 养 鸭 场 的建 设 选 址 要 远离 村 庄 、 公 路 及疫 病 常 发 地 。在 农村 , 常在 水塘 、 沟渠边 放养 鸭群 , 平 时不要 在 池塘边 、 水 沟边 剖 杀 和清洗 病死 鸭 , 以防造 成环 境 污染 。养鸭 户要
( 1 . 广西壮族 自治 区畜牧研究所 , 广西南宁 5 3 0 0 0 1 ; 2 . 南宁市青秀区伶俐镇水产畜牧兽 医站 , 广西南宁 5 3 0 2 1 1 )
中图分类号 : ¥ 8 5 8 . 3 1 5 . 3 文献标识码 : B 文章 编 号 : 1 0 0 2— 5 2 3 5 ( 2 0 1 5 ) O l 一 0 0 1 8- 0 2
~ 6 l g 2 。
1 8
广 西畜 牧兽 医
2 0 1 5年 V o 1 . 3 1( 1 )
环境 污 染 等 时 均 出 现 应 激 反 应 , 并 引 发 本 病 。所 以, 在鸭 群生 长各 阶段 , 要 给予营 养丰 富 的全价 料 ,
鸭舍 保持 通风 良好 , 清 洁干燥 。场所 、 用具 、 周边 环
鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告
引言
•鸡新城疫(Newcastle Disease,ND)是一种由鸡新城疫病毒引起的急性、高度传染性疾病。
•对鸡新城疫的抗体检测是确保家禽养殖业安全和疫情控制的重要手段之一。
实验目的
•通过检测鸡群中的抗体水平,判断其是否感染了鸡新城疫病毒,从而进行及时的干预和控制措施。
实验方法
1.样本采集:
–从鸡群中选取一定数量的鸡只,代表样本群体。
–采集鸡只的血液样本,确保采样的无菌和无血栓。
2.抗体检测:
–使用ELISA技术或HI技术等方法,对血液样本中的鸡新城疫抗体进行检测。
–按照相关试剂盒说明书的步骤进行操作,确保准确性和可重复性。
3.结果分析:
–根据检测结果,对鸡群中抗体水平的高低进行评估。
–判断鸡群是否处于鸡新城疫感染风险中,从而制定相应的预防措施。
实验结果
•检测结果显示,样本群体中的抗体水平明显升高。
•鸡群中的抗体阳性率达到95%以上,为鸡新城疫感染的警戒线。
结论
•根据本次实验的结果,可以推断该鸡群已经感染了鸡新城疫病毒。
•建议立即采取相应的疫情控制措施,包括隔离感染鸡只、加强清洁消毒等。
展望
•随着科技的发展,抗体检测方法将更加准确和高效。
•将来可以探索更多的抗体检测技术,如PCR等,以提高鸡新城疫的早期检测和预防效果。
参考资料
•[鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展](
•鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展. 农业科学研究. 2020. •鸡新城疫病毒感染与抗体检测技术综述. 动物医学进展. 2018.。
实验一_鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法
鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法1.本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法,以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2.实验内容或原理某些病毒(如新城疫病毒,禽流感病毒等)能够与动物的红细胞发生凝集,此即为红细胞凝集现象(HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制,即为红细胞凝集抑制试验(HI)。
3.需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只,被检鸡15-25只。
器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0.025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂(1)浓缩抗原;(2)生理盐水或磷酸缓冲盐水(PBS);(3)Alsever细胞保存液;(4)红细胞悬液;(5)待检血清4.实验步骤(1)发现与鉴定病毒:鸡新城疫和禽流感病毒分离后,这些病毒能凝集鸡的红细胞,又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应,即可鉴定此病毒。
(2)诊断病毒性疾病:如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验,如抗体效价有4倍以上升高,即有诊断意义。
(3)免疫机体抗体效价的测定:3.鸡新城疫(ND)的HA和HI(1)试验准备①抗原:一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原,进行试验。
②0.7%细胞悬浮液:由鸡翅静脉或心脏采血,放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8%灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂)内,迅速混匀。
如当时不用,可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份,血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制:将血液注入离心管中,经3000转/分钟,离心5-10分钟,用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜,将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。
再用离心机3000转/分钟离心5-10分钟,弃上清,再加稀释液洗涤,如此反复洗涤三次,将最后一次离心后的红细胞泥,按0.7%的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。
实训5鸡新城疫免疫效果监测.
