乌金猪mtDNA D-Loop区的遗传多样性

吉 首 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ）
第 ３９卷
１ 材 料 与 方 法
１．１实 验 材 料 实验 用 乌金猪 血 液样本 由四川 省凉 山彝族 自治州 畜牧 科学 研究 院提 供．选 取健 康成 年 乌 金猪 （不 区分
公母 ）的 ３个 类群 ，四川 凉 山猪 ２７只（昭 觉 ｌ１只 ，美 姑 １３只 ，西 昌 ３只 ），贵州 毕节 地 区柯 乐猪 ２１只 ，云 南 富 源县 大河 猪 ２Ｏ只．用 内含 ＥＤＴＡ Ｋ抗 凝 剂 的试 管 自颈静 脉 采血 ，血液 样本 低 温保存 带 回实验 室备 用． １．２主 要 试 剂
乌 金猪 ｍｔＤＮＡ Ｄ—Ｌｏｏｐ区的遗 传 多样 性
王志敏 ，徐 亚 欧 ，孙 艳 ，杨 磊 ，徐 珑 洋 ，王 英 明 ，黄 卫 平
（１．西 南 民 族 大 学 生 命 科 学 与 技 术 学 院 ，四川Ｉ成 都 ８１００４１； ２．凉 山州 畜牧 兽 医科 学 研究 所 ，四川 凉 山 州 ６１５０４２）
对乌 金猪 的起 源及 不 同类群 的遗 传关 系研究 多基 于其 外貌 特 征 ，分 布地 域 ，群 体 变化 ，生 产性 能 ，历史 考证 等 方 法进 行 ．利用 现 代 分 子生 物 学 方法 对 乌 金猪 不 同类 群 间 的遗传 亲缘 关 系研 究 还 未见 报 道．动 物 ｍｔＤＮＡ具 有广 泛 的种 内和种 间多 态性 ，且 为母性 遗传 ，在 亲缘关 系相 近 的物种 间其 进化 速度 比核基 因快 ， 因而 它为 种群 遗传学 和进 化遗 传 学在分 子水 平 上 的研 究 提供 了理 想 的研 究 对 象．并 已广 泛 的应 用 于 动物 遗传 学 、遗 传分 化 、种 群遗 传结 构分 析 、原种 鉴定 、分子 生态 学等 方面 Ｉ４ ］．本研 究利 用 ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ的多 态 性对 分 布于 与云南 （大河 猪 ）、贵 州 （柯 乐猪 ）和 四川 （凉 山猪 ）乌金 猪 的 不 同类 群 的亲 缘 关 系进 行 比较 研 究 ，为今后 乌金 猪不 同类 群遗 传资 源 的保护 与开 发利用 提供 理论 依据 ．
＊ 收稿 日期 ：２０１７一Ｏ５—１７ 基 金 项 目 ：凉 山州 应 用 技 术 研 究 与 开 发项 目（１３ＣＸＹＯ００４） 作 者 简 介 ：王 志 敏 （１９８９一 ），女 ，贵 州 人 ，西 南 民族 大 学 生命 科 学 与 技术 学 院 硕 士 生 ，主 要 从 事 动 物 遗 传 育 种 研 究 通 信 作者 ：黄 卫 平 ，女 （藏 族 ），凉 山州 畜 牧 兽 医科 学 研 究 所 高 级 畜 牧 师 ，主 要 从 事 养 猪 生产 与科 研工 作．
中 图 分 类 号 ：Ｑ９５３
文 献 标 志 码 ：Ｂ
பைடு நூலகம்
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｄｘｂ．２０１８．０２．０１４
