菌渣效价检测方法-委托检测
抗生素效价测定操作规程
抗生素效价测定操作规程1. 主题内容和适用范围本规程规定了公司外购原料药品及生产成品中抗生素的效价测定方法及要求。
本规程适用于公司外购原料药品及生产成品中抗生素的效价测定。
2. 引用标准《中国药典》2010年版二部。
3. 术语抗生素微生物检定法：在适宜的条件下，根据量反应平行原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）方法。
抗生素微生物检定包括两种方法，即管碟法和浊度法。
本法采用的是管碟法。
4. 操作技术（仪器与用具）4.1 操作室：光线明亮，操作间分 a.一般操作间b 半无菌操作间。
室温控制20-25℃。
注意抗生素的污染。
4.2 双蝶：内径90mm 高16-17mm.用后经高压灭菌倒出培养基后，置专用洗液或清洁液中浸泡过夜，冲洗，沥干150-160℃干热灭菌2小时或高压灭菌121℃30min,备用。
4.3 陶瓦盖：内径103mm,外经108mm,吸水性强，定期清洗、干燥或干热灭菌。
4.4 钢管：内径 6.0±0.1mm 高7.8±0.1mm 或8.0±0.1mm,10.0±0.1mm.重量差异不超±0.05g.用后置1:1000苯扎溴铵溶液内浸泡2h 以上,再灭菌洗涤,先用水洗,超声波30min 或用去污粉的沙布条串擦内外壁,水冲洗,淋干,PW 冲洗3次150-160℃干热灭菌2小时备用. 4.5 钢管放置器4.6 恒温培养箱:隔水式为宜35-37℃4.7 灭菌刻度吸管:用于吸取菌液及培养基（5ml 、20ml ），用后立即置5%石碳酸或QCA/QC-SOP-006山东良福制药有限公司起草人 日 期 抗生素效价测定操作规程审核人 日 期 批准人 日 期 第五版实施日期总页数共5页1:1000苯扎溴铵溶液中消毒后再常规洗涤.150-160℃干热灭菌2小时备用.4.8玻璃容器:滴定管、移液管、刻度吸管、容量瓶.符合一等品规定用前用清洁液浸泡,水洗、PW冲3次4.9称量瓶:具塞,重量在10g以下.水冲洗、淋干,置清洁液浸泡2小时以上,水洗、PW冲3次,置洁净的大平皿中.120℃干热3h,待冷到70-60℃时,取出置干燥器中备用.4.10毛细滴管: 清洁液浸泡, 水洗、PW冲3次.120℃干燥3h4.11天平:分析天平,感量0.1mg4.12抑菌圈测量仪(多功能微生物自动测量分析仪)4.13超净工作台5.菌悬液制备取短小芽孢杆菌工作用菌种营养琼脂斜面培养物，加灭菌水1~2ml将菌苔洗下，制成悬液，用吸管将此悬液接种至盛有营养琼脂培养基的扁培养瓶内，摊布均匀，在35~37℃培养7天。
抗生素效价测定操作规程
1.主题内容和适用范圉本规程规定了公司外购原料药品及生产成品中抗生素的效价测定方法及要求。
本规程适用于公司外购原料药品及生产成品中抗生素的效价测定。
2.引用标准《中国药典》2010年版二部。
3.术语抗生素微生物检定法：在适宜的条件下，根据量反应平行原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）方法。
抗生素微主物检定包括两种方法，即管碟法和浊度法。
本法釆用的是管碟法。
4.操作技术（仪器与用具）4.1操作室：光线明壳，操作间分&一般操作间b半无菌操作间。
室温控制20-25°Co 注意抗生素的污染。
4. 2双蝶：内径90mm高16-17呗用后经高压灭菌倒出培养基后，置专用洗液或清洁液中浸泡过夜，冲洗，沥干150-160°C干热灭菌2小时或高压灭菌121o C30min,备用。
4. 3陶瓦盖：内径103mm,外经108mm,吸水性强，定期清洗、干燥或干热灭菌。
4. 4 钢管：内径 6. 0±0. 1mm 高7. 8±0. 1mm 或8. 0±0. 1mm, 10. 0±0. lmm.重量差异不超±0. 05g.用后置1:1000苯扎澳钱溶液内浸泡2h以上，再灭菌洗涤，先用水洗,超声波30min或用去污粉的沙布条串擦内外壁，水冲洗,淋干,PW冲洗3次150-160°C干热灭菌2小时备用.4. 5钢管放置器4. 6恒温培养箱：隔水式为宜35-37°C4. 7灭菌刻度吸管:用于吸取菌液及培养基（5ml、20ml）,用后立即置5%石碳酸或1:1000 苯扎漠鞍溶液中消毒后再常规洗涤.150- 160°C干热灭菌2小时备用.4. 8玻璃容器:滴定管、移液管、刻度吸管、容量瓶.符合一等品规定用前用清洁液浸泡, 水洗、PW冲3次4. 9称量瓶:具塞，重量在10g以下.水冲洗、淋干,置清洁液浸泡2小时以上,水洗、PW 冲3次，置洁净的大平皿中.120°C干热3h,待冷到70-60°C时,取出置干燥器中备用.4. 10 毛细滴管：清洁液浸泡，水洗、PW冲3次.120°C干燥3h4.11 天平:分析天平，感量0. lmg4. 12 抑菌圈测量仪（多功能微主物自动测量分析仪）4.13 超净工作台5.菌悬液制备取短小芽泡杆菌工作用菌种营养琼脂斜面培养物，加灭菌水广2ml将菌苔洗下，制成悬液，用吸管将此悬液接种至盛有营养琼脂培养基的扁培养瓶内，摊布均匀，在35〜37°C 培养7天。