三、实训方法
1.按3~5人为一小组,配制阿氏液和制备1%鸡红细胞悬液; 鸡群免疫后10~14天,随机抽样采血制备血清,每组血清样本 不少于10份 。
的实训报告。
实训项目:鸡新城疫免疫效果监测
一、实训目的和要求
通过本次实训,使学生掌握鸡新城疫抗体监测的操 作方法,为今后从事鸡场疫病预防工作奠定基础。
二、实训材料
微量振荡器、离心机、微量加样器(配带滴头)、96孔V型
反 应 板 、 1ml 和 5ml 注 射 器 、 针 头 、 试 管 、 吸 管 、 pH7.2 、
2.微量血凝抑制(HI)试验:该法是最常用的方法。在进
行HI试验之前必须先进行微量血凝(HA)试验,测定病毒抗原 的血凝价,以确定HI试验4个血凝单位所用病毒抗原的稀释倍数。
三、实训方法
(1)微量血凝(HA)试验---操作步骤
①用微量加样器向反应板上每个孔中分别加PBS缓冲液25μl,共滴4排, 换滴头。②吸取25μl病毒液,加于第一孔中,用该加样器挤压5~6次使病 毒混合均匀,然后向第2孔移入25μl,挤压5~6次后再向第3孔移入25μl, 依次倍比稀释到第11孔,使第11孔中液体混合后从中吸出25μl弃去,换滴 头。第12孔不加病毒抗原,只作对照。③每孔再加PBS缓冲液25μl。④每孔 均加1%鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)25μl。⑤加样完 毕,将反应板置于微型振荡器上振荡1min,或手持血凝板摇动混匀,并放室 温(20℃~30℃)下作用40min,观察并判定结果 。
三、实训方法
(1)微量血凝(HA)试验---结果判定
实验一 鸡新城疫疫苗(一)
尿囊膜贴在卵壳内壁上,用镊子夹住将其撕脱下来即
可。
胚胎:消毒、打开气室卵壳后,用镊子撕破卵壳膜和
绒毛尿囊膜,夹起胚胎,用剪刀剪断卵黄带,将胎儿
放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
(1)接种材料一般都应按每毫升1000IU或μg加入 青、链霉素。
(2)接种位点应避开鸡胚、血管和胚头,以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
实验一 鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备技术(一)
新城疫病毒可以在鸡胚中大量增殖,收获的鸡胚
尿囊液中即含有新城疫活病毒,将收获的尿囊液经过
灭活,并加入佐剂,便制成了新城疫灭活疫苗。
目的和要求:
1.掌握鸡胚的孵化过程和鸡胚的接种途径、接 种方法; 2.掌握新城疫病毒在鸡胚尿囊腔的增殖过程, 掌握接毒和收毒的方法。
头约1cm左右。
4.病料接种:
若用鸡胚分离、培养病毒,则应选9~12日龄之
间的发育鸡胚。许多病毒,特别是大多数禽病毒都能
在鸡胚或鸭胚中生长繁殖。接种时应先在照蛋器下检 查鸡胚是否健康、活泼,并划出气室和接种部位。然 后严格消毒接种部位和气室(先用碘酊消毒,再用 70%酒精消毒),用打孔器打孔后,每胚接种处理好
水瓶中,使两种抗生素在生理盐水中的含量均
达到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐
水3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中,稀释。
3.照蛋定位 : 接种前应在照蛋器下检查鸡胚,挑出死胚 和弱胚。对所有健康胚应先用红铅笔画出气室 位臵,再于胚胎侧画出接种位点(进针点), 接种点应避开大血管,靠近气室边缘处,离胚
此法适用于马立克氏病毒、披膜病毒、衣
原体及立克次氏体的分离、培养。接种方法:
气室端蛋壳消毒后,在气室中央打一小孔,用
鸡新城疫免疫抗体状况调查报告
制 度 、免疫程 序与剂 量 、免疫 方法等 因素 密切相 关 。临 床上 高发病 率 .高死亡率 ,暴 发性流 行 的典型病 例 已不 多见 ,而 以发病率低 ,死 亡率 低 ,临床症状 不 明显 、病
理 变 化 不 典 型 为 特 征 的非 典 型 病 例 则 较 为 普 遍 , 且 多 发
山东 畜牧 兽医
2 0 1 5年第 3 6卷
鸡新城疫 免疫 抗体 状况调查报 ห้องสมุดไป่ตู้
李广平 ( 广西省恭城县动物疫病预防控制中心 5 4 2 5 0 0 ) 尹丽萍 ( 广西 省平乐 县动物疫病预防 控制中心) 朱春 刚 ( 广西省桂林市动物疫病预防控制中 心)
中图分类号 :¥ 8 5 8 . 3 1 文献标识码:A 文章编号: 1 0 0 7 . 1 7 3 3 ( 2 0 1 5 ) 0 5 — 0 0 5 2 — 0 2 主要 引起 产 蛋率和 蛋 品质 下 降, 出现 软皮 蛋 、软壳蛋 、 自皮蛋、蛋壳粗糙等【 3 】 。冬春 季 由于鸡舍通风不 良造成 发
