色素的提取和分离原理（6篇）

色素的提取和分离原理(6
篇)
以下是网友分享的关于色素的提取和分离原理的资料6篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。

篇一
实验名称:菠菜色素的提取和分离
一、实验目的
1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分
离提纯方法；
2、通过柱色谱和薄层色谱分离操作，加深了解微量有
机物色谱分离鉴定的原理。

二、实验原理
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素
（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。

叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素
a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了
叶绿素b。

它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，
是植物进行光合作用所必需的催化剂。

植物中叶绿素
a的含量通常是b的3倍。

尽管叶绿素分子中含有一
些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚
等一些非极性的溶剂。

胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体，即-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡
萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最重要。

在生
物体内，β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A。

目
前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A使用，也可作为食品工业中的色素。

叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，
它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。

与胡萝卜
素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

CH2
H3CCH2CH3Mg
NH3CCH3
CO2CH3
CH3CH3CH3CH3
CH3叶绿素a（R = CH3）叶绿素b（R = CHO）22 H3C H3C3CH3CH3
3RR33H3C3
β-胡萝卜素（R = H）叶黄素（R =
OH）
H3C3CH3CH3
CH2OH
CH3
维生素A
三、操作步骤
1、菠菜色素的提取
取2g新鲜菠菜叶，与10mL甲醇拌匀研磨5分钟，弃
去滤液。

残渣用10mL的石油醚-甲醇（3:2）混合液进
行提取，共提取两次。

合并液用水洗后弃去甲醇层，
石油醚层进行干燥、浓缩。

2、薄层层析
将上述的浓缩液点在硅胶G的预制板上，分别用石油
醚-丙酮（8:2）和石油醚-乙酸乙酯（6:4）两种溶剂系
统展开，经过显色后，进行观察并计算比移值。

3、柱层析
取3g中性氧化铝进行湿法装柱。

填料装好后，从柱顶加入上述浓缩液，用石油醚-丙酮（9:1）、石油醚-丙酮（7:3）和正丁醇-乙醇-水（3:1:1）进行洗脱，依次接
收个色素带，即得胡萝卜素（橙黄色溶液）、叶黄素（黄色溶液）、叶绿素a（蓝绿色溶液）以及叶绿素b（黄
绿色溶液）。

【实验流程】
研磨石油醚—甲醇水
过滤萃取洗涤、蒸馏
薄层层析
四、实验关键及注意事项
注意薄层色谱、柱层析实验操作要点的掌握和应用
五、提问纲要
试比较叶绿素、叶黄素和胡萝卜素三种色素的极性，
为什么胡萝卜素在层析柱中移动最快？
六、主要试剂用量、规格
新鲜菠菜2g、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇
10ml、硅胶G、中性氧化铝
植物细胞质壁分离实验
探究目的：了解一定浓度的不同溶液引起植物细胞质
壁分离的效果
实验材料：紫色洋葱鳞片叶
实验试剂：30%的蔗糖溶液，
实验器具：显微镜，载玻片，盖玻片，胶头滴管，吸
水纸，刀片，镊子，烧杯
方法步骤：
1.制作洋葱鳞片叶外表皮临时装片；
2.用显微镜观察洋葱鳞片叶表细胞中紫色中央液泡的
大小，以及原生质的位置；
3.从盖玻片的一侧滴一滴蔗糖溶液，在盖玻片的另一
侧用吸水纸进行吸引，这样重复几次。

在开始滴蔗糖
溶液时开始观察，马上用手表计时，质壁分离停止时，立即停止计时，记录好时间。

质壁分离结束后，观察
原生质层和液泡的形态。

再在载玻片一侧滴清水，用
吸水纸在另一侧吸引，观察细胞质壁复原情况。

4.分别用新的洋葱鳞片叶外表皮装片加实验试剂中的
其它试剂，重复3的实验。

5.将观察到的现象记录下来，并分析，得出结论。

观察成熟植物细胞的质壁分离和复原
实验原理：
当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出
到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞
壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度大于
细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和壁又复原。

目的要求：
1．初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法；
2．理解植物细胞发生质壁分离和复原的原理。

重点和难点：
1．初步掌握植物细胞质壁分离和复原的实验方法；
2．临时装片的制作；
3．高倍显微镜的使用。

实验器材：
紫色洋葱的鳞片叶、刀子、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜；
质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液、清水；
方法步骤：
一临时装片制作：
1选材：
（1）选用紫色特别深的洋葱外表皮；
说明：Ⅰ在实验之前，最好将洋葱放在水中浸泡一下，可以使洋葱吸水多一些，
而且代谢也比较旺盛，实验效果明显。

