气相色谱法快速测定瓜子中甜蜜素

摘 要 ：建立 了气相色谱法 测定 瓜子中甜蜜素的方法 。采用超声萃取瓜子 中的甜蜜 素，样 品经过衍 生化 处理，
正庚烷 萃取 ，离心 ，过滤膜 ，最后 采用 氢火 焰离子化检测器 （ＦＩＤ）检测 。结果表 明，甜蜜 素质量浓度 在 ０．００４～
１．６ｍｇ／Ｌ范嗣内与峰面积呈线性关系，相关 系数 ０．９９９ ２；在 ０．１、０．５、１．０ ｇ／ｋｇ ３个添加水 平下，甜蜜素的平均 回收
色谱柱 ：ＢＲ一５毛细管柱（３０１ＴＩＸ ０．３２ｍｍ Ｘ０．２５
“ｍ）；程序 升温 ：初 始 温度 ５０ ℃保持 ５ ｍｉｎ，以 １０
℃／ｍｉｎ的速率升温到 ９０℃保持 ２ ｍｉｎ，以 ２０ ℃／ｍｉｎ
的速率升温到 ２６０ ｑＣ保持 ２ ｍｉｎ；进样 口温度 ：２５０
（ｃ）阴性 样 品色 图谱
瓜子 在 我 国是 比较常 见 的一种 零食 ，很 多人 都 有 嗑瓜 子的 习惯 ，导 致瓜 子 的食用 量和 产 出量都 很
大 ，市场 上瓜 子 中添加 的食 品添 加剂 种类 越来 越 多 ， 口味也越 来 越多 ， 口感越 来越 好 ，有许 多不 同 口味 的瓜 子都 添 加 了不 同含量 的甜 蜜素 ，为 了追 求更 好 的 口感 ，很 多商家 往 往都 增大 添加 甜蜜 素 的剂量 ， 使得 带有 甜 味 的瓜 子 更受 青 睐 。 目前 测 定甜 蜜素 的 常 用方 法 有 气相 色谱 法 。、气 质联 用 法 ” “ 、液 相 色谱 法” 、液相 色谱 串联 质谱 法［１５，１６１，鉴 于 添加甜 蜜 素 的食 品种类 繁 多 ，在对样 品基质 的前 处理 时也 都 不一 样 。
率 为 ９４．８％一９７．９％；相对标准偏差 （ＲＳＤ）为 ２．１％～３．２％，方法 的检 出限为 ０．００３ ｇ／ｋｇ。该方法操作简单快速 、
结果 可靠 、灵 ห้องสมุดไป่ตู้度 高，精 密度好 ，适用 于快速处理瓜子 中甜蜜素的检测 。
关 键 词 ：甜 蜜素 ；瓜 子 ；气相 色谱 法
中 图 分 类 号 ： ０ ６５７．７
ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ． Ｕｌ￣ａｓｏｕｎｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍ ｅｔｅ ｉｎ ｍｅｌｏｎ ｓｅｅｄｓ． Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ
ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｐｔａｎｅ，ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅｄ，ｆ ｉｌｔｅｒｅｄ ａｎｄ ｆ ｉｎａｌｌｙ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆ ｌａｍｅ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｏｒ（ＦＩＤ）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ＣＨＩＶｅ ｗａｓ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．００４－１．６ ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆ ｉｃｉｅｎｔｓ（
（Ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆＪｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍａｔｅ ｉｎ ｍｅｌｏｎ ｓｅｅｄｓ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＣ）
收稿 日期 ： ２０１８－０３－０５ 作 者 简介 ： 庄 件兵 （１ ９８２一）， 男，江 苏省 南 京市人 ，工 程 师 ，２００４ 年 毕 业于 南京 师范 大学 食 品科 学 与 营养 专 业 ，研 究方 向 ：从 事 食 品检 测 技 术
工作 。 Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｕａｎｇｊ１ａｎｂ＠１ ２６．ｃｏｍ。
２．２ 标 准 曲线 和检 出限 分别 取 浓度 为 ２ ｍｇ／ｍＬ的甜 蜜素标 准 品 ０．０１、
０．０５、０．２、０．５、１、２、４ ｍＬ于 ２５ ｍＬ比色管 中 ，蒸
２．１ 衍 生化产 物 与定 量
馏水 定容 至 １０ ｍＬ，按 １．２．２的方法进 行 衍生 化处 理 ，