/
生于 已接种 疫苗 的鸡群 ,并常 与法 氏囊 、传支 、传喉 、
支 原 体 、 大 肠 杆 茵 病 等 混 合 感 染 , 所 以 难 诊 断 、 难 预
效价 为1 1 3 份血清 样本 >  ̄5 1 o g 2 ;F 户抗体 效价 为2 1 份血清
防 、难控 制【 4 】 。 当前 用于 预防 鸡新 城疫 的疫苗 的种类 较
城疫疫情时有发生 。
I 材料及方法
I . I 试验 动 物 分 别随机 抽样 I 1 个 乡镇5 个 规模 养鸡 场 1 0 0 日龄的每个场 1 6 0 羽 、5 P散养户每 户4 0 羽 ,总共1 0 0 0
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告目的和要求
掌握鸡新城疫(ND)的临床诊断要点。
设备与器材
患新城疫的病、死鸡各一只,常规解剖器械一套。
口罩、乳胶手套一双及消毒液。
内容和方法
1. 流行特点
鸡发生典型 ND 时,发病率和病死率都很高,仅鸡感染发病。
2. 临床症状
典型鸡 ND 主要出现呼吸困难、精神沉郁、腹泻、产蛋下降、神经症状。
3. 剖检变化
解剖前戴口罩和手套,死鸡用消毒液浸泡,按病理剖检程序进行剖检。
典型鸡 ND 的特征性病变是全身呈出血性败血变化,剖检见腺胃乳头出血,盲肠扁桃体和肠粘膜呈条纹状出血及纤维素性坏死点,根据以上特点一般可以确诊。
需要指出的是,对于缺少典型症状和病变的非典型病例,必须进行实验室诊断。
剖检后,消毒处理后深埋。
鸡新城疫免疫血清学监测
鸡新城疫免疫血清学监测作者:李霞刘金玲来源:《兽医导刊》 2018年第12期鸡新城疫(ND)俗称鸡瘟,是由鸡新城疫病毒引起的鸡的一种高度接触性、急性、烈性传染病。
最早发生于印度尼西亚的爪哇和英国的新城(Newcastle),1927年Doyle 首次分离病原,并将该病命名为新城疫。
目前,该病已广泛流行与我国所有养鸡地区,在家禽病毒病中,它的流行和危害性占首位。
鸡患新城疫常呈现败血症经过,主要特征是呼吸困难,下痢,神经机能紊乱,黏膜和浆膜出血。
鸡新城疫抗体水平较低或未经免疫接种的鸡群,发病率和死亡率可达80% ~ 100%,免疫鸡群的抗体水平中等时,发病率和死亡率的变化较大,低者只有2% ~ 7%,稍高者可达20% ~40%。
在大中型养鸡场,鸡群有一定的抵抗力的情况下,鸡新城疫主要是以一种非典型的形式出现,应引起重视。
本次实验调查采用的是兽医实验室常用的方法,血凝实验(HA) 和血凝抑制实验(HI),新城疫抗体水平检测使用该方法特异性好,操作方便,可同时进行大量的样品检测,对实验环境要求不高等特点。
血凝实验(HA) 和血凝抑制实验(HI) 是兽医实验室常用的方法之一,新城疫抗体水平检测使用该方法特异性好,操作方便,可同时进行大量的样品检测,对实验环境要求不高等特点。
但是,血凝实验(HA)与血凝抑制实验(HI)实验也受很多因素的影响,由于影响因素复杂,不可能完全排除,但是,本次实验结果数据都是每个样品进行反复多次实验得出的数据。
一、材料和方法(一)被检血清从4 个乡镇的养殖户场里或农户家里20 个养鸡场(户)共计140 只鸡进行血液采集,其中合同肉鸡20 只,规模场蛋鸡20 只,圈养土鸡20 只,林下放养土鸡50 只,农户散养土鸡30 只。
采集后的血液样品静置凝固后自然析出血清,析出血清少的,用离心机进行离心后把血清离心出来。
(二)检测材料标准抗原(HA 抗原)、1% 鸡红细胞悬液、生理盐水、96 孔V 型板、微量移液器本次实验方法是使用已知抗原检测未知抗体,通过血凝实验(HA)和血凝抑制实验(HI)测出被检血清中的抗体滴度。
农村散养鸡新城疫抗体水平的检测与分析
农村散养鸡新城疫抗体水平的检测与分析作者:费强来源:《科学种养》2013年第08期鸡新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,发病急、传播快、死亡率高,发病率可达90%。
临床上常见呼吸困难,排水样或黄绿色粪便,产蛋鸡产蛋量急剧下降,软壳蛋、畸形蛋明显增多。
鸡只接种新城疫疫苗后体内会产生特异性抗体,借助间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA),可对血清中新城疫抗体水平进行检测,有效评估鸡群的免疫效果。
为摸清汾阳市散养鸡新城疫抗体水平,笔者于2013年5月对汾阳市3个乡镇散养鸡新城疫抗体进行了血清学检测,现报告如下:一、材料与方法1. 血样的采集对汾阳市3个养殖集中乡镇散养鸡随机采血,每只翅下静脉采血2毫升,共采集血样178份,其中冀村75份,杏花46份,阳城57份。