抗生素的生物效价测定法(管碟法)
抗生素的生物效价测定法(管碟法)work Information Technology Company.2020YEAR抗生素的生物效价测定法测定抗生素效价的方法比较多，一般可以分为物理学方法、化学方法、生物学方法、和两种方法配合等四大类，可根据具体情况选择使用。
生物学方法以抗生素的杀菌力作为衡量效价的标准，其原理恰好和临床应用于的要求一致这是它的优点；又其灵敏度较高，需用检品的量较小，也是其它方法所不及的。
抗生素的生物效价测定法，常用的有稀释法、比浊法和扩散法（或称渗透法）。
稀释法这一方法是用培养基将检品抗生素稀释到各种浓度，并依次分装到一系列的容器内，再加入等量“试验菌种”菌种菌液，并放在37 ℃保温箱内培养一定时间，观察何种稀释度适能抑制细菌的生长，该稀释度即为测定终点（或以细菌生长所引起的PH改变及溶血现象等生化反应作为测定终点），再与同样处理的标准抗生素的终点作比较，即可求得检品的效价。
这种方法可以使用液体培养基，也可以使用固体培养基。
所用的材料及培养基都必须严格无菌，并要注意无菌操作。
由于测定终点是以有无细菌生长来判断的，因此所得结果公是一个范围。
比浊法原理及操作大致与稀释法相同。
比浊法也是将不同量的检品及标准品分别加入培养基中，观察其对“试验菌种”的效应——即细菌生长所引起的混浊。
这一方法和稀释法的区别有二：a.比浊法的稀释间隔的密度比较近，准确度高一些；b.比浊法不以细菌有无生长的区分为终点，而是将标准品浓度和细菌生长所引起的混浊度求得一定的比例，再由检品的细菌生长混浊度推算检品的效价。
这一方法易受杂质的影响，并且不适用于有色或混浊的检品。
扩散法使用固体培养基，在培养基凝固以前将“试验菌种”混合进去，在这样备妥的培养表面，可以用种种设计使检品液或含有抗生素的物质与有菌种的培养基接触。
经过培育后，由于抗生素向培养基中扩散，凡抑菌浓度所能达到之下细菌不能生长因而形成透明的抑菌范围，此种范围一般都呈圆形，称为“抑菌圈”。
菌的检测方法
菌的检测方法菌是一类微生物，广泛存在于自然界的各种生物体中，对人类健康和环境具有重要影响。
为确保食品安全、环境卫生和医疗卫生的需要，菌的检测成为必要的工作。
本文将介绍几种常用的菌的检测方法。
二、传统培养法传统培养法是一种常见的菌的检测方法。
其主要步骤包括样品采集、接种培养基、培养、菌落计数等。
首先，从待测样品中采集菌落并转移到培养基上。
然后，将培养基置于适宜的温度和湿度条件下，培养一定时间后观察菌落的形成和生长情况。
最后，通过菌落计数来确定待测样品中菌落的数量并进行分析。
三、分子生物学方法近年来，随着分子生物学技术的发展，分子生物学方法也被广泛应用于菌的检测中。
其中，聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学方法。
该方法通过特定引物选择性地扩增待测样品中的目标基因序列，然后使用凝胶电泳等技术进行目标基因的检测和分析。
相比传统培养法，分子生物学方法具有更高的灵敏度和特异性，能够检测到更低浓度的菌，并且不受菌种生长条件的限制。
四、免疫学方法免疫学方法是另一种常用的菌的检测方法。
该方法基于菌体表面的抗原与特异性抗体的结合，通过免疫反应来检测菌的存在。
常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫荧光技术。
这些方法具有快速、准确的特点，可以进行大规模样品的高通量检测。
五、快速检测方法为了满足现代社会对快速、便捷、准确的菌检测需求，一些快速检测方法也被提出和发展。
比如，基于光学传感技术的生物传感器，利用菌体与传感器之间的相互作用来快速检测菌的存在。
同时，一些生物芯片技术也应用于菌的检测中，通过微小芯片上的微阵列来同时检测多个菌种。
综上所述，菌的检测是确保食品安全、环境卫生和医疗卫生的关键环节。
传统培养法、分子生物学方法、免疫学方法以及快速检测方法都是常用的菌的检测方法。
在选择适合的方法时，需要考虑样品的特点、检测的目的以及实验条件等因素。
