人参糖果中人参总皂苷含量的测定

人参糖果中人参总皂苷含量的测定
王磊;孙德水;郑东梅
【摘要】目的建立市售人参糖果中人参总皂苷含量的测定方法.方法采用比色法测定,检测波长为540nm.结果比色法测定在20～240μg(r=0.9992)范围内线性关系良好,平均回收率为95.74％,RSD=2.29％ (n=5).所测3个批次市售人参糖果中人参总皂苷含量相近,总皂苷含量分别为0.195％,0.159％和0.141％.结论该方法操作简便,稳定性和重现性好,可用于市售人参糖果中人参总皂苷含量的测定.
【期刊名称】《人参研究》
【年(卷),期】2013(025)004
【总页数】3页(P28-30)
【关键词】人参糖果;人参总皂苷;比色法;含量测定
【作者】王磊;孙德水;郑东梅
【作者单位】华润吉林医药有限公司长春·130000;吉林特研药业有限公司吉林·132109;华润吉林医药有限公司长春·130000
【正文语种】中文
人参糖果作为一种人参制品，是以白砂糖和人参提取物为主要原料，在白砂糖内加入一定比例的人参颗粒或人参提取液，用明胶作为凝胶剂，最后浇注成型的糖果。

因其含有人参皂苷等活性成分[1,2,3]，与普通糖果相比具有安神益智、生津养血的功效，经常食用还能够美容养颜、延年益寿。

随着卫生部2012年9月6日批准人参为新资源食品，人参"药食同源"得到认可[3]，相关的人参制品种类也越来越
多，但由于目前生产人参糖果的厂家和原料的不同，人参糖果的质量也存在差异。

为了更好的控制市售人参糖果的质量，本文对人参糖果中人参总皂苷的含量进行了分析研究。

TU-1810型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；N-1001型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；电热恒温鼓风干燥箱（上海一恒科技有限公司）；电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）；人参糖果于2011年9月购于长白山特产市场，考虑到商家的利益，生产企业名未标注。

人参皂苷Re标准品（批次：11075-201123）购于中国药品生物制品检验所；所用试剂均为国产分析纯；实验用水均为自制蒸馏水。

2.1 对照品溶液的制备
精密称取人参皂苷Re对照品20.00mg，置于10mL容量瓶中，加甲醇适量使其溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（含人参皂苷Re 2mg/mL）。

2.2 供试品溶液的制备
样品砸碎后精确称取10.00g，置锥形瓶中，加入100 mL 85%乙醇溶液，浸泡过夜，次日超声波提取3次，每次半小时。

合并回收提取液，少量提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。

用蒸馏水溶解提取物，加蒸馏水30mL置分液漏斗中用乙醚50mL 萃取3次，后用水饱和的正丁醇50mL进行萃取，共3次。

再用正丁醇饱和的水萃取3次，取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 标准曲线的绘制
2.3.1 5%香草醛-冰醋酸试液的配置
取香草醛2.50g，加冰醋酸定容置50mL容量瓶中，溶解，摇匀，即得。

2.3.2 标准曲线的制备
精密吸取人参皂苷Re对照品10、30、50、70、90、120μL，置于磨口带塞试管
中，水浴蒸干甲醇后，加入5%香草醛-冰醋酸(2.50g/50mL)0.2mL和高氯酸
0.8mL，振摇混匀，置60℃恒温水浴加热15min后立即取出在冰水浴中冷却
2min，再加入冰醋酸5mL，振摇均匀，以试剂作空白，照分光光度法于540nm
波长处分别测定吸收度，以吸光度(A)为纵坐标、浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=0.23575(C)+ 0.00282，r=0.9992。

2.4 测定波长的选择
取人参皂苷Re对照品溶液(空白对照为不加对照品的香草醛-高氯酸溶液)显色后，在紫外分光光度计500～600nm范围进行光谱扫描。

结果表明，对照品溶液在540 nm处有最大吸收，多次重复，峰形一致且空白对照无干扰，故选择540nm
作为样品测定的波长。

2.5 样品的测定
精密吸取“2.2供试品溶液的制备”方法中样品溶液40μL，共3份。

分别置于3
个10mL磨口带塞试管中，按“2.3.2”项下方法显色测定吸收度，由回归方程计
算总皂苷的平均质量分数。

3.1 提取溶剂的选择
皂苷的提取溶剂主要有水、甲醇、乙醇3种[4,5,6]，本方法采用85%乙醇溶液浸提。

由于人参糖果不同于单一的人参，成分较为复杂，其中添加了糊精、白砂糖类物质，如果用水作提取溶剂，浸提液会出现粘稠状不易萃取；并且由于糖在水相中的溶解度大于有机相，为降低提取液中的含糖量，减少测定误差，应选用甲醇或乙醇，但甲醇毒性偏大，故采用85%乙醇溶液作为提取溶剂。