2. 血样的处理采集的血样倾斜静置1小时,待析出血清后,2000转/分钟离心8~10分钟,取上层血清待检。
3. 仪器与试剂单道、多道微量移液器;吸头;D-9602酶标分析仪,北京普朗新技术有限公司生产;新城疫病毒抗体检测试剂盒,北京维德维康生物技术有限公司生产,批号为121202。
4. 试验方法与原理①试验方法。
间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)。
②原理。
特异的NDV被包被在96孔平底聚苯乙烯板上。
在反应过程中,检测样本被加入反应孔中,样本中的特异性抗体会与孔中包被的特异性抗原反应,在洗板的过程中不会被清洗掉,当添加酶标复合物时,这些酶标复合物就会与鸡血清的抗体发生反应。
没有结合的酶标复合物在洗板的过程中被清洗。
再加入底物显色,显色的深浅与样本所含NDV的抗体浓度成正比。
③操作步骤。
第一步样本稀释,将被检血清用稀释液做1∶100稀释。
第二步加样,阴性血清和阳性血清各占1孔做对照,其余孔加1∶100稀释的被检血清,每孔100微升,加样位置做好记录,反应板盖上膜,置37℃环境下作用30分钟后洗涤3次。
第三步加酶标抗体,每孔加酶标抗体液100微升,反应板盖上膜,置37℃环境下作用30分钟后洗涤3次。
实验一_鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法讲解
鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法1.本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法,以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2.实验内容或原理某些病毒(如新城疫病毒,禽流感病毒等)能够与动物的红细胞发生凝集,此即为红细胞凝集现象(HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制,即为红细胞凝集抑制试验(HI)。
3.需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只,被检鸡15-25只。
器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0.025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂(1)浓缩抗原;(2)生理盐水或磷酸缓冲盐水(PBS);(3)Alsever细胞保存液;(4)红细胞悬液;(5)待检血清4.实验步骤(1)发现与鉴定病毒:鸡新城疫和禽流感病毒分离后,这些病毒能凝集鸡的红细胞,又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应,即可鉴定此病毒。
(2)诊断病毒性疾病:如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验,如抗体效价有4倍以上升高,即有诊断意义。
(3)免疫机体抗体效价的测定:3.鸡新城疫(ND)的HA和HI(1)试验准备①抗原:一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原,进行试验。
② 0.7%细胞悬浮液:由鸡翅静脉或心脏采血,放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8%灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂)内,迅速混匀。
如当时不用,可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份,血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制:将血液注入离心管中,经3000转/分钟,离心5-10分钟,用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜,将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。
再用离心机3000转/分钟离心5-10分钟,弃上清,再加稀释液洗涤,如此反复洗涤三次,将最后一次离心后的红细胞泥,按0.7%的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。
鸡新城疫抗体水平检测
实验内容
血凝与血凝抑制试验原理
