《过柱纯化》PPT课件

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未纯化前 质粒DNA
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未纯化前 未纯化前 PCR产物 质粒DNA
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有利于提高洗脱效率。
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1.什么是传统机械按键设计？
传统的机械按键设计是需要手动按压按键触动PCBA上的 开关按键来实现功能的一种设计方式。
传统机械按键结构层图：
按
PCBA
键
开关 键
传统机械按键设计要点： 1.合理的选择按键的类型， 尽量选择平头类的按键，以 防按键下陷。 2.开关按键和塑胶按键设计 间隙建议留0.05~0.1mm，以 防按键死键。 3.要考虑成型工艺，合理计 算累积公差，以防按键手感 不良。
弃滤液。 9.将700 µl的Rinse B加入Spin Column中，12,000 rpm离心30秒，
弃滤液 。 10.重复操作步骤9，然后12,000 rpm再离心1分钟。 11.将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上，在Spin Column
膜的中央处加入25 µl 的灭菌蒸馏水*，室温静置1分钟*。 12. 12,000 rpm离心2分钟洗脱DNA。
2.切碎胶块。胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块融化时间，提 高DNA的回收率。
3.称量胶块重量，计算胶块体积。计算胶块体积时，以1 mg=1µl 进行计算。
4.向胶块中加入胶块融化液DR-I Buffer，DR-I Buffer的加量如下 表：
5.均匀混合后75℃加热融化胶块(低熔点琼脂只需在45 ℃)，间断 振荡混合，使胶块充分融化（约6～10分钟)。
6、电泳、割胶、纯化DNA
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1、实验目的：(p140)
将所需要的DNA片段进行回收，纯化。 （TaKaRa公司 凝胶回收试剂盒）
2、实验原理：
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实验操作
1.在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶 表面的液体。此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶， 尽量减小凝胶体积，提高DNA回收率*。
*切胶时请注意不要将DNA长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。 3
6.加入DR-I Buffer量的1/2体积量的DR-II Buffer，均匀混合。 7.将溶液转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液
(可重复一次，提高DNA回收率)。 8.将500 µl的Rinse A加入Spin Column中，12,000 rpm离心30s，