胆舒滴丸质量标准研究

胆舒滴丸质量标准研究
周维;胡昌江;冯健
【摘要】目的：建立胆舒滴丸的质量标准。

方法：采用薄层色谱法对胆舒滴丸中
的薄荷脑进行定性研究；采用气相色谱法对胆舒滴丸进行特征图谱研究及含量测定。

结果：薄层色谱鉴别特征明显，专属性强；胆舒滴丸不同批次的气相色谱图均有8个特征峰，均具有较好的分离度；薄荷脑在0.104～0.780μg 呈现良好的线性关系，回归方程为 Y＝1827.0X －2×10－13，相关系数为 r ＝1.0000。

结论：所建立的质量标准能有效地对胆舒滴丸进行鉴别，并准确地进行含量测定。

%[Abstract ] Objective: To establish the quality standard for establishing the quality of Danshu dripping pills.Methods:Characteristic identification of Danshu dripping pill was performed by TLC,and content determination and the characteristics chromatograms was performed by gas chromatography.Results:The identification of TLC was obvious and specific.There were 8 characteristic chromatographic peaks with good separation in different batches of Danshu dripping.Menthol showed a good linear relationship in 0.104 ~0.78 μg.The regression equation was Y
=1827.0X -2*10 -13.The correlation coefficient was r =1.0.Conclusion:The established quality standard can be effective for the identification and accurate determination of the content of Danshu dripping pills.
【期刊名称】《中国现代中药》
【年(卷),期】2016(018)005
【总页数】4页(P637-639,656)
【关键词】胆舒滴丸;薄荷脑;特征图谱;质量标准;含量测定
【作者】周维;胡昌江;冯健
【作者单位】四川新绿色药业科技发展股份有限公司，四川彭州 611930;四川新
绿色药业科技发展股份有限公司，四川彭州 611930;四川新绿色药业科技发展股
份有限公司，四川彭州 611930
【正文语种】中文
胆舒滴丸是以薄荷素油为原料制成的中药制剂，用于慢性结石性胆囊炎、慢性胆囊炎及胆结石肝胆郁结、湿热胃滞证[1]。

薄荷素油主要成分为L-薄荷脑、(-)-薄荷酮、胡薄荷酮、桉油精、异薄荷酮等[2]。

为了有效地控制胆舒滴丸的质量，本文建立
薄层色谱法对其进行定性鉴别，气相色谱法考察其特征图谱及含量。

通过方法学考察得出，所建方法专属性强、灵敏度高、方法稳定，可用于胆舒滴丸的质量控制。

1.1 仪器
薄层自动成像仪(TLC Visualizer，CAMAG)；半自动点样仪(linamat5，CAMAG)；万分之一天平(BS110S，赛多利斯)；超声清洗器(KQ-250B型，昆山超声电子有
限公司)；气相色谱仪(78090B，安捷伦)；色谱柱(安捷伦)；
1.2 试药
桉油精、薄荷脑、胡薄荷酮、(-)-薄荷酮(中国食品药品检定研究院，批号分别为110788-201105，110728-200506，111706-201205，111705-201105)；胆
舒滴丸(四川新绿色药业科技发展股份有限公司，批号分别为1312001，312002，1312003，140501，140502，140503，150401，150402，150403)；其他试剂、试药均为分析纯
2.1 薄层色谱鉴别
取本品10丸，研细，加乙酸乙酯10 mL，超声处理5 min，滤过，滤液作为供试品溶液。

另取薄荷脑对照品，加乙酸乙酯制成质量浓度为4 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)
试验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60～90 ℃-乙酸乙酯(7∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。

喷以5%香草醛乙醇溶
液-硫酸(100∶5)的混合溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点[3-4]。

结果见图1。

2.2 特征图谱
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇20 M为固定相的毛细管柱(柱长为
30 m，内径为0.53 mm，膜厚度为1 μm)；柱温为程序升温：初始温度为
115 ℃，保持5 min，以4 ℃·min-1的速率升温至200 ℃，保持3 min；进样口温度为230 ℃；检测器温度为230 ℃；分流进样，分流比为10∶1。

理论板数按
薄荷脑峰计算应不低于50 000。

见图2。

2.2.2 参照物溶液的制备取桉油精对照品、(-)-薄荷酮对照品、薄荷脑、胡薄荷酮
对照品[5]，精密称定，分别加无水乙醇制成质量浓度为2 mg·mL-1的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液的制备取本品5丸，精密称定，置50 mL量瓶中，加水4 mL，超声处理使溶散，加入无水乙醇30 mL，超声处理(功率200 W，频率40 kHz)5 min，放冷，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 特征图谱方法学考察稳定性：取同一供试品溶液，分别于0、4、8、12、
24 h测定，对其中的特征峰进行分析，各色谱峰相对保留时间的RSD均小于
0.3%，结果表明，供试品溶液在24 h内稳定。