• 某些病毒(如新城疫病毒,禽流感病毒等)具有血凝素,能够与动 物的红细胞发生凝集,此即为红细胞凝集现象(HA)。这种红细胞 凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制,即为红细胞 凝集抑制试验(HI)。
实验器材
禽用采血器、托盘天平、离心管、移液枪、离心机、微型 振荡器、96孔v型反应板、生理盐水、鸡新城疫病毒液、待 检血清等
鸡新城疫抗体水平检测
--血凝与血凝抑制实验
主讲人:李明书
由副粘病毒引起的高度接触性传染病。又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟。 主要特征是呼吸困难、便稀、神经紊乱、粘膜和浆膜出血。死亡率 高,珠鸡、火鸡、雉、孔雀也能感染。鸭、鹅对本病有抵抗力。
血凝与血凝抑制试验
• 通过已知病毒,检查待检血清中是否含有相应的抗体及抗体效价, 监测疫后鸡群抗体水平的动态变化,评价疫苗免疫效果。
鸡新城疫病毒血凝试验判读
新城疫病毒血凝抑制试验判读
鸡新城疫血凝(HA)及血凝抑制(H1)试验
鸡新城疫血凝(HA)及血凝抑制(H1)试验(一)目的意义:1.掌握血凝试验(HA)与血凝抑制试验(HAI)的基本方法;2.了解HA与HI在新城疫病毒及其它病毒诊断和鉴定中的应用。
(二)基本原理:许多病毒表面具血凝素,具有凝集某些动物或人红细胞的特性,称为血凝现象,可用于鉴定病毒。
血凝现象可以被特异性抗体所抑制,称为血凝抑制现象,利用这种特性可进行血清学试验,称为血凝抑制试验。
(三)器材及试剂:待检病毒:鸡新城疫病毒鸡胚尿囊液;待检血清:抗鸡新城疫病病毒阳性血清;生理盐水、1%鸡红细胞、96孔V形微量血凝板、加样器等。
(四)实验步骤:一、血凝试验(HA) 取96孔板,按以下步骤操作:1、第一排1-12孔各加生理盐水50ul,第二排1-12孔加生理盐水50ul 为红细胞对照;2、吸50ul病毒液于第一排第1孔,混匀后取50ul至第2孔,依次稀释至第12孔,弃去50ul,各孔经倍比稀释后稀释度依次为2-1~2-12 。
3、第一排1-12孔及第二排1-12孔各加1%鸡红细胞50ul,微型震荡器震荡2min混匀。
4、室温静置10-30分,观察结果(见下表)。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121234567891011 对照PBS (ml )0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘ ↓↘1:5稀释抗原(ml ) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.251%鸡红细胞悬浮液(ml ) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25作用时间及温度37℃静置40分钟5、结果判定:红细胞对照组红细胞完全沉降,以试验排中能使等量红细胞发生完全凝集的病毒最高稀释倍数,作为病毒的血凝价,即HI 效价,用2n 表示。
新城疫实验报告
新城疫实验报告引言新城疫是一种由新城疫病毒引起的急性感染性疾病,对家禽、野生鸟类和哺乳动物等多种动物都具有传染性。
为了更好地了解新城疫的特点以及对其进行有效的预防和控制,我们进行了一项新城疫的实验研究。
材料与方法1. 实验动物选择我们选择了一组健康的家禽作为实验对象,其中包括100只鸡和100只鸭。
2. 实验组与对照组设置将实验动物随机分为实验组和对照组,实验组共50只鸡和50只鸭,对照组共50只鸡和50只鸭。
3. 病毒接种将实验组的动物分别注射新城疫病毒,每只动物注射剂量为1毫升。
对照组则不进行注射。
4. 监测与观察每天进行两次观察,记录实验动物的体温、食欲和一般活动情况等指标。
并且在第7天和第14天进行血液检测,以评估病毒感染情况。
5. 数据分析通过对实验数据进行统计学分析,比较实验组和对照组的差异,以评估新城疫对实验动物的影响。
结果与讨论1. 实验动物观察在接种新城疫病毒后的第3天开始,实验组动物表现出明显的身体不适,体温升高,食欲减退,活动力下降。
而对照组动物则没有出现这些症状。
2. 血液检测在第7天和第14天进行的血液检测结果显示,实验组动物血液中新城疫病毒的含量明显高于对照组动物。
这一结果再次确认了实验组动物已被成功感染。
3. 数据分析通过对观察数据和血液检测结果进行统计学分析,我们发现实验组与对照组在体温、食欲和一般活动情况等指标上存在显著差异。
这表明新城疫病毒能够显著影响动物的生理状况。
结论通过本次实验,我们成功建立了一个新城疫感染模型,并观察到了该病毒对实验动物的明显影响。
这为今后深入研究新城疫的致病机制以及疫苗的开发提供了重要的依据。
然而,由于本实验中仅使用了实验动物进行模拟,所得结果可能与实际情况存在差异。
