邻苯二甲酸二丁酯对小鼠骨髓微核和精子形态的影响

关键词 ： 邻苯二 甲酸二丁酯 ； 微核 ； 精子畸形
中图分类号 ： Ｉ４ Ｒ １
一
Ｌ （０ ・ｗ ， 次 连续 ５ 。 ｄ 邻苯二甲酸二 丁酯（ ｉ ｔ ｈ ａ ￣， Ｂ ） ｄ ｕ ｌ ｔ ｌ Ｄ Ｐ 是最 常用 的 ｍ ／ １ｇｂ ）每 天 １ ， ｂｙｐｈａ 类增塑剂 ， 主要用于塑料增塑剂 、 润滑剂 、 树脂溶剂 、 印刷 １４ 观察指标 ． 在染毒期 间， 观察动物 的活动 、 毛发 、 进
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论著 ・
邻 苯二 甲酸二 丁酯对 小 鼠骨髓 微 核 和精 子形 态 的影 响
李 玲 ， 刘 莉 ， 刘桂株
７００ ） ５０４ （ 宁夏医学院公共卫 生学 院 ， 银川
摘要 ： 了解邻苯二甲酸二丁酯（ Ｂ ） 目的 Ｄ Ｐ 对微核试验 和精子畸形试验 的影 响。方 法 将 昆明种小 鼠随机分 为 ５ ，Ｂ 组 Ｄ Ｐ染毒剂量 为 ５０ ｇｋ（ ０ ｍ ／ｇ低剂量组 ） １０ｍ ／ ｇ 中剂量组 ） ￣０ ｍ ／ｇ 高剂量组 ） 以及阴性对 照 ，００ ｇ ｋ（ 和 ０ ｇｋ （ ， 组（ 玉米油 ） 阳性对照组（ 和 环磷酰胺 ，０ ４ｒ ｔ ）每 只小 鼠计 数 １（ ， ０｝ ０个骨髓嗜多染红细胞 （ ｃ ） Ｐ Ｅ 和每个剂量组 的小 鼠计数 １０ ００个精子的形态 。结摹 中、 高剂量组微 核率与 阴性 对照组 相 比明显 升高 （ Ｐ＜００ ） 且各剂 ．５ ， 量组微核率随染毒浓度的增加而升高 ， 呈现剂量 一反应关系（ ＝ ．３ ， ｒ ０ ９７ Ｐ＜００ ） 中、 ．１ ； 高剂量组精子 畸形率与 阴性对照组 比较差异有统计学意义（ Ｐ＜００ ） 且各剂 量组精 子畸形 率随染毒浓 度 的增加 而升 高 ， ．５ ， 呈剂 量 一
０２ ）生 理 盐 水 。 ．ｇ ；
１２ 主要试剂和仪器 ．
１５ 统计 学方 法 ．
眼科剪刀及 镊 子 、 吸管 、 晾片架 、 注射器 、 胃针及 针 灌
头 、 片 、 微镜 、 数 器 。 玻 显 计
采用 ＳＳ ００统计软件建立数据库 ， ＰＳ１ ． 本次实验数据采 用单 因素方差分析 。微 核 、 子畸形 出现频率 呈现泊松 分 精
反应关系 （ ＝０９４ Ｐ＜００ ） 畸形精子 中以无钩为最多 ， ｒ ．０ ， ．１ ， 其次 是香蕉形 、 尾折叠 、 头 ， 双 分别 为 ４５ ３ｏ ％ ．％、 ．９
和 １３ ％， ．２ 结论 Ｄ Ｐ染毒在一定剂量下对小 鼠骨髓微 核试验 和精子畸形 试验 呈现 阳性结果 。 Ｂ 文献标识码 ： Ａ
中也含有 Ｄ －ｊＤ Ｐ的健康危 害越来越 引起人 们的重 脱 臼处死雌性小 鼠， 两侧股骨用小 牛血清 冲洗骨髓制片 ， Ｉ ４， Ｂ 取 视 。 目前对 Ｄ Ｐ的研究 多集 中在生殖 发育毒性 ， 于 Ｄ Ｐ 甲醇固定 ，０ ｉ ｓ Ｂ 关 Ｂ １ ％Ｇｅ ａ染色 ， 只小 鼠计 数 １０ ｍ 每 ００个 多 染红 Ｐ Ｅ 中出现 的微核细胞 数 ， 并计 算各组 的微核 率（ 有 的致 突变毒性 国内报道甚 少 ， 文采用微 核试验 和精子畸 细胞（ Ｃ ） 本 微 核 的 双 核 细 胞 数／ ００ 双 核 细 胞 ） ｊ １０ 个 Ｅ。 ５ 形试验来研究 Ｄ Ｐ的遗传毒性 ， Ｂ 了解 Ｄ Ｐ Ｂ 对小 鼠体细胞和 生殖细胞 的致 突变作用 。