Ⅱ将洋葱的外层剥去两层，因为处于最外
的可能已经死亡。

提问：对实验材料有何要求？什么样的细胞可以发生质壁分
离？
（2）取表皮：在洋葱的外表皮上，用刀片划“井”字，用镊子轻轻撕取一小块；
关键：最好撕取单层细胞，如果撕的太厚，则会使细胞重叠，严重影响实验效果；
2制片：
在载玻片中央滴上一滴清水，然后将取下的洋葱表皮放在水中，平展开来；加上
盖玻片。

注意：Ⅰ洋葱表皮不能卷曲起来；Ⅱ不能带有气泡；Ⅲ加盖玻片时，要从一侧大
约45°角放下，在载玻片和盖玻片之间充满了清水，以便挤出空气。

二观察：
㈠低倍镜观察：找到洋葱表皮细胞。

㈡高倍镜观察观察正常细胞形态。

在高倍镜下主要要注意以下几个结构：⑴紫色的大液泡，几乎充满了整个细胞；
⑵注意观察原生质层和细胞壁紧紧地贴在一起。

⑶找到细胞核，它是判断液泡膜
还是细胞膜的关键。

⑷指导学生绘一个正常状态下的成熟植物细胞结构图应指导
学生多移动临时装片，找到呈单层的地方，然后调节清晰；㈢质壁分离实验：
1．处理：
从载物台上取下装片，在盖玻片的一侧，滴入0.3g/mL的蔗糖溶液，另一侧用吸
水纸重复吸引几次。

实验成功关键：最好多重复几次，因为在洋葱表皮周围充满的是清水，如果不多
重复几次，洋葱表皮周围的蔗糖溶液浓度太低，质壁分离效果不明显。

拓展提问：对所用的溶液有何要求？
答：Ⅰ不能是对植物细胞有伤害作用的物质，如强酸强碱，因为它们会使细胞致
死，而死亡的细胞内的膜便失去了选择透过性，而成了全
透性；Ⅱ外界溶液中的
物质必须是不可以被植物细胞吸收的物质，如硝酸钾、碳酸铵等等，因为这些物
质会被植物细胞所吸收，而使质壁分离后的植物细胞自动发生质壁分离复原；Ⅲ
溶液的浓度要适中，太大会使细胞失水过多或过快而导致细胞死亡，而浓度太小
又现象不明显；
2．观察：
在高倍镜下观察，可见到本来在各个细胞交界的地方都是紫色的，此时可见在细
胞的角落处开始变淡，随着可见液泡变小，颜色变深，慢慢的从边角到四周完全
分离开来。

说明：所谓的质壁分离要让学生清楚其真实含义，是指原生质层和细胞壁的分离，
不是细胞壁和细胞质分离；
指导学生分析原因：Ⅰ外因：外界的蔗糖溶液浓度大于细胞液的浓度，成熟的植
物细胞通过渗透作用失水；Ⅱ内因：细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁的
伸缩性较小，而原生质层的伸缩性较大，二者不同步伸缩，
从而导致质壁分离；㈣质壁分离复原实验：
1处理：取下临时装片，在一侧滴入清水，另一侧再用吸水纸重复几次吸引，以
确保洋葱表皮细胞完全浸在几乎是清水中；
2观察：先在低倍镜找到一个现象质壁分离比较明显的细胞，然后换用高倍镜观
察，可见和刚才相反的现象，中央液泡渐渐变大，颜色变浅，最后原生质层又和
细胞壁紧紧地贴在一起。

三总结：细胞液浓度小于外界溶液浓度时，细胞通过渗透作用吸水，发生质壁
分离现象；细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞通过渗透作用失水，发生质壁
分离复原现象；
四用途：证明成熟的植物细胞可以发生渗透作用；还可以证明细胞的死活。

附：紫色洋葱表皮细胞正常形态及质壁分离图
拓展实验：植物质壁分离和复原实验从微观角度证明成熟植物细胞可渗透失水和
吸水，如何从宏观角度证明成熟植物细胞可渗透失水和吸水？引导学生从实际生
活出发设计实验，并准备一些材料让学生亲自操作。