在未来，随着技术的不断进步和创新，菌的检测方法将更加多样化和高效化，为人类保障健康提供更强有力的支持。
制霉菌素发酵、提取与效价测定
实验一制霉菌素发酵、提取与效价测定1.1.1 目的与要求(1) 了解抗生素发酵的一般过程及发酵过程中一些重要理化指标检测方法；(2) 学习抗生素（制霉菌素）的提取纯化工艺；(3) 了解制霉菌素化学效价测定的原理；(4) 掌握抗生素生物效价测定的常规方法——管碟法的原理与操作。
1.1.2 基本原理1.1.2.1制霉菌素制霉菌素(nystatin)是由诺尔斯链霉菌(Streptomyces noursei)产生的一种多烯大环内酯类(polyene macrolides) 抗真菌抗生素。
此类抗生素的结构特点是在分子中既有经内酯化作用而闭合的大碳环，又有一系列的共轭双键。
制霉菌素存在于菌丝体中，其纯品为淡黄色微细晶体；不溶于水、氯仿和丙酮等；稍溶于低级醇等；溶于吡啶、冰醋酸和NaOH溶液，但均能使其破坏而失效；对较高和较低的pH以及光和热均不稳定。
临床上使用的制霉菌素，其主要成分为制霉菌素A1，化学结构式如下图所示：图1-1 制霉菌素化学结构图它的氨基糖部分是氨基海藻糖，即3-氨基-3,6-二脱氧-D-吡喃甘露糖，非糖部分为38元的多烯大环内酯。
制霉菌素对各种真菌如白色念珠菌、隐球菌、荚膜组织胞浆菌及球孢子菌等有抑制作用。
主要用于白色念珠菌感染，如消化道念珠菌病、鹅口疮、念珠菌性阴道炎及外阴炎等。
但口服治疗全身性真菌感染或深部真菌感染则无效。
制霉菌素的作用机理是与真菌细胞膜上的特异甾醇相结合，导致原生质膜破坏，通透性改变，以致重要的细胞内容物外漏而死亡，从而杀灭真菌。
由于细菌原生质膜上不含甾醇，故本品对细菌无效；对肠道正常菌丛也无作用。
1.1.2.2 抗生素发酵生产工艺简介抗生素液体发酵共分为三大工序：菌种、发酵和提取。
配合三个工序进行分析化验和有关产物测定。
具体而言，其过程为菌种→孢子制备→种子制备→发酵→发酵液预处理→提取与精制→成品包装。
菌种一般采用液氮超低温保藏或沙土管保藏。
一般生产用菌种经多次转接往往会发生变异而退化，故必须经常进行菌种选育和纯化，以提高其生产能力。
检测一种菌的方法是
检测一种菌的方法是检测一种菌的方法是生物学和实验室技术的综合应用。
以下是一种常用的菌类检测方法的详细步骤：1. 选取样本：首先，根据需要检测的菌类类型和目标样本的来源选择合适的样本。
可以是从自然环境中采集到的土壤、水样、空气样等，也可以是食品、药品等生物材料。
2. 样本处理：将采集到的样本进行处理，以获得菌类的可培养分离物。
处理过程可能包括样本的过滤、稀释等步骤。
3. 分离和纯化：将处理后的样本进行分离和纯化，以获取单一的菌落。
这个过程通常会使用琼脂平板培养基和菌落计数方法进行。
4. 鉴定和分类：通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对分离得到的菌落进行鉴定和分类。
常见的鉴定方法包括显微镜观察、生化试验、抗生素敏感性试验、蛋白质或DNA序列分析等。
5. 菌量测定：通过菌落计数或其他定量方法，测定分离得到的菌落的数量，以评估样本中菌落的密度。
6. 生长条件优化：对已分离和鉴定的菌株进行进一步培养，并优化其生长条件。
这通常涉及到温度、pH值、营养成分等因素的控制。
7. 毒力检测：对于某些如病原菌等具有毒力的菌株，可以进行毒力检测。
常见的方法包括动物模型实验，细胞培养实验等。
8. 抗菌药物敏感性测试：对于已经分离和鉴定的菌株，可以通过抗菌药物敏感性测试来确定其对常用抗菌药物的敏感性。
这是选择治疗方法的重要依据。
9. 快速检测方法：除了传统的培养和鉴定方法，近年来还出现了很多快速检测方法，如PCR技术、基因芯片技术等。
这些方法通常能够在较短的时间内获得可靠的检测结果。
总体来说，菌类检测方法是一个复杂而多步骤的过程，需要结合生物学和实验室技术的知识和技能，以确保准确性和可重复性。
不同的菌类和应用场景可能需要特定的检测方法和步骤，但上述的步骤可以作为一般的菌类检测流程的参考。
细菌、霉菌、酵母菌检查标准操作规程
细菌、霉菌、酵母菌检查标准操作规程全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：细菌、霉菌、酵母菌检查是食品安全和环境卫生领域中非常重要的一项工作。
为了确保检查结果的准确性和可靠性，需要遵守一系列标准操作规程。
下面将介绍一份关于细菌、霉菌、酵母菌检查的标准操作规程，以供参考。