3.2 人参总皂苷纯化方法的选择
本实验采用溶剂萃取法对人参总皂苷进行纯化。

用乙醚萃取，对粗提液进行脱脂，与水相比，皂苷更易溶于正丁醇相，用水饱和的正丁醇萃取，将皂苷与不溶于正丁醇的糖类等杂质分离，用水饱和正丁醇是为了防止萃取液越来越少，影响萃取效果，
但同时又会将一部分溶于水的糖类带到萃取液中。

用正丁醇饱和的水洗，可以将其中所含的糖类去除。

文献报道[7,8]采用D-101大孔吸附树脂进行纯化，虽效果较好，但需对大孔树脂进行预处理、装柱、洗柱等步骤，方法繁琐、耗时，而萃取法简便、用时少，通过上述萃取方法，可消除大部分干扰。

所以本实验采用溶剂萃取法对人参糖果中的人参总皂苷进行分离纯化。

3.3 精密度实验
精密吸取对照品溶液20μL置于10mL磨口带塞试管中，共6份，按“2.4.2”项
下方法显色测定吸收度，连续测定6次，记录吸光度值，计算得其RSD为0.04%，表明仪器的精密度良好。

3.4 稳定性实验
精密吸取样品溶液40μL置于10mL磨口带塞试管中，按“2.4.2”项下方法显色，并分别在显色后每隔10min测定一次吸光度，共测6次，计算得其RSD为
1.25%，结果表明所测样品在1小时内较稳定，本实验在1小时内完成。

3.5 重复性实验
精确称取样品5份，每份10.00g，按照“2.2供试品溶液的制备”步骤，平行制
备样品溶液，各吸取40μL置于5个10mL具塞试管中，按“2.4.2”项下方法显
色测定吸收度，通过回归方程得到平均总皂苷的质量浓度，其RSD为0.74%，说明样品重现性良好。

3.6 加样回收实验
由以上结果可知,用该方法测定人参糖果中人参总皂苷含量,加样回收率较高,且稳定,表明人参总皂苷在提取、纯化过程中没有较大损失,可以保证测定结果的准确性。

3.7 样品的测定
所测3个批次市售人参糖果中人参总皂苷含量相近，且含量都偏低，这可能与卫
生部规定的人参（人工种植）为新资源食品，且人参的食用量不大于3g/d有关。

本实验采用超声提取人参糖果中的人参总皂苷，可将人参糖中的总皂苷提取完全，通过水饱和正丁醇萃取，可将人参糖果中的多糖等杂质于人参总皂苷得到较好的分离，同时采用香草醛-高氯酸比色法对糖的干扰较小，保证了实验结果的准确。

该法简便易行，精确度、稳定性和重现性均较好，所测3个批次的市售人参糖果中人参总皂苷含量在0.141%～0.195%之间，对市售人参糖果质量的控制具有参考意义。

精确吸取已知含量的样品溶液40μL，平行5份，分别置于5个10mL磨口带塞试管中，再分别精确加入Re标准品溶液(2mg/mL)10、20、30、40、50μL，按“2.4.2”项下方法显色测定吸光度，计算回收率为95.74%RSD为2.29%。

【相关文献】
［1］黎阳,张铁军,刘素香,等.人参化学成分和药理研究进展[J].中草药,2009,40(1):164～166. ［2］王铁生.中国人参[M].沈阳:辽宁科学技术出版社,2001:10.
［3］闫德胜李晓峰.人参成了新资源食品[N].健康报,2012-10-8(4).
［4］王玉堂.人参中人参皂苷的提取、分离和测定[D].吉林:吉林大学,2008:55～60.
［5］高丽萍,刘华,封云芳.人参总皂苷的含量测定[J].浙江工程学院学报,2002,19(3):171～174. ［6］北京医学院、北京中医学院.中草药成分化学[M].北京:人民卫生出版社,1980：444～445. ［7］桂双英,周亚球.比色法测定人参中人参总皂苷的含量[J].安徽中医学院学报,2003,22(4):51～5 ［8］吴斌秀,赖招莲.紫外分光光度法测定西洋参含片中人参总皂苷[J].海峡药学,2007,19(8):68～70.。