sanger法测序的原理

sanger法测序的原理
Sanger法测序是由威廉·Sander教授领导的英国剑桥大学团队于1977年研制成功的，是一种以dideoxy nucleotides作为核苷酸测序试剂的方法，是现今最常用的DNA测序方法。

Sanger法测序的原理很简单，主要是两个步骤：
1. 引物延伸：
每个DNA片段围绕引物都会发生DNA聚合反应，形成一种叫做DNA复制产物（DNA replicant）的单链DNA 分子。

在这种反应过程中，除了DNA复制酶以外，还要使用一种叫做dideoxy nucleotides （ddNTP）的特殊核苷酸，这种核苷酸可以终止DNA合成过程，即当DNA复制酶将其作为一个核苷酸的替代品时，ddNTP会使DNA复制酶与被复制片段分离，从而终止后续字符的产生。

2. 核苷酸分离：
使用ddNTP合成的DNA复制产物可以应用凝胶电泳的方法，由于不同大小的DNA复制产物，在特定电场中移动的速度也不一样，通过对比应用不同dnTPs的产物，可以在凝胶上获得待测序片段的测序图谱，从而确定其DNA序列。

Sanger法测序的原理就是这样，各种不同大小的DNA复制物在凝胶上按照其大小被分离，形成一条测序图谱，从而可以确定其DNA 序列。

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