高效液相色谱法测定苦参子中氧化苦参碱的含量

临床医药文献电子杂志
Electronic Journal of Clinical Medical Literature
2019 年 第 6 卷第 91 期2019 Vol.6 No.91
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高效液相色谱法测定苦参子中氧化苦参碱的含量
殷 丹
（通化市食品药品检验所抗生素室，吉林 通化 134100）
【摘要】目的 为控制苦参子药材的质量，对苦参子中含有的有效成分氧化苦参碱进行质量标准的制定。

方法 采用高效液相色谱法检测药材中氧化苦参碱的含量，并进行方法学考察。

结果 回归方程为Y=844.3766x-1272.0107，r=1.0000，氧化苦参碱线性范围为428.3906～5711.8750ng ，平均回收率为93.71%，RSD=1.3%。

结论 采用HPLC 法测定苦参子中氧化苦参碱的含量，该方法灵敏，结果准确，专属性强，可作为该品种的内在质量控制方法。

【关键词】高效液相色谱法；苦参子；氧化苦参碱；方法学
【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.91.182.02
1 方法
1.1 仪器与试药
日本岛津LC-2010AHT 型高效液相色谱仪；KQ-3200DE 型数控超声波清洗器 ：昆山市超声仪器有限公司；氧化苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院， 批号：110780-201508 含量：92.5% ）。

水为超纯水，乙腈、无水乙醇、磷酸为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件色谱柱：迪马Platisil NH2（4.6×250 mm ，5 µm ）；以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（84：7：9）为流动相；检测波长为220 nm 。

理论板数按氧化苦参碱峰计算应不低于2000。

1.3 对照试剂溶液的制备精密称取氧化苦参碱对照品适量，加乙腈-无水乙醇（80：20）混合溶液制成每1ml 含氧化苦参碱0.15 mg 的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备精密称取本品粉末（过三号筛）0.3 g ，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液0.5 mL ，精密加入三氯甲烷20 mL ，同《中国药典》2015年版一部苦参[含量测定]供试品溶液制备项下操作，即得[1]。

2 方法学考察
2.1 精密度试验
同一供试品溶液重复测定6次，精密吸取10 µL 注入液相色谱仪，测定其色谱峰面积值，RSD 值为0.1%，结果表明所用仪器精密性良好。

2.2 稳定性试验同一供试品溶液分别在0，4，8，12，18 h 注入液相色谱仪，峰面积的RSD 值为0.9%，结果表明在18h 内供试品溶液稳定。

2.3 重复性试验取同一供试品，依正文方法独立测定6份，RSD 值为0.3%，结果表明本法重复性良好。

2.4 线性关系精密称取氧化苦参碱对照品约24 mg ，置20 mL 量瓶中，加乙腈-无水乙醇（80:20）适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

分别精密吸取0.75 mL 、1.25 mL 、2.5 mL 、5 mL ，置10 mL 量瓶中，加上述溶液稀释至刻度，摇匀。

精密吸取上述5种溶液各5 µL 注入液相色谱仪中，以对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，可得回归方程，见表1，结果表明氧化苦参碱在428.3906～5711.8750ng 范围内，呈线性关系，符合外标法定量测定要求。

表1 标准曲线数据
进样量（ng ）428.3906713.98441427.96882855.93755711.8750峰面积值A1355546615272121984424099804854882峰面积值A2345373604175120104924010564819699平均峰面积A 350460
609724
1210447
2405518
4822291
回归方程
Y=844.3766x-1272.0107(R 2
=1.0000)
2.5 回收率试验
精密称取已知含量供试品6份，每份约0.3g ，精密称定，分别加入苦参碱对照品适量，按标准正文含量测定项下测定，计算回收率。

见表2
结果测得氧化苦参碱平均回收率为93.71%，RSD=1.3%，结果表明本法回收率好，准确度较高。

3 结 果
通过试验可知，氨基键合硅胶色谱柱分离氧化苦参碱成分，所得到的供试品色谱图中主峰峰形较对称、尖锐，理论板数较高，在检测的10批样品中，在拟规定的采收季
节采收的苦参子药材含氧化苦参碱的平均含量2.18%。

表2 氧化苦参碱加样回收率测定结果（n =6）
次 数 样品取样量（g ）样品中含量（mg ） 加入量（mg ） 测得量（mg ）回收率（%）10.3104 6.71057.520213.678492.6620.3005 6.49657.834813.846993.8230.3097 6.69547.723813.820092.2440.3088 6.67597.779214.085495.2550.3091 6.68247.649813.821293.326
0.3066
6.6284
7.8718
14.1028
94.95
平均回收率：93.71% RSD = 1.3%
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4 小 结
结果表明，苦参子中氧化苦参碱含量较高，但苦参子中有效成分苦参碱与氧化苦参碱，二者存在着互相转化的情况，氧化苦参碱也可能由苦参碱转化而来。

