乳鸽早期生长及鸽乳营养水平的研究进展
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
乳鸽早期生长及鸽乳营养水平的研究进展
单达聪;王铮;黄建国;计峰
【摘要】近几年养鸽业的规模化、机械化和标准化程度都取得了很大进展,养鸽业已逐渐成为畜牧业的一个独立的产业分支.但目前关于乳鸽能量、粗蛋白质、氨基酸、矿物元素和维生素需要量的研究鲜有报道,这可能是由于乳鸽在达到成年体重之前一直由亲鸽哺喂所致.本文综述了乳鸽早期生长及鸽乳营养水平的研究进展,为乳鸽营养需要研究和人工育雏实践提供理论依据,以促进肉鸽养殖业的健康发展.【期刊名称】《动物营养学报》
【年(卷),期】2019(031)003
【总页数】6页(P981-986)
【关键词】乳鸽;鸽乳;营养水平
【作者】单达聪;王铮;黄建国;计峰
【作者单位】北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097
【正文语种】中文
【中图分类】S836
家鸽是由野生的原鸽(Columba livia)经过人类长期驯养而成的。
随着经济发展水平的提升和人民收入的提高,鸽产品的市场需求量逐步上升,养鸽业的规模化、机
械化和标准化程度都取得了很大进展,养鸽业已逐渐成为畜牧业的一个独立的产业分支。
据不完全统计,我国现存栏种鸽4 500万对左右,年出栏商品肉鸽6亿多只,食用鸽蛋8亿个,生产总量已占到世界总量的80%以上。
研究表明,鸽肉氨
基酸含量丰富,脂肪酸组成合理,是一种高蛋白质、低脂肪的理想型食用肉类[1]。
鸽是晚成鸟,出壳后需要亲鸽以嘴喂哺,出生后1个月才能独立采食,正因为肉
鸽的繁殖能力相对较低,用人工配制的鸽乳料人工哺喂乳鸽已成为行业的研究热点之一,但在生产中尚未形成较成熟的方法。
目前关于乳鸽能量、粗蛋白质、氨基酸、矿物元素和维生素需要量的研究鲜有报道,这可能是由于乳鸽达到成年体重之前一直由亲鸽哺喂所致。
因此,本文综述了乳鸽早期生长及鸽乳营养水平的研究进展,为乳鸽营养需要研究和人工育雏实践提供理论依据,以促进肉鸽养殖业的健康发展。
1 乳鸽的生长发育
在乳鸽出壳的前几天,亲鸽嗉囊上皮细胞层开始脱落并分泌一种物质——鸽乳。
嗉囊平时不进行分泌活动,只有在垂体产生催乳素时才开始增生和分泌,而催乳素是由于亲鸽孵化行为引起的[2-3],有趣的是,不仅雌鸽嗉囊可以分泌鸽乳,雄鸽
也可分泌[4]。
当乳鸽出壳后,亲鸽开始以鸽乳哺育乳鸽。
乳鸽出壳后的前3 d,完全依靠鸽乳为生,随着乳鸽日龄的增长,亲鸽分泌的鸽乳量逐渐降低,9日龄以后开始哺喂经嗉囊浸润的半消化食物和消化液的混合物,12日龄以后亲鸽分泌的鸽乳量在乳鸽营
养来源中的比例已经很少,此时乳鸽主要依靠亲鸽饲喂的籽实饲料维持生长发育,25日龄后亲鸽开始减少哺喂量,诱逼乳鸽自行采食[5]。
初生乳鸽比较脆弱,还没有睁眼,体温调节能力以及抗病能力都比较弱,在亲鸽分泌的初乳中含有一定的免疫蛋白和抗体[6]。
出壳后2周内乳鸽的小肠绒毛高度和
表面积将持续增加,二糖酶活性在出壳后8 d时达到最大值,小肠黏膜酶活性从
出壳后3~5 d开始显著增加,与日龄变化呈显著线性正相关,其中肠黏膜水解作
用是鸽早期发育阶段消化吸收的限速步骤;鸽出壳时小肠发育程度比肉鸡等家禽低,表现为鸽小肠黏膜水解酶活性的增加和绒毛的生长一直持续到出壳后8~14 d,而肉鸡等家禽则在出壳后72 h内完成;鸽出壳后的早期发育过程中,小肠黏膜及胰腺中碳水化合物类水解酶活性的变化比蛋白质类水解酶显著,表明碳水化合物类水解酶是限制鸽早期小肠消化功能的主要因素[7]。
随着日龄变化,乳鸽消化系统发
育迅速,其生长速度高于机体的生长,至10日龄时,机体的发育水平明显提高。
