盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸检查

实验项目名称：盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸检查
实验计划学时：6
一、实验目的
1．掌握TLC法测定有关物质的原理与测定方法。

2．熟悉粘合薄层板的制备与活化。

二、实验内容和要求
（一）．薄层色谱法
(1)玻板用5cm×20cm或l0cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

(2)固定相常用固定相有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254等。

其颗粒大小．一般要求直径为10-40 µm,取各品种项下规定的固定项一定量，按“薄层板制备”法制备薄层板。

(3)薄层涂布一般可分无粘合剂和含粘合剂两种；前者系固定相直接涂布于玻板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10％-15％煅石膏(CaSO4.2H2O 在140o C加热4h),混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5％-0.7％)适量调成糊状，均匀涂布于玻板上。

(4)展开室应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密的盖子，底部应平整光滑，便于观察。

薄层板制备根据各品种项下规定，取1份固定相和3份水(或粘合剂)在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，用倾注法或平铺法或涂布器法，在玻板上涂布厚度为0.2-0.3 mm的薄层板。

将涂
好薄层的玻板置水平台上，于室温下晾干后在110o C烘30min；置有干燥剂的干燥箱中备用。

使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视).
点样用微量注射器或微量吸管吸取规定量样品溶液，点样于薄层板上，—般为圆点，点样基线距底边2.0 cm，样点直径为2-4 mm，点间距离约为1．5-2．0 cm，点样时必须注意勿损伤薄层表面。

展开展开缸如需预先用展开剂饱和，可在缸个加入足够量的展开剂，并在壁上贴两条与缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中,一端浸入展开剂中，密封缸顶的盖，使系统平衡.将点好样品的薄层板放人展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底0.5-1.0 cm(切勿将样点浸入展开刑中)，密封缸盖，待展开至规定距离(一般为10-15cm)，取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。

三、实验主要仪器设备和材料
层析缸，玻板，喷雾器，点样用微量注射器或微量吸管。

硅胶H,硅胶GF254，对二甲氨基苯甲醛，盐酸普鲁卡因注射液.
四、实验方法、步骤及结果测试
盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸检查
精密量取本品，加乙醇制成每1mL中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。

另取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1mL中含30 ug的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(附录A)试验，吸取上述两种溶液各10 uL，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇(14：1：l：4)为展
开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液(2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100 mL，加冰醋酸5 mL制成)喷雾显色。

供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深。

五、实验报告要求
记录实验详细步骤及分析结果。

六、思考题
1．TLC分析定性定量方面的应用？
七、实验说明及注意事项
1．薄层色谱分析中为使斑点集中，点样应分次点加，每次点加后，候其自然干燥、低温烘干或经温热气流吠干。

2．荡层板故入层析缸时，薄板底边应水平浸入展开剂中，待展开至溶剂前沿距玻板顶端2-3cm时，取出薄层板。

3．展开缸必须密封，为使缸内展开剂饱和，薄层板故人前可在层析缸内壁贴滤纸条，让滤纸条一端浸入展开剂中，密封层析缸，待系统平衡后再将薄层板故入，展开。