甜 蜜 素在 硫 酸 溶 液 中与 亚 硝 酸 发 生 反 应 生 成 经正庚 烷 萃取 后 ，得到 甜蜜 素 的质量 浓度 为 ４、２０、
台式 离心机 （安徽 中科 中佳 科学仪器有 限公
司 ）；
ＢＲＵＫＥＲ—ＧＣ４５６气 相 色谱 （美 国 ＢＲＵＫＥＲ公
司 ）；
市 售某 品牌 瓜 子 （各种 口味 ）。
１－２ 实验 方 法
１．２．１ 样 品前 处理
称 取 打碎 、混 匀 的瓜子 样 品 （带 壳 ）５．００ ｇ于
５０ｍＬ离心管中，加 ３０ｍＬ水 ，振摇 １ ｍｉｎ，超声提
本 实 验 主 要 探 讨 了毛 细 管 气 相 色谱 法 测 定 瓜 子 中甜 蜜 素 的方 法 以及 不 同 口味 瓜 子 中甜 蜜 素 的 含 量
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图 １ 甜 蜜 素 结 构 式
Ｆｉｇ．１ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｆｏｒｍｕｌａ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍ ａｔｅ
第 ４７卷 第 ５期 ２０１８年 ５月
当 代 化 工 Ｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｒｙ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ
ＶＯ］．４７． Ｎ０．５ Ｍａｙ， ２０１８
气 相 色 谱 法快 速 测 定 瓜 子 中甜 蜜素
庄件兵 ，李青 ，郭芳芳
（江苏 省理 化测 试 中心 ，江 苏 南京 ２１００００）
甜蜜素 ，其化学名称为环 己基 氨基磺 酸钠 ， 化 学 式 ：Ｃ Ｈ ＮＮａＯ Ｓ，结 构 见 图 １，是 常 用 的甜 味 剂 ，其 甜 度 是 蔗糖 的 ３０～４０倍 ，目前 被 广 泛 用 于饮料 、蜜饯 、瓜 子 、糕点 等多种食 品 中，其风 味 较 自然 ，后 苦 不 明显 ，热 稳 定性 高 ，是 人 体 不 吸 收 的 低 热能 甜 昧 剂 －ｚ ，也是 一 种 应 用非 常广 泛 的 食 品添 加 剂 。在 日常 生 活 中 经 常食 用 添 加 了 甜 蜜 素 的食 品 ，可 能会 有 因摄 入 过 量 而 导 致对 人 体 的 肝 脏 和 神 经 系统 造 成 一 定 的危 害 ，而 且 国 际上 一 直 存 在 着 其 是 否 具 有 致 癌 性 的 争 议 ，很 多 国家 对 其添加量都有 十分严格的要求 ，近年来我 国将其 列 入 限 制使 用 范 畴 ，对 甜 蜜 素 在 食 品 中 的添 加 量 有 严格 的强 制 性 限量 。 由于 甜蜜 素对 热 、光和 空 气 稳 定 ，加热 后 略有 苦味 ，其 已成 为 目前 中 国食 品 行业 中应 用最 多 的一 种甜 味添 加剂 。
（ａ）对照 品 色谱 图
取 ２０ｍｉｎ，涡旋混 匀 ， 置 于离 心机 中以 ４０００ ｒ／ｍｉｎ
离 心 ５ ｒａｉｎ，过 滤于 ５０ ｍＬ比色管 中 ，加水 １０ ｍＬ
洗 涤残 渣 ，离 心 ，过 滤 ，重 复 １次 ，合 并滤 液并 定
容 至 ５０ｍＬ，混 匀备 用 。
１．２．２ 衍生 化
的衍生 物 在 图谱上 表 现 出来 的是两 个峰 ，一 个是 环 ８０、２００、４００、８００、１ ６００ ｇ／ｍＬ的系列 标 准溶 液 ，
化 工
按 试验 方 法提供 的色谱 方法 进行 测定 ，以环 己醇亚 硝 酸 酯和 环 己醇峰 面积 加和 为纵 坐标 ，质 量浓 度 为
表 ３ 精 密 度 和 回收 试 验 结 果 （ｎ＝６）
正 庚 烷 （德 国默 克 ），氯 化钠 、硫 酸 、亚硝 酸 慢 增 大 ，如果 以环 己醇亚 硝酸 酯来 作为 定量 峰会 造
钠 （南 京化 学 试剂 股 份有 限公 司 ）； 电子 天 平 ＢＳＡ２２４Ｓ—ｃｗ（赛 多 利 斯 科 学仪 器 北
京 有 限公 司）； ＫＱ一４００ＫＤＥ 型 高功 率数 控超 声 波 清洗 器 （昆
第 ４７卷 第 ５期
庄件兵 ，等 ：气相色谱法快速测定瓜子 中甜 蜜素
９８３
ｌ 实验部 分
１．１ 试 剂 与仪 器
己醇 亚硝 酸酯 另 一个 是环 己醇 ，由于环 己醇 亚硝 酸 酯不 稳定 ，会 部分 分解 成环 己醇 ，从 而 导致环 己 醇亚 硝 酸酯 的峰 随时 间推 移而 减小 ，环 己醇 峰会 慢