鸽乳具有促进生长的作用,乳鸽出壳后饲喂鸽乳3周,其体重可增长近22倍[8-9],乳鸽4周龄时体重可增长约26倍[9]。
Sales等[10]也报道,按照乳鸽出栏重
和生长天数计算得出的生长常数值是快大型鸡的3.79倍,是鹌鹑的1.96倍。
乳鸽相对生长速度快、生长强度大,这与乳鸽所采食的鸽乳的促生长作用密不可分。
2 鸽乳的营养水平
自然鸽乳呈小块的糊状物,白色或淡黄色,有酸败味,鸽乳表面可见油状物。
与哺乳类动物不同,鸽乳中不含乳糖[11-12]。
Shetty等[8]发现,当嗉囊内容物中鸽乳相对含量下降,谷物相对含量升高时,乳鸽的生长速度显著下降。
可见,鸽乳对乳鸽早期的快速生长发育有着不可替代的作用。
虽然不同文献所测得的鸽乳的营养水平因取样困难、乳鸽日龄及种鸽所采食的饲料不同,并不完全一致[13],但鸽乳的主要成分包括粗蛋白质、脂肪、矿物质和维生素,其中粗蛋白质和脂肪含量最为丰富(表1)。
鸽乳是一种高蛋白质、高脂肪、基本上无碳水化合物的物质。
表1 鸽乳的营养水平Table 1 Nutrient levels of crop milk %项目 Items含量Content近似分析(鲜样基础) Proximate analysis (fresh sample basis)[10]水分Moisture64.0~84.0粗蛋白质 CP11.0~18.8脂肪Fat4.5~12.7
续表1项目 Items含量 Content粗灰分 Ash0.8~1.8碳水化合物Carbohydrate0~6.4氨基酸(干物质基础) AA (dry matter basis)[10]精氨酸
Arg5.48甘氨酸 Gly4.99丝氨酸 Ser5.20组氨酸 His1.52异亮氨酸 Ile4.50亮氨酸
Leu8.96赖氨酸 Lys5.87蛋氨酸 Met2.84蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys3.18苯丙
氨酸 Phe5.50酪氨酸 Tyr5.36苏氨酸 Thr5.49色氨酸 Try2.80缬氨酸 Val5.61矿物质(干物质基础) Minerals (dry matter basis)[10]钙 Ca0.81钾 K0.62镁
Mg0.08钠 Na0.54铁 Fe/(mg/kg)429.00脂肪酸(干物质基础) Fatty acids (dry matter basis)[14]C14∶00.49C16∶016.67C16∶1n-
97.90C18∶012.13C18∶1n-941.26C18∶2n-613.81C18∶3n-
30.78C20∶02.99C20∶1n-92.06C20∶2n-60.26C20∶3n-6traceC20∶4n-
60.45C20∶5n-3traceC22∶00.59C22∶1n-9traceC22∶4n-60.11C22∶5n-
6traceC22∶5n-3traceC22∶6n-30.23C24∶00.34
Trace:微量。
2.1 粗蛋白质和氨基酸含量及其变化
8日龄以内鸽乳中的干物质含量基本保持不变,1~3日龄和4~6日龄乳鸽的自然鸽乳中粗蛋白质含量分别为52.6%和44.6%(以干物质计),粗蛋白质含量随乳鸽日龄的增加有下降的趋势,在乳鸽刚出壳的前几天,鸽乳中粗蛋白质含量较高,3 d 以后逐渐降低。
8日龄以后,亲鸽哺育的鸽乳成分主要为其所摄食的饲料[15]。
根据Sales等[10]的报道,鸽乳中的干物质和粗蛋白质含量在1~3日龄基本稳定,
1日龄乳鸽嗉囊中的干物质含量为30%,27日龄时为73%,粗蛋白质含量(以干
物质为基础)分别为46%和17%。