一、检测方法选择在进行细菌、霉菌、酵母菌检查之前，首先需要确定检测的目的和样品种类。
根据具体情况选择适合的检测方法，一般可以选择培养基法、PCR法、免疫学法等方法进行检测。
不同方法的灵敏度和准确度有所差异，需要根据具体要求选择合适的检测方法。
二、样品采集在进行细菌、霉菌、酵母菌检查之前，需要首先采集样品。
样品的采集应该遵循以下原则：1. 样品应该代表性，能够反映整个检测对象的真实情况；2. 样品的采集方法应该符合标准操作规程，避免污染；3. 采样器具和容器应该经过消毒处理，避免样品受到外界干扰。
三、样品处理在采集到样品后，需要进行样品处理以提取目标微生物。
样品处理的方法应该符合标准操作规程，避免样品受到外界污染。
常用的样品处理方法包括过滤法、萃取法、富集法等。
四、培养条件设置对于细菌、霉菌、酵母菌的检测，需要设置合适的培养条件以促进目标微生物的生长。
培养条件的设置应该考虑到目标微生物的生长特性和适宜条件，并严格控制培养环境的温度、湿度和氧气等因素。
五、培养基选择在进行微生物检测时，需要选择适合的培养基以促进目标微生物的生长。
不同微生物对培养基有不同的选择性，需要选择适合的培养基进行培养。
常用的培养基包括普通培养基、选择性培养基、差异培养基等。
六、检测结果解读在检测完成后，需要进行检测结果的解读。
根据实验结果判断目标微生物的存在与否，对结果进行合理解读和分析。
检测结果应该符合标准操作规程的要求，确保检测结果的准确性和可信度。
七、结果报告在完成检测后，需要对检测结果进行报告。
检测报告应该包括检测方法、样品信息、检测结果、结论和建议等内容。
细菌的一般检验方法
细菌的一般检验方法细菌是一类微生物，其存在对人类和动植物的生长发育、食品的加工贮藏和环境的卫生安全等方面都具有重要的影响。
因此，对细菌的检验成为了保障公共卫生安全和食品安全的重要手段。
细菌的一般检验方法包括了样品采集、预处理、培养、鉴定和计数等步骤。
首先，样品采集是细菌检验的第一步。
样品的采集应当严格按照规范进行，以避免外界污染的介入，影响检验结果的准确性。
不同类型的样品需要采用不同的采集方法，比如空气中的微生物可以通过空气采样器进行采集，而食品和水样则需要进行样品的取样和保存。
其次，样品的预处理是为了提高细菌的检出率。
预处理的方法包括了样品的稀释、过滤、离心、酶处理等。
这些方法可以去除样品中的干扰物质，使得细菌更容易被检测出来。
然后，培养是细菌检验的关键步骤。
将样品接种在含有营养物质的培养基上，利用恒温箱进行培养，有利于细菌的生长和繁殖。
不同的培养条件可以选择不同的培养基，比如选择富含营养物质的富养分琼脂培养基用于一般微生物的培养，选择含有特定抑菌剂的培养基用于选择性培养。
接下来是鉴定，即对培养后的细菌进行鉴定和分类。
鉴定的方法包括了生化试验、形态学观察、生理生化特性检测、分子生物学方法等。
通过这些方法，可以对细菌的种属进行初步鉴定，从而为后续的处理和控制提供依据。
最后是计数，通过计数可以了解样品中细菌的数量。
常用的计数方法包括了平板计数法、膜过滤法、MPN法等。
这些方法可以对样品中的细菌数量进行定量分析，为后续的风险评估和控制提供依据。
总的来说，细菌的一般检验方法包括了样品采集、预处理、培养、鉴定和计数等步骤。
这些方法的准确性和可靠性对于保障公共卫生安全和食品安全具有重要的意义，因此在实际操作中需要严格按照规范进行操作，以确保检验结果的准确性和可靠性。
一种青霉素菌渣中青霉素残留效价的测定方法[发明专利]
![一种青霉素菌渣中青霉素残留效价的测定方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7e7c28ea16fc700aba68fc2a.png)
专利名称：一种青霉素菌渣中青霉素残留效价的测定方法专利类型：发明专利
发明人：赵佳静,邓仕宏,王小莉,徐文科,李香霖,王远莉
申请号：CN202011338051.7
申请日：20201125
公开号：CN112710744A
公开日：
20210427
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种青霉素菌渣中青霉素残留效价的测定方法，包括如下步骤：(1)取青霉素菌渣，研磨，用流动相A对其进行提取，离心，取上清液作为供试品溶液；(2)将青霉素工作对照品溶于流动相A中，得对照品溶液；(3)分别取供试品溶液和对照品溶液，利用高效液相色谱法测定峰面积，根据对照品和供试品的峰面积计算得到青霉素残留效价；该方法灵敏度高、分离效率高、选择性好、复性好、准确度高的优点，检测限可达0.03μg/ml，定量限可达0.25μg/ml。
