利用细胞微核技术对污水处理厂水质污染状况检测研究

损 伤等 为测 试终 点 的植 物 微 核检 测 方 法 ， 具 有 准 确， 快速 ， 操 作简 便 ， 有 明显剂量 的效 应关 系 ， 适 合 大批 量样 品检 测 等特 点 ， 且 微 核 产 生 的 数量 与 诱
变 因子剂量 的强 弱成 正 比 ， 因此 微 核 试验 作 为 一
豆根 尖有 丝分 裂制 片制备 的方 法参 考本试 验 室张
关键 词 ： 蚕豆 ； 微核 ； 污水 处理 厂 ； 微 核 千 分 率
微核 （ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｕ ｓ ，ＭＣ Ｎ） 是 真 核 类 生 物 细 胞 中的一种 异 常结 构 ， 往 往 是 细胞 经 辐射 或 化 学
然 环境 。该处 理 厂主要 接 纳居 民 的生 活污 水 和工 业废 水 ， 试验 分别 取 污 水 处 理 厂处 理 前 和处 理 后 的水样 。
蚕 豆根 尖微 核技 术是 一种 以染 色体 断裂及 纺锤 体
１ ． ３ ． １ 蚕 豆根 尖有丝 分 裂制 片的 制备 选取 无 虫害、 无 霉变 的饱 满青 皮 蚕 豆 于 ２ ５ ℃ 的 恒 温箱 中
催 芽长 根 ； 分 别 用河 南 省 洛 阳市 洛 宁县 污水 处 理 厂 处理 前 、 处 理 后 的水 样 培 养 蚕 豆 根尖 作 为 两 个 试 验组 ， 阴性 对 照为 自来水 培养 的蚕 豆根 尖 ； 阳性 对照为 ２ ｍｇ－ Ｌ 环磷 酰胺 培 养 的蚕 豆根 尖 。蚕
苯 酚 品红染 色 液 （ 北 京雷 根 生 物技 术 有 限公 司 ） ； 数 码显 微镜 （ Ｌ ｅ ｉ ｃ ａ Ｄ Ｍ ７ ５ ０ ） 。
１ ． ２ 水样
１ ． ３ ． ３ 数 据分 析
根 据镜 检 所 得 微 核 数 计算 微
核千 分率 ， 微核 千分 率 ＝（ 带 有 微 核 的细 胞 ห้องสมุดไป่ตู้／ 观
李 爱玲 ， 赵 妮 平
（ 陕 西学前 师 范学 院 生物 科 学与技 术 系， 陕 西 西安
摘
７ １ ０ ０ ６ １ ）
要： 应 用蚕 豆根 尖微核技 术对 河 南省洛 阳 市洛 宁县污 水处 理厂 处理前 后 的 水样 进行 了研 究． 同时 以 ２
ｍ ｇ・ Ｌ 的 环 磷 酰 胺 处理 蚕 豆 根 尖作 阳性 对 照 ， 自来 水 作 阴 性 对 照 。测 定 微 核 千 分 率 ， 判 断 其 对 蚕 豆 的 诱 变
采 用 盲法 。计 数 时 ， 选 取 涂 片及 染 色 质 量好 的 区
域， 避 开过 分重 叠 和细 胞 破 坏 的 区域 。通过 调 节 显 微镜 焦 距 区分 微 核 和 落 在 细 胞 上 被 染 色 的杂 质 。微 核 的识 别标 准 为 在 主 核 大小 的 １ ／ ３以下 ， 并 与 主核 分离 的小 核 ； 着 色与 主核 相 当或稍 浅 ； 形 态为 圆形 、 椭 圆 形 或不 规 则 图形 。每 组 至 少 观察 １ ０ ０ ０个 细 胞 ， 记 录 微 核 数 。每 个 试 验 组 统 计 ３ 次， 取 平均 值 。
陕西农业科学 ２ ０ １ ５ ， ６ １ （ ０ ７ ） ： ４ ４— ４ ６
Ｓ ｈ ａ ａ ｎ ｘ ｉ Ｊ ｏ ｕ ｍａ ｌ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
利 用 细胞 微 核技 术 对 污水 处 理 厂水 质 污 染 状 况 检 测 研 究
贞 的文献 。
种有 效 的生物学 短期 测试 方法 应用 于监 测水 质污
染， 被 许多 国家 列为 常规 指标 ， 并列 入水 环境监 测 的规 范化方 法 之 一 【 ２ Ｊ 。笔 者 研 究 采 用 蚕 豆 根 尖
１ ． ３ ． ２ 镜检 并 统 计微 核 数
玻 片 的 编 号 与计 数
河南 省洛 阳市 洛宁 县污水 处理 厂周 围有 居 民
住房 、 工 厂 等 高 大建 筑 ， 附 近 还有 河 流 、 树林 等 自
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ５ － ０ ３ ． １ ６ 修 回 日期 ： ２ ０ １ ５ ０ － ４ ０９ －
察 细胞 总 数 ）×１ ０ ０ ％ 。参 照 文 献 记 载 方 法 计 算 污染 指数 Ｊ ， 污染 指数 （ Ｐ Ｉ ）＝样 品实 测 ＭＣ Ｎ ％ ｃ 平 均值／ 对 照组 （ 标准水 ） ＭＣ Ｎ ％ ｏ 平 均 值 。并 根 据 污
染指 数 的大ｄ ， Ｎ 断水 样 的污 染 程 度 ， 污 染 指 数 为
能力 。结果表明 ： 处理前 水样 的污染指数是 ５ ． ４ ８ ， 为重度污 染； 处理后 水样 的污染指数是 １ ． ９ ９ ， 为轻度 污染 。 处理前水样的微核 千分率为 ３ ． ６ ７ ％ ０ ， 处理后水样 的微核千分率 为 １ ． ３ ３ ％ ｅ ， 处理 前水样 与处理后 水样的微核 平 均数差异具有统计学意义（ Ｐ ＜０ ． ０ ５ ） ， 表 明该污水处理厂对污水的净化有明显效果。
细胞 微核试 验技 术对 河南 省洛 阳市 洛宁 县污水 处
理厂 处理前 后 的水 样 污 染 程 度进 行 客 观 的评 价 ，
以期 为城 市 的综 合治 理 提供科 学依 据 。
１ 试 验 材 料 与方 法
１ ． １ 试验 仪器 和试 剂
青皮蚕 豆 （ 西安 市售 优 质青 皮 蚕 豆 ） ； ２ ｍｇ・ Ｌ 环磷 酰胺 （ ｃ Ｐ ， 上 海第 十二制 药 厂 生产 ） ； 改 良
１ ． ３ 方法
药 物 的作用 而产 生 的。在 细胞 间期 微核 呈 圆形 或
椭 圆形 ， 游 离于主核之外 、 大小应 在主核 １ ／ ３以
下¨ Ｊ 。一般认为染色体复制过程 中， 受到污染 因
子 的影 响 ， 断裂后 的染 色体 片段 不具 有着 丝点 ， 到 细胞 分 裂 末 期 ， 断 片 流 失 在 细胞 质 中 成 为 微 核 。