HPLC法测定参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量

HPLC法测定参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量
孙小燕
【摘要】目的采用HPLC法测定参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量.方法色谱柱为HangBang C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸(21∶79),检测波长203 nm,流速1.0mL/min,外标法峰面积定量.结果线性范围为0.633 ～6.326 μg(r =0.999 2),平均回收率为98.99％,RSD=0.56％.结论所建方法简便、快速、准确.%Objective To establish an HPLC method for the determination of ginsenoside Rgl in capsules of Shenyi. Methods A HangBang-Clg column was used. The mobile phase consisted of Methyl Cyanides-O. 1 % phosphoric acid(21:79). The wavelength was set at 203 nm. Results The linear range of ginsenoside Rgl was 0. 633 ~ 6. 326 (*g( r =0. 999 2) . The average recovery rate was 98. 99% ,RSD was 0. 56% . Conclusion The method is simple, rapid and accurate.
【期刊名称】《实用药物与临床》
【年(卷),期】2012(015)001
【总页数】2页(P28-29)
【关键词】参蚁胶囊;人参皂苷Rg1;HPLC
【作者】孙小燕
【作者单位】江苏省如皋市皮肤病专科医院,江苏如皋226500
【正文语种】中文
参蚁胶囊由人参、蚂蚁等中药组成，是我院医院制剂，具有免疫调节作用，主要用于治疗白癜风，在多年的运用中取得良好效果。

为了控制参蚁胶囊的质量，保证临床用药效果，本实验建立了HPLC法对参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量进行测定。

经方法学考察证实，该方法特异性高，回收率和精密度好，结果满意。

1 实验部分
1.1 仪器与试药 515高效液相色谱系统(美国Waters公司);SB22200超声波清洗
器(上海Branson超声波仪器厂)。

人参皂苷Rg1对照品(中国药品生物制品检定所，批号:0703-200917);乙腈为色谱纯;其余试剂为分析纯;参蚁胶囊(江苏省如皋市皮肤病防治所，每粒0.5 g，每瓶100粒，批号:20100809、 20100914、 20101014、20101225、20110221、20110324、20110425、20110526，其中前4批人参原料购自南通药材采购供应站，后4批人参原料购自南京中药饮片厂)。

1.2 方法与结果
1.2.1 色谱条件及系统适用性［1-2］色谱柱为HangBang C18(200mm
×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸(21∶79)，流速为1.0mL/min，进样
量为10μL，检测波长为203 nm。

理论板数按人参皂苷Rg1峰计算不低于
2×103，被测组分及杂质峰之间的分离度均大于1.5，处方中的其他成分及辅料无干扰(见图1)。

1.2.2 溶液的制备取参蚁胶囊12粒，称重，得出平均粒重，倾出胶囊内粉末，研匀，精密称取5 g，精密加入10mL流动相，精密称定，超声处理(功率300 W，频率50 Hz)45min，室温放置，精密称定，补充缺失的重量，用0.45μm微孔滤
膜过滤，作为供试品溶液。

1.2.3 精密称取人参皂苷Rg1对照品12.65 mg，置100mL量瓶中，加适量流动
相溶解并定容，即得126.5μg/mL的对照品溶液。

按参蚁胶囊配方制备不含人参
的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

1.2.4 线性关系的考察按“1.2.1”项的色谱条件，取对照品溶液分别进样5、10、15、20、25、50μL，测定峰面积。

以峰面积积分值为纵坐标、人参皂苷Rg1的
量为横坐标进行线性回归，得回归方程:Y=1.847×104X-9.636×102(r=0.9998)。

结果表明，人参皂苷 Rg10.633～6.326μg时，与峰面积的线性关系良好。

1.2.5 精密度试验精密吸取10μL对照品溶液，连续进样5次，其峰面积的
RSD=0.95%。

1.2.6 重复性试验取同一批参蚁胶囊，制备5份供试品溶液，分别进样，按
“1.2.8”项的方法测定人参皂苷Rg1的含量，平均含量为0.2154 mg/粒，
RSD=1.63%。

1.2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于制备后 0、2、4、6、8、12、24 h 进样10μL，记录峰面积。

其峰面积的RSD=0.82%，表明供试品溶液在24 h内
稳定。

1.2.8 回收试验分别精密称取5 g已测定含量的参蚁胶囊(含人参皂苷Rg10.2154 mg/粒)6份，分别精密加入 10、20、30mL 的126.5μg/mL人参皂苷Rg1对照
品溶液，混匀后再按“1.2.7”项的方法测定人参皂苷Rg1的含量，其平均回收率为98.99%，RSD=0.56%(见表1)。

图1 人参皂苷Rg1阴性样品(A)、对照品(B)和样品(C)溶液的色谱图
表1 回收率测定结果成分样品量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)2.154 1.265 3.398 98.342.154 1.265 3.402 98.65人参皂苷
Rg1 2.154 2.530 4.675 99.64 98.99 0.562.154 2.530 4.672 99.532.154 3.795 5.893 98.522.154 3.795 5.921 99.26
1.2.9 样品的测定取参蚁胶囊，按“1.2.2”项的方法制备成供试品溶液，在
“1.2.1”项色谱条件下，分别取10μL供试品溶液和对照品溶液，分别进样。

以
峰面积按外标法计算含量，测得8批样品的含量分别为0.2154 mg/粒、0.2241 mg/粒、0.2108 mg/粒、0.2187 mg/粒、0.2218 mg/粒、0.2356 mg/粒、0.2191 mg/粒、0.2103 mg/粒，平均含量为0.2195 mg/粒，RSD=0.66%。

2 讨论
取同一批号样品内容物，加流动相适量，超声处理 5、15、45、60min，测定峰面积。

结果表明，超声45min以上测得的人参皂苷Rg1峰面积不再增加，故采用超声45min处理样品。

测得8批参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量均在0.2195 mg/粒左右。

考虑到药材的来源、炮制加工、颗粒生产及贮存等因素，含量限度在8批均值的基础上下降20%，故暂定本品含量限度为含人参皂苷Rg1不得少于0.2 mg/粒。

采用HPLC法测定参蚁胶囊中人参皂苷Rg1的含量，方法稳定、快速、准确，可作为其质量控制的有效方法。

参考文献:
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［S］.北京:化学工业出版社，2005:7.
［2］杨丽敏，王红艳.HPLC法测定参茸鹿胎丸中人参皂苷Rg1的含量［J］.中国实用医药，2011，6(3):165-167.。