精密度：取同一供试品溶液，连续进样6次，每次1 μL，各色谱峰相对保留时间
的RSD均小于2.0%，符合特征图谱研究的技术要求，表明该方法进样精密度良好。

重复性：取同一批胆舒滴丸样品6份，分别按照2.2.3项下方法制备供试品溶液，分别进样，结果各色谱峰的相对保留时间的RSD均小于2.0%，表明该方法重复
性好。

2.2.5 胆舒滴丸对照特征图谱的建立和分析按照2.2.3项下分别制备9批胆舒滴丸供试品溶液进行检测，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行分析，根据相对保留时间稳定、各批次样品均能检出，且峰相对较高的原则，以7号峰
为参照确定8个重复性较好的峰作为特征峰，并进行多点校正，自动匹配后生成
对照特征图谱。

9批胆舒滴丸特征图谱见图3，所得对照特征图谱见图4，各共有峰的相对保留时间见表1。

各特征峰与S峰的相对保留时间分别为：0.37(峰1)、
0.73(峰2)、0.78(峰3)、0.87(峰4)、0.90(峰5)、0.92(峰6)、1.00(峰S)、
1.05(峰8)。

2.3 含量测定
2.3.1 色谱条件与系统适用性试验同2.2.1色谱条件。

2.3.2 对照品溶液的制备取薄荷脑对照品，精密称定，加无水乙醇制成每质量浓度为0.2 mg·mL-1的溶液，即得。

2.3.3 供试品溶液的制备同2.2.3供试品溶液的制备方法。

2.3.4 空白供试品溶液的制备原方法去除薄荷素油，依法制成阴性制剂。

取5丸，按照2.2.3项下方法制备空白供试品溶液，依法测定。

结果在色谱图薄荷脑色谱峰位置无吸收峰，空白制剂色谱图对待测峰的测定无干扰。

2.3.5 标准曲线的制备分别精密吸取薄荷脑对照品溶液(0.52 mg·mL-1)0.2、0.5、0.8、1、1.5 μL，注入气相色谱仪，测定峰面积，以进样量(X，μg)为横坐标，以
峰面积值(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程：Y=1 827.0X-2×10-13，
相关系数r=1.000 0，表明薄荷脑在0.1～0.75 μg进样量与峰面积值呈良好的线
性关系。

2.3.6 精密度试验精密吸取薄荷脑对照品溶液(0.52 mg·mL-1)1 μL，连续进样6次，薄荷脑峰面积的RSD为1.0%，表明本方法进样精密度良好。

2.3.7 重复性试验取同一批次胆舒滴丸5丸，共6份，置具塞锥形瓶中，按照
2.3.3项下方法处理成6份供试品溶液，进行测定，薄荷脑峰面积的RSD为1.5%，表明本方法重复性良好。

2.3.8 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、4、8、12、24 h测定，对其中
的特征峰进行分析，薄荷脑峰面积的RSD为0.6%，结果表明，供试品溶液在24 h内稳定。

2.3.9 加样回收试验取已知含量的样品(批号：1312001，薄荷脑的含量为1.95
mg/丸，)3丸，共6份，精密称定，分别精密加入薄荷脑对照品溶液(0.52 mg·mL-1)10 mL，依法测定。

计算回收率为100.6%，RSD为2.2%，表明此方
法准确性良好。

2.3.10 样品的含量测定依法对9批胆舒滴丸进行薄荷脑的含量测定，结果见表2。

胆舒滴丸是以薄荷素油为主要原料制成的滴丸剂。

薄荷素油主要成分为L-薄荷脑、(-)-薄荷酮、胡薄荷酮、桉油精、异薄荷酮等，其中以薄荷脑含量最高，故以薄荷
脑为薄层色谱鉴别和含量测定的指标成分，以桉油精、(-)-薄荷酮、薄荷脑、胡薄
荷酮为参照物，采用薄层色谱法和气相色谱法对胆舒滴丸进行鉴别、含量测定及特征图谱研究。

特征图谱可从整体上实现质量控制，有利于中药质量稳定和有效。

2015年版《中华人民共和国药典》一部收载的薄荷素油指纹图谱项下，对薄荷素油进行了指纹图谱检测。

为了提高胆舒滴丸的质量标准，特进行胆舒滴丸的特征图谱研究，确定了8个特征峰，其中4个峰得到指认。

根据9批胆舒滴丸含量测定数据，以9批薄荷脑含量的80%为限量标准，暂定本
品每丸含薄荷素油以薄荷脑(C10H20O)计，不得少于1.6 mg。

【相关文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010.
[2] 刘红杰，金若敏.薄荷油研究进展[J].山东中医药大学学报，2006，30(6)：502.
[3] 朱亮，包贝华，周灵君.胆舒滴丸的质量标准研究[J].江苏中医药，2007，39(8)：68-69.
[4] 刘军，袁杰，吕雄文.枇杷止咳颗粒中枇杷叶、薄荷脑和罂粟壳薄层鉴别的研究[J].安徽医药，2011，15(12)1498-1500.
[5] 桂新，周荣汉.国产野生薄荷挥发油化学组分变异及其化学型[J].植物资源与环境，1998，7(3)：13-18.。