申请人：伊犁川宁生物技术股份有限公司
地址：835007 新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自治州霍尔果斯经济开发区伊宁园区阿拉木图亚村516号
国籍：CN
代理机构：北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：赵徐平
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菌剂质量测定方法
菌剂质量测定方法
菌剂质量可以通过多种方法进行测定，以下是一些主要的质量测定方法：
1. 重量法：微生物菌剂的有机质含量可以通过称量物质的方法来测定。
具体步骤包括摩擦瓶中加入已经干燥的微生物菌剂，然后加入适量的氢氧化钠，加热至水分析后，将其放入烘箱中干燥至恒定质量，然后称量其重量。
通过计算比例，即可得出微生物菌剂的有机质含量。
2. 细菌数量测定：通过在凝胶中依赖（或独立）生长技术，或平板计数法或滤膜法测定细菌菌量。
这通常以CFU/g（或/ml）的形式报告。
3. 纯度检测：使用不同的原核生物和真核生物培养基对微生物进行检测。
该标准是确保微生物菌剂纯度的关键。
4. 活性检测：测定微生物菌剂中生物活性的程度。
这种活性可以测定菌剂对病原体的抑制作用，或对土壤生态系统的生物地球化学循环的发挥作用。
通过这些方法，可以对菌剂的质量进行全面的评价。
如需更多信息，建议咨询微生物学家或查阅相关文献资料。
混凝土中细菌含量检测技术规程
混凝土中细菌含量检测技术规程一、前言混凝土是建筑工程中常用的材料，其质量直接影响工程的安全和使用寿命。
细菌是混凝土病害的主要因素之一，因此混凝土中细菌含量的检测是建筑工程中必不可少的环节。
本文将详细介绍混凝土中细菌含量检测技术规程。
二、检测设备（一）细菌培养基：选择适合混凝土中细菌生长的培养基，常用的有牛肉精肉汤培养基、亚硝酸盐蔗糖琼脂培养基等。
（二）培养皿：选择适合培养细菌的培养皿，常用的有平板培养皿、斜面培养皿、液体培养皿等。
（三）无菌操作设备：包括无菌操作台、无菌手套、无菌医用口罩等。
三、样品采集（一）样品选择：选择混凝土表面或内部的样品，一般选择混凝土的裸露表面、裂缝处、孔洞处等。
（二）样品采集：采用无菌铲子或无菌钻头采集样品，避免污染。
（三）样品保存：将采集的样品放入无菌小袋中，密封并标明采样位置、采样时间等信息，送往实验室进行检测。
四、样品处理（一）样品消毒：将样品放入无菌水中，用无菌手套将样品取出，浸泡在含有0.1%次氯酸钠的溶液中进行消毒，消毒时间不少于30分钟。
（二）样品分离：用无菌铲子或无菌钻头将样品分离成小块，放入细菌培养基中，进行细菌培养。
五、细菌培养（一）选取适当的培养基：根据样品特性和检测要求，选择适合的培养基进行培养。
（二）接种细菌：将样品分离后的小块放入培养基中，用无菌的铲子或针头将样品均匀涂抹在培养基表面，然后将培养皿放入恒温培养箱中进行培养。
（三）培养条件：一般在30℃左右、相对湿度60%~80%的环境中进行培养，培养时间一般为48小时。
（四）观察结果：观察培养皿中细菌生长情况，根据不同的生长形态和特征，进行鉴定和分类。
六、质量控制（一）空白对照：在同一条件下，选取不含样品的培养基作为空白对照，用于判断实验室操作是否符合规范和细菌培养基是否含有细菌。
（二）阳性对照：选用已知含有目标细菌的样品作为阳性对照，用于判断实验操作是否正确、培养基是否适合目标细菌生长。
（三）重复实验：对同一样品进行重复实验，计算平均数和标准差，保证检测结果的准确性和可靠性。
效价检测方法
抗菌肽检测方法1、LB培养基配制NaCl：1%胰蛋白胨：1%酵母浸粉：0.5%葡萄糖：0.5%技术琼脂粉：2 %将上述培养基配比，以水为溶剂，调pH值7.0，121度30分钟，灭菌备用。
2、大肠杆菌菌液制备2.1 菌液制备：将大肠杆菌（K12D31）从斜面上刮一环转接于装液量50ml的250ml摇瓶中，置于180rpm、37℃的摇床上培养16-24h。
2.2 分光光度计测定其消光值（OD600nm）：将上述大肠杆菌菌悬液用无菌生理盐水稀释，用无菌生理盐水做空白对照，调整菌液吸光值为1.0。
于4度冰箱中储存备用（菌液储存时间不得超过4天）。
3、试验菌培养基制备将无菌LB培养基置室温待其冷却至48-50度时，按100ml无菌LB培养基中加入100μl菌液（OD600nm =1.0），摇匀。
吸取含菌LB培养基10ml，使在90mm培养皿底内均匀摊布，放置在水平台面上使其凝固备用。