实验方案一：1.取烧杯2只，装等量的清水和0.3g/mL的蔗糖溶液，2.将新鲜萝
卜切成大小一样的萝卜条（如长10厘米，宽1厘米，厚1厘米）放入其中，3.20
分钟后，测量萝卜条的长度和质量。

实验方案二：1.取两个大小相同的萝卜，中间挖大小相同的两个洞，2.一个萝卜
的洞中加满清水，另一个洞中加满0.3g/mL的蔗糖溶液，3.20分钟后，观察洞中液体量的变化。

篇二
实验：提取和分离叶绿体中的色素
1、原理：
叶绿体中的色素能溶解于有机溶剂（如丙酮、无水乙醇等）。

叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。

2、过程：（见书P61）
3、结果：色素在滤纸条上的分布如下图：
（橙黄色）最快、最窄
（黄色）
（蓝绿色）最宽
（黄绿色）最慢
【特别提示】
①从色素带的宽度知色素含量的多少依次为：叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素。

②从色素带的位置知再层析液中溶解度大小依次为：胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a >叶绿素b。

③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 和叶绿素b，最远的是胡萝卜素和叶黄素。

4、实验疑难点拨：
丙酮（或无水乙醇）的用途是溶解（提取）叶绿体中的色素。

石英砂（二氧化硅）的作用是。

碳酸钙的作用是防止研磨过程中色素被破坏。

层析液的的用途是。

5、实验成功的关键：
叶片，颜色要，含有较多色素。

研磨要、。

叶绿素不稳定，易被细胞内有机酸破坏。

充分研磨使叶绿体完全破
裂，提取较多的色素。

滤液细线要画得细而直，以防止。

且要重复2-3次，以带更加清晰。

滤液细线不能触及层析液，否则到色素带。

三、叶绿体中的色素
1、位置：叶绿体中的色素存在于上。

2
叶绿素：叶绿素a（蓝绿色），叶绿素b（黄绿色）
类胡萝卜素：胡萝卜素（橙黄色），叶黄素（黄色）
3、功能：叶绿素a和叶绿素b主要吸收和；
胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光及保护叶绿素免受强光伤害的作用。

【特别提示】
①叶绿素中的色素只吸收可见光，而对红外光和紫外光等不吸收。

②叶绿素对红光和蓝紫光的吸收量大，类胡萝卜素对蓝紫光吸收量大，但对其他波段的光并非不吸收，只是吸收量较少。

③有色大棚主要透过同色光，其他光被吸收，而无色透明大棚日光中各种色光均能通过，所以光合效率最高。

④叶绿素对绿光吸收最少，所以绿色大棚光合效率最低。

篇三
光和色素的提取与分离
一、学习任务分析
“光和色素的提取与分离”是必修一《分子与细胞》第三章“细胞的代谢”中第五节“光合作用”中的一个活动实验。

绿色植物能进行光合作用是因为含有光和色素，本实验旨在让学生通过实验学会提取和分离光和色素的方法，加深光和色素在光合作用中的所起的地位和作用。

通过学生自己动手操作，分离叶绿体中的各种色素，并加以区别，结合理论知识了解每种光和色素的吸收光谱，为学习光合作用打下基础。

二、学习者分析
学生在学习本次活动实验之前，已经基本了解了光合作用所需要的原料，场所，条件等基本知识，知道光合作用的概念基本过程，在此之前也学习了过滤、层析等基本实验操作技能，这些都为本次活动实验打下基础。

高二的学生已经具备较好的假设、演绎、抽象和系统的思维，并且本班学生好奇心旺盛，爱思考，爱提问，动手能力极强，对此类操作性实验具有浓厚的兴趣。

同学们无不希望通过自己的双手提取光和色素，解密光合作用的过程。

三、教学重难点设计
1、教学重点：
(1)学会提取和分离叶绿体中色素的方法和技能。

(2)理解“提取和分离叶绿体中色素”实验的原理
2、教学难点：学会提取和分离叶绿体中色素的方法和技能。

四、教学目标设计
1、知识与技能目标：了解叶绿体中的四种色素及其吸收光谱
2、过程与方法目标：学会提取和分离叶绿体中色素的方法和技能。

3、情感态度价值观目标：
(1)树立严谨认真的科学实验观
(2)学会合作学习的方法
五、教学过程
1、导出实验
我们都知道光合作用的发生依赖于叶绿体中的光和色素，这也是为什么动物或是细菌不能进行光合作用的关键因素之一。

