蛙心灌流1

实验结果
实验项目
无钙任氏液 3%氯化钙溶液 乙酰胆碱 1:10000肾上腺素 乳酸 1:10000去甲肾上腺素 碳酸氢钠 1%氯化钾
心脏收缩情况
注意事项
1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必 须用任氏液冲洗3次。 2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液 体吸出。 3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4.换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。 5.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。
7. 3%乳酸灌流 H+抑制Ca2+内流；与Ca2+竞争肌钙蛋白， 使Ca2+ 与肌钙蛋白亲和力降低，心肌收缩力↓。
4期 If 、I CaT通道↑
4期自动去极速度↑
自律性↑
心率↑
5. 1:10000 Ach灌流 与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓ [Ca2+]i↓ 自律性↓ E-C耦联↓ 心率↓ 最大复极电位↑ 4期K+外流↑
收缩力↓
6. 2.5％NaHCO3 灌流 中和H+， 促进Ca2+内流；使Ca2+与肌钙 蛋白亲和力增加，心肌收缩力↑ 。
（腹面）
（背面）
3.离体蛙心标本制备
在主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉圆锥， 在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定。
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支 架支台上，在心室舒张期 将与换能器相连的蛙心夹 夹住心尖1mm。
观察项目
1)观察描记正常的蛙心搏动曲线 2)加入1～2滴3%氯化钙溶液 3)加入1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液 4)加入1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液 5)加入1～2滴1：10000肾上腺素溶液 6)加入1～2滴3%乳酸溶液 7)加入1～2滴2.5%碳酸氢钠溶液 8)加入1～2滴1%氯化钾溶液
实验目的
1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。
2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ E、NE、Ach
对心脏活动的影响
实验对象 Байду номын сангаас或蟾蜍
实验步骤
一、离体心脏标本制备 1.破坏脑和脊髓 2.暴露心脏，观察心脏的解剖结构
心室 心房 静脉窦 左肝静脉
前腔静脉 右肝静脉 后腔静脉
暴露心脏观察心脏的解剖结构右肝静脉前腔静脉在主动脉根部剪一斜口将插管插入动脉圆锥在心室收缩时将插管插入心室结扎固定
离体蛙心灌流及某些离子、药物 对离体蛙心活动的影响
(perfusion of frog’s heart)
相关理论知识
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴 奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的 理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时 间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏 的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改 变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
结果分析与讨论
1.任氏液：正常对照 2. 3%CaCl2灌流：
[Ca2+ ]o ↑ Ca2+内流↑
[Ca2+]i↑
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
3. 1%KCl灌流：
[K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓
4. 1:10000 E灌流 与心肌β1受体结合 cAMP Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