１ 材 料 与 方 法 １１ 动物 ．
１４ ３ 小 鼠精子畸形 试验 ．．ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
从 小 鼠染毒 到第 ３ 时， ５天 颈
椎脱臼处死雄性小 鼠， 取两侧附睾 ， 在盛有 ０５ Ｌ生理盐水 ．ｍ
的平皿 中用眼科剪将 附睾组织剪碎 ， 用吸管轻 轻吹打 ５～６ 制成 精子悬液 ， 用胶头滴 管滴一滴 于清洁玻片上 ， 均匀 选用宁夏 医学院 试验动 物 中心提供 的 昆明种 健康 小 次 ， 推 片晾干后 ， 甲醇 固定 ５ ｉ， 用 ｍｎ 干燥 后 ， ２ 用 ％伊 红水 溶液 鼠， 雌性 ２ ０只， 雄性 ６ ， ０只 体重 １ —２ｇ ８ ５。 染色至少 ２ ， ｈ 晾干 后于 高倍镜 下观察 ； 每剂 量组 小 鼠检查 ６０条 计 邻苯二 甲酸二丁酯（ 分析纯 ， 天津市瑞金特化学品有限 完整无重叠 的精 子 １０ ， 数不 同类型 的 畸形 精子 数 精子畸形率（ 及畸形精子类型构成 比＿ 。 ％） ６ ｊ 公司） 玉 米 油 ； 磷 酰 胺 （ 苏恒 瑞 医药 股 份 有 限 公 司 目， ； 环 江
油墨 、 胶黏剂 、 化妆 品 、 农药 载体等 … 广泛存 在于空 气 、 １， 水 １４ １ 一般情 况 ．．
体、 土壤及生物体 内， 可通过饮水 、 食物、 皮肤接触（ 化妆品 ） 食量 、 粪便及 动物 的体重变化 。 ．． 颈椎 和呼吸进入 人体。有研究发现在食用油及家庭厨房油烟雾 １４２ 小 鼠骨髓微核试验 从小 鼠染毒到第 ６天时 ，
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宁夏 医学 院 学 报
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ｄ ｕ ｌ ｆ ｎ ｘａ Ｍｅ ｉ ｌ ｌ ｅ ｏ ｍａ ｇ ｉ ｄｃ ￣ｊ ｏ Ｎｉ ａ ｃｏ
第３ ０卷 ２期 ２０ ０８年 ４月
文章 编号 ：０ ５—８ ８ （０ ８ ０ １０ ４ Ｓ ２ ０ ）２—０ ９ １４—０ ２
行精子 畸形实验 。两个 试验 均设 Ｄ Ｐ低 、 、 Ｂ 中 高染 毒组及 ２ 结 果 阳、 阴性对照组 ， Ｂ Ｄ Ｐ用玉米油配 制 ， 剂量分别 为 ５０ １０ 、 ２ １ 一般情况 ０ 、００ ．
１３ 动物分组与处 理 ． 布 ， 计时进行 平方根反正 弦变换 （ｒｓ － 使之变成 或 统 ａｃｉ ４ ｎ ？） 昆明种小鼠 ４ ， ０只 雌雄各 ２ ， ０只 随机分为 ５组进行 骨 接近正态分布作 ｔ 检验或 方差分 析［ 相 关结果 作直线 相 ， 髓 细胞微核实验 ， 同时 ４ ０只雄 性小 鼠也随机 分为 ５ ， 组 进 关分析 。