鸽乳粗蛋白质中约17%是以游离氨基酸形式存在,90%的粗蛋白质为含磷酪蛋白,其含磷量是牛奶中酪蛋白含磷量的1/2[16]。
游离氨基酸中的蛋氨酸、赖氨酸和苏氨酸含量在1~3日龄时明显增加。
3日龄以后,氨基酸中除组氨酸和半胱氨酸外,其他氨基酸含量均有下降的趋势;1~3日龄自然鸽乳中酸性氨基酸谷氨酸或/和谷氨酰胺和天冬氨酸的含量占总氨基酸的37.8%,必需氨基酸的含量占总氨基酸的47.7%[10]。
1~3日龄乳鸽快速生长的能量部分来源于鸽乳中含量较高的酸性氨
基酸(天冬氨酸和谷氨酸)。
而曾秋凤[15]的分析结果表明,除组氨酸外,4~6日龄鸽乳中各种氨基酸的含量均比1~3日龄鸽乳中的含量要低,且1~6日龄鸽乳中
蛋氨酸的含量均较低,表明蛋氨酸可能是自然鸽乳中的第一限制性氨基酸;1~3
日龄鸽乳中的支链氨基酸(缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸)含量高,可能与支链氨基酸除用于体内的蛋白质合成之外,在特定的生理时期可氧化供能、提高动物的免疫性能、增进动物的健康等特殊作用相关。
此外,鸽乳中酪蛋白含量占粗蛋白质的90%,其余为活性物质如免疫球蛋白A、乳铁蛋白和生长因子等[17-18]。
6日龄
以下的鸽乳与哺乳动物的初乳一样含有大量的营养性物质,同时还包含诸如各种激素、免疫球蛋白以及各类神经因子等非营养性物质[19],并且这些功能性物质的种类和含量等问题均不清楚,所以10日龄以前的鸽乳较难用人工配制的饲料替代,人工鸽乳对乳鸽的饲喂效果并不理想,与自然哺育的相同日龄乳鸽在体重上差异较大[15,20]。
2.2 脂肪含量及其变化
鸽乳中的脂肪主要包括甘油三酯、磷脂、胆固醇、游离脂肪酸、胆固醇酯和甘油二酯[21]。
前期鸽乳中的脂类绝大部分为中等链长的不饱和甘油三酯[3]。
鸽乳中总
共检测出21种不同的脂肪酸,其中主要的脂肪酸是十八碳一烯酸(表1)[14]。
鸽
乳脂肪中脂肪酸的组成与鸽蛋蛋黄和种鸽所采食饲料中的脂肪酸的组成极为相似,
即甘油三酯占81.2%,磷脂占12.2%,磷脂酸胆碱、磷脂酸胆胺和神经鞘磷脂分别占磷脂的52.8%、20.4%和21.9%[15]。
鸽乳中的脂肪和脂肪酸含量在1~3日龄基本稳定,但脂肪含量从1日龄的27%
下降为27日龄时的3%,甘油三酯的含量从1日龄占总脂肪的81.2%下降到19
日龄的62.7%[21]。
随乳鸽日龄的增加,鸽乳中便混有经过亲鸽嗉囊浸泡过的饲料,脂肪含量随之下降。
有分析指出粗脂肪的含量在出壳后前4 d逐渐上升,到第10天达到高峰,以后开始下降[22]。
但曾秋凤[15]发现1~3日龄鸽乳中脂肪含量比4~
6日龄鸽乳高13.6%,说明鸽乳中的粗脂肪在出壳3 d后就逐渐下降。
分析不同报道结果不一致的原因可能是采样方法不统一及亲鸽所采食的饲料不同所致。
2.3 碳水化合物含量及其变化
前期鸽乳中的碳水化合物含量极低,可忽略不计,随哺育乳鸽日龄的增加,亲鸽鸽乳中的碳水化合物含量上升[11]。
曾秋凤[15]指出1~3日龄鸽乳中无碳水化合物,3日龄以后开始含有碳水化合物,且其含量的分析结果受采样方法的影响较大。
乳鸽出壳当天,小肠黏膜二糖酶活性仍处于较低水平,但在1~3日龄增加迅速。
1~3日龄的乳鸽完全依靠亲鸽分泌的富含粗蛋白质和脂肪的鸽乳维持生长,所以
对前期乳鸽人工代乳料中是否添加碳水化合物一直存在争议,董信阳[7]与Shetty 等[8]研究均指出,鸽乳并不是完全缺乏碳水化合物,在鸽乳分泌的第1周内,碳
水化合物含量为0.9%~1.5%,乳鸽出壳后对碳水化合物具有一定的耐受性。
随着日龄的增长,鸽乳中逐渐混入亲鸽嗉囊浸湿的谷物饲料,并在8日龄以后谷物饲
料所占比例显著增加[23]。
伴随着这一变化,小肠二糖酶活性在乳鸽出壳后8 d时达到最大值[7]。