ｇ／ｋｇ．Ｔｈｅ ｍ ｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍ ｐｌｅ ａｎｄ ｆａｓｔ，ａｎｄ ｈａｓ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｒｅｓｕｌｔｓ，ｈｉｇｈ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｇｏｏｄ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ＳＯ ｉｔ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍ ａｔｅ ｉｎ ｍ ｅｌｏｎ ｓｅｅｄｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍａｔｅ； Ｍ ｅｌｏｎ ｓｅｅｄｓ； Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＧＣ）
Ｔａｂｌｅ ３ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｅｓｔｓ ｆ ｏ ｒ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ
横坐标 绘 制标 准 曲线 ，得到 线性 回归 方程 Ｙ＝４．１４９
＋４４．０６３，相关 系数 ｒ＝０．９９９ ２。
以 ３倍 信 噪 比计 算方 法 的检 出 限 （３ Ｓ／Ｎ）为
℃；检测器 ：氢火焰离子化检测器 （ＦＩＤ）；检测器 温度 ：２６０ ℃ ；载气 为 高纯 氮气 （９９．９９９％ ）；柱 流 速 １．０ ｍＬ／ｍｉｎ；不 分 流进 样 ，进样 量 ：１．０ ｕＬ。
２ 结 果与分析
图 ２ １一环 己醇 亚 硝 酸 酯 ；２－环 己醇
Ｆｉｇ．２ １－Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｏｌ ｎｉｔｒｉｔｅ；２－Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｏｌ
ｗｅｒｅ ａｌｌ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ０．９９９．Ｗ ｈｅｎ ｔｈｅ ｓｐｉｋｅｄ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ０．１，０．５，１．０ ｇ／ｋｇ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒ ｉｅｓ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｙｃｌａｍａｔｅ
ｗｅｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ９４．８％～９７．９％；ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｆＲＳＤ）ｗａｓ ２．１％－３，２％，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｗａｓ ０．００３
山市超 声仪 器 有 限公 司 ）； 涡旋 混合 器 （上 海 沪西分 析仪 器 厂有 限公 司 ）；
成最 终定 量结 果 的不 稳定性 ，在处 理大 批量 样 品时 进 样 时 间会 比较长 ，两个 峰之 间会有 比较 明显 的大 小变 化关 系 。本试 验 通过采 用 对两个 峰 进行 面积 加 和计 算 ，以 消除环 己醇亚硝 酸 酯会分 解 给定量 带来 的不 准确 性 。衍生 化产 物 色谱 图见 图 ２。
文 献标 识码 ： Ａ
文 章 编 号 ： １６７１—０４６０（２０１８）０５—０９８２—０３
Ｒａｐｉｄ Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｙｃｌａｍ ａｔｅ ｉｎ Ｍ ｅｌｏｎ Ｓｅｅｄｓ
ｂｙ Ｇａｓ Ｃ ｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＣ）
ＺＨＵＡＮＧＪｉａｎ—ｂｉｎｇ，ＬＩＱｉｎｇ，ＧＵＯＦａｎｇ－ｆａｎｇ
准确移取上述备用液体试样溶液 １０．０ ｍＬ于 ２５
ｍＬ带 盖离 心 管 中 。离 心管 置 于冰浴 中 ５ ｍｉｎ后 ，加
入 ２．５ ｍＬ亚硝 酸钠 溶 液（５０ ｇ／Ｌ），２．５ ｍＬ硫 酸溶 液
（２００ ｇ／Ｌ），盖紧 离心 管盖 ，摇 匀 ，在 冰浴 中放 置 ３０ ｍｉｎ，其 间 振摇 ３—５次 。衍 生化 完 成后 将其 从冰 浴
（ｂ）阳性样 品 色谱 图谱
中取出，准确加入 ２．５ ｇ氯化钠 、５ ｍＬ正庚烷 ，盖
上盖子后置涡旋混合器上涡旋 １ ｒ ａｉｎ，４ ０００ ｒ／ｍ离
心 ５ ｍｉｎ取 上 清液 过有 机相 滤膜 ，装 入 进样 瓶 ，放
置 在 １ ４ ℃冰 箱冷 藏保 存 以备 进样 用 。
１．２＿３ 色谱 条件