4、样品制备4.1 精密称定待测的试样1.0000g，倒入精准9ml水中震荡溶解，放入100度水浴中温浴10分钟，拿出移入离心管中10000rpm离心15分钟，倒出上清液，用针筒吸取上清液，备用。
4.2 将上述3中制备好的检测培养基上用灭菌的打孔器（2.7mm）打孔，每孔中分别加入5ul 的抗菌肽测试样品溶液，取3个平板每板1空重复3板，置于37度培养箱中培养16-20小时后，测定抑菌圈直径，取平均值。
5、抗菌肽效价测定计算公式：U（单位/克）=2X×1000×稀释倍数；X=（y -2.7）/2.1，其中：Y：抗菌肽抑菌圈直径（mm）取平均值；2.7：孔穴直径（mm）；2.1：抗菌肽浓度与抑菌圈直径的比值常数。
使用时间: 2013年9月26日起。
8种食用菌菌渣中3种饲用酶活性的测定
张国庆等： 8 种食用菌菌渣中 3 种饲用酶活性的测定
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的问题。 本研究从饲用酶的角度入手， 测定和分析 8 种常见食
用菌菌渣中 3 种饲用酶的活力， 为食用菌菌渣的合理利用 提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料 8 种 食 用 菌 分 别 是 双 孢 蘑 菇 （Agaricus bisporus）、 黑
Three Kinds of Feed Enzymes Activity of Eight Mushroom Residue
ZHANG Guo-qing1, DONG Xiao-fang1, WANG He-xiang2, TONG Jian-ming1, ZHANG Qi1 （1.State Key Laboratory of Animal Nutrition, Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing
中国食用菌 2009， 28 （5）： 28~29， 56 EDIBLE FUNGI OF CHINA
CN53－1054 ／ Q ISSN 1003－8310
〈生理生化〉
8 种食用菌菌渣中 3 种饲用酶活性的测定 *
张国庆 1， 董晓芳 1， 王贺祥 2， 佟建明 1**， 张 琪 1
（1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室， 北京 100193； 2.中国农业大学农业生物技术国家重点实验室， 北京 100193）
食 用 菌 采 收 后 剩 余 的 栽 培 料 称 为 菌 渣 （ Mushroom Residue）。 食用菌对纤维素 、 半纤维 素 、 木 质 素 等复 杂 生 物有机质， 具有良好的分解和转化能力。 在菇菌采收后， 菌渣较之原始培养料， 其营养价值得到显著改善。 粗纤维 的含量大幅降低， 同时由于菌渣中大量菌体蛋白的存在， 使得菌渣中粗蛋白含量显著提高， 因而菌渣也被称为 “菌 糠蛋白”[1, 2]。
医疗器械产品委托灭菌方式检查要点指南(2021版)
医疗器械产品委托灭菌方式检查要点指南（2021版）发布时间：2021-08-16本指南旨在指导和规范北京市医疗器械生产企业监督检查工作和注册审查工作，帮助检查人员增强对医疗器械产品委托灭菌方式的认识，明确在对委托灭菌方式审查时应把握的基本要求。
同时，为采用委托灭菌方式的医疗器械生产企业（以下简称生产企业）履行法律义务，保障产品安全提供参考和依据。
本指南适用于北京市各级药品监督管理部门开展的各类监督检查活动（包括质量管理体系审查、专项监督检查、日常监督检查等）和注册审查工作。
当国家相关法规、标准与检查要求发生变化时，应重新讨论以确保本指南持续符合法律要求。
一、常见的委托灭菌方式委托方式灭菌的医疗器械常见于采用环氧乙烷（EO）灭菌或钴-60（60Co）辐射灭菌的产品。
对于采用EO灭菌的，全部灭菌过程包含的活动主要有： 1.灭菌确认；2.灭菌；3.无菌检测；4.产品解析；5.EO残留量检测；6.热原检测（如有）；7.产品的交付与接收。
对于采用60Co辐射灭菌的，全部灭菌过程包含的活动主要有：1.灭菌确认；2.灭菌；3.无菌检测；4.热原检测（如有）；5.产品的交付与接收。
如生产企业在标准允许的范围内，将同一个注册产品分别委托给两家各自具备EO灭菌和60Co辐射灭菌条件的企业，生产企业应针对具体的委托情况，按实际的委托内容与不同的受托方分别签订委托协议。
