酚酸的提取方案
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一脱脂
1称取200g 小麦麸皮样品(不同粉碎程度),倒入烧瓶
2量取800ml正己烷到烧瓶,震荡1h。
3使用定性滤纸过滤。
4. 重复脱脂一次。
使用氮吹仪干燥。
(冷冻干燥)
二提取
2在室温条件下,使用有机溶剂(80%乙醇,甲醇/丙酮/水混合溶剂,乙酸乙酯/乙醚混合溶剂,乙醇/丙酮/水混合溶剂),搅拌,提取1h。
重复一次。
(混合溶剂的比例以及体积?)
3离心机分离。
得上清液和滤渣。
三萃取
方法一;碱—酸法提取酚酸
(一)游离型酚酸(FPA)萃取
取6mL上清液,氮吹仪蒸干。
用HCl溶液调至pH2,用6mL的乙醚萃取3 次,有机相混合后用氮吹仪蒸干,用2ml的色谱纯的甲醇复溶,得到游离型酚酸(FPA).
(二)总酚酸的萃取
1上述游离酚酸萃取后的水相用2mol/L 的NaOH溶液调至pH7,
2用5mL 2mol/L 的NaOH溶液碱解4h,
3用6mol/L的盐酸调pH2,用10mL 乙醚萃取3 次,有机相氮吹仪蒸干后,用2mL 甲醇复溶,得到碱解可溶共价结合型酚酸(BHPA),4水相用5mL 6mol/L 的HCl溶液在95℃中酸解20min,冷却后用10mL 乙醚萃取3 次,有机相用氮吹仪蒸干后,用2mL 甲醇复溶,得到酸
解可溶共价结合型酚酸(AHPA)。
总的可溶酚酸=酸解可溶共价结合型酚酸(AHPA)+碱解可溶共价结合型酚酸(BHPA)+游离型酚酸(FPA)
(三)不溶性酚酸的萃取
1氮吹仪干燥后滤渣称重,取50mg,用4mL 2mol/L的NaO H 溶液碱解4h,
2于室温条件下40 00r / m i n 离心15m in,
3上清液调pH2,用无水乙醚萃取3 次,
4有机相混合后用氮吹仪蒸干后,用2mL 甲醇复溶,得到碱解束缚型酚酸(BBPA)。
5残渣用4mL 6mol/L的HCl溶液于沸水中酸解1h,冷却后室温条件下4000r/min 离心15min,上清液用10mL 乙醚萃取3 次,
5有机相混合用氮吹仪蒸干后,用2mL 甲醇复溶,得到酸解束缚型酚酸(ABPA)。
不溶性酚酸=碱解束缚型酚酸(BBPA)+酸解束缚型酚酸(ABPA)
方法二:碱法提取酚酸。
(一)游离型酚酸(FPA)萃取
取6mL上清液,氮吹仪蒸干。
用HCl溶液调至pH2,用6mL的乙醚萃取3 次,有机相混合后用氮吹仪蒸干,用2ml的色谱纯的甲醇复溶,得到游离型酚酸(FPA).
(二)总酚酸的萃取
1上取6ml上清液,用2mol/L 的NaOH溶液调至pH7,
2用20mL 2mol/L 的NaOH溶液,在室温条件下,碱解4h,
3用6mol/L的盐酸调pH2,用10mL 乙醚萃取3 次,有机相氮吹仪蒸干后,用2mL 甲醇复溶,得到总的可溶性酚酸。
(三)不溶性酚酸萃取
1氮吹仪干燥后滤渣称重,取50mg,用4mL 2mol/L的NaO H 溶液碱解室温条件下4h。
2用HCl溶液调至pH2,用无水乙醚萃取3 次,有机相混合后用氮吹仪蒸干,用色谱纯的甲醇复溶,得到不溶性酚酸。