今天我们大家一起动手来提取存在于叶绿体中的光和色素。

2、准备材料用具
新鲜的菠菜叶片，干燥的定性滤纸，95%的乙醇，层析液
（乙醚和石油醚），二氧化硅，碳酸钙，研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，试管，量筒，天平。

3、实验操作准备
学生阅读书本P87页实验步骤，完了以后教师讲解实验需要注意的问题，强调操作过程种可能存在的危险因素。

小组搭建叶绿体色素层析实验装置。

4、师生共同实验
(1)教师按照下列步骤边讲边操作，学生根据老师的操作和书本上的步骤一步一步进行实验操作，提取和分离光和色素。

①用新鲜的菠菜叶放入40℃—50℃的烘箱中烘干，粉碎后取2g干粉放入研钵中，加入少量的二氧化硅和碳酸钙，再加入2—3mL95%的乙醇，充分、迅速研磨成匀浆。

（思考：加入二氧化硅和碳酸钙的作用分别是什么？）
②在一小玻璃漏斗基部放一块单层尼龙布，将研磨液迅速倒入漏斗中，收集滤液到一个试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。

③制备滤纸条。

将一张预先干燥过的定性滤纸剪成长10cm、宽1cm的纸条，在距滤纸条一端1cm处用铅笔画一条细线。

④点样。

用细毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔画的横线均匀地画出一条细而直的滤液细线。

待滤液干后再画一次，共
画3、4次。

⑤分离叶绿体中的色素。

将2mL层析液沿试管壁一侧倒入大试管中，将滤纸条略微斜靠大试管壁的另一侧，轻轻的插入到层析液中，但要保证上面部分干燥。

随后用软木塞塞住试管口。

注意。

滤纸上的细线要高于层析液面。

⑥观察实验结果。

几分钟后，取出滤纸条。

带滤纸条干燥后，观察滤纸条上的色素带。

⑦由于接触了层析液等化学药品，做完实验后一定要用肥皂将手洗干净。

(2)实验结束后，小组记录自己的实验结果。

与正确的实验结果对照，小组分析交流本次实验的为什么会成功或是失败，总结原因。

5、教师就各组实验结果给出评价，总结学生在实验中出现的问题，并加以分析。

6、教师讲解提取出来的4种光和色素在层析带中分布的位置、各自的颜色、作用和吸收光谱。

六、教学设计方案的评价与修改。

（课后）
七、板书设计
一、光和色素的提取与分离
1、实验过程：制备色素滤液——制备滤纸条——点样——层析分离——观察结果二氧化硅的作用：研磨充分
碳酸钙的作用：中和液泡中的有机酸，保护叶绿素
2、层析带中从上到下：胡萝卜素（橙黄色）
叶黄素（黄色）
叶绿素a（蓝绿色）
叶绿素b（黄绿色）
篇四
菠菜色素的提取和分离
精化2班
201024102237
陈翠婷
摘要：用抽滤和浸泡法从菠菜叶中提取了色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离.薄层层析时使用了石油醚-乙酸乙酯=3:2展开剂，洗脱剂的选择是菠菜色素分离的优化条件。

关键词：菠菜色素、色素分离、胡萝卜素、薄层色谱、柱层色谱、叶绿素、叶黄素、洗脱剂、石油醚、抽滤
菠菜含有大量的植物粗纤维、维生素C、钙铁等，还含有大量的胡萝卜素、叶绿素、叶黄素等营养色素。

叶绿素是植物进行光合作用所必须的催化剂，也是使用的绿色色素，可
用于糕点、饮料水中，添加于胶姆糖中还可以消除口臭。

胡萝卜素的三种异构中β-异构体具有维生素A的生理活性，可代替维生素A使用，也可以作为食品工业中的色素使用，最新研究报道，β-胡萝卜素还有防癌功能。

叶黄素是胡萝卜素的羟基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。

由此可见，叶绿素等天然色素有广泛的用途，对于色素的提取与分类就显得很重要了。

一、实验目的
1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法；
2、了解柱层析和薄层色谱分离的基本原理，掌握柱层析和薄层色谱分离的操作技术。

3、初步掌握铺板和湿法装柱及计标比移值Rf。

二、实验原理
1、绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。

叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b。

叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。

胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。

它有三种异构体，即-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素，其中
β-胡萝卜素含量最多，也最重要。

叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。

与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。

在薄层层析时，上述化合物的展开速度不同；在柱层析时，流出速度有差异，可被极性不同的溶剂洗脱。

2、薄层色谱——薄层色谱又叫薄层板析，是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。

待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。

若滤纸、溶剂温度等保持恒定，则各种物质呈现特定的Rf值，成为鉴定
物质的极重要的常数。

3、柱色谱——又称层析法，吸附色谱常用氧化铝和硅胶为吸附剂，填装在柱中的吸附剂将混合物中各组分先从溶液中吸附到其表面上，而后用溶剂洗脱。

溶剂流经吸附剂时发生无数次吸附和脱附的过程，由于各组分被吸附的程度不同，吸附强的组分移动得慢留在柱的上端，吸附弱的组分移动得快在柱的下端，从而达到分离的目的。

三、文献值
乙醇：沸点78.4℃石油醚：沸点40~80℃。

四、实验仪器与试剂
仪器：天秤布氏漏斗研钵分液漏斗显微载玻片毛细管层析柱(20×10cm)分液漏斗
试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶五、实验内容
步骤操作现象
滤液呈深绿色，分液后有机
乙醇（3:2）浸泡20分钟层在上面
→研磨→抽滤(收集滤
液)→滤渣+10ml石油醚：
乙醇（3:2）浸泡10分钟
→研磨→抽滤→收集滤
液并与20mL水混合→分
液→取有机层(无水硫酸
钠干燥)
薄板上出现三个斑点:从上
2展开将点样后薄到下—橙黄(胡萝卜素)→
层板放入盛20mL石黄(叶黄素)→绿(叶绿素)
油醚:乙酸乙酯(3:2)烧
杯中,并罩上表面皿
3求Rf值
用石油醚洗脱时出现三种不
同颜色,先是橙黄色的胡溶入40g石油醚,石油萝卜素被洗脱出来,然后
醚保持一定高度装样样品均匀滴在2滤纸圈上
洗脱1.先用石油醚
再用石油醚:乙酸乙
酯(3:1)洗脱胡萝卜
素
2.用石油醚:乙酸乙
酯(3:2)洗脱叶绿素
六、结果与讨论
Rf值计算
色素种类胡萝卜素叶绿素叶黄素f结论：菠菜中各色素的Rf值得大小：胡萝卜素>叶黄素>叶绿素。

讨论：本次实验有一个失败的地方，就是装柱装得不好，导致第洗脱时，不能很好地洗出色素。

最后不得已重新装柱，重装后效果还是挺好的，能够洗出三种颜色。

七、注意事项
1、两次研磨得到的液体均要抽滤并最后合并在一起，防乳化。

2、拿层析板时，尽量避免手沾到上面使其污染。

3、层析过程中，烧杯切勿移动。

4、拿出层析板时，要立即在色素上升线处做记号。

5、柱一定要干燥。

6、萃取时不要剧烈振荡，以防止发生乳化现象。

层析柱填装紧密与否，对分离效果很有影响，若各部分松紧不匀，会影响渗透速度和显色的均匀。

参考文献：
1李好样，冯轶雪.菠菜色素的提取与分离[J].太原师范学院.2004(3):64-66
2王巍杰，贾晓东.菠菜叶中叶绿素a和其它有效成份的分离提纯[J].河北理工学院学报.2006(2):122-124.
3李玉明,林琳,等.薄层色谱法在叶绿体色素分离实验中的有效应用[J].生物学通报,2005,40(12):53~54
篇五
实验九：叶绿体中色素的提取和分离
一、实验目的：
1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2、探索叶绿体中有几种色素。

二、实验原理：
1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。

2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液
在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。

三、实验材料：
新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶），无水乙醇，层析液（由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。

93号汽油也可代用），二氧化硅和碳酸钙。

四、实验用具：
干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml），天平。

五、方法步骤：
1）称取5g绿色叶片并剪碎研钵→研磨→漏斗过滤→
2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口
1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时
到达滤液细线）
制滤纸条
2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线
1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线滤液划线2）干燥后重复划2-3次
1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线
为准）
纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中
3）用培养皿盖盖上烧杯
观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）
最宽：叶绿素a；
最窄：胡萝卜素；
相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；
相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。

六、考点提示：
1、二氧化硅：为了使研磨充分。

不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。

碳酸钙：保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

不加碳酸钙，滤液会变成黄
绿色或褐色。

丙酮：色素的溶剂。

它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于
水。

2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素b（黄绿色）。