种拟南芥的步骤

种拟南芥的步骤
种拟南芥的步骤
1、紫外线照实验台15-20分钟。

准备：1/2MS培养基；平皿；枪；灭菌水；
0.1%Agar溶液（高温高压灭菌）；灭菌枪头（黄枪头要剪）；marker笔；无
水乙醇；95%乙醇；封口膜。

2、数种子于1.5ml的EP管中，做好标记。

3、微波炉化1/2MS培养基，倒板。

需要加抗生素的要加抗生素（潮霉素：每
100ml培养基加56ul；卡纳：每100ml培养基加100ul），无菌操作。

4、洗种子：
A、向盛种子的EP管中加1ml 75%的乙醇（250ul的无菌水加750ul的无水
乙醇，现配现用，且要先加无菌水），剧烈晃动8分钟。

【或者洗两次，每次4分钟】
B、将上述酒精倒出后，加入95%的乙醇冲洗5遍。

【3遍也可以】
C、用无菌水清洗2遍，倒掉水。

【1遍也可以】
5、将种子悬起。

加入100—200ul的0.1%的Agar溶液，将种子用枪吹起。

【Agar
的量要视情况而定】
6、点种子。

用200ul的枪和剪过的黄枪头吸取种子，在培养基上依次点种，尽
量分散均匀，晾干。

7、封皿，并做好标记。

8、层化。

放于4度的冰箱处理3天。

9、将层化的种子置于光照培养箱中育苗一周，培养皿要倾斜放置。

10、移栽于土中。