二、对委托双方的基本要求（一）委托双方均应是能够承担独立法律责任的法人主体；（二）生产企业作为医疗器械产品上市的法律责任主体，应充分了解产品灭菌所带来的风险；应识别并确定适宜的灭菌方法，开展初始污染菌的监测，明确灭菌过程的控制要求；应熟悉相关检测项目（产品吸收剂量检测除外）的检测方法和技术要求；（三）双方应签订具有法律效力的委托灭菌协议；（四）生产企业应在充分考虑产品本身、产品包装物等因素的情况下，选择适宜的灭菌方法；应制订对受托灭菌企业资质和能力进行评审的文件，并保有相关记录；（五）生产企业应与受托方共同对委托灭菌产品的灭菌过程进行确认，并保有相关记录；应适时对灭菌过程进行再确认，并保有相关记录；（六）受托方应具备所承担的灭菌能力，并能够对灭菌过程进行记录；生产企业还应与受托方确定适宜的方法，保存每一灭菌批的灭菌过程记录，灭菌记录应可追溯到产品的每一生产批。
有效菌费样品检测方法
样品检测方法
1.菌有效活菌数的测定
采用平板计数法，选用改良LB培养基。
改良LB培养基
1% 蛋白胨
0.5% 酵母粉
0.5% 氯化钠
0.5% 葡萄糖
琼脂 15克/1升水
1.1系列稀释
称取样品1.0 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100.0 mL的0.5%蛋白胨水中(液体菌剂取l.0 mL加入99.0 mL的0.01%蛋白胨水中)，然后放入旋转式摇床上200 r/min，充分振荡30 min，即成102菌悬液。
用无菌移液管分别吸取1.0mL上述母液菌悬液加入9.0mL 1% Tween80生理盐水中，按1:10 进行系列稀释，分别得到103、104、105、106……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
1.2加样及培养
每个样品取3个左右连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，然后用50℃左右适宜的培养基倒平板，每一稀释度重复3次。
培养皿于37℃恒温培养箱中培养24h-48h（视生长情况而定）。
1.3菌落识别
根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。
1.4菌落计数
以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10~150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
当只有一个稀释度，其平均菌落数
在20～300个之间时，则以该平均菌落数计算。
若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。
若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。
菌落计算：有效活菌平均数目*稀释倍数。
壮观链霉素菌菌渣的大观霉素检测及好氧堆肥
壮观链霉素菌菌渣的大观霉素检测及好氧堆肥我国作为抗生素生产、使用大国,在生产中产生的大量药物废渣,易在环境胁迫下产生抗性基因,进而严重威胁人类健康,故2008年我国在《国家危险废物名录》将抗生素菌渣判定为危险固体废物。
因此企业亟待寻找解决抗生素菌渣高效的无害化与资源化方法。
主要围绕建立大观霉素菌渣残留检测方法,探究大观霉素菌渣与污泥进行混合好氧堆肥对堆体理化参数、生物特性的影响,最后对堆肥产品进行腐熟性与安全性的评估,以期在生产实践中得到广泛地应用。
为准确地确定菌渣中大观霉素的残留量,首先建立了适用于菌渣中大观霉素残留检测的超高效液相色谱-串联四级杆质谱。
将固相萃取法选为菌渣中大观霉素残留的预处理方法,并优化了必要的固相萃取预处理及色谱条件,最终将三氯乙酸与乙酸铵混合液作为大观霉素菌渣中的提取剂,分别用体积为5ml的水和甲醇作为固相萃取柱的活化剂,分别用体积为5ml的水和甲醇作为固相萃取柱的淋洗剂,最后固相萃取法的洗脱剂选用体积为5m L的10%氨化甲醇。
待检物大观霉素的最佳母离子以及对应高响应值的二级子离子为333.10和98.16,对应的最佳检测的锥孔电压及碰撞能量为20、36;30、18,质谱条件为正离子扫描模式,多反应监测,锥孔电压30v、离子源温度350℃、锥孔气流量35L/hr、脱溶剂流量700L/hr、离子源内毛细管电压3.5kv。
流动相选用乙腈-0.1%甲酸水,比例为80/20(v/v)进行等度洗脱。
当添加水平为50-2000mg/kg时,该方法的日内及日间回收率范围符合要求;方法的检测限和定量限分别为0.06、0.1mg/kg,线性关系良好。
