补阳还五汤对脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

摘要 背景：研究表明，Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白有利于脊髓损伤后肢体运动功能的恢复。 目的：通过观察脊髓损伤大鼠肢体运动功能变化及Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达，探讨补阳还五汤对 脊髓损伤后大鼠肢体运动功能改善的可能机制。 方法：实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准[批准号为 SYXK(闽)2013-005]。将 54 只大鼠随 机分为 3 组：假手组(n=18)、模型组(n=18)和补阳还五汤组(n=18)。假手术组切除椎板后立即缝合伤口，其 余 2 组切除椎板后应用 NYU 脊髓打击器建立脊髓损伤模型。造模后第 1 天开始补阳还五汤组给予补阳还五 汤 1 mL 灌胃，模型组和假手术组术后蒸馏水 1 mL 灌胃。干预后 1，3，5，7 d 对各组大鼠进行 BBB 肢体 运动功能评分；干预 7 d 后取材，尼式染色观察脊髓神经元形态和免疫组织化学检测Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶 原蛋白表达；电镜观察脊髓髓鞘超微结构，Western blot 检测Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的蛋白表达量。 结果与结论：①干预第 5 天后，补阳还五汤组的 BBB 肢体运动功能评分显著高于同期的模型组(P < 0.05)； ②尼式染色显示补阳还五汤组的细胞形态较为完整，细胞水肿较轻，瘀血面积较小，神经元恢复情况好于模 型组；③电镜实验发现补阳还五汤组的髓鞘形态较模型组完整，水肿情况较轻，与尼式染色结果一致；④免 疫组织化学显示补阳还五汤组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达量均较模型组显著增多(P < 0.05)；⑤ Western blot 显示补阳还五汤组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达量均较模型组显著增多(P < 0.05)； ⑥结果说明，补阳还五汤能够改善脊髓损伤后大鼠的肢体运动功能障碍，其机制可能与增加Ⅰ型胶原蛋白和 Ⅳ型胶原蛋白表达有关。 关键词： 脊髓损伤；补阳还五汤；Ⅰ型胶原蛋白；Ⅳ型胶原蛋白；髓鞘；超微结构 中图分类号：R496；R453；R318 基金资助： 福建省中青年教师教育科研社科项目(社科)(JAS161084)，项目负责人：潘伟滨
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文章编号:2095-4344(2019)31-04986-06
Lin XM, Pan WB, Wu YQ, Fan X. Effects of Buyang Huanwu decoction on the expression of collagen type I and IV after spinal cord injury. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2019;23(31):4986-4991. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1459
通讯作者：范筱，博士， 主治医师，青岛市市立医 院，山东省青岛市 266000
文献标识码:B 稿件接受：2019-04-27
文题释义： Ⅰ型胶原蛋白：是由成骨细胞分泌的一种重要的、基本的蛋白质，长度约 300 nm，直径约 1.5 nm，呈棒状， 由 3 条肽链组成，其中有 2 条α(Ⅰ)链，1 条α(Ⅱ)链，其参与构成骨架结构并发挥力学稳定作用，促进损伤 后血管和微血管重建，在脊髓损伤的修复中起到重要作用。 补阳还五汤：为著名的中医方剂，由黄芪、赤芍、当归、地龙、川芎、桃仁和红花药物组成，具有补气，活 血，通络的功效。此方对于气虚血瘀所致的半身不遂有一定疗效，临床常用于治疗脑血管意外后遗症、小儿 麻痹后遗症，以及脊髓损伤等原因引起的肢体功能障碍。
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1459
ORCID: 0000-0002-2740-9821(林晓敏)
文章快速阅读：
补阳还五汤改善脊髓损伤后大鼠肢体运动功能
SD 大鼠
假手术组： 仅切除椎板
造模组： 行 NYU 脊髓打击器 建立脊髓损伤模型
模型组 补阳还五汤组
检测指标：
(1)BBB 肢体功能评分； (2)尼式染色观察脊髓神经元； (3)免疫组织化学检测脊髓组织Ⅰ
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineer究原著·
补阳还五汤对脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响
林晓敏1，潘伟滨1，吴玉琼1，范 筱2 (1漳州卫生职业学院，福建省漳州市 363000；2青岛市市立医院，山东省青岛市 266000)
型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白；
(4)电镜观察脊髓髓鞘超微结构； (5)Western Blot 脊髓组织Ⅰ型胶
原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达
结论：
(1)补阳还五汤能够改善脊髓损伤后大鼠的肢体运动功能障碍； (2)其机制可能与增加Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达有关的修复。
林晓敏，女，1990 年生， 福建省平和县人，汉族， 2017 年 福 建 中医 药 大 学 毕业，硕士，助教，主要 从事康复方面研究。
Effects of Buyang Huanwu decoction on the expression of collagen type I and IV after spinal cord injury
Lin Xiaomin1, Pan Weibin1, Wu Yuqiong1, Fan Xiao2 (1Zhangzhou Health Vocational College, Zhangzhou 363000, Fujian Province, China; 2Qingdao Municipal Hospital, Qingdao 266000, Shandong Province, China)
Lin Xiaomin, Master, Assistant lecturer, Zhangzhou Health Vocational College, Zhangzhou 363000, Fujian Province, China
Corresponding author: Fan Xiao, MD, Attending physician, Qingdao Municipal Hospital, Qingdao 266000, Shandong Province, China