所以，根据样品实际测得结果，苦参子中[含量测定]项下应明确规定，其含量应以苦参碱（C 15H 24N 2O ）和氧化苦
参碱（C 15H 24N 2O 2）的总量计。

参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典:四部[M ].北京:化学工业出版
社,2015,202.
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有效的检测手段，该方法有操作简单、结果准确的优点。

本研究中对复方樟脑乳膏的主要成分检测，在检测过程选取了樟脑、薄荷脑、水样酸甲酯及盐酸苯海拉明这4种主要的成分。

行GC 检测的时候首先配置对照品及供试品溶液待检，将选取的溶液滴入至气相色谱仪中，得出峰值，同时在检测的过程实施了专属性试验、线性试验及精密度试验等，这些试验主要是为了证明检测方法的可行性，试验结果为良好。

此外在本研究中还选取了不同厂家所生产的复方樟脑乳膏标本，行样本测定发现标本中各种主要成
分的含量一致性高，表明所选标本合格，这在另一方面也提示采用GC 法测定药物成分含量的价值显著。

参考文献
[1] 杨跃龙,龚力民,李 菁,等.气相色谱法测定复方樟脑醑中樟
脑、薄荷脑、苯酚的含量[J].中国当代医药,2017,36(6):87-90.[2] 张任男,李振兴,刘福胜,等.GC 法同时测定复方氨搽剂中樟脑、
薄荷脑、苯酚的含量[J].海峡药学,2019,18(1):225.
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3.2 循证医学为基础，规范化培训
徐海燕等人在《循证医学结合PBL 教学模式在住院医师规范化培训心内科教学中的应用》中指出，神经内科规范化培训工作实施中，由于人员培训认识不高，使得规范化培训工作实施在神经内科培训工作实施中，并不能发挥出培训水平[6]。

且在现有神经内科规范化培训工作实施中，科室内培训工作实施需要在循证医学指导下进行相关工作落实。

在循证医学的培训和指导过程中，神经内科医护人员需要深入学习循证医学内涵，在明确循证医学内涵的同时，将循证医学诊断标准告知医护人员，从而保障在医护人员培训工作实施和引导中，展示出现有科室人员培训水平，为科室培训工作的处置和实施奠定基础。

3.3 联合实践，重视技能培养孙洁等人在《循证医学结合PBL 教学法应用于肿瘤内科教学的效果评价与探讨》中指出，循证医学与PBL 教学法实施过程中，对于培训实践技能的要求越来越高。

作为科室培训人员，在现有培训工作的处置和优化中，应该以循证医学和PBL 教学法为基础，联合实施培训方法转变，确保在培训方法的转变过程中，能够提升科室人员培训水平。

在当前世界医学发展中，神经内科的发展已经出现了全新的改变，人们对于神经内科的培训要求也出现了新的改变[7]。

只有迎合世界医学发展中的要求，将神经内科培训方式调整，这样才能确保在科室人员调整工作实施中，展示出现有科室人员培训水平，为科室培训工作实施和优化提供帮助。

4 结 语
综上所述，在PBL 教学法和循证医学在神经内科规范化培训中，由于培训中的方法和认识观念发生了改变，使得
神经内科规范化培训工作实施出现了全面的改变。

通过PBL 教学法与循证医学整合，能够为神经内科规范化培训工作实施奠定基础，提升了神经内科规范化培训水平。

作为神经内科规范化培训管理人员，在科室培训工作实施中，应该完善以下几点对策，即以问题为导向，精准实践目的、以问题为导向，精准实践目的和联合实践，重视技能培养三点。

参考文献
[1] 王凌鹏,蒋 华,罗 健，等.P B L 教学法与循证医学思
维相结合在心血管病临床教学中的应用[J ].江苏科技信息,2017,22(22):105-108.
[2] 王 喆,游 弋,潘 凤,等.PBL 结合循证医学教学在肿瘤
科住院医师规范化培训中的实践[J].中华医学教育探索杂志,2017,16(4):396-398.
[3] 崔 莉,姜 玫,李秋梅,等.内分泌科规范化培训中循证医学与PBL
教学模式相结合的探索[J].中国医药指南,2017,25(02):100-105.[4] 付 爽,杨东红,宁尚波,等.循证医学思维与PBL 教学法相结合在
口腔医师规范化培训中的应用[J].经济师,2018,21(05):103-105.[5] 陈 楠,刘 涛.目标教学法、循证医学理论联合PBL 教学理
论在中西医结合内科临床带教中的应用[J].内蒙古医科大学学报,2017,39(S1):326-328.
[6] 徐海燕,许小进,张喜文,等.循证医学结合PBL 教学模式在
住院医师规范化培训心内科教学中的应用[J].中国卫生产业,2018,22(2):147-149.
[7] 孙 洁,王明月,李 喆,等.循证医学结合PBL 教学法应用于肿瘤
内科教学的效果评价与探讨[J].重庆医学,2018,47(13):133-135.
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