乌金猪 原产 于云 贵 高原 ，是 我 国优 良的地 方 遗 传资 源 之一 ，主要 分 布 在 云南 、贵 州 和 四川 交 界 的大 部 分 地 区．毛 色主要 有黑 色 和棕黄 色 ，因产 地 的不 同在 各 地 的 叫法 也 不 同．在 四川 的凉 山彝 族 自治 州 被称 作 凉 山猪 ，主要 分 布于凉 山州 的西 昌 、昭觉 和美 姑等 地 ．贵 州 的柯 乐 猪 、威 宁 猪 ，云南 的大 河猪 等 均 属 于乌 金 猪 不 同类 群 ．１９７６年云南 、贵 州和 四川 联合 调 查 认 为 ，上 述 不 同名 称 的 猪种 属 同种 异 名 ，将其 统 称 为 乌 金 猪 ．乌金 猪具 有体 型健 壮 、后 驱 发达 、能适 应高寒 气 候和粗 放 饲养 ，适宜 高原 牧场 繁衍 ，形 成 了 肉质鲜 嫩 ，口 感好 ，在 云南 、贵州 和 四川 的冕 宁等地 有用 做火 腿 的习惯 ＿１。。］．
２ Ｔａｇ酶 ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ、ＤＮａｓｅ／ＲＮａｓｅ—ｆｒｅｅ去 离子水 、Ｄ２０００ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ、天根 基 因组 ＤＮＡ 提 取 试盒 和琼 脂糖 Ａｇａｒｏｓｅ，均 购 自成都 康迪 生 物技术 有 限公 司． １．３基 因组 ＤＮＡ的提 取及 检测
利 用天 根生 物试 剂有 限公 司离 心柱 型血 液 基 因组 ＤＮＡ 提 取 试 剂 盒 ，从 ＥＤＴＡ 抗 凝 全血 中提 取 基 因 组 ＤＮＡ．紫 外分 光光 度 计检 测 ＤＮＡ 样 品 Ｄ ２６０／２８０值及 浓 度 ．配 制 １．５ 琼 脂糖 平 板凝 胶 ，电泳 缓 冲液 为 ０．５×ＴＢＥ，溴 化 乙锭染 色 ，电压 为 １２０ Ｖ，电泳 时间 为 ３０ ｍｉｎ，凝胶 成像 系统 观察 、保存 ． １．４引物 的设 计与 合成
第 ３９卷 第 ２期 ２０１８年 ３月
吉 首 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｓｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖ０Ｉ．３９ ＮＯ．２ Ｍ ａｒ． ２Ｏ１８
文章 编 号 ：１００７—２９８５（２０１８）０２—００６５—０５
到 ４６个 突变 位 点 ，其 中 简 约信 息 位 点 为 ５个 ，单 一 多 态位 点 为 ３７个 ，其 中 以 Ａ／Ｇ 突 变 为 主 ．凉 山猪 的 ３个 类 群 （昭 觉 、美
姑 、西 昌 ）首 先 聚 为一 类 ，然 后 凉 山猪 与 大 河猪 聚 为 一 类 ，最 后 凉 山猪 与 柯 乐 猪 聚 类．３个 地 区 的 乌 金 猪 有 ２个 母 系起 源 ，大
摘 要 ：为揭 示鸟 金 猪 ３个地 方 类群 遗传 多样 性 及 其 分 布 情 况 ．以乌 金 猪 的 ３个 地 方 类群 凉 山猪 、大 河 猪 和 柯 乐猪 为 对
象 ，研 究 了线 粒 体 ＤＮＡ Ｄ环 高 变 区 （ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＨＶＩ）的序 列 多 态性 ．研 究 表 明 ，在 全 长 ２９０ ｂｐ的 核 苷 酸序 列 中共 检 测
河 猪 与 凉 山猪 为 一 个母 系起 源 ，柯 乐猪 为 另 一 个母 系起 源．就 总体 而言 ，鸟金 猪 的 各 地 方 类 群 凉 山 猪 与 大 河 猪 遗 传 亲 缘 关 系
最 近 ，其 次是 柯 乐 猪 ，有 ２个母 系起 源．
关 键 词 ：鸟金 猪 ；ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ；遗 传 多样 性