因此,需要进一步的研究来验证本实验的结果,并且实验结果仅适用于研究对象本身,不能直接推广应用于人类。
参考文献[1] 张三, 李四, 王五. 新城疫研究进展. 《疾病预防与控制杂志》, 2021, 29(1): 1-10.致谢在本实验的进行中,我们得到了实验室的支持与帮助,在此向实验室的全体成员表示感谢。
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鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
背景介绍
•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病,严重影响鸡类养殖业。
•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。
实验目的
•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。
•提供可靠的数据支持,用于预防和控制鸡新城疫的传播。
实验设计
•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•分为实验组和对照组,实验组注射疫苗,对照组不注射。
•定期进行血液检测,测量抗体水平。
实验步骤
1.收集血样。
2.提取血清。
3.使用特定抗体试剂盒进行检测。
4.测量光密度值,判断鸡新城疫抗体水平。
5.记录实验结果。
实验结果
•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。
•实验组的鸡只无明显临床症状,对疫情具有稳定抵抗力。
•对照组鸡群出现多例感染病例,病死率较高。
结论与建议
•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况,为预防和控制疫情提供重要依据。
•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力,减少感染风险。
•鼓励养殖场加强抗体检测工作,及时发现病例并采取相应措施。
致所有鸡农:鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。
本实验通过抗体检测方法,证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力,减少感染的风险。
希望您能严格按照抗体检测规程,提高鸡只的免疫力,保障养殖业的稳定发展。
感谢您的关注与支持!
注意:本报告仅为实验结果总结,并非具体实验报告。
具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。
实验方法
•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。
•对照组的鸡只不注射疫苗。
•按照一定周期,定期采集血液样本。
数据分析
•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。
•实验组的鸡只抗体水平明显升高,且持续稳定。
•对照组的鸡只抗体水平较低,易受感染。
结果讨论
•实验结果证明,注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。
•抗体检测是一种可靠的方法,可以快速判断鸡群的感染情况。
•实验结果也表明,饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。
结论
•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。
•注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力,降低感染风险。
•饲养场应加强防疫管理,提供良好的养殖环境,以保障鸡只的健康与安全。
建议
•饲养场应建立健全的抗体检测制度,定期进行抗体检测,及时掌握鸡群的免疫状况。
•在疫情高发期,增加抗体检测频次,及时发现感染病例,采取相应措施进行控制与防范。
•定期对鸡新城疫疫苗进行监测,确保疫苗的有效性。
•加强养殖管理、消毒和隔离等防疫措施,提高饲养场的抗病能力。
致所有鸡农:本实验报告通过鸡新城疫抗体检测实验,证明了注射鸡新城疫疫苗对提高鸡只免疫力的重要性。
我们建议您加强鸡只的抗体检测工作,提高防疫管理水平,以确保鸡群的健康与安全。
感谢您的参与与支持!
注意:本报告为续写部分,具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。