2.4 矿物质和维生素含量及其变化
前期鸽乳中的灰分(矿物元素)含量类似于牛乳,为5%~6%[3]。
鸽乳富含矿物元素,如钙、磷、钠和钾[11]。
矿物元素含量在3日龄以前基本不变,但镁含量会增加[10]。
1~3日龄鸽乳中的氯化钠含量特别高,比4~6日龄鸽乳中的含量和肉仔鸡的推荐需要量(0.37%)高2倍左右,其对1~3日龄乳鸽的作用机理有待进一步
研究;1~3日龄鸽乳中钙的含量比4~6日龄中的低11.8%,磷的含量高18.2%,随乳鸽日龄的增加,自然鸽乳中的钙磷比例有所增加,即从1~3日龄的
1.15∶1.00上升到4~6日龄的1.91∶1.00;自然鸽乳中钙和磷的含量均比肉仔鸡的推荐需要量(钙1.00%、总磷0.65%)高[15]。
亲鸽鸽乳中的灰分及盐分含量随哺育乳鸽日龄的增加均降低。
除以上成分外,鸽乳中还含有维生素C、维生素A以及维生素B2,但缺乏维生素B1[12]。
维生素A和维生素B12的含量直接影响幼雏的肠道发育,其缺乏可导致动物的消化吸收能力降低[24]。
鸽乳中还含有丰富的类胡萝卜素,主要为叶黄素和β-胡萝卜素,假如鸽乳日摄入量为8 g,1~5日龄乳鸽每日摄入的类胡萝卜素高达152.4 μg。
目前尚未检索到关于鸽乳中其他维生素成分含量的相关报道[25]。
2.5 免疫抗体等生物活性物质
鸽乳中母源抗体的含量很丰富,免疫球蛋白A含量高达1.45 mg/kg,免疫球蛋白G含量为0.34 mg/kg[26];1日龄乳鸽肠道对抗体的吸收非常少,大部分免疫球蛋白A和免疫球蛋白G仍留在肠道内发挥局部免疫的作用[27]。
正因为鸽乳中含有大量的母源抗体,所以在自然哺喂的情况下,1~3日龄的乳鸽在母源抗体和卵黄囊中抗体的双重保护下很少或几乎不发病。
2~10日龄雌雄亲鸽所分泌的鸽乳中免疫球蛋白G含量并无差异,且均随泌乳日龄的增加而下降[28]。
前期的鸽乳中还含有丰富的生物活性酶,主要包括碱性磷酸酶、半乳糖酶、亮氨酸氨肽酶、谷氨酰转肽酶和酸性磷酸酶等[29]。
研究结果显示,胰蛋白酶、肽酶和脂肪酶等酶类在亲鸽脱落的嗉囊黏膜细胞中积累增加,最终成为鸽乳的一部分,这些酶作为有效补充提高了乳鸽的消化能力,使得乳鸽消化道能够适应鸽乳高粗蛋白质和高能量的特性[28]。
此外,鸽乳中含有与表皮生长因子功能相似的促生长因子,鸽乳中存在一种分子质量为6 000 u的多肽—鸽乳生长因子,该生长因子可能与乳鸽早期的快速生长密切相关,但目前对其生物学特性和分子结构均不清楚[30-31]。
鸽乳中也含有转铁蛋白[32]以及序列和结构与乳铁蛋白相似的一种糖蛋白[33-34]。
但人工哺育条件下如何满足乳鸽对促生长因子和母源抗体等微量组分的需求尚有待进一步研究。
3 小结
目前国内外人工鸽乳主要是模拟自然鸽乳的营养成分进行配制,生产中已实现了从
出壳到出栏的全程人工哺喂。
然而由于乳鸽的消化、免疫等性能发育尚不完善,亲鸽的鸽乳中除含有大量的粗蛋白质和脂肪等营养物质外,还含有少量的免疫球蛋白、激素和酶类等活性物质,所以人工鸽乳配制的技术难题尚未完全攻克,尤其在乳鸽的生长前期,人工鸽乳的配制和人工哺喂技术并不完善,与亲鸽自然哺喂相比较尚有较大差距,在满足乳鸽消化性能以及免疫性能的发育需要等方面尚有待进一步深入研究。
人工鸽乳的饲喂能减轻亲鸽的育雏负担,使亲鸽得到休养从而提高生产效率。
由于乳鸽需要亲鸽哺育,且同一栋鸽舍的生产鸽很难同期产蛋,所以养鸽生产的现状是重复式生产模式,无法实行“全进全出”的卫生消毒制度,疫病垂直传播途径无法切断,传染病在亲代与子代之间交叉感染,其具体表现之一就是鸽病越来越多,治疗用药的种类和剂量越来越大,而人工哺育乳鸽则可以分批饲养,对鸽舍进行彻底消毒,切断病原微生物的循环感染,保证动物的健康。