表明该方法可以作为检测菌渣中大观霉素残留的方法。
实验通过大观霉素菌渣与污泥进行混合好氧堆肥,通过探究三个不同水浴温度下的基本理化参数的变化、大观霉素降解情况以及微生物性质的研究如酶活性、细菌等可培养微生物数量的变化验证大观霉素混合城市污泥好氧堆肥的可行性。
天然气门站工程设计_李金成
生时对高压端管线
阀门开启
进行放空
门站压力超过工艺 ５ 门站压力超高 运行的高高限时， ２
对站内设备进行相 应的操作
停止输气
４结 语
由于门站关系到供气区域内的社会稳定及经 济效益，因此总图布置应根据现场地形实际情况 合理布局，在满足国家规范的要求前提下尽量减 少占地。工艺系统设计时应充分考虑工艺配置和 实际操作、社会需求之间的关系，合理选择工艺 设计方案。正确设置安全仪表系统参数，在保证 站场安全运行的前提下，尽量减少站场工艺系统 误动作。
１２８
李金成等：天然气门站工程设计
２０１５ 年第 ３ 期
计量区、放散区、辅助生产区及办公区 ５ 个区域。 进出站工艺阀组区肩负着事故状态下紧急关断
的重要作用，所以其布置必须与其他区域保持必要 的安全距离，对于这个安全距离 《城镇燃气设计规 范》 并没有一个明确的数值，一般可以参考 《城镇 燃气设计规范》 对于调压站的要求，保持 １０ ｍ 的 安全距离，以便在事故状态下操作人员能够靠近阀 组，进行作业。
安全功能描述检测到进站测站外管线或站内有危险事件发生时将站场管线和站外管线进行隔离检测到出站测站外管线或站内有危险事件发生时将站场管线和站外管线进行隔离检测到进站管线出现故障或站内发生火灾等危险事件发生时对低压端管线进行放空检测到出站管线出现故障或站内发生火灾等危险事件发生时对高压端管线进行放空门站压力超过工艺运行的高高限时对站内设备进行相103石油和化工工程设计手册编委会
参考文献：
［ １ ］ ＧＢ５００２８—２００６，城镇燃气设计规范［ Ｓ ］． 北京：中国建筑工 业出版社，２００６．
［ ２ ］ ＳＨ／Ｔ ３１６９—２０１２，长输油气管道站场布置规范［ Ｓ ］． 北京：中 国石化出版社，２０１３．
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菌渣中粘菌素残留检测方法
1.1、检验程序
1.1.1、试液制备
A、样品溶液：准确称取5.0左右g待检样品到50mL容量瓶中，加入40mL 左右0.05M的硫酸超声处理30分钟，用0.05M的硫酸稀释到50.0mL摇匀即可。
B、标准品溶液：准确称取25.0mg粘菌素标准品到50mL容量瓶中，用
0.05M的硫酸稀释到50.0mL。
将上述溶液分别用孔径0.22um的水系和油系微孔滤膜滤过，贮存于样品小瓶中。
1.1.2、流动相制备
1）、流动相:
将试液a与乙腈按78：22（v/v）混合抽滤。
试液a是由4.46g无水硫酸钠溶解到900mL水中，用磷酸调pH至2.4，用水稀释至1000mL而成。
2）、溶剂:
乙腈和水按22∶78的体积配比，混匀后抽滤，装入瓶中备用。
1.1.3、
色谱条件
不大于2.0%，然后进处理好的样品，根据公式计算效价或含量。
F=标标标S A m ⨯⨯50 或
Ei Ei Ei A T m F ⨯⨯=502
F ： 计算效价校正因子 FEi ：计算含量校正因子 A 标：标准品的生物效价 TEi ：各峰的标示百分含量 m 标: 称取标准品的质量 m2：标准品的质量
S 标：E1与E2峰的峰面积之和 AEi ：各峰的面积
50：稀释倍数
1.2.1系统适用性要求
E2和E1峰的分离度不小于8.0，E2和E1-I 峰的分离度不小于6.0，E1-I 和E1峰的分离度不小于2.5，E1和E1-7MOA 峰的分离度不小于1.5。
R =1.18×W W t t
Ei fpeak
Ei
fpeak %50Re %50Re +- R ：分离度
t fpeak Re :Ref 峰的保留时间
t Ei ：Ei 峰的保留时间 W fpeak Re %50：Ref 峰的半高峰宽 W fpeak Re %50：Ei 峰的半高
峰宽
1.2.2、效价计算结果或含量计算结果
P=（F×As 样×50）/m 样 或
Ei 150F Ei Ei A C m =⨯⨯
P(u/mg)：样品的效价(湿品）
As 样：样品的E1、E2峰的峰面积和
m 样：样品的质量
F: 计算效价校正因子
C：样品Ei峰的百分含量
Ei
A Ei：样品Ei峰的面积
m1：样品的质量
：计算含量校正因子
F
E i
河北圣雪大成制药有限责任公司
2014-5-4。