Tnni3k过表达转基因小鼠构建技术原理
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Tnni3k过表达转基因小鼠构建技术原理
研究人员首先构建了由α-MHC作为启动子的Tnni3k表达质粒,并注射到胚胎中进而构建转基因动物。
值得注意的是,使用转基因方式构建的小鼠,不同的个体(或称为谱系)可能具有不同的基因型或表型。
研究人员发现TG-H谱系的小鼠在3月龄(31.3%)和12月龄(43.1%)的时候表现出异常的心重/体重比变化(heart weight/body weight, HW/BW)。
研究人员之后对这一谱系的小鼠进行了后续分析。
在3月龄时,TG-H小鼠的心脏明显大于野生型同窝小鼠(图3A)。
切片结果显示转基因小鼠具有同侧心室肥大的表型,并具有腔室尺寸较小、心室壁较厚的特点(图3B)。
镜下观察结果显示,在TG-H 小鼠中未观察到坏死或肌细胞紊乱的现象(图3C,上图)。
Masson三色染色的结果显示TG-H转基因小鼠没有间质纤维化的发生(图3C,下图)。
除此之外,研究人员通过H&E染色检测心肌细胞的横截面积,实验结果显示,TG-H谱系小鼠的心肌细胞明显更大,并且,其平均表面积比同窝对照小鼠大1.8倍(图3D)[6]。
图3. Tnni3k过表达转基因小鼠3月龄的心脏组织学分析。
(A)完整心脏的形态学照片。
(B)H&E染色后心脏的宏观视图,结果显示TG-H小鼠同侧心室肥大。
(C)心肌细胞的组织学分析,上图是H&E染色切片,下图是三色染色切片。
(D)从H&E染色的组织切片中定量心肌细胞的横截面积。