但是人工哺育乳鸽的哺喂技术和管理模式较为滞后,目前仅用于商品肉鸽的生产,如何利用人工哺育技术改善养鸽生产模式、促进养鸽生产的良性循环值得深思。
参考文献:
【相关文献】
[1] 常玲玲,汤青萍,王晴,等.欧洲肉鸽与其他畜禽肉品质及主要营养成分比较分析[J].食品安全质量检
测学报,2017,8(6):2035-2040.
[2] 罗毅,王讯,马瑶,等.鸽乳的生物学功能及其生成调控[J].遗传,2017,39(12):1158-1167.
[3] HORSEMAN N D,BUNTIN J D.Regulation of pigeon cropmilk secretion and parental behaviors by prolactin[J].Annual Review of Nutririon,1995,15:213-238.
[4] GILLESPIE M J,HARING V R,MCCOLL K A,et al.Histological and global gene expression analysis of the ‘lactating’ pigeon crop[J].BMC Genomics,2011,12:452.
[5] 候振东,王奇志,田瑶,等.人工鸽乳的研究进展[J].湖南畜牧兽医,2015(1):5-7.
[6] JACQUIN L,BLOTTIRE L,HAUSSY C,et al.Prenatal and postnatal parental effects on immunity and growth in ‘lactating’ pigeons[J].Functional Ecology,2012,26(4):866-875.
[7] 董信阳.鸽早期小肠发育及碳水化合物对其调控的研究[D].博士学位论文.杭州:浙江大
学,2013:51-57.
[8] SHETTY S,BHARATHI L,SHENOY K B,et al.Biochemical properties of pigeon milk and its effect on growth[J].Journal of Comparative Physiology B,1992,162(7):632-636.
[9] GAO C Q,YANG J X,CHEN M X,et al.Growth curves and age-related changes in carcass characteristics,organs,serum parameters,and intestinal transporter gene expression in domestic pigeon (Columba livia)[J].Poultry Science,2016,95(4):867-877.
[10] SALES J,JANSSENS G P J.Nutrition of the domestic pigeon (Columba livia domestica)[J].World’s Poultry Science Journal,2003,59(2):221-232.
[11] DAVIES W L.The composition of the crop-milk of pigeons[J].Biochemical Journal,1939,133(6):898-901.
[12] HEDGE S position of pigeon milk and its effect on growth in chicks[J].Indian Journal of Experimental Biology,1973,11(3):238-239.
[13] 曾秋凤,张彬,张在伟.自然鸽乳的常规营养分析[J].中国家禽,2003,25(21):12-14.
[14] DESMETH M.Lipid composition of pigeon cropmilk-Ⅱ.Fatty acids[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry,1980,66(1):135-138. [15] 曾秋凤.0~10日龄乳鸽人工鸽乳的研制及其饲用价值的研究[D].硕士学位论文.长沙:湖南农业大学,2002:11-15.
[16] YANG M C,VOHRA P.Protein and metabolizable energy requirements of hand-fed squabs from hatching to 28 days of age[J].Poultry Science,1987,66(12):2017-2023. [17] GILLESPIE M J,CROWLEY T M,HARING V R,et al.Transcriptome analysis of pigeon milk production-role of cornification and triglyceride synthesis genes[J].BMC
Genomics,2013,14:169.
[18] HU X C,GAO C Q,WANG X H,et al.Crop milk protein is synthesised following activation of the IRS1/Akt/TOR signalling pathway in the domestic pigeon (Columba livia)[J].British Poultry Science,2016,57(6):855-862.
[19] 李香鑫.免疫型人工鸽乳的研制及其饲用价值的研究[D].硕士学位论文.长沙:湖南农业大
学,2006:23-36.
[20] 谢青梅,毕英佐,陈朝霞,等.不同人工鸽乳对0~10日龄乳鸽的饲喂效果[J].中国畜牧杂
志,2001,37(1):24-26.
[21] DESMETH M,VANDEPUTTE-POMA J.Lipid composition of pigeon cropmilk-Ⅰ.Total lipids and lipid classes[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Comparative Biochemistry,1980,66(1):129-133.
[22] REED L L,MENDEL L B,VICKERY H B.The nut ritive properties of the “crop-milk” of pigeons[J].American Journal of Physiology,1932,102(2):282-292.
[23] VANDEPUTTE-POMA J.Feeding,growth and metabolism of the pigeon,Columba livia domestica:duration and role of crop milk feeding[J].Journal of Comparative Physiology,1980,135(2):97-99.
[24] KOUTSOS E A.General principles of nutrition for the newly hatched chick[J].Veterinary Clinics of North America:Exotic Animal Practice,2012,15(2):195-204.
[25] ERAUD C,DORIE A,JACQUET A,et al.The crop milk:a potential new route for carotenoid-mediated parental effects[J].Journal of Avian Biology,2008,39(2):247-251. [26] ENGBERG R M,KASPERS B,SCHRANNER I,et al.Quantification of the immunoglobulin classes IgG and IgA in the young and adult pigeon (Columba livia)[J].Avian Pathology,1992,21(3):409-420.
[27] GOUDSWAARD J,VAERMAN J P,HEREMANS J F.Three immunoglobulin classes in the pigeon (Columbia livia)[J].International Archives of Allergy and Applied Immunology,1977,53(5):409-419.
[28] BHARATHI L,SHENOY K B,HEGDE S N.Biochemical differences between crop tissue and crop milk of pigeons (Columba livia)[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Physiology,1997,116(1):51-55.
[29] 张晓昀,董信阳,卜星晨,等.2~10日龄鸽乳中活性成分变化的规律研究[J].中国畜牧杂
志,2016,52(11):39-42.
[30] SHETTY S,HEGDE S N.Pigeon milk:a new source of growth
factor[J].Experientia,1993,49(10):925-928.
[31] SHETTY S,HEGDE S N,BHARATHI L.Purification of a growth factor from pigeon
milk[J].Biochimica et Biophysica Acta:General Subjects,1992,1117(2):193-198.
[32] FRELINGER J A.Maternally derived transferrin in pigeon
squabs[J].Science,1971,171(3977):1260-1261.
[33] GILLESPIE M J,STANLEY D,CHEN H L,et al.Functional similarities between pigeon
‘milk’ and mammalian milk:induction of immune gene expression and modification of the microbiota[J].PLoS One,2012,7(10):e48363,doi:10.1371/journal.pone.0048363. [34] 梁勇,姜庆林,陈益填,等.鸽乳成分及其分泌机制研究进展[J].中国家禽,